丁 豪，楊海燕*，辛志宏

（1.新疆農業(yè)大學食品科學與藥學學院，新疆 烏魯木齊 830052；2.南京農業(yè)大學食品科技學院，江蘇 南京 210095）

昆侖雪菊黃酮類化合物的抗氧化相互作用研究

丁 豪1,2，楊海燕1,*，辛志宏2,*

（1.新疆農業(yè)大學食品科學與藥學學院，新疆 烏魯木齊 830052；2.南京農業(yè)大學食品科技學院，江蘇 南京 210095）

目的：選取昆侖雪菊中5 種具有強抗氧化活性的黃酮類化合物馬里苷、金雞菊噢、黃杉素、紫鉚因和奧卡寧，研究其抗氧化相互作用。方法：以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-dinhenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除能力為指標，采用Chou-Talalay中效原理設計實驗，分析抗氧化相互作用。結果：金雞菊噢與紫鉚因、黃杉素與紫鉚因之間具有抗氧化中等協(xié)同作用，它們對清除DPPH自由基的加權平均聯(lián)合作用指數(shù)（weighted average combination index，CIwt）值分別為0.824和0.749。另外，金雞菊噢與紫鉚因復配時，當半抑制濃度（IC50）大于1且CIwt值小于0.90時，出現(xiàn)協(xié)同效應。3 種化合物聯(lián)合使用時，清除DPPH自由基的CIwt值均大于1，不存在協(xié)同抗氧化作用。結論：昆侖雪菊中黃酮類化合物之間的抗氧化相互作用關系與化合物的結構和濃度有關。

黃酮類化合物；抗氧化；中效原理；相互作用

氧自由基是由機體氧化反應產生的有害化合物，具有強氧化性，能破壞細胞內DNA，加速人體衰老，導致癌癥的產生[1]。自由基導致衰老的加速，衰老又使得人體在“消滅”自由基方面的功能減弱，自由基和衰老使得人體的健康陷入了一個惡性循環(huán)。因此，及時消除機體內過多的氧化自由基，能夠有效預防由自由基引發(fā)的一系列疾病，如癌癥、動脈硬化、糖尿病、心血管病等[2]。天然抗氧化劑與人工合成的抗氧化劑相比，具有安全、無毒、高效等特點，而復合抗氧化劑相比于單一抗氧化劑不僅抗氧化活性提高[3]，而且降低了成本，還可以避免因抗氧化劑使用過多從而帶來安全問題，具良好的應用前景。許多研究表明，植物的強抗氧化能力并非單個化合物作用的結果，而是由多個化合物共同作用產生的[4]，因而對于多種抗氧化劑協(xié)同抗氧化作用的研究已成為天然抗氧化劑的研究熱點。不同抗氧化劑的協(xié)同抗氧化作用的研究已有報道，如麥苗中阿魏酸、抗壞血酸、總黃酮兩兩復配顯示協(xié)同抗氧化作用[5]，白藜蘆醇與黑木耳多糖具有協(xié)同抗氧化作用[6-7]，荔枝皮原花青素與VC、VE存在協(xié)同抗氧化作用[8]，茶多酚與幾種天然抗氧化物質之間存在協(xié)同抗氧化作用[9-10]，VC、VE對鷹嘴豆抗氧化多肽的抗氧化能力具有顯著增效作用[11]，花椒葉提取物與VC、檸檬酸具有協(xié)同增效作用[12]，咖啡渣提取物與VC、檸檬酸存在協(xié)同抗氧化作用等[13]。目前，黃酮類化合物的抗氧化能力已被科學界廣泛接受[14]，雪菊提取物中分離純化的黃酮類化合物的抗氧化作用也有初步的研究[15-16]，但關于它們之間協(xié)同抗氧化作用的研究尚未見報道。

本實驗是在研究雪菊中分離純化的幾個黃酮類化合物的基礎上，將其相互組合，探討它們之間抗氧化活性的相互作用，以期篩選出協(xié)同抗氧化作用的最佳組合，為深入研究昆侖雪菊抗氧化活性奠定基礎，也為開發(fā)復合型天然抗氧化劑提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

昆侖雪菊（購于新疆烏魯木齊北園春批發(fā)市場）中分離純化得到的5 種黃酮類化合物，經譜學方法分別鑒定為馬里苷（化合物1）、金雞菊噢（化合物2）、黃杉素（化合物3）、紫鉚因（化合物4）和奧卡寧（化合物5）[17]；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、α-生育酚 美國Sigma公司。

1.2 儀器與設備

UV-2102C/PC/PCS型分光光度計 尤尼柯（上海）儀器有限公司；電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 DPPH自由基清除能力測定

DPPH自由基清除法參照Alvarez-Jubete等[18]，并稍作修改。0.2 mmol/L DPPH溶液用乙醇配制，吸取2.0 mL DPPH溶液分別與2.0 mL不同濃度的化合物溶液混合，室溫避光放置30 min，每個濃度重復3 次，517 nm波長處測定吸光度（A517nm）。清除率計算見公式（1）。

式中：A空白為加入DPPH溶液與無水乙醇的A517nm值；A樣品為DPPH溶液與樣品溶液的A517nm值；A對照為樣品溶液與無水乙醇的A517nm值。

1.3.2 抗氧化活性的測定

將5 種化合物分別配制為濃度2.5、5、7.5、10、12.5、15、20、25、30、40、60、80、100 μmol/L的溶液，測定其DPPH自由基清除率，根據所得清除率曲線計算出半抑制濃度（50% inhibition concentration，IC50）。以α-生育酚為陽性對照組。

1.3.3 抗氧化相互作用的實驗設計

以5 種化合物各自的IC50（μmol/L）為基礎，每種化合物分別配制濃度為0.1 IC50（即0.1×IC50，下同）、0.2 IC50、0.3 IC50、0.4 IC50、0.5 IC50、0.75 IC50、1.0 IC50、1.25 IC50、1.5 IC50的溶液。兩種化合物復配，各個濃度均以體積比1:1混合均勻（如：1 mL 0.1 IC50的化合物1與1 mL 0.1 IC50的化合物2混合），測定其DPPH自由基清除率[19-20]。3 種化合物復配，各個濃度以體積比1∶1∶1混合均勻（如0.67 mL 0.1 IC50的化合物1與0.67 mL 0.1 IC50的化合物2及0.67 mL 0.1 IC50的化合物3混合），按1.3.1節(jié)方法測定復合組分的抗氧化活性。

1.3.4 中效原理

采用Chou-Talalay的中效原理設計實驗，研究5 種黃酮類化合物之間的相互作用?？捎萌缦鹿奖硎荆?/p>

式中：fa為反應系統(tǒng)中D濃度所產生效應的部分；fu為未產生效應的部分；fu＝1－fa；D為藥物濃度/（mol/L）；Dm為中效濃度/（mol/L）；m為中效曲線斜率。

兩邊取對數(shù)，即

設Y＝lg（fa/fu），X＝lgD，b＝m，a＝mlgDm，可得線性方程式：

藥物聯(lián)合作用指數(shù)（combination index，CI）的一般式為：

其中兩藥物聯(lián)合作用指數(shù)的公式為：

式中：D1和D2分別為藥物1與2聯(lián)合作用產生x效應時各自所需濃度/（mol/L）；Dx1和Dx2為藥物1和2單用產生x效應時各自所需濃度/（mol/L）[21]，通過CI值的大小可以定量判斷藥物間相互作用的性質以及強度，詳見表1。用于衡量綜合相互作用的加權平均CI（weighted average CI，CIwt）值的一般式為：

式中：CI50表示在達到中效劑量，即50%作用濃度（50% effect concentration，EC50）時候的CI值，CI75、CI90、CI95同理[22]。

表1 藥物聯(lián)合作用的CI值區(qū)間及評價Table 1 Average CI and description in drug combination studies

1.4 統(tǒng)計分析

2 結果與分析

2.1 5 種化合物的抗氧化活性

圖1 5種化合物的DPPH自由基清除效果Fig.1 DPPH radical scavenging effects of five compounds

由圖1可知，馬里苷、金雞菊噢、黃杉素、紫鉚因和奧卡寧的IC50分別為28.33、34.35、41.69、30.81、38.72 μmol/L，而對照組α-生育酚的IC50為27.07 μmol/L，說明這5 種化合物對DPPH自由基清除能力略弱于α-生育酚，且馬里苷（化合物1）的抗氧化能力強于其他4 種化合物。圖2則是本實驗所選取的5 種黃酮類化合物的化學結構以及黃酮的基本結構。

圖2 5種化合物的結構及黃酮類物質的基本結構Fig.2 Structures of five compounds and basic structure of flavonoids

2.2 5 種化合物兩兩復合物的抗氧化活性

圖3 兩化合物組合的DPPH自由基清除率和濃度關系Fig.3 Relationship of DPPH free radical clearance and concentrations of two flavonoid compounds in combination

由圖3可知，化合物兩兩組合時，除了化合物2+4和化合物3+4以外，其他8 組聯(lián)合使用清除DPPH自由基的清除率都小于它們各自單個化合物的清除率。

圖4 5種化合物的聯(lián)合作用指數(shù)Fig.4 CI-effect plots for five compounds in combination

由圖4F可知，化合物2+4在半抑制濃度為0.1 IC50、0.2 IC50、0.3 IC50、0.4 IC50、0.5 IC50、0.75 IC50、1.0 IC50、1.25 IC50、1.5 IC50時，其CI值分別為0.91、0.95、0.95、1.02、1.03、1.00、1.00、0.85、0.65。由此可見，在半抑制濃度＜1.0 IC50的時候，CI值在0.90～1.10內，表明是相加效應；當半抑制濃度＞1.0 IC50時，CI值＜0.90，說明兩化合物之間具有協(xié)同抗氧化作用?；衔?+4在半抑制濃度為0.1 IC50、0.2 IC50、0.3 IC50、0.4 IC50、0.5 IC50、0.75 IC50、1.0 IC50、1.25 IC50、1.5 IC50時，其CI值分別為1.00、0.93、0.95、0.94、1.00、0.95、0.88、0.79、0.67，各半抑制濃度下的CI值均≤1，說明這兩個化合物具有協(xié)同抗氧化作用（圖4H）。其中，圖4F、4H的CI值曲線在判別線（CI＝1.0）的下方，說明化合物2+4和化合物3+4之間存在協(xié)同作用；圖4A、4B、 4E、4I的CI值≈1，表現(xiàn)為相加效應；圖4C、4D、4G、4J的CI值曲線在判別線上方，即CI值＞1，說明這幾個組合之間存在拮抗作用。

表2 兩化合物復配清除DPPH自由基的CI值Table 2 CI values of combinations two flavonoid compounds for scavenging DPPH free radical

由表2可知，化合物2+4、3+4時的CIwt值分別為0.824、0.749，表現(xiàn)為中等協(xié)同作用，且協(xié)同效果后者略大于前者；同樣，化合物1+2、1+3、1+4、化合物2+3、化合物4+5分別組合時的CIwt值分別為1.038、1.006、1.090、0.979、1.004，全部位于0.90～1.10之間，說明兩兩之間存在相加作用；另外，化合物1+5，化合物2+5的CIwt值分別為1.273、1.367，位于1.20～1.45之間，說明兩兩之間存在中等拮抗作用；化合物3+5組合時的CIwt值為1.103，略大于1.10，說明兩化合物之間存在輕微拮抗作用。

2.3 5 種化合物三者復合物的抗氧化活性

表3 3種化合物復配清除DPPH自由基的CI值Table 3 CI values of combinations of three flavonoid compounds for scavenging DPPH free radical

由表3可知，3 種化合物復合使用時，除了化合物1、2、3復配和1、3、4復配時的CIwt值在1.00～1.10區(qū)間表現(xiàn)為相加作用，其余8 組組合的CIwt值均大于1.10，表現(xiàn)出不同程度的拮抗作用。其中CIwt最高的組合為化合物1+2+4，說明其抗氧化拮抗作用相對于其他組合較強。

3 討 論

本實驗選取昆侖雪菊中5 種黃酮類化合物作為研究對象，包括馬里苷（化合物1）、金雞菊噢（化合物2）、黃杉素（化合物3）、紫鉚因（化合物4）和奧卡寧（化合物5），以DPPH自由基清除能力為評價指標，簡單易行，靈敏可靠，并采用Chou-Talalay中效原理分析化合物之間的相互作用，具有科學依據。

3.1 結構的影響

影響黃酮類化合物抗氧活性的因素，最主要的是羥基化的程度和羥基的位置[23]。研究表明，黃酮結構中，B環(huán)鄰二羥基、2,3-雙鍵與4-羰基、以及3,5-羥基是決定黃酮類化合物自由基清除活性的重要因素，一般認為B環(huán)中的鄰二羥基對黃酮類化合物的抗氧活性起主要作用[24]。實驗所選的5 種昆侖雪菊黃酮類化合物都具有3’,4’-二羥基結構（圖2），因此，它們都具有較高的自由基清除能力（圖1）。但是，當黃酮化合物兩兩復配和三者復配后，混合物的自由基清除能力卻多數(shù)呈相加和拮抗作用（表2、3），僅兩組具有協(xié)同作用（化合物2+4、化合物3+4）。Samra等[25]的研究表明，若兩種黃酮均有3’,4’-二羥基結構，則混合物經反應后，由于2 種黃酮均生成鄰二苯醌結構，混合物抗氧化活性受到較強抑制。三者復配的實驗結果突出表明3’,4’-二羥基結構對多黃酮化合物復配抗氧化活性的抑制作用（表3）。

除此之外，Choueiri等[26]發(fā)現(xiàn)，槲皮素與兒茶素混合后易成為氧化強化劑，增強活性氧類物質（reactive oxygen species, ROS）的作用，從而導致細胞毒性。Hidalgo等[27]認為，槲皮素、異槲皮素與花青素混合后，由于二者間發(fā)生氫鍵締合，減少了羥基數(shù)目，降低了供電子能力，從而削弱了與DPPH自由基的反應能力。Meyer等[28]的研究結果表明，表兒茶素與具有4-羰基結構的黃酮混合后，兒茶素、表兒茶素的鄰二酚羥基可與羰基發(fā)生氫鍵締合，阻礙兒茶素、表兒茶素的供氫能力，從而降低黃酮混合物的抗氧化性。由此可見，昆侖雪菊5 種黃酮類化合物復配清除DPPH自由基的實驗多數(shù)呈相加和拮抗作用的原因是5 種黃酮化合物都具有4-羰基結構，相互混合以后，鄰二酚羥基可與羰基發(fā)生氫鍵締合，阻礙了其供氫能力，導致混合物缺少能夠中斷自由基鏈式反應的氫電子，從而降低DPPH自由基清除能力。

3.2 濃度的影響

有研究表明抗氧化物質之間的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質的濃度有關[29]?；衔飪蓛蓮团淝宄鼶PPH自由基實驗的結果顯示，在不同濃度下，有的混合物DPPH自由基清除能力比兩種化合物各自的清除能力都高，有的高于其中一個，也有的比兩種化合物都低，表明化合物濃度對昆侖雪菊黃酮類化合物復配的抗氧化活性有很大影響（圖3）。另外，不同DPPH自由基清除效果時，CI值也存在較大差異（圖4），說明作用效果對昆侖黃酮類化合物的相互作用關系有影響。由此推測，昆侖雪菊黃酮類化合物的抗氧化相互作用與化合物濃度有關。王岳飛等[9]研究了茶多酚與幾種天然抗氧化物質的協(xié)同作用，研究結果也表明，抗氧化物質之間的協(xié)同抗氧化作用與抗氧化物質本身的抗氧化能力、抗氧化物質有效濃度的高低等因素有關。孫世利等[10]研究茶多酚與VC、VE的協(xié)同抗氧化作用，結果表明，高濃度的茶多酚與VC、VE存在很好的協(xié)同抗氧化效應。因此，選擇合適的復配濃度可以有效地降低昆侖雪菊黃酮類化合物之間的拮抗作用，或者增強其協(xié)同作用。

3.3 體內實驗的有關研究

對黃酮類化合物體外抗氧化活性的評價取決于DPPH自由基的性質以及反應機理，而這些機理又受到黃酮羥基的數(shù)量、位置、甲基化基團、糖基化結構、反應試劑的結構與極性等因素影響[30]。然而，除了體外抗氧化活性評價，更全面研究黃酮化合物的抗氧化相互作用還需要進一步通過體內實驗探究黃酮混合物抗氧化活性的生物反應。Rossetto等[31]以抗亞油酸氧化為評價指標發(fā)現(xiàn)，兒茶素可促進矢車菊素-3-O-葡萄糖苷等花青素的氫再生，從而提高混合物的抗氧化能力。Pignatelli等[32]則通過人體質粒實驗發(fā)現(xiàn)，兒茶素與槲皮素混合物能顯著抑制血小板聚集，從而顯著抑制膠原質引起的過氧化氫的產生。因此，昆侖雪菊黃酮類化合物的體內抗氧化相互作用有待進一步研究。

4 結 論

昆侖雪菊中含有很多強抗氧化活性的黃酮類化合物，它們的抗氧化活性與其化學結構密切相關。黃酮化合物的化學結構也對黃酮混合物的抗氧化活性有很大影響。而且黃酮混合物的抗氧化相互作用關系跟黃酮化合物的復配濃度有關，合適的復配濃度可以增強協(xié)同作用，或降低拮抗作用。但由于昆侖雪菊中的黃酮類化合物種類繁多，并且相互作用的機理研究尚不十分明確，因此，對更多種類黃酮化合物的相互作用研究將是下一步的研究方向。此外，隨著體內抗氧化活性評價體系的日益完善，昆侖雪菊黃酮類化合物的體內抗氧化活性及其相互作用研究也將成為其抗氧化相互作用的研究重點。與此同時，進一步研究黃酮類化合物的抗氧化相互作用，將為開發(fā)昆侖雪菊復合型天然抗氧化劑提供重要依據。

參考文獻：

[1] 張麗芬, 郭玉萍, 周軍, 等. 運動對人體自由基代謝的影響[J]. 現(xiàn)代生物醫(yī)學進展, 2012, 12(17): 3388-3393.

[2] 李勇, 孔令青, 高洪, 等. 自由基與疾病研究進展[J]. 動物醫(yī)學進展, 2008, 29(4): 85-88.

[3] 盛雪飛, 彭燕, 陳健初. 天然抗氧化劑之間的協(xié)同作用研究進展[J].食品工業(yè)科技, 2010, 31(7): 414-417.

[4] MEERA B, SUSHMA R G, GHAZIA A, et al. Ginger phytochemicals exhibit synergy to inhibit prostate cancer cell proliferation[J]. Nutrition and Cancer, 2013, 65(2): 263-272.

[5] 張志清, 向建軍, 周利茗, 等. 麥苗中阿魏酸、抗壞血酸(VC)、總黃酮協(xié)同抗氧化能力分析[J]. 中國糧油學報, 2013, 28(7): 5-11.

[6] 白海娜, 王振宇, 張華, 等. 多酚類化合物與黑木耳多糖協(xié)同抗氧化作用研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2013, 34(22): 124-134.

[7] 白海娜, 王振宇, 劉瑞海, 等. 白藜蘆醇與黑木耳多糖協(xié)同清除ABTS自由基活性的研究[J]. 現(xiàn)代食品科技, 2014, 30(3): 64-68.

[8] 周瑋婧, 隋勇, 孫智達, 等. 荔枝皮原花青素與VC、VE的協(xié)同抗氧化研究[J]. 食品科學, 2012, 33(3): 5-8.

[9] 王岳飛, 徐平, 李磊, 等. 茶多酚與幾種天然抗氧化物質的協(xié)同作用研究[J]. 茶葉科學, 2010, 30(2): 109-114.

[10] 孫世利, 劉淑媚, 趙超藝, 等. 茶多酚與維生素C/E的協(xié)同抗氧化作用研究[J]. 廣東農業(yè)科學, 2013, 40(1): 96-98.

[11] 李翠蓮, 方北曙, 申雙貴. 鷹嘴豆抗氧化多肽與其它抗氧化劑的協(xié)同作用[J]. 中國農學通報, 2008, 24(10): 57-60.

[12] 羅愛國, 胡變芳, 趙健. 花椒葉提取物抗氧化性及協(xié)同效應[J]. 江蘇農業(yè)科學, 2014, 42(5): 240-242.

[13] 潘文潔, 黃曉東, 張玲. 咖啡渣提取物抗氧化性及其協(xié)同效應的研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2008, 29(11): 130-132.

[14] YI Long, CHEN Chunye, JIN Xin, et al. Structural requirements of anthocyanins in relation to inhibition of endothelial injury induced by oxidized low-density lipoprotein and correlation with radical scavenging activity[J]. FEBS Letters, 2010, 584(3): 583-590.

[15] 楊英士, 陳偉, 楊海燕, 等. 昆侖雪菊中2個黃酮類化合物的分離鑒定及其抗氧化活性評價[J]. 南京農業(yè)大學學報, 2014, 37(4): 149-154.

[16] 陳偉, 楊英士, 楊海燕. 昆侖雪菊結合型黃酮類化合物的分離與鑒定[J]. 食品科學, 2014, 35(11): 72-78. doi:10.7506/spkx1002-6630-201411015.

[17] WANG Wei, CHEN Wei, YANG Yingshi, et al. New phenolic compounds from Coreopsis tinctoria Nutt. and their antioxidant and angiotensin I-converting enzyme inhibitory[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2015, 62(63): 200-207.

[18] ALVAREZ-JUBETE L, WIJIGAARD H, ARENDT E K, et al. Polyphenol composition and in vitro antioxidant activity of amaranth, quinoa buckwheat and wheat as affected by sprouting and baking[J]. Food Chemistry, 2010, 119(2): 770-778.

[19] HO J H, YOUNG J K, DONGHWA C, et al. Antioxidant capacities of individual and combined phenolics in a model system[J]. Food Chemistry, 2007, 104(1): 87-92.

[20] CHEN Zheng, RICCARDO B, GUGLIELMINA F. EC50estimation of antioxidant activity in DPPH assay using several statistical programs[J]. Food Chemistry, 2013, 138(1): 414-420.

[21] CHOU T C. Drug combination studies and their synergy quantification using the Chou-Talalay method[J]. Cancer Research, 2010, 70(2): 440-446.

[22] CHOU T C. Theoretical basis, experimental design, and computerized simulation of synergism and antagonism in drug combination studies[J]. Pharmacological Reviews, 2006, 58(3): 621-681.

[23] 萬素英, 趙亞軍, 李琳, 等. 天然食品抗氧化劑: 黃酮類化合物[J]. 河北大學學報: 自然科學版, 1998, 18(3): 110-115.

[24] 劉嶺, 陳復生, 薛靜玉. 復配抗氧化劑的研究進展[J]. 中國食品添加劑, 2012(2): 172-176.

[25] SAMRA M A, CHEDEA V S, ECONOMOU A, et al. Antioxidant/ prooxidant properties of model phenolic compounds: Part I. Studies on equimolar mixtures by chemiluminescence and cyclic voltammetry[J]. Food Chemistry, 2010, 125(2): 622-629.

[26] CHOUEIRI L, CHEDEA V S, CALOKERINOS A C, et al. Antioxidant/pro-oxidant properties of model phenolic compounds. Part II: studies on mixtures of polyphenols at different molar ratios by chemiluminescence and LC-MS[J]. Food Chemistry, 2012, 133(3): 1039-1044.

[27] HIDALGO M, SANCHEZ-MORENO C, PASCUAL-TERESA S. Flavonoid-flavonoid interaction and its effect on their antioxidant activity[J]. Food Chemistry, 2010, 121(3): 691-696.

[28] MEYER A S, HEINONEN M, FRANKEL E N. Antioxidant interactions of catechin, cyanidin, caffeic acid, quercetin, and ellagic acid on human LDL oxidation[J]. Food Chemistry, 1997, 61(1/2): 71-75.

[29] 湯曉, 焦?jié)晌? 龔淑珍, 等. 黃酮混合物體外抗氧化活性的相互作用[J].食品科技, 2013, 38(2): 198-206.

[30] 湯曉, 方偉, 沈秀麗, 等. 多黃酮混合物抗氧化活性的協(xié)同與拮抗作用[J]. 食品科學, 2014, 35(5): 111-115. doi:10.7506/spkx1002-6630-201405022.

[31] ROSSETTO M, VANZANI P, MATTIVI F, et al. Synergistic antioxidant effect of catechin and malvidin 3-glucoside on free radicalinitiated peroxidation of linoleic acid in micelles[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2002, 408(2): 239-245.

[32] PIGNATELLI P, PULCINELLI F M, CELESTINI A, et al. The flavonoids quercetin and catechin synergistically inhibit platelet function by antagonizing the intracellular production of hydrogen peroxide[J]. The American Journal of Clinical Nutrition, 2000, 72(5): 1150-1155.

Antioxidant Interaction of Flavonoids from Coreopsis tinctoria Nutt.

DING Hao1,2, YANG Haiyan1,*, XIN Zhihong2,*
(1. College of Food Science and Pharmacy, Xinjiang Agricultural University, ürümqi 830052, China; 2. College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

Objective: To study the interaction of five powerful antioxidant flavonoids isolated from Coreopsis tinctoria Nutt. including marein, maritimetin, taxifolin, butein and okanin. Methods: The DPPH scavenging capacity was used as the indicator of antioxidant activity, and Chou-Talalay method was used to analyze antioxidant interactions among these flavonoids. Results: There was moderate synergistic antioxidant interaction between maritimetin and butein, and between taxifolin and butein with weighed average combination index (CIwt) values of 0.824 and 0.749 for scavenging 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical, respectively. In addition, the IC50for maritimetin combined with butein was higher than 1, and the CIwtvalue was less than 0.90, suggesting an obvious synergistic interaction. Nevertheless, a combination of maritimetin, butein and taxifolin scavenged DPPH free radical with a CI value of higher than 1.0, indicating no synergistic interaction among these three antioxidants. Conclusion: The structure and concentration of flavonoids from Coreopsis tinctoria Nutt. can influence their antioxidant interaction.

flavonoids; antioxidant; Chou-Talalay method; interaction

TS201.2

A

1002-6630（2015）21-0026-07

10.7506/spkx1002-6630-201521006

2015-01-31

烏魯木齊市科學技術計劃項目（Y121120008）；國家自然科學基金地區(qū)科學基金項目（31260377）

丁豪（1992—），男，碩士研究生，研究方向為天然產物提取與利用。E-mail：943880577@qq.com

*通信作者：楊海燕（1962—），女，教授，博士，研究方向為天然產物提取與利用。E-mail：yanghaiyan163@163.com

辛志宏（1974—），男，教授，博士，研究方向為食品營養(yǎng)與化學。E-mail：xzhfood@njau.edu.cn