NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神經(jīng)性聾中的作用

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬深圳沙井醫(yī)院耳鼻咽喉科深圳518104

【摘要】目的研究NO及NOS在分泌性中耳炎導(dǎo)致的感音神經(jīng)性聾中所起的作用或影響。方法選取58例分泌性中耳炎患者，其中29例為單純性分泌性中耳炎患者(A組)，29例為分泌性中耳炎所致的感音神經(jīng)性聾患者(B組)，分別抽取A、B 2組的中耳積液，試劑盒檢測(cè)NO的含量及NOS的活性，探討NO及NOS在分泌性中耳炎導(dǎo)致感音神經(jīng)性聾中所起的作用。結(jié)果A組中耳積液中NO含量為(138.71±40.98)μmol/L，NOS的活性為(74.28±27.00)U，B組耳積液中NO含量為(176.18±42.68)μmol/L，NOS的活性為(98.78±30.02)U，B組NO含量大于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；NOS活性比較，B組>A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；結(jié)論NO及NOS在分泌性中耳炎引起的感音神經(jīng)性聾中發(fā)揮著重要作用，可能參與感音神經(jīng)性聾的炎癥病理發(fā)病過(guò)程。

【關(guān)鍵詞】NO； NOS；中耳炎；感音神經(jīng)性聾

通訊作者張文淵李遠(yuǎn)航姜翠菊殷亞磊蔡永明()

【中圖分類(lèi)號(hào)】R764.43+1

本文就中耳炎引起的感音神經(jīng)性聾患者耳積液中NOS及NO的含量或活性，探討NOS及NO在分泌性中耳炎引起的感音神經(jīng)性聾中的作用。

1資料與方法

1.1一般資料選取2014-01—2015-01來(lái)我院就診的單純性分泌性中耳炎患者29例為A組，分泌性中耳炎伴隨感音神經(jīng)性聾的患者29例為B組。A組男21例，女8例；年齡22～46歲，平均36.5歲；平均發(fā)病時(shí)間12 d；病程≤4周。B組男15例，女14例；年齡21～44歲，平均34.5歲；平均發(fā)病時(shí)間為11.4 d，病程≤4周； 2組一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2感音測(cè)試2組病患均為單耳，純音聽(tīng)力測(cè)試結(jié)果為0.24～7.9 kHz；A組連續(xù)頻率鼓導(dǎo)聽(tīng)閥<30 dB，鼓導(dǎo)平均聽(tīng)閥<25 dB。B組5例連續(xù)頻率鼓導(dǎo)聽(tīng)閥≥30 dB，鼓導(dǎo)平均聽(tīng)閥≥25dB，2組鼓室導(dǎo)抗圖均為B型，同側(cè)鐙骨肌反射未引出，中耳積液提取量>0.15 mL。2組均無(wú)家族性耳聾史，均無(wú)服用耳毒性藥物史以及其他遺傳耳病史，無(wú)可能導(dǎo)致咽鼓管長(zhǎng)期阻塞(如鼻息肉、腺體肥大等)的慢性病史，來(lái)院診斷前2個(gè)月未使用激素類(lèi)免疫抑制藥物。

1.3治療方法實(shí)驗(yàn)前均考察A、B 2組病例的病史及用藥情況，并進(jìn)行純音測(cè)試，結(jié)果無(wú)特殊性后，方可抽取各組病患中耳積液，鼓膜穿刺抽取積液時(shí)，向鼓室注射潑尼松龍，并口服抗生素、糖皮質(zhì)激素等進(jìn)行治療。

1.41NO含量及NOS活性的測(cè)定2組病患均以抽取中耳積液，試劑盒檢測(cè)的方法測(cè)定NO含量及NOS活性。具體程序?yàn)閷?duì)外耳酒精消毒后，對(duì)鼓膜用適量濃度的丁卡因進(jìn)行表面麻醉，采用1 mL的醫(yī)用注射器連接接7號(hào)長(zhǎng)針頭刺入鼓膜，緩慢抽取中耳積液，體積>0.15 mL，收集積液后密封保存于-20℃?zhèn)溆?。檢測(cè)方法為用試劑盒檢測(cè)NOS的活性，用硝酸還原法測(cè)定NO代謝產(chǎn)物含量，最后計(jì)算積液中NO含量。

2結(jié)果

2.12組治療結(jié)果比較見(jiàn)表1。

表1　2組治療前后氣骨導(dǎo)平均聽(tīng)閾變化比較　

注：與治療前相比，P<0.01

2.22組耳積液NO含量及NOS活性檢測(cè)結(jié)果比較通過(guò)用硝酸還原法測(cè)定NO代謝產(chǎn)物NO2-或NO3-的含量計(jì)算積液中NO含量，發(fā)現(xiàn)B組病例耳積液中NO的含量為(176.18±42.68)μmol/L，A組為(138.71±40.98)μmol/L，與A組比較，B組明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。試劑盒檢測(cè)2組病例耳積液中NOS活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)B組耳積液中NOS的活性為(98.78±30.02)U，A組為(74.28±27.00)U，與A組比較，B組耳積液中NOS活性明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3討論

分泌性中耳炎所致的感音神經(jīng)性聾中，炎性介質(zhì)在致病過(guò)程中起重要作用，但影響機(jī)制尚未確定。目前，關(guān)于分泌性中耳炎所致的感音神經(jīng)性聾的發(fā)病機(jī)制有多種假設(shè)，包括病毒及細(xì)菌感染、NO機(jī)制、除NO外的細(xì)胞因子因素以及缺氧因素等。

NO由氧氣、氨基酸、NADPH以及其他輔助因子在不同NO合酶催化下進(jìn)行生化合成，NO合酶有幾種亞型，包括eNOS、nNOS和iNOS，與eNOS、nNOS被激活的方式不同，iNOS的產(chǎn)生是由多種細(xì)胞因子(如TNF-α)進(jìn)行誘導(dǎo)后由血管內(nèi)皮產(chǎn)生，當(dāng)炎癥刺激時(shí)，血管內(nèi)皮釋放大量NO，NO本無(wú)毒性，但在與白細(xì)胞代謝產(chǎn)物結(jié)合時(shí)能生成NO2，N2O3等氧化物，這些氧化物有較強(qiáng)的細(xì)胞毒性。John等[1]發(fā)現(xiàn)，在黏液分泌性中耳炎患者以及化膿性中耳炎患者的中耳積液中NO及NO代謝物的含量有很大差別，黏液分泌性中耳炎患者中耳積液中NO及NO代謝物的含量要明顯高于化膿性中耳炎患者，說(shuō)明NO參與了分泌性中耳炎的發(fā)病機(jī)制。此外，研究顯示[2]，伴有感音神經(jīng)性聾的中耳炎患者與不伴有感音神經(jīng)性聾的中耳炎患者相比，前者中耳積液中NO及NO合酶的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于后者，說(shuō)明NO極有可能通過(guò)與其他炎性介質(zhì)共同參與炎癥的局部反應(yīng)。Yilmazl等[3]通過(guò)測(cè)定分泌性中耳炎模型豚鼠和對(duì)照組豚鼠血紅細(xì)胞內(nèi)的 NO含量及NO合酶活性，結(jié)果顯示在模型組中兩種物質(zhì)的含量均比對(duì)照組高，表明NO對(duì)細(xì)胞及組織具有較強(qiáng)的損傷作用。關(guān)于NO的釋放機(jī)制，目前尚無(wú)明確的結(jié)論支持，但有研究發(fā)現(xiàn)[4]，IL-1β和TNF-α等細(xì)胞因子能刺激分泌性中耳炎患者積液表達(dá)iNOS，而大量研究[5-6]也表明許多高表達(dá)的細(xì)胞因子在分泌性中耳炎患者中耳積液中被檢測(cè)到。Kim等[7]研究發(fā)現(xiàn)，NOS的活性能顯著影響中耳積液的分泌量，以上研究表明當(dāng)NOS活性增強(qiáng)時(shí)，能促進(jìn)NO的大量釋放，導(dǎo)致炎性反應(yīng)增強(qiáng)，患者聽(tīng)力下降。Popa等[8]曾將內(nèi)毒素注入小鼠耳內(nèi)，并發(fā)現(xiàn)NO能使耳蝸損傷，還發(fā)現(xiàn)使用NO抑制劑能緩解耳蝸損傷程度，這一現(xiàn)象表明NO參與了耳蝸損害的發(fā)病機(jī)制。此外內(nèi)耳自身產(chǎn)生的參與炎性反應(yīng)的細(xì)胞因子也是內(nèi)耳損傷的重要因素[9]，如TNF-α等[10]。

本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)，伴有感音神經(jīng)性聾的分泌性中耳炎患者中耳積液中NO含量較單純性分泌性中耳炎高，NOS活性也較單純性分泌性中耳炎高，表明NO含量及NOS活性能參與分泌性中耳炎及分泌性中耳炎導(dǎo)致的感音神經(jīng)性聾的發(fā)病機(jī)制。通過(guò)抑制NOS的活性以及NO的含量，能降低炎癥反應(yīng)程度，減緩細(xì)胞或組織損傷，對(duì)治療分泌性中耳炎所致的感音神經(jīng)性聾提供了一個(gè)治療方向，值得推廣及重視。

參考文獻(xiàn)4

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(收稿2014-12-01)