常瑞亭，耿左軍，朱青峰，王 亞，韓學(xué)芳，呂煥娣

（河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院醫(yī)學(xué)影像科，河北石家莊050000）

正常老化過(guò)程中海馬不同部位代謝物濃度與年齡的相關(guān)性

常瑞亭，耿左軍*，朱青峰，王 亞，韓學(xué)芳，呂煥娣

（河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院醫(yī)學(xué)影像科，河北石家莊050000）

目的 利用氫質(zhì)子磁共振波譜分析（1Hmagnetic resonance spectroscopy，1H－MRS）技術(shù)，評(píng)價(jià)正常腦老化過(guò)程中雙側(cè)海馬不同部位代謝物濃度的變化，并進(jìn)一步探討代謝物濃度與年齡的相關(guān)性。方法 121例健康右利手志愿者，行顱腦常規(guī)磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）、磁共振波譜（magnetic resonance spectroscopy，MRS）檢查，人為確定MRS感興趣區(qū)，機(jī)器自動(dòng)測(cè)量海馬不同部位濃度值參數(shù)：N－乙酰天門冬氨酸（N－acetylaspartate，NAA）、膽堿（choline compounds，Cho）、肌酸（creatine，Cr）。比較不同性別、不同年齡組間各參數(shù)的差異。分析海馬各部位NAA、Cho、Cr與年齡的相關(guān)性。結(jié)果 不同性別間海馬各部位NAA、Cho、Cr比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同年齡組間雙側(cè)海馬頭、體（體1、體2）、尾部NAA值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，老年組雙側(cè)海馬頭、體（體1區(qū)、體2區(qū)）、尾部NAA顯著低于青年組和中年組（P＜0.05），青年組與中年組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;不同年齡組間Cho、Cr差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。雙側(cè)海馬頭、體（體1、體2區(qū)）、尾部?jī)HNAA與年齡呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），Cho、Cr與年齡無(wú)相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論 正常腦老化過(guò)程中海馬各部位NAA值隨年齡增長(zhǎng)而降低，老年組明顯低于青年組及中年組。海馬各部位NAA、Cho、Cr值無(wú)性別差異。

氫質(zhì)子波譜成像;海馬;腦老化;相關(guān)性分析

磁共振波譜（magnetic resonance spectroscopy，MRS）作為目前惟一一種能夠無(wú)創(chuàng)性檢測(cè)活體組織能量代謝、生化改變及化合物定量分析的影像學(xué)技術(shù)，能客觀地檢測(cè)活體腦組織內(nèi)化合物含量，提供腦的代謝信息，可以檢測(cè)到常規(guī)磁共振不能顯示的早期異常，為磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）提供補(bǔ)充信息，從而提高病變?cè)\斷的特異度和準(zhǔn)確度。本研究探討不同性別、年齡間正常人海馬各部位組織代謝物濃度的差異，并發(fā)現(xiàn)其變化規(guī)律，旨在為研究海馬組織正常生理生化進(jìn)程變化提供基礎(chǔ)依據(jù)，也為一些與海馬相關(guān)的疾病如Alzheimer病［1］、輕度認(rèn)知功能障礙［2］、癲癇［3］等的鑒別及早期診斷提供臨床依據(jù)。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年10—12月招募右利手健康志愿者121例，根據(jù)世界衛(wèi)生組織對(duì)人類年齡段的最新劃分，按年齡將志愿者分為3組：青年組41例，男性22例，女性19例，年齡20～44歲，平均（29.2±4.6）歲;中年組40例，男性20例，女性20例，年齡45～59歲，平均（49.7±4.6）歲;老年組40例，男性20例，女性20例，年齡60～79歲，平均（67.1±5.0）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①右利手;②簡(jiǎn)易精神狀態(tài)量表檢查評(píng)分＞27分;③無(wú)任何神經(jīng)系統(tǒng)疾病或精神疾病，如頭痛、頭暈、嗜睡、瞻望、情感障礙等神經(jīng)或精神癥狀;④無(wú)顱腦手術(shù)或外傷史，無(wú)高血壓（60歲以上老年人血壓＜140/90 mmHg）、糖尿病、心臟病等基礎(chǔ)病或慢性病史;⑤無(wú)酗酒、吸煙成癮、長(zhǎng)期服用藥物、毒品依賴史;⑥無(wú)MRI檢查禁忌證，如體內(nèi)存在心臟起搏器、神經(jīng)刺激器、金屬動(dòng)脈夾、不可摘除的假牙等金屬植入物等;⑦無(wú)抽搐、癲癇、痙攣史，無(wú)腦炎或腦膜炎史;⑧無(wú)腦乏氧史，如一氧化碳及其他毒物中毒史等;⑨頭顱MRI常規(guī)掃描陰性，海馬區(qū)未見(jiàn)空泡及異常信號(hào)者;⑩按照上述標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)掃描獲得的圖像評(píng)估質(zhì)量，并進(jìn)行后處理，去除偽影嚴(yán)重及后處理不理想者。所有志愿者均知情同意接受檢查，并簽署知情同意書。

1.2 方法 應(yīng)用飛利浦公司Achieva 3.0T超導(dǎo)磁共振設(shè)備，標(biāo)準(zhǔn)8通道頭顱線圈。顱腦常規(guī)檢查包括軸位T1WI，快速自旋回波（turbo－spin echo，TSE）序列：重復(fù)時(shí)間（repetition time，TR）3 056 ms，恢復(fù)時(shí)間（echo time，TE）7.6 ms，反轉(zhuǎn)時(shí)間（inversion time，TI）860 ms;軸位 T2WI，TSE 序 列：TR 2 000 ms，TE 80 ms;軸位T2FLAIR，T2FLAIR序列： TR 10 002 ms，TE 130.4 ms，TI2 400 ms。以上序列層厚均為6.0 mm，層間隔為1.0 mm，矩陣512×256，視野 （field of view，F(xiàn)OV）240 mm×240 mm× 120 mm（AP×RL×FH），平均激勵(lì)次數(shù)（number of signal averaged，NSA）1次;矢狀T2WI，TSE序列：TR 2 000 ms，TE 80 ms，層厚6.0 mm，層間隔1.0 mm，矩陣 260×234，F(xiàn)OV 240 mm×240 mm×143 mm （AP×RL×FH），NSA 1次。1H－MRS成像：在矢狀位T2WI上沿海馬長(zhǎng)軸進(jìn)行海馬長(zhǎng)軸位掃描。T2WI，TSE序列：TR 2 000 ms，TE 80 ms，層間隔0 mm，層厚3 mm;采用多體素2D－PRESS－144序列選擇海馬軸位層面中海馬頭、體、尾顯示最好層面定位，其中海馬頭、體、尾分區(qū)參照Malykhin等［4］及過(guò)去垂直于海馬長(zhǎng)軸斜冠狀掃描的分段方法加以改進(jìn)后進(jìn)行分段，分別對(duì)雙側(cè)海馬不同區(qū)域進(jìn)行MRS掃描（圖1），盡量避開(kāi)干擾組織，如顱骨、血管、脂肪、硬膜、腦脊液等。掃描參數(shù)：TR 2 000 ms，TE 144 ms，體素大小10×10 mm，層厚10 mm，矩陣2×4，F(xiàn)OV 20 mm×40 mm，接收/發(fā)射增益調(diào)節(jié)、掃描過(guò)程中體素內(nèi)勻場(chǎng)、水抑制及無(wú)水抑制掃描均由自動(dòng)預(yù)掃描程序完成，勻場(chǎng)效果達(dá)到半高全寬＜15 Hz，水抑制達(dá)99%水平，左右海馬MRS總掃描時(shí)間為15 min。

圖1 雙側(cè)海馬區(qū)MRS定位圖1.海馬頭;2.海馬體1區(qū);3.海馬體2區(qū);4.海馬尾Figure 1 MRS location map of the bilateral hippocam pus

1.3 圖像處理 將MRS原始圖像傳輸至飛利浦EWS后處理工作站，用EWS工作站中MRS特定處理軟件進(jìn)行圖像后處理，將得出原始波譜進(jìn)行高斯、指數(shù)倍增，零填充，傅立葉變換，頻率位移較正，相位校正，基線校正，得出相應(yīng)MRS。對(duì)各峰進(jìn)行單峰分析，記錄各代謝物的峰下面積，包括N－乙酰天門冬氨酸（N－acetyl－aspartate，NAA）、膽堿（choline compounds，Cho）、肌酸（creatine，Cr）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料以±s表示，分別采用t檢驗(yàn)、F檢驗(yàn)和q檢驗(yàn);相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同性別間海馬各部位參數(shù)比較 不同性別間海馬各部位代謝物NAA、Cr、Cho濃度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1～3。

表1 不同性別間海馬各部位NAA比較Table 1 Com parison of NAA in the different regions of hippocam pus between genders （±s）

表1 不同性別間海馬各部位NAA比較Table 1 Com parison of NAA in the different regions of hippocam pus between genders （±s）

性別 例數(shù) 海馬頭 海馬體1海馬體2海馬尾左右左右左右左右男 62 21.16±8.23 19.21±6.08 33.24±10.26 44.21±10.70 39.45±8.95 43.15±11.54 29.07±8.61 33.59±7.44女 59 22.33±9.02 21.44±6.98 34.65±8.80 45..34±8.09 38.13±10.62 44.92±8.43 29.78±8.85 35.46±8.68t0.743 1.620 0.905 0.652 0.736 0.962 0.448 1.271P0.459 0.108 0.419 0.515 0.463 0.338 0.655 0.206

表2 不同性別間海馬各部位Cho比較Table 2 Com parison of Cho in the differen t regions of hippocam pus betw een genders （±s）

表2 不同性別間海馬各部位Cho比較Table 2 Com parison of Cho in the differen t regions of hippocam pus betw een genders （±s）

性別 例數(shù) 海馬頭 海馬體1海馬體2海馬尾左右左右左右左右男 62 20.27±7.63 18.97±7.44 30.17±6.98 32.68±9.25 31.70±8.47 32.43±8.93 27.29±8.30 29.38±9.44女 59 20.86±8.90 19.07±8.63 30.53±6.92 34.09±7.86 30.77±7.55 34.42±8.10 27.09±8.29 29.37±8.28t0.509 0.067 0.291 1.083 0.660 1.461 0.128 0.006P0.611 0.947 0.770 0.281 0.510 0.147 0.898 0.996

表3 不同性別間海馬各部位Cr比較Table 3 Com parison of Cr in the different regions of hippocam pus between genders（±s）

表3 不同性別間海馬各部位Cr比較Table 3 Com parison of Cr in the different regions of hippocam pus between genders（±s）

性別 例數(shù) 海馬頭 海馬體1海馬體2海馬尾左右左右左右左右男 62 16.29±5.36 17.22±7.83 25.67±7.50 32.35±7.80 29.69±7.60 32.46±7.93 24.95±8.24 28.70±9.00女 59 17.84±7.62 17.18±5.18 26.74±8.85 32..43±7.61 30.22±7.82 32.42±7.44 26.55±7.28 29.69±8.87t1.299 0.034 0.826 0.259 0.312 0.167 1.123 0.625P0.196 0.973 0.410 0.796 0.755 0.867 0.264 0.533

2.2 不同年齡組間海馬各部位參數(shù)比較 不同年齡組間雙側(cè)海馬頭、體（體1、體2）、尾部NAA值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，老年組雙側(cè)海馬頭、體（體1區(qū)、體2區(qū)）、尾部NAA顯著低于青年組和中年組（P＜ 0.05），青年組與中年組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同年齡組間Cho及Cr比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表4～6。

表4 不同年齡組間海馬各部位NAA比較Table 4 Com parison of NAA among different age groups in the different regions of hippocam pus （±s）

表4 不同年齡組間海馬各部位NAA比較Table 4 Com parison of NAA among different age groups in the different regions of hippocam pus （±s）

*P＜0.05與青年組比較 #P＜0.05與中年組比較（q檢驗(yàn)）

青年組 41 24.40±6.42 23.24±6.56 36.25±9.00 49.32±10.35 43.03±7.60 48.23±12.39 33.39±8.10 36.96±8.01中年組 40 24.44±9.41 21.94±7.30 35.05±10.84 46.23±7.01 40.08±10.90 46.36±6.97 30.00±7.96 35.16±7.55老年組 40 16.23±7.44*#15.63±6.85*#30.55±7.89*#38.75±7.58*# 33.13±7.99*#38.75±7.58*# 24.79±7.94*#31.30±7.79*#F14.299 13.945 3.845 16.580 12.830 11.059 11.860 5.563P0.000 0.000 0.024 0.000 0.000 0.000 0.000 0.005

表5 不同年齡組間海馬各部位Cho比較Table 5 Comparison of Cho among different age groups in the different regions of hippocampus （±s）

表5 不同年齡組間海馬各部位Cho比較Table 5 Comparison of Cho among different age groups in the different regions of hippocampus （±s）

性別 例數(shù) 海馬頭 海馬體1海馬體2海馬尾左右左右左右左右青年組 41 18.55±7.89 17.72±7.24 29.14±6.10 33.98±9.73 30.92±6.71 33.46±10.17 27.12±6.80 29.69±10.53中年組 40 22.05±8.20 19.54±9.94 31.07±8.52 31.70±7.70 31.20±10.91 31.87±7.62 28.65±9.12 28.83±9.04老年組 40 21.42±8.30 18.79±6.67 30.85±5.91 34.38±8.00 30.87±7.28 34.38±8.20 25.83±8.71 29.74±6.81F2.127 0.125 0.927 0.932 0.214 0.969 1.154 0.182 P 34

表6 不同年齡組間海馬各部位Cr比較Table 6 Com parison of Cr among different age groups in the different regions of hippocam pus （±s）

表6 不同年齡組間海馬各部位Cr比較Table 6 Com parison of Cr among different age groups in the different regions of hippocam pus （±s）

?

2.3 海馬各部位代謝參數(shù)與年齡的Pearson相關(guān)性分析 雙側(cè)海馬頭、體（體1區(qū)、體2區(qū)）、尾部NAA濃度與年齡呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），雙側(cè)海馬頭、體（體1區(qū)、體2區(qū)）、尾部Cho、Cr與年齡無(wú)相關(guān)關(guān)系（P＞0.05），見(jiàn)表7。

表7 海馬各部位代謝參數(shù)與年齡的Pearson相關(guān)性分析Table 7 Pearson analysis of metabolite indexes in the different regions of hippocampus with age

3 討 論

MRS是利用磁共振化學(xué)位移現(xiàn)象測(cè)定組成物質(zhì)中分子成分的一種檢測(cè)方法。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用于波譜研究的原子核有很多，如31P、1H、23Na、13C、7Li等，尤以氫質(zhì)子（1H）波譜技術(shù)最常用［5］。由于1H在不同化合物中的磁共振頻率不同，致使它們?cè)贛RS的譜線中共振峰的位置不同，從而分辨出不同化合物，同時(shí)共振峰的面積反映了化合物的濃度，因此可以對(duì)不同化合物進(jìn)行定量分析。本研究中不同性別間代謝物濃度差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與過(guò)去關(guān)于海馬的MRS研究結(jié)果一致［6－7］。以往不少研究發(fā)現(xiàn)雄激素對(duì)海馬神經(jīng)元有促進(jìn)作用，亦有研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雌激素及胰島素對(duì)神經(jīng)有保護(hù)作用。故我們認(rèn)為海馬區(qū)代謝物濃度是多種激素共同作用下的結(jié)果，受性別影響不大。

本研究結(jié)果顯示雙側(cè)海馬頭、體（體1區(qū)、體2區(qū)）、尾部NAA與年齡呈負(fù)相關(guān)。表明NAA濃度隨著年齡的增長(zhǎng)逐漸減低，與以往研究結(jié)果基本相符。NAA主要存在于神經(jīng)元內(nèi)，其濃度與神經(jīng)元的成熟和數(shù)量有關(guān)，老化過(guò)程中大腦存在神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，究其根本原因是由于神經(jīng)元的破壞和神經(jīng)元數(shù)量的減少，因此海馬的老化表現(xiàn)在MRS上即為NAA的降低。Reyngoudt等［8］發(fā)現(xiàn)NAA濃度不會(huì)隨年齡增加而發(fā)生變化;Chiu等［6］發(fā)現(xiàn)右側(cè)海馬NAA與年齡無(wú)相關(guān)性，左側(cè)NAA與年齡呈正相關(guān)。但這2項(xiàng)研究的樣本含量、分組方式、波譜掃描方式與本研究差異性較大，我們猜測(cè)發(fā)生這些差異性的結(jié)果可能與以上原因有關(guān)，要證明這一猜測(cè)是否正確，有待我們今后更進(jìn)一步深入而細(xì)致的研究。

Cho存在于神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞，包括游離膽堿、磷酸膽堿、磷酸甘油膽堿及磷脂酰膽堿，參與細(xì)胞膜的合成及降解，可反映細(xì)胞膜的穩(wěn)定性和神經(jīng)膠質(zhì)的增生。本研究結(jié)果顯示，青、中、老年組間Cho差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明老化過(guò)程中海馬區(qū)膠質(zhì)細(xì)胞增生或細(xì)胞降解現(xiàn)象并非十分明顯。

Cr主要存在于腦內(nèi)膠質(zhì)細(xì)胞中，反映腦內(nèi)肌酸與磷酸肌酸的總和，作為高能磷酸化的儲(chǔ)備以及ATP和ADP的緩沖劑，以往認(rèn)為其對(duì)維持腦細(xì)胞中的能量依賴系統(tǒng)發(fā)揮作用。研究證實(shí)Cr在同一個(gè)體腦內(nèi)不同代謝條件下均保持相對(duì)穩(wěn)定，常用Cr作為波譜研究的內(nèi)參照。本研究結(jié)果顯示，不同年齡組間雙側(cè)海馬區(qū)各部位Cr差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明海馬在正常老化過(guò)程中膠質(zhì)細(xì)胞變化并不明顯。研究［9－10］發(fā)現(xiàn)額葉及頂葉白質(zhì)Cr隨年齡增長(zhǎng)而增高，提示應(yīng)謹(jǐn)慎對(duì)待把Cr作為波譜研究?jī)?nèi)參照的觀點(diǎn)。

本研究結(jié)果與馬曉臣等［11］關(guān)于海馬MRS的研究報(bào)道僅部分相符。導(dǎo)致這些差異性結(jié)果的原因可能與入選標(biāo)準(zhǔn)感興趣的區(qū)域、數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理等因素的不同有關(guān)。

為了解開(kāi)人腦老化之謎，人們對(duì)正常腦老化的探索已有很長(zhǎng)一段歷史，MRS技術(shù)的發(fā)展使人們?cè)跓o(wú)創(chuàng)性、可重復(fù)性的條件下研究腦老化成為可能。不同的疾病可以損傷海馬的不同區(qū)域，最終導(dǎo)致海馬特定區(qū)域體積發(fā)生相應(yīng)萎縮，如顳葉癲癇及精神分裂癥患者常表現(xiàn)為海馬頭部相應(yīng)的萎縮，嚴(yán)重抑郁癥患者常表現(xiàn)為海馬尾相應(yīng)的萎縮等。MRS較MRI能更早期發(fā)現(xiàn)病變，從而有利于早期治療。本研究通過(guò)對(duì)海馬不同區(qū)域分別進(jìn)行MRS研究，得到了海馬不同部位代謝物質(zhì)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)及變化規(guī)律，這為以后海馬相關(guān)疾病的科學(xué)研究和臨床診斷提供了重要的依據(jù)。

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（本文編輯：趙麗潔）

Correlation between metabolite concentrations and age in different regions of hippocampus during normal brain aging

CHANG Rui－ting，GENG Zuo－jun*，ZHU Qing－feng，WANG Ya，HAN Xue－fang，LV Huan－di
（ Department of Radiology，the Second Hospital of Hebei Medical University Shijiazhuang 050000，China）

Objective To evaluate themetabolism change with aging brain in the different regions of the bilateral hippocampal using1H magnetic resonance spectroscopy（1H－MRS），and to further investigate the correlation between metabolites，metabolite concentrations ratio and age.MethodsBrain conventional MRI，MRSwere employed in 121 right－h(huán)anded healthy volunteers.After selecting the regions of interest artificially，the required parameters N－acetyl－aspartate（NAA），choline compounds（Cho），creatine（Cr）were measured by the machine automatically.The parameters between genders and ages were compared.Pearson correlation analysis was used to further investigate the correlation between the concentrations of NAA，Cho，Cr and age in different regions of the hippocampus.ResultsNo significant gender effectswere found in the concentrations of NAA，Cho，Cr（P＞0.05）.A significant age effectswere found in the concentrations of NAA in the hippocampal head，body（body 1 area，body 2 area）and tail.The concentrations of NAA in the above regions of elderly group decreased significantly as compared with young and elderly group（P＜0.05），while NAA showed significant changes between young andmiddleaged group in the hippocampal head，body（body 1 area，body 2 area）and tail（P＞0.05）.No significant age－associated changes were observed in Cho，Cr.Only the NAA concentrations were negatively correlated with age in bilateral hippocampal head，body（body 1 area，2 area），and tail（P＜0.05）.No significant age－associated changes were observed in Cho，Cr（P＞0.05）.ConclusionThe NAA concentration decreased with age in the different regions of the hippocampus during normal brain aging.The NAA concentration in elderly group is significantly lower than that of young and middle aged group.No significant differences are found in the concentrations of NAA，Cho，Cr between genders.

proton magnetic resonance spectroscopy;hippocampus;brain aging;correlation analysis

R735.7

A

1007－3205（2015）03－0291－05

2014－10－15;

2014－11－21

河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題（zd2013016）

常瑞亭（1987－），女，河北衡水人，河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院醫(yī)學(xué)碩士研究生，從事影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)診斷研究。

*通訊作者。E－mail：1980756261@qq.com

10.3969/j.issn.1007－3205.2015.03.013