楊洪云　王　靜

(1.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 青島　266021；2.泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東 泰安　271000)

血清CK18、CEA、CA19-9在胃癌診斷中的臨床意義*1

楊洪云1,2王靜1

(1.青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 青島266021；2.泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，山東 泰安271000)

摘要：目的測(cè)定胃癌患者血清中CK18、CEA和CA19-9水平并探討其在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為胃癌的診治提供依據(jù)。方法采用微粒子化學(xué)發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)20例健康體檢者、20例胃良性病變患者和40例胃癌患者血清中的CK18、CEA、CA19-9水平，比較三種指標(biāo)在血清中的變化，分析其在胃癌診斷評(píng)估中的價(jià)值。應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果CK18、CEA和CA19-9濃度在胃癌組中顯著大于其在正常組和胃良性病變組中的濃度,存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)； CK18在腺癌組表達(dá)高于非腺癌組，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而CEA、CA199在腺癌組與非腺癌組無(wú)明顯差異，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論血清CK18、CEA和CA19-9的濃度測(cè)定對(duì)胃癌的診斷具有重要意義；監(jiān)測(cè)CK18、CEA和CA19-9的動(dòng)態(tài)變化，對(duì)胃癌患者的療效觀察、預(yù)后評(píng)估有重要的價(jià)值。CK18在胃腺癌組表達(dá)高于胃非腺癌組，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3.在聯(lián)合檢測(cè)中顯示CK18、CEA和CA19-9三個(gè)指標(biāo)聯(lián)合相對(duì)于單一指標(biāo)效果更佳。

關(guān)鍵詞：胃癌； 角蛋白CK18；癌胚抗原 ；糖類(lèi)抗原19-9；

胃癌在中國(guó)惡性腫瘤死亡率中排第二，嚴(yán)重威脅人民生命健康。[1]因此，許多臨床工作者和醫(yī)學(xué)研究人員正努力探索和尋找敏感性高、特異性強(qiáng)的胃癌血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物，研究其在胃癌臨床分期與治療過(guò)程中的水平變化，以期更好的應(yīng)用于胃癌的診療中。CEA和CA19-9，CA72-4等作為胃癌的可靠標(biāo)志物，已被許多研究證實(shí)[2-10]。細(xì)胞角蛋白18在胃癌診斷中的作用研究較少。聯(lián)合檢測(cè)CK18、CEA和CA19-9在正常人、胃良性病變、胃癌患者血清中的含量，分析CK18、CEA和CA19-9與胃癌的關(guān)系，為胃癌的診斷和治療以及判斷預(yù)后提供一定的理論依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料

胃癌組：40例均為2014年1月～2014年10月就診于本院的住院病例，男30例，女10例；年齡最大77歲，最小30，中位年齡64歲；其中管狀腺癌2例，乳頭狀腺癌28例，黏液腺癌2例，印戒細(xì)胞癌8例，,全部病例經(jīng)胃鏡活檢及手術(shù)病理確診。良性胃病組：20例均為同期門(mén)診或住院患者，男12例，女8例；年齡最大76歲，最小15，中位年齡42歲；胃炎15例，胃潰瘍3例，胃息肉2例；中位年齡49歲，經(jīng)胃鏡活檢病理確診。健康對(duì)照組：20例均為來(lái)本院體檢人員(經(jīng)化驗(yàn)室及其他項(xiàng)目檢查確定無(wú)其他疾病的健康人)，男10例，女10例；年齡最大75歲，最小18，中位年齡52歲。三組一般情況對(duì)比無(wú)顯著性差異具有可比性。

1.2方法

1.2.1胃癌組：于病情確診收入院后采集空腹靜脈血5 ml，3500 r/min,離心10 min，血清收集-70℃冰箱，用于相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)；胃良性病變組：于做胃鏡當(dāng)日采集空腹靜脈血5 ml， 3500 r/min,離心10 min，血清收集-70℃冰箱，用于相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)；健康對(duì)照組：收集體檢結(jié)果符合要求的血清，血清收集-70℃ 冰箱，用于相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)。

1.2.2CK18采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法進(jìn)行測(cè)定，酶聯(lián)試劑盒由齊-生物科技(上海)有限公司提供；CEA 、CA19-9采用微粒子化學(xué)發(fā)光法，儀器由美國(guó)雅培公司生產(chǎn)的雅培i2000，試劑為專(zhuān)用配套試劑。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS22.0分析軟件包處理，對(duì)各組數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)來(lái)表示，組間比較使用配對(duì)t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1胃癌組CK18、CEA和CA19-9測(cè)定值與胃良性病變組及健康對(duì)照組比較均明顯增高(P<0.05)；胃良性病變組與健康對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。各實(shí)驗(yàn)組CK-18、CEA和CA19-9測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2在胃癌組中，按胃癌的TNM分期進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，Ⅲ期、Ⅳ期組CK18、CEA和CA19-9測(cè)定值均顯著高于Ⅰ期、Ⅱ期組(P<0.05)。胃癌患者按TNM分期分組CK18、CEA和CA19-9測(cè)定結(jié)果比較見(jiàn)表2。

2.3在胃癌組中按病理類(lèi)型進(jìn)行比較,CK18在腺癌組表達(dá)高于非腺癌組，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CEA和CA19-9差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。胃癌組中，腺癌與非腺癌CK-18、CEA和CEA測(cè)定結(jié)果比較見(jiàn)表3。

表1　各組CK18、CEA和CA199測(cè)定結(jié)果(±s)

表1　各組CK18、CEA和CA199測(cè)定結(jié)果(±s)

組別nCK18(ng/ml)CEA(ng/ml)CA199(U/ml)健康組200.95±0.311.70±0.8216.08±7.67胃良性病變組201.01±0.421.97±1.3122.16±11.94胃癌組4010.30±11.30※*56.53±152.89△▲259.12±408.17※*

※：P<0.01，與胃良性病變組比較；＊：P<0.01，與健康對(duì)照組比較?！鳎篜<0.05，與胃良性病變組比較；▲：P<0.05，與健康對(duì)照組比較。

表2　胃癌不同分期CK18、CEA和CA199測(cè)定結(jié)果(±s)

表2　胃癌不同分期CK18、CEA和CA199測(cè)定結(jié)果(±s)

組別nCK18(ng/ml)CEA(ng/ml)CA199(U/ml)胃癌I,II期204.64±4.304.99±2.9146.76±23.84胃癌III,IV期2015.97±13.28※108.08±205.86※471.49±496.45※

※：P<0．01，胃癌III，IV期與胃癌I，II期比較。

表3　胃腺癌與非腺癌CK18、CEA和CA199測(cè)定結(jié)果(±s)

表3　胃腺癌與非腺癌CK18、CEA和CA199測(cè)定結(jié)果(±s)

組別nCK18(ng/ml)CEA(ng/ml)CA199(U/ml)胃非腺癌84.39±3.3323.21±32.96147.36±245.21胃腺癌3211.78±12.13※64.86±169.71287.06±438.17

※：P<0.05，胃腺癌與非腺癌比較

3討論

細(xì)胞角蛋白屬于中間絲蛋白家族，是上皮細(xì)胞骨架的一部分[12]，可分為20多種不同類(lèi)型。研究較多的有CK19(CYFRA21-1)和CK18。CK18是一種廣泛存在于上皮細(xì)胞,分化特異的用于組成細(xì)胞骨架的蛋白質(zhì)之一，分子量較小。在上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中，角蛋白18被激活的蛋白酶加速降解，大量角蛋白18片段釋放入血液循環(huán)，使得血液中的細(xì)胞角蛋白18片段的濃度升高。因此，細(xì)胞角蛋白也是上皮性細(xì)胞惡變的標(biāo)志之一，其研究主要在胃癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌等方面。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[6]，CK18在胃癌原發(fā)腫瘤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中均有較高水平的表達(dá)，對(duì)病理無(wú)轉(zhuǎn)移的胃癌患者，CK18即可有淋巴結(jié)表達(dá)。胃癌患者中有淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑大于6 cm、侵及肌層和周?chē)浗M織、TNM 分期Ⅲ期以上情況，CK18的陽(yáng)性率尤為高[7]尤其在胃腺癌中陽(yáng)性率較高[8]。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，胃癌患者血清CK18明顯高于健康人及胃良性疾病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。胃腺癌與其他胃癌比較，血清CK18水平更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

CEA 是目前腫瘤標(biāo)志物中研究最為廣泛的，應(yīng)用時(shí)間最長(zhǎng)的(約有20年)一種物質(zhì)。CA19-9，是一種來(lái)源?于細(xì)胞膜上的單延酸神經(jīng)節(jié)苷酯，在血清中以唾液粘蛋白形式存在，在人體內(nèi)分布較廣泛，與消化系惡性腫瘤相關(guān)。GaoZL[12]監(jiān)測(cè) 40 例胃癌組和20 名健康對(duì)照組的血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物, 結(jié)果顯示 CEA ,CA19-9 水平可作為胃癌轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的一種標(biāo)識(shí)。ChoiSR[13]監(jiān)測(cè)行胃癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的CA19-9，結(jié)果顯示, 復(fù)發(fā)病例中的 CA19-9 陽(yáng)性率較高，CA19-9 可作為胃癌根治術(shù)后腹腔內(nèi)復(fù)發(fā)的相對(duì)特異的標(biāo)志物之一，在診斷隨訪期間，升高的腫瘤標(biāo)志物預(yù)示腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，且對(duì)腫瘤術(shù)前進(jìn)行分期、預(yù)測(cè)其能否手術(shù)及其他治療方法的選擇有一定臨床指導(dǎo)價(jià)值。本次研究結(jié)果與文獻(xiàn)相符，結(jié)果如下:(1)胃癌組血清CEA和CA19-9明顯高于胃良性病變組和健康對(duì)照組；(2)胃癌組中，處于Ⅲ期、Ⅳ期的CEA和CA19-9測(cè)定值均顯著高于Ⅰ期、Ⅱ期(P<0.05)。(3) 針對(duì)Ⅰ、Ⅱ期胃癌，以CK18 3.0 ng/ml,CEA 5 ng/ml,CA19-9 37 U/ ml 為cut off, CK18 、CEA和CA19-9陽(yáng)性率分別為50%(10/20)、50%(10/20)和60%(12/20)，三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)胃癌總的陽(yáng)性率為80%(16/20)，三者聯(lián)合檢測(cè)大大提高了胃癌的陽(yáng)性檢出率。(4)在對(duì)胃癌治療后患者的隨訪中發(fā)現(xiàn)，治療后CEA和CA19-9持續(xù)高水平，大部分病例預(yù)后差，很快復(fù)發(fā)。提示檢測(cè)血清CEA和CA19-9與胃癌的病情和發(fā)展和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其水平改變對(duì)于胃病的良、惡性鑒別具有重要意義；對(duì)于胃癌的預(yù)后估計(jì)和觀察療效更具臨床意義。

綜上所述，CK18可作為胃癌診斷新的免疫學(xué)標(biāo)志物，與胃癌的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后有著重要關(guān)系。聯(lián)合和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CK18、CEA、CA19-9對(duì)于良、惡性胃病的鑒別及胃癌的病情判斷、療效觀察、預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)等具有重要的參考意義。但由于本研究的病例有限，所得數(shù)據(jù)可能存在一定的局限性， CK18是否能成為胃癌腫瘤標(biāo)志物大家族中舉足輕重的一員，還需用進(jìn)一步大量的實(shí)驗(yàn)來(lái)證實(shí)其在診斷胃癌方面的價(jià)值。

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作者簡(jiǎn)介：楊洪云(1979—)，女，山東泰安人，主管技師，青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士在讀，主要研究方向：胃癌腫瘤標(biāo)志物相關(guān)研究。

通訊作者：王靜，青島大學(xué)免疫學(xué)教研室 ，碩士生導(dǎo)師，jingwang686@yahoo.com.cn。

中圖分類(lèi)號(hào)：R73-34

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1004-7115(2015)04-0376-03

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2015.04.005

(收稿日期2015-1-15)

The clinical significance of serum CK18、 CEA、CA19-9 in the diagnosis of gastric cancer

YANGHong-yun1,2WANGJing1

(1.The Qingdao University School of Medicine，Qingdao 266021，China； 2. Affiliated Hospital of Taian Medical College， Taian 271000，China)

Abstract:Objective: To explore the clinical significance of serum CK18 CEA and CA19-9 in diagnosis of gastric cancer. Methods: CLIA(chemiluminescence immunology analysis) was used to detect the serum level of markers(CEA ,CA19-9) in 20 cases of healthy persona, 20 cases of benign diseases of stomach(gastritis ,gastric ulcer and polyp of stomach), and 40 cases of gastric cancer). ELISA was used to detect the serum level of CK18 in those people. Results: Levels of CK18 CEA and CA199 in cancer group were higher than those in healthy persona and benign diseases of stomach(P<0.05) . Expression of CK18 in adenocarcinoma was higher than that of non adenocarcinoma group, there were significant differences(P<0.05), And CEA, CA199 in the adenocarcinoma group had no difference with the non cancer group, no statistical significance (P>0.05). Conclusion: The serum concentration of CK18, CEA and CA19-9 determination in diagnosis of gastric cancer has important significance . Dynamic monitoring the changes of CK18, CEA and CA19-9, have important value for the observation of the curative effect evaluation, prognosis of patients with gastric camcer. Expression of CK18 in adenocarcinoma was higher than that of non adenocarcinoma group, there were significant differences(P<0.05). The three markers(CK18, CEA , CA19-9)of combined detection are better effect than single indicators .

Key words:gastric cancer; cytokeratin 18; CEA; carbohydrate antigen19-9