茉莉花葉水提物對(duì)小腸平滑肌的影響

翟玉榮劉波莫鎮(zhèn)濤李意奇

(遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)，廣東珠海519041)

摘要〔〕目的觀察茉莉花葉水提物對(duì)小腸平滑肌的作用。方法采用常規(guī)離體灌注小腸平滑肌標(biāo)本方法，觀察給藥前后離體家兔小腸平滑肌平均張力、振幅及收縮頻率變化，并檢測(cè)其對(duì)在體小鼠小腸推進(jìn)功能的影響。結(jié)果與給藥前相比，茉莉花葉水提物槽內(nèi)終濃度(2.0～6.0)×10-2 g生藥/ml可使家兔離體十二指腸平滑肌平均張力及振幅顯著降低，并隨著給藥劑量增加，抑制作用增強(qiáng)，當(dāng)終濃度為4.0×10-2 g生藥/ml時(shí)抑制效應(yīng)達(dá)到最大,但各濃度組對(duì)收縮頻率均無(wú)明顯影響。40 g生藥/kg、20 g生藥/kg劑量組對(duì)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)亦有顯著抑制作用。結(jié)論茉莉花葉水提物對(duì)家兔離體小腸平滑肌活動(dòng)及小鼠小腸的推進(jìn)運(yùn)動(dòng)有抑制作用，其作用機(jī)制可能與平滑肌細(xì)胞膜上的M受體有關(guān)，而與α,β受體無(wú)關(guān)。

關(guān)鍵詞〔〕茉莉花葉水提物；小腸平滑肌

中圖分類號(hào)〔〕R285.5〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：貴州省衛(wèi)生廳科學(xué)技術(shù)

通訊作者：劉波(1978-)，男，碩士，講師，主要從事腎臟及消化生理研究。

第一作者：翟玉榮(1976-)，女，副教授，碩士，主要從事心血管藥理學(xué)與新藥研發(fā)工作。

茉莉除了可用于香料物質(zhì)來(lái)源外，還具有一定的藥物價(jià)值，傳統(tǒng)中醫(yī)藥中，茉莉的花、根、葉均可入藥〔1〕。有關(guān)茉莉花的化學(xué)藥理研究較多,并取得了一定的成果〔2,3〕。為綜合利用資源，國(guó)內(nèi)外對(duì)茉莉花芳香性成分以外的化學(xué)成分和植物其他部位的成分也進(jìn)行了一些研究〔4～6〕，目前我國(guó)對(duì)茉莉花的研究主要停留在花朵上。本實(shí)驗(yàn)擬觀察茉莉花葉水提物對(duì)離體家兔小腸平滑肌活動(dòng)及小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響。

1材料與方法

1.1藥物與試劑茉莉花葉水提物(自制，2 g生藥/ml)的制備:稱取500 g新鮮茉莉花葉(珠海市農(nóng)科所農(nóng)業(yè)高新技術(shù)研究中心提供及鑒定)，加入蒸餾水浸泡30 min，加適量的蒸餾水煮沸后用文火煎煮3次，每次0.5 h，合并3次煎出濾液，靜止去渣，然后用旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮后定容至250 ml，即配成濃度為2 g生藥/ml備用。碳末混懸液(含碳末0.1 g/ml)。0.1%心得安(常州康普藥業(yè)有限公司，批號(hào)：1205002),0.1%酚妥拉明(江蘇康寶制藥有限公司，批號(hào)：120201)，0.1%氯化乙酰膽堿(北京天宇祥瑞科技有限公司，批號(hào)：120806)。

1.2動(dòng)物新西蘭兔8只,雌雄不限,體重2.0～2.5 kg,昆明種小鼠30只,雌雄各半,體重18～22 g。以上動(dòng)物均由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供〔合格證號(hào)：SCXK(粵)2012-0002〕。

1.3儀器BL-420E生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)、張力換能器和恒溫平滑肌浴槽均由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)；旋轉(zhuǎn)濃縮蒸發(fā)儀由上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)，型號(hào)RE-52。

1.4對(duì)家兔離體小腸平滑肌的影響①家兔離體小腸平滑肌標(biāo)本制備及收縮活動(dòng)記錄方法：家兔在實(shí)驗(yàn)前禁食24 h，自由飲水，實(shí)驗(yàn)前1 h喂食。將家兔倒懸,用木棰猛擊兔頭枕部，使其昏迷，迅速沿腹部正中切開腹部，找出幽門與十二指腸交界處，以此處為起點(diǎn)，找出十二指腸，剪取腸管一段，置于充氧的室溫臺(tái)氏液的平皿中，洗凈腸管內(nèi)容物，當(dāng)腸管活動(dòng)明顯時(shí)，將十二指腸剪成2～2.5 cm的腸段備用。連接張力換能器、BL-420E生物信號(hào)采集系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)和恒溫水浴槽。浴槽內(nèi)溫度保持在(37.0±0.5)℃。取一段腸管將其對(duì)角的兩端用線結(jié)扎，一端系在通氣管的鉤上，另一端與張力換能器相連，使標(biāo)本垂直懸掛于恒溫浴槽內(nèi)的盛有20 ml臺(tái)氏液浴管中，持續(xù)慢慢通入空氣,其速度以持續(xù)單個(gè)氣泡出現(xiàn)而不沖動(dòng)小腸為宜，調(diào)整適宜的肌張力，給予標(biāo)本2.0 g的基礎(chǔ)負(fù)荷，待標(biāo)本自發(fā)節(jié)律性收縮穩(wěn)定20 min后開始給藥記錄。②不同劑量茉莉花葉水提液對(duì)小腸平滑肌收縮的影響：待標(biāo)本自發(fā)節(jié)律性收縮穩(wěn)定后，記錄一段正常曲線，然后累計(jì)加入茉莉花葉水提液,使槽內(nèi)終濃度分別為(1.0～6.0)×10-2g生藥/ml，每次換藥后,用(37.0±0.5)℃臺(tái)氏液反復(fù)沖洗腸管3次，待舒縮恢復(fù)到用藥前水平再加入下組藥液，觀察給藥前3 min和給藥后3 min腸管收縮平均張力和收縮頻率變化，并計(jì)算抑制率〔抑制率=(給藥后-給藥前)/給藥前〕。③心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿對(duì)茉莉花葉水提物效應(yīng)的影響：待標(biāo)本自發(fā)節(jié)律性收縮穩(wěn)定后，記錄一段正常曲線，然后分別加入0.1%心得安0.1 ml、0.1%酚妥拉明0.1 ml和0.1%乙酰膽堿0.1 ml,分別觀察小腸平滑肌收縮活動(dòng)變化，待各自加入上述藥3 min后再分別加入茉莉花葉水提物使其終濃度為4.0×10-2g生藥/ml，分別觀察上述藥對(duì)茉莉花葉水提物效應(yīng)的影響，每次換藥方法同②。

1.5對(duì)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響昆明種小鼠30只(禁食24 h,不禁水)，隨機(jī)平均分為空白對(duì)照組(蒸餾水)、茉莉花葉水提液高劑量組(40 g生藥/kg)和低劑量組(20 g生藥/kg)，均采取灌胃給藥，每組10只。各組給藥后45 min，用碳末混懸液(含碳末0.1 g/ml)0.2 ml/10 g灌胃，20 min后脫頸椎處死小鼠，打開腹腔，分離腸系膜，剪取上端至幽門，下端至回盲部的腸管，置于托盤上將小腸拉直，測(cè)量腸管長(zhǎng)度作為小腸總長(zhǎng)度，從幽門至碳末前沿的距離作為碳末推進(jìn)距離，計(jì)算碳末推進(jìn)百分率=碳末推進(jìn)距離(cm)/小腸總長(zhǎng)度(cm)。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS19.0軟件行t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1茉莉花葉水提物對(duì)家兔離體十二指腸平滑肌活動(dòng)的影響與給藥前相比，茉莉花葉水提物終濃度(2.0～6.0)×10-2g生藥/ml對(duì)家兔離體十二指腸平滑肌收縮活動(dòng)均有抑制作用，表現(xiàn)為平均張力和振幅均明顯下降(P<0.05或P<0.01)；隨著給藥劑量增加，其抑制作用增強(qiáng)，在終濃度4.0×10-2g生藥/ml時(shí)其抑制效應(yīng)達(dá)到最大。但各劑量組對(duì)收縮頻率無(wú)明顯抑制作用(P<0.05)。見表1。

表1　茉莉花葉水提液對(duì)家兔離體十二指腸平滑肌收縮活動(dòng)的影響( n=10， ± s)

與給藥前比較：1)P<0.05，2)P<0.01

2.2心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿對(duì)茉莉花葉水提液效應(yīng)的影響分別加入心得安、酚妥拉明后，與給藥前相比，家兔離體十二指腸平均張力和振幅均增加(P<0.05)；加入乙酰膽堿后，與給藥前相比，十二指腸平滑肌平均張力顯著增加(P<0.05)，但收縮頻率無(wú)明顯變化(P>0.05)。3 min后再加入茉莉花葉水提液(終濃度4.0×10-2g生藥/ml)，與單獨(dú)加入心得安、酚妥拉明或乙酰膽堿相比，十二指腸平均張力和振幅均明顯下降(P<0.05)，但收縮頻率無(wú)明顯變化(P>0.05)。見表2。

表2　心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿對(duì)茉莉花葉

與給藥前比較：1)P<0.05；與獨(dú)立加入心得安、酚妥拉明和乙酰膽堿比較：2)P<0.05

2.3茉莉花葉水提液對(duì)在體小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)的影響與對(duì)照組(0.60±0.02)比較，茉莉花葉水提物40、20 g生藥/kg均能明顯抑制小鼠小腸推進(jìn)功能(0.46±0.01、0.49±0.01)(P<0.01)。

3討論

茉莉花是具有廣泛藥用價(jià)值的植物，其根、葉、花均有藥用價(jià)值?；捎糜谥委煾姑浉篂a、結(jié)膜炎、皮炎、瘡毒等；根有麻醉、止痛之功效，可以用于治療失眠、頭痛、齲齒、跌打損傷；葉用于治療外感發(fā)熱、腹脹腹瀉等癥〔7〕。本實(shí)驗(yàn)觀察了茉莉花葉水提物對(duì)小腸平滑肌收縮活動(dòng)的影響。結(jié)果顯示,茉莉花葉水提物終濃度(2.0～6.0)×10-2g生藥/ml均可以使家兔離體十二指腸平滑肌平均張力降低，且茉莉花葉水提物40 g生藥/kg、20 g生藥/kg能明顯抑制小鼠小腸推進(jìn)功能，此結(jié)果與茉莉具有收斂、止痛、止瀉的功效基本吻合。

小腸的機(jī)械活動(dòng)和電活動(dòng)受到神經(jīng)和體液因素調(diào)節(jié),也受中藥中某些化學(xué)物質(zhì)的調(diào)節(jié)。消化道平滑肌主要有α,β，M受體分布，α,β受體激動(dòng)可使小腸平滑肌舒張,M受體可使小腸平滑肌興奮收縮。本次實(shí)驗(yàn)在使用α和β受體阻斷劑酚妥拉明和心得安干預(yù)后，沒有阻斷茉莉花葉水提物對(duì)小腸平滑肌的抑制效應(yīng)。在應(yīng)用M受體激動(dòng)劑乙酰膽堿干預(yù)后，對(duì)平滑肌痙攣有一定的拮抗作用，表現(xiàn)為使乙酰膽堿所致的小腸強(qiáng)烈的收縮活動(dòng)減弱。根據(jù)上述結(jié)果推測(cè)其抑制小腸平滑肌的作用可能與平滑肌細(xì)胞膜上的M受體有關(guān)，而與α,β受體無(wú)關(guān)。另外，茉莉花葉提取物減弱乙酰膽堿作用的同時(shí)，仍能使離體小腸保持著較好的收縮力并能恢復(fù)正常，這對(duì)維持小腸的正?；顒?dòng)極有意義。

4參考文獻(xiàn)

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〔2014-05-17修回〕

(編輯李相軍)