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(1.懷化市第一人民醫(yī)院，湖南 懷化 418000；2.湖南省胃癌研究中心，湖南省高校腫瘤細(xì)胞與分子病理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南華大學(xué)腫瘤研究所，湖南 衡陽(yáng) 421001)

·基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)·

二烯丙基二硫下調(diào)β-catenin抑制人胃癌MGC803細(xì)胞EMT

向姝霖1,2#，劉芳2#，夏紅2，曾希2，蘇波2，董琳2，凌暉2，蘇琦2*

(1.懷化市第一人民醫(yī)院，湖南 懷化 418000；2.湖南省胃癌研究中心，湖南省高校腫瘤細(xì)胞與分子病理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南華大學(xué)腫瘤研究所，湖南 衡陽(yáng) 421001)

目的研究二烯丙基二硫(DADS)抑制人胃癌MGC803細(xì)胞EMT與形態(tài)學(xué)變化。方法應(yīng)用相差顯微鏡與透射電鏡觀察30 mg·L-1DADS處理后的MGC803細(xì)胞形態(tài)學(xué)與超微結(jié)構(gòu)的變化。RT-PCR與Western blot檢測(cè)β-catenin和EMT標(biāo)記E-cadherin與Vimentin表達(dá)。結(jié)果30 mg·L-1DADS處理MGC803細(xì)胞24 h后，相差顯微鏡顯示，與未處理比較，細(xì)胞圓形、橢圓形，核漿比值降低，巢狀分布，均未見(jiàn)偽足。透射電鏡顯示，細(xì)胞表面微絨毛數(shù)目減少，細(xì)胞核變規(guī)整，核漿比值下降，異型性降低，細(xì)胞與細(xì)胞之間出現(xiàn)連接結(jié)構(gòu)，細(xì)胞器增多。RT-PCR與Western blot表明，DADS可呈時(shí)間依賴性分別下調(diào)MGC803細(xì)胞β-catenin和Vimentin mRNA與蛋白和上調(diào)E-cadherin mRNA與蛋白。結(jié)論DADS可通過(guò)下調(diào)β-catenin上調(diào)E-cadherin與下調(diào)Vimentin抑制EMT和偽足形成。

二烯丙基二硫； 人胃癌MGC803細(xì)胞； EMT； β-catenin； E-cadherin； Vimentin

胃癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。據(jù)最新統(tǒng)計(jì)，胃癌的發(fā)生率與死亡率分別為全球第四位與第二位，每年新發(fā)病例約95.16萬(wàn)，死亡約72.31萬(wàn)。由于患者就診時(shí)大多已經(jīng)發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移，從而療效差，中位生存期不超過(guò)10個(gè)月，5年生存率低于10%，嚴(yán)重威害人類的生命健康[1,2]。因此，開(kāi)發(fā)有效的抗腫瘤藥物，對(duì)治療胃癌具有重要意義。

二烯丙基二硫(diallyl disulfide，DADS)是大蒜中的脂溶性有效成分，可抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖，其機(jī)制與調(diào)節(jié)生物酶降低化學(xué)致癌物毒性，抑制DNA加合物形成，阻滯腫瘤細(xì)胞周期演進(jìn)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和調(diào)亡，組蛋白修飾，抑制血管形成與侵襲等有關(guān)[3]。我們已經(jīng)證明，DADS可體內(nèi)外明顯抑制人胃癌細(xì)胞增殖，與激活p38，抑制ERK，調(diào)節(jié)ATR/Chk1/Cdc25C/cyclin B1等相關(guān)分子，上調(diào)組蛋白乙?；蚿21WAF1表達(dá)，阻滯G2/M期，上調(diào)miR-200b與 miR-22等有關(guān)[4-8]。并且，可通過(guò)下調(diào)LIMK1、p-Cofilin1、MMP-9和上調(diào)TIMP-3抑制人胃癌細(xì)胞遷移與侵襲[9-11]。本研究觀察DADS對(duì)人胃癌細(xì)胞EMT與形態(tài)學(xué)的影響，探討抑制遷移與侵襲的機(jī)制。

1 材料和方法

1.1試劑DADS：Fluka公司產(chǎn)品，純度80%，與Tween80以1∶2比例充分溶解，加入體積分?jǐn)?shù)為0.90的生理鹽水稀釋100倍，作為母液保存于-20 ℃冰箱。小牛血清(杭州四季青生物工程公司)，RPMI-1640培養(yǎng)基(Gibco公司)，Total RNA Kit(Omega公司)，RT試劑盒(Invitrogen 公司)，PCR試劑(Promega公司)，BCA蛋白定量檢測(cè)試劑盒(Pierce公司)，ECL發(fā)光檢測(cè)試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)，胰蛋白酶(Amresco公司)，β-catenin、E-cadherin，Vimentin與β-actin抗體購(gòu)自美國(guó)Abcam公司。

1.2細(xì)胞培養(yǎng)人胃癌MGC803細(xì)胞系南華大學(xué)腫瘤研究所保存。在含10%小牛血清的RPMI-1640(GIBCO，USA)培養(yǎng)液培養(yǎng)于370C，含5%CO2，恒濕、恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞呈單層生長(zhǎng)，鋪滿培養(yǎng)瓶后傳代，傳代時(shí)常規(guī)吸去培養(yǎng)液，用2.5 g·L-1胰蛋白酶消化3 min，傾去胰酶，加適量含血清培養(yǎng)液吹打成單細(xì)胞懸液，按所需濃度接種。

1.3相差顯微鏡檢查30 mg· L-1DADS處理MGC803細(xì)胞24 h，倒置相差顯微鏡觀察處理前后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。

1.4透射電子顯微鏡檢查取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MGC803細(xì)胞，常規(guī)胰酶消化傳代，接種于24孔培養(yǎng)板培養(yǎng)6 h，待細(xì)胞貼壁后，處理組加30 mg· L-1DADS，陽(yáng)性對(duì)照用2.0%DMSO(Sigma,USA)，陰性對(duì)照為常規(guī)培養(yǎng)液，分別處理24 h。消化收集細(xì)胞，離心，PBS液洗兩次，2.5%戊二醛/PBS固定24 h，剔取細(xì)胞團(tuán)，PBS清洗3次×10 min；1%鋨酸后固定1 h，PBS清洗3次×10 min；50%、70%、90%、100%丙酮梯度脫水，各10 min；環(huán)氧樹(shù)脂(Epon 812)浸泡24 h，包埋成塊24 h；LKB-Ⅲ型超薄切片機(jī)切成500-700A0超薄切片，硝酸鉛、醋酸鈾雙重染色，H-600日產(chǎn)透射電子顯微鏡下觀察、攝片。

1.3 RT-PCR Total RNA Kit 提取細(xì)胞總RNA，在 AMV 酶作用下逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。設(shè)計(jì)并合成PCR擴(kuò)增引物。E-cadherin：F 5′-CTCCCAATACATCTCCCTTCAC-3′,R 5′-CGCCTCCTTCTTCATCATAGTAA-3′,擴(kuò)增片段423 bp;Vimentin：F 5′-GCGAGG AGAGCAGGATTTC-3′,R 5′-TCTTGTAGGAGTGTCGGTTGTT-3′,擴(kuò)增片段351 bp;β-catenin:F 5′-GGAAGGGACAGTATCGTTTGTT-3′,R 5′-GCCTCAGCATCTACCA GCATAG-3′,擴(kuò)增片段334 bp;β-actin：F 5′-CTGGGACGACATGGAGAAAA-3′,R 5′-AAGGAAGGATGGAAGAGTG-3′,擴(kuò)增片段564 bp。PCR產(chǎn)物用2%瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙錠染色，BIO-RAD凝膠成像系統(tǒng)拍照，AlphaImager 2200軟件掃描，計(jì)算平均光密度值。

1.4 Western Blot 收集細(xì)胞，冰PBS洗兩次，1×107個(gè)細(xì)胞加入100 μL裂解液(100 mM NaCl，10 mM Tris-Hcl pH 7.6，1 mM EDTA pH 8.0，1 μg·mL-1Aprotinin，100μg·mL-1PMSF)，冰上裂解1 h，12 000 r/min離心10 min，吸出上清液，即細(xì)胞總蛋白。Bradford法測(cè)定蛋白含量，分光光度計(jì)在570 nm波長(zhǎng)處測(cè)定光吸收值，以溶劑為空白對(duì)照，牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)繪制曲線，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線推算蛋白含量。使蛋白變性，10%SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳后轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，含5%牛血清白蛋白的TBST(Tris-HCL 20 mmol/L，NaCl 137 mmol/L 含0.1% Tween-20)封閉1h，一抗4 ℃孵育過(guò)夜，TBST洗3次，每次5 min，二抗孵育1 h，TBST洗3次，每次5 min，化學(xué)發(fā)光劑檢測(cè)蛋白質(zhì)印跡，薄層掃描儀測(cè)定光密度值。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件One-Way Anova或t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1 MGC803細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變相差顯微鏡顯示，未處理組MGC803細(xì)胞排列松散、彌漫分布，呈長(zhǎng)梭形，核大而核漿比值大，胞漿伸出形成纖細(xì)偽足，有的細(xì)胞具有多個(gè)偽足，甚至形成網(wǎng)狀。30 mg· L-1DADS處理24h后，細(xì)胞聚集，呈巢狀，細(xì)胞圓形、橢圓形，少數(shù)細(xì)胞呈胖梭形，核漿比值降低，胞漿增多，均未見(jiàn)偽足(圖1)。

圖1 DADS 處理MGC803 的形態(tài)學(xué)變化(×40) A:非處理組;B: DADS處理組

2.2 MGC803細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變圖2顯示，MGC803細(xì)胞形狀不規(guī)則，細(xì)胞表面有較多或豐富的微絨毛結(jié)構(gòu)，胞漿較少，核大，核漿比值大，細(xì)胞核不規(guī)則，有切跡，畸形，有大而致密核仁，部分細(xì)胞有多個(gè)小核仁。細(xì)胞漿內(nèi)，線粒體較少，形狀不規(guī)則，線粒體嵴的數(shù)量少，常見(jiàn)空泡。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)不發(fā)達(dá)，數(shù)量少。細(xì)胞內(nèi)多聚核糖體較多而游離核糖體少見(jiàn)。圖3顯示，30 mg· L-1DADS處理24 h后，MGC803細(xì)胞表面微絨毛減少，胞漿增多，核漿比值下降，核圓型，較規(guī)整，畸形少見(jiàn)，核仁致密或出現(xiàn)核仁內(nèi)空泡，部分細(xì)胞核呈現(xiàn)退行性變；細(xì)胞有形成腺腔趨勢(shì)，并出現(xiàn)細(xì)胞間連接結(jié)構(gòu)；細(xì)胞器豐富，線粒體增多，伴有水腫，可見(jiàn)線粒體嵴；除粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外，有的出現(xiàn)滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有擴(kuò)張、水腫和空泡變性；在胞漿內(nèi)有成熟的分泌顆粒和脂滴，夾雜單核糖體和多聚核糖體，表明DADS可部分誘導(dǎo)MGC803細(xì)胞分化。圖4顯示DMSO處理后細(xì)胞的改變與DADS作用相類似。

圖2 非處理組MGC803 細(xì)胞超微結(jié)構(gòu) A：表面有豐富的微絨毛，核漿比值大，核不規(guī)則，畸形，有致密核仁(5000×)；B：微絨毛豐富，核大，細(xì)胞器稀少(8000×)；C：大而致密核仁，出現(xiàn)空泡，細(xì)胞器稀少(10000×)

圖3 DADS處理的MGC803細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化 A：表面微絨毛減少，核形狀較規(guī)則，核漿比值變小，細(xì)胞器豐富增多(5000×)；B：細(xì)胞有形成腺腔趨勢(shì)，并且出現(xiàn)細(xì)胞間連接結(jié)構(gòu)(8000×)；C：可見(jiàn)線粒體嵴、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及核糖體(10000×)

圖4 DMSO處理 MGC803 細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化 A：表面有豐富的微絨毛，核漿比值大，核不規(guī)則，畸形，有致密核仁(5000×)；B：微絨毛豐富，核大，細(xì)胞器稀少(8000×)；C：大而致密核仁，出現(xiàn)空泡，細(xì)胞器稀少(10000×)

2.3 DADS對(duì)E-cadherin表達(dá)的影響圖5與6顯示，30 mg· L-1DADS處理MGC803細(xì)胞12 h、24 h、48 h后，DADS呈時(shí)間依賴性上調(diào)MGC803細(xì)胞E-cadherin mRNA和蛋白表達(dá) (P<0.05)。

圖5 E-cadherin mRNA表達(dá) M:mark;1:Control;2:12 h;3:24 h;4:48 h. *：P<0.05 vs Control, #：P<0.05 vs 12 h,$：P<0.05 vs 24 h

2.4 DADS對(duì)Vimentin表達(dá)的影響圖7與8顯示，30 mg· L-1DADS處理MGC803細(xì)胞12 h、24 h、48 h后，與對(duì)照組相比，DADS可呈時(shí)間依賴性下調(diào)MGC803細(xì)胞Vimentin mRNA和蛋白表達(dá) (P<0.05)。

2.5 DADS對(duì)β-catenin表達(dá)的影響圖9與10顯示，30 mg· L-1DADS分別處理MGC803細(xì)胞12 h、24 h、48 h后，與對(duì)照組相比，DADS可呈時(shí)間依賴性下調(diào)MGC803細(xì)胞β-catenin mRNA和蛋白表達(dá) (P<0.05)。

圖6 E-cadherin蛋白表達(dá) 1:Control; 2: 12 h; 3: 24 h; 4: 48 h. *:P<0.05 vs Control, #:P<0.05 vs 12 h,$:P<0.05 vs 24 h

圖7 Vimentin mRNA表達(dá) M: mark;1: Control;2: 12 h;3: 24 h;4: 48 h. *：P<0.05 vs Control, #：P<0.05 vs 12 h,$：P<0.05 vs 24 h

圖8 Vimentin蛋白表達(dá) 1:Control;2: 12 h;3: 24 h;4: 48 h.*：P<0.05 vs Control,#：P<0.05 vs 12 h,$：P<0.05 vs 24 h

圖9 β-catenin mRNA 表達(dá) M:mark;1:Control;2:12 h;3:24 h;4:48 h. *：P<0.05 vs Control, #：P<0.05 vs 12 h,$：P<0.05 vs 24 h

3 討 論

在腫瘤生長(zhǎng)和演進(jìn)過(guò)程中，上皮來(lái)源性腫瘤細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變(EMT)。EMT在多種因子的調(diào)節(jié)下，上皮細(xì)胞黏附分子E-cadherin下調(diào)和間質(zhì)標(biāo)記Vimentin上調(diào)，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞失去原有的緊密連接及粘附力，細(xì)胞形態(tài)從多邊形變?yōu)樗笮危瑥亩@得侵襲與轉(zhuǎn)移能力[12]。研究證實(shí)，Wnt/β-catenin通路與EMT 密切相關(guān)。β-catenin直接影響著Wnt通路的開(kāi)放或關(guān)閉，當(dāng)胞外Wnt增加時(shí)，Wnt與Frizzled結(jié)合，激活Dsh/Dvl蛋白，進(jìn)而抑制GSK3Bβ/APC/Axin復(fù)合物對(duì)β-catenin的磷酸化，保護(hù)其不被降解，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)β-catenin增多，而進(jìn)入胞核與轉(zhuǎn)錄因子Tcf/Lef結(jié)合，引起c-Myc、Cyclin D1、survivin、c-jun、Fra等靶基因轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)腫瘤增殖、血管形成、遷移侵襲和轉(zhuǎn)移[13,14]。因此，β-catenin在促進(jìn)EMT起著關(guān)鍵作用，而靶向抑制β-catenin可逆轉(zhuǎn)EMT[14]。此外，E-cadherin 缺失是促進(jìn)EMT的主要因子，E-cadherin/β-catenin 復(fù)合物和Wnt/β-caternin通路失調(diào)將導(dǎo)致β-catenin 核轉(zhuǎn)位和EMT與促進(jìn)靶基因激活[15]。

圖10 β-catenin蛋白表達(dá) 1:Control;2:12 h;3:24 h;4:48 h.*:P<0.05 vs Control,#:P<0.05 vs 12 h,$:P<0.05 vs 24 h

Huang 等發(fā)現(xiàn)，DADS可明顯通過(guò)抑制β-catenin活化下調(diào)Bcl-2和上調(diào)Bax，下調(diào)MMP-9和逆轉(zhuǎn)EMT[14]。我們先前證明，DADS可體內(nèi)外通過(guò)上調(diào)miR-200b與miR-22下調(diào)Wnt1、β-catenin和TCF-4 mRNA與蛋白表達(dá)，抑制人胃癌細(xì)胞增殖與移植瘤生長(zhǎng)和誘導(dǎo)凋亡[8]。本研究結(jié)果表明，DADS處理后，MGC803細(xì)胞從彌漫分布，長(zhǎng)梭形，核大而核漿比值大，轉(zhuǎn)變?yōu)槌矤罘植迹蕡A形、橢圓形，核漿比值降低。超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞核質(zhì)比明顯下降，細(xì)胞與細(xì)胞之間出現(xiàn)連接結(jié)構(gòu)，細(xì)胞器數(shù)目增多，可見(jiàn)游離核糖體，表明DADS可降低胃癌細(xì)胞異型性，細(xì)胞形態(tài)可從梭形轉(zhuǎn)變?yōu)閳A形、橢圓形，具有逆轉(zhuǎn)EMT作用。RT-PCR與Western blot進(jìn)一步證明，DADS可呈時(shí)間依賴性下調(diào)MGC803細(xì)胞β-catenin與Vimentin和上調(diào)E-cadherin，提示DADS可能通過(guò)下調(diào)β-catenin上調(diào)E-cadherin與下調(diào)Vimentin，抑制EMT形成。

近年來(lái)，越來(lái)越多的研究認(rèn)為，偽足形成是腫瘤轉(zhuǎn)移中局部侵襲的重要驅(qū)動(dòng)器，與EMT相關(guān)，偽足形成與EMT是惡性腫瘤細(xì)胞基本特征。EMT 通過(guò)溶解上皮細(xì)胞間粘附、調(diào)節(jié)細(xì)胞與基質(zhì)粘附和誘導(dǎo)分泌ECM 降解蛋白酶導(dǎo)致上皮細(xì)胞的遷移與侵襲能力增加。因此，EMT可引發(fā)偽足或侵襲性偽足樣結(jié)構(gòu)形成。侵襲性偽足是具有豐富的actin與磷酸酪氨酸和高度降解ECM能力的膜突出，其可聚集MMPs降解ECM，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中起著重要作用。已經(jīng)鑒定大量蛋白，如EGF、HGF、PDGF與TGFβ等各種生長(zhǎng)因子對(duì)侵襲性偽足與EMT形成是重要的。這些生長(zhǎng)因子可活化非受體Src，而Src 具有誘導(dǎo)侵襲性偽足與EMT 的能力。最近，有人提出腫瘤細(xì)胞的偽足形成與actin細(xì)胞骨架重組對(duì)EMT和轉(zhuǎn)移相關(guān)的新觀點(diǎn)，但是，EMT與偽足形成的直接聯(lián)系尚待確定，如果這些關(guān)系能夠得到證實(shí)，那么將對(duì)阻止腫瘤細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移的創(chuàng)新性治療方法的研發(fā)帶來(lái)曙光。因此，進(jìn)一步研究這些問(wèn)題是亟待解決的[16-18]。

目前，抑制侵襲性偽足形成與EMT已成為臨床治療的靶點(diǎn)。研究顯示，調(diào)控EMT的重要因子Twist通過(guò)上調(diào)PDGFR表達(dá)與活性促進(jìn)侵襲性偽足形成[17]。A431-Ⅲ 細(xì)胞是具有高遷移侵襲能力、MMP-9高表達(dá)與EMT增強(qiáng)的鱗癌A431細(xì)胞亞型，并且，其侵襲性偽足形成和降解ECM的能力增加。黃酮類化合物的有效成分Luteolin與Quercetin不僅可抑制A431-Ⅲ 細(xì)胞EMT，而且可廢除侵襲性偽足形成、降低ECM降解與下調(diào)MMP-9，從而減少轉(zhuǎn)移[18]。miR-21的小分子抑制劑AC1MMYR2與紫杉醇聯(lián)合治療可抑制乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞和惡性膠質(zhì)瘤U87VⅢ細(xì)胞的遷移侵襲能力，減少高劑量紫杉醇誘導(dǎo)的侵襲性偽足形成，下調(diào)β-catenin與vimentin和上調(diào)E-cadherin，明顯抑制EMT和減少肺轉(zhuǎn)移[19]。FHOD1可促進(jìn)梭形形態(tài)與F-actin形成和遷移侵襲，沉默F(xiàn)HOD1可減少EMT腫瘤細(xì)胞形成侵襲性偽足與降解ECM的能力[20]。

本研究發(fā)現(xiàn)，DADS作用MGC803細(xì)胞后，未見(jiàn)偽足形成，超微結(jié)構(gòu)顯示微絨毛減少，表明DADS可抑制人胃癌細(xì)胞偽足形成。LIMK1表達(dá)或活性增強(qiáng)可導(dǎo)致磷酸化cofilin1水平升高，增加肌動(dòng)蛋白聚合，促進(jìn)細(xì)胞偽足形成，驅(qū)動(dòng)腫瘤細(xì)胞遷移侵襲，而DADS可阻斷Rac1-Pak1/Rock1通路下調(diào)LIMK1，抑制cofilin1磷酸化，從而抑制人胃癌細(xì)胞遷移與侵襲，提示DADS可能通過(guò)下調(diào)LIMK1抑制cofilin1磷酸化，降低actin聚合，抑制偽足形成[9-11]。

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DADSInhibitEMTThroughDown-Regulationofβ-catenininHumanGastricCancerMGC803Cells

XIANG Shulin,LIU Fang,XIA Hong,et al

(TheHuaihuaFirsthospital,Huaihua418000Hunan,China)

ObjectiveTo investigate the effect of EMT and morphology change in human gastric cancer MGC803 cells induced by diallyl disulfide (DADS).MethodsThe phase contrast microscope and transmission electron microscope were employed to confirm the DADS-induced morphology change.The expression of β-catenin,E-cadherin and Vimentin was detected by RT-PCR and Western blot in MGC803 cells after treated by 30 mg·L-1DADS.ResultsThe phase contrast microscope show that MGC803 cells after 24 h treated by 30 mg·L-1DADS were round or ellipse,enlarged cytoplasm,descend nuclear/cytoplasmic ratio,exhibited nest and even not view pseudopodia.Transmission electron microscope results show,that the number of microvilli on cells surface decrease,malignance declining as cellular heteromorphism diminish,nucleocytoplasmic proportion reduce,intercellular conjunctional structure appear and cellular organ increase in cytoplasm after MGC803 cells treated by DADS to contrast untreated.RT-PCR and Western blot indicated that DADS may be down-regulation of β-catenin and Vimentin mRNA and protein up-regulation of E-cadherin mRNA and protein in time dependence in MGC803 cells.ConclusionAll these suggested that DADS may inhibit EMT and pseudopodia via down-regulation of β-catenin to up-regulate E-cadherin and down-regulate Vimentin in MGC803 cells.

diallyl disulfide; human gastric cancer MGC803 cells; EMT; β-catenin; E-cadherin; Vimentin

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.05.002

2015-07-30；

2015-09-02

國(guó)家自然科學(xué)基金(81102854,31100935，81374013)；湖南省衛(wèi)計(jì)委科研項(xiàng)目(B2015-182).

*通訊作者，E-mail:suqi1945@163.com.

R36

A

(此文編輯：秦旭平)