趙文杰，陳麗紅，呂海鵬，高永杰，古桂芳，江淵，黃卓

（福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)B門中醫(yī)院，福建廈門361009）

復(fù)方青黛膏對(duì)尋常型銀屑病皮損微血管增生的影響

趙文杰，陳麗紅，呂海鵬，高永杰，古桂芳，江淵，黃卓

（福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬?gòu)B門中醫(yī)院，福建廈門361009）

尋常型銀屑??；復(fù)方青黛膏；PASI；MVD

新生血管學(xué)說在銀屑病發(fā)病中的重要作用越來越被重視，銀屑病皮損中首先發(fā)生的病理改變是血管分布和生成的變化。銀屑病的復(fù)發(fā)則與皮損內(nèi)真皮乳頭的微血管內(nèi)皮細(xì)胞的過度增殖有關(guān)，其皮損處的真皮乳頭微血管擴(kuò)張迂曲、通透性增高、微血管數(shù)量增多［1-2］。新生血管學(xué)說為臨床上治療銀屑病提供了重要線索，他扎羅汀治療銀屑病的機(jī)制之一可能在于其降低銀屑病病人角質(zhì)形成細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）表達(dá)，從而改善銀屑病皮損的微血管擴(kuò)張、增生等病理改變，進(jìn)而減輕炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及炎癥反應(yīng)［3］。我們發(fā)現(xiàn)外用復(fù)方青黛膏可有效地減輕患者皮損紅斑、肥厚及點(diǎn)狀出血等現(xiàn)象，推測(cè)這種現(xiàn)象與其抑制銀屑病血管新生有關(guān)。含青黛制劑的藥物治療銀屑病在我國(guó)已廣泛地應(yīng)用，但治療機(jī)制不明，內(nèi)服青黛引起消化道出血等毒副作用明顯［4］，臨床應(yīng)用受到了限制。我們基于銀屑病新生血管理論，以治療前后銀屑病皮損內(nèi)微血管密度為指標(biāo)，探討外用復(fù)方青黛膏治療銀屑病機(jī)制。

1 資料

1.1 一般資料選取2011年7月—2013年7月在我院皮膚科門診就診的尋常型銀屑病患者60例，采用區(qū)組隨機(jī)化分組法將納入病患隨機(jī)分為空白組、他扎羅汀組、青黛膏組各20例，各組性別、年齡、病程比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）,具有可比性。見表1。

表1 3組一般資料比較（x±s）

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷根據(jù)臨床表現(xiàn)及病理診斷確診。中醫(yī)風(fēng)熱血燥證辨證標(biāo)準(zhǔn)參考《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》［5］：皮損鮮紅，皮疹不斷出現(xiàn)，紅斑增多，刮去鱗屑可見發(fā)亮薄膜，點(diǎn)狀出血，伴心煩口渴，大便干，尿黃，舌質(zhì)紅，舌苔黃或膩，脈弦滑或數(shù)。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)臨床表現(xiàn)及病理診斷確診為尋常型銀屑??；中醫(yī)辨證屬風(fēng)熱血燥證；年齡＞16歲；近2個(gè)月內(nèi)未系統(tǒng)服用維A酸、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑等藥物；2周內(nèi)未使用任何外用藥物。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)合并有心、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病的患者；根據(jù)研究者的判斷，具有降低入組可能性或使入組復(fù)雜化的其他病變者；未按規(guī)定用藥，無法判斷療效或資料不全等影響療效判定者；已知對(duì)本藥組成成分過敏者。

2 方法

2.1 治療及取材參考我們之前的治療方案［6］，復(fù)方青黛膏（院內(nèi)制劑）組成：青黛粉50 g，黃柏粉20 g，滑石粉20 g，爐甘石粉20 g。以凡士林2 000 mL為基質(zhì)，100℃熔解后加入藥物，調(diào)均，冷卻后分裝，每30 g為一個(gè)包裝單位。他扎羅汀乳膏（重慶華邦制藥有限公司，規(guī)格：15g／支)。用藥方法：將藥膏均勻薄層涂擦皮損，每日早晚各1次，每次用藥不能大于皮膚總面積的20%，治療期間不得應(yīng)用非實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的其他藥物，實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行4周。治療前后取病人同一區(qū)域內(nèi)（相隔不超過10 cm）的典型皮損，所選擇的皮損在1%利多卡因局部麻醉下手術(shù)取材，皮損塊立即進(jìn)行石蠟包埋。

2.2 實(shí)驗(yàn)方法微血管的判斷與微血管密度（MVD）計(jì)數(shù)應(yīng)用免疫組化法，單個(gè)微血管的判定：抗CD34單克隆抗體標(biāo)記的棕黃色孤立的內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞簇團(tuán)，只要與相臨的微血管或其他結(jié)締組織分開，既為單個(gè)微血管。MVD的測(cè)定參照Weidner［7］方法進(jìn)行，即先在低倍鏡（×40）下掃視整個(gè)切片，尋找高血管密度區(qū)，即所謂“熱點(diǎn)”區(qū)；然后在高倍鏡（× 200）下計(jì)數(shù)每一個(gè)視野的微血管數(shù)目。每一張切片結(jié)果采用3個(gè)視野下微血管數(shù)目的平均數(shù)來表示。免疫組化試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司，鼠抗人CD34單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)R＆D公司。

2.3 療效判定標(biāo)準(zhǔn)分別在治療前、治療后1、4周進(jìn)行，按照銀屑病皮損面積及嚴(yán)重程度指數(shù)（psoriasis area and severity index，PASI）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，記錄治療前后的PASI評(píng)分，根據(jù)PASI評(píng)分下降率進(jìn)行療效判定。

PASI評(píng)分下降率＝［（治療前評(píng)分-治療后評(píng)分）／治療前評(píng)分］×100%。

療效判定以PASI評(píng)分下降率多少確定：治愈為＞95%；顯效為60%～95%；有效為20%～59%；無效為0%～19%。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0軟件處理。計(jì)量資料屬正態(tài)分布的以x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.13 組療效比較見表2。青黛膏組對(duì)銀屑病皮損的療效優(yōu)于他扎羅汀組（P＜0.05），與我們之前的實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致［6］。

表2 3組療效比較（n，%）

3.23 組經(jīng)免疫組化觀測(cè)皮損MVD見圖1和表3。

圖1 3組治療前后MVD圖（HE染色×200）

表3 3組治療前后MVD值比較（x±s）個(gè)

4 討論

祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)銀屑病早有記載，常根據(jù)外觀形態(tài)命名，如“膚如疹疥，色白而癢，搔起白皮”，稱為“白疕”；或“狀如滄松之皮，紅白斑點(diǎn)相連”，又稱“松皮癬”。風(fēng)熱血燥是本病的主要致病因素，治則以清熱解毒，涼血祛風(fēng)為主。方中青黛、黃柏清熱涼血解毒。青黛含靛藍(lán)、靛玉紅等成分，靛玉紅已證實(shí)可抑制多種細(xì)胞合成，對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖分化起調(diào)控作用［8］。黃柏性味苦寒，有清熱燥濕、解毒療瘡之功效。黃柏主要藥理有效成分是生物堿（如小檗堿），有抑制DNA和蛋白質(zhì)的合成、抑制增殖、抗炎和抗癌作用，小檗堿對(duì)銀屑病表皮角質(zhì)形成細(xì)胞增殖亦有抑制作用［9］。

正常皮膚的微血管在內(nèi)源性血管生成抑制因子的作用下，處于相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài)，而在銀屑病的皮損中，促血管生成的活性因子的表達(dá)上調(diào)從而破壞了這種平衡，致微血管的異常增生。銀屑病皮損處的真皮乳頭層微血管擴(kuò)張迂曲、通透性增高、血管數(shù)量增多、皮損內(nèi)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）的過高表達(dá)等與銀屑病的發(fā)病及轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)［10-11］。

本研究中發(fā)現(xiàn)復(fù)方青黛膏外用可明顯減輕皮損內(nèi)的點(diǎn)狀出血點(diǎn)、紅斑及炎性反應(yīng)，并能改善患者PASI評(píng)分［6］。在免疫組化的實(shí)驗(yàn)中我們同樣證實(shí)了青黛膏可降低皮損內(nèi)微血管的密度，故我們認(rèn)為其通過抑制皮損內(nèi)微血管增生是其治療銀屑病的重要機(jī)制之一，復(fù)方青黛膏治療銀屑病的機(jī)制可能與其抑制促血管生成的活性因子有關(guān)。

［1］朱凡，鄭敏，鮑彰.銀屑病患者皮損中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體的表達(dá)與血管增生的關(guān)系［J］.中華皮膚科雜志，2003，36（7）：365-367.

［2］李勇堅(jiān)，張桂英，肖嶸，等.HIF-1α與VEGF在銀屑病皮損中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系［J］.中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2010，24（7）：810-813.

［3］張憲旗，馮捷，李建國(guó).他扎羅汀抑制角質(zhì)形成細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)［J］.中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2003，17（3）：162-163.

［4］張莉，段麗萍，楊衛(wèi)紅.含青黛成分中藥導(dǎo)致便血的臨床特點(diǎn)及可能致病機(jī)制［J］.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜，2004，13（2）：161-164.

［5］國(guó)家中醫(yī)藥管理局.中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)［S］.南京：南京大學(xué)出版社，1994：276－277.

［6］陳麗紅，趙文杰.復(fù)方青黛膏治療尋常型銀屑病60例［J］.光明中醫(yī)，2014，29（7）：1413-1414.

［7］WEIDNER N.Current pathologic methods for measuring intratumoral microvessel density within breast carcinoma and other solid tumors［J］.Breast Cancer Res Treat，1995，36（2）：169-180.

［8］LIN Y K，WONG W R，CHANG Y C，et al.The efficacy and safety of topically applied indigo naturalis ointment in patients with plaque-type psoriasis［J］.Dermatology，2007，214（2）：155-161.

［9］KUO C L，CHI C W，LIU T Y，et al.The anti-inflammatory potential of berberineinvitroandinvivo［J］.Cancer Lett，2004，203（2）：127-137.

［10］郭靜，郝雁杰，張偉，等.尋常型進(jìn)行期銀屑病皮損中VEGF、EGFR的表達(dá)及其與PASI指數(shù)的相關(guān)性研究［J］.皮膚病與性病，2013，35（1）：7-10.

［11］ELIAS P M，ARBISER J，BROWN B E，et al.Epidermal vascular endothelial growth factor production is required for permeability barrier homeostasis，dermal angio-genesis，and the development of epidermal hyperplasia：implications for the pathogenesis of psoriasis［J］.The American Journal of Pathology，2008，173（3）：689-699.

R758.63

B

1000-338X（2015）04-0026-03

2014-12-29

廈門市科技計(jì)劃社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目（3502Z20104011）

趙文杰（1972—），男，博士，副主任醫(yī)師，研究方向：自身免疫性皮膚病。

通迅作者：陳麗紅（1969—），女，主任醫(yī)師。E-mail：clh0592@126. com