羅孝坤，尚陸娥，陳觀玉，劉紹雄，郭永紅，2**

（1.云南省供銷合作社科學研究所，云南 昆明 650223；2.云南省食用菌工程技術(shù)研究中心，云南 昆明 650223）

16個杏鮑菇菌株的生物學特性及親緣關(guān)系研究*

羅孝坤1，尚陸娥1，陳觀玉1，劉紹雄1，郭永紅1，2**

（1.云南省供銷合作社科學研究所，云南 昆明 650223；2.云南省食用菌工程技術(shù)研究中心，云南 昆明 650223）

對16個不同杏鮑菇菌株的菌絲拮抗作用、菌絲生長特性、生物學效率及子實體性狀特征進行比較研究。研究結(jié)果表明，杏鮑菇栽培品種比較混亂，同種異名、同名異種的現(xiàn)象較為嚴重，同種異名的菌株間生物學特性表現(xiàn)出顯著差異。杏01（杏鮑菇-1）、杏13（杏F）兩個菌株的菌絲生長較快，長勢較好，菌絲濃密，原基分化快，栽培周期短；出菇產(chǎn)量高，生物學效率均大于70%；菌蓋大小適中，菌柄長且粗壯，子實體個體大，單菇重量大，組織致密，子實體各項性狀優(yōu)良。因此，菌株杏01與杏13可作為杏鮑菇優(yōu)良菌株進行示范推廣。

杏鮑菇；拮抗作用；生物學特性；親緣關(guān)系

杏鮑菇 [Pleurotus eryngii（DC.ex.Fr.)Quel.]，又名刺芹側(cè)耳，菌肉肥厚，營養(yǎng)豐富，具有杏仁香味和鮑魚味，故稱杏仁鮑魚菇[1]。其子實體色澤雪白，質(zhì)地脆嫩，素有“平菇王”的美譽[2]，是近年來引進開發(fā)的一種集食用、藥用、保健于一體的珍稀食用菌品種。研究表明，杏鮑菇營養(yǎng)豐富，食用價值高，具有提高人體免疫力、抗癌、降血壓、降血脂、潤腸胃、抗氧化等功效[3-7]。近年來，隨著市場需求量的增加，杏鮑菇生產(chǎn)發(fā)展十分迅速，栽培規(guī)模不斷擴大，杏鮑菇栽培已從季節(jié)性栽培向工廠化栽培轉(zhuǎn)變[8]。工廠化栽培能對栽培環(huán)境條件（如：溫度、濕度、光照、CO2濃度）進行更準確的控制，使產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量更加穩(wěn)定[9-10]。由于工廠化栽培設(shè)施一次性投資較大，工廠化栽培菌株要求菌株具有菌絲生長快、生長周期短、產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)的特性。目前，優(yōu)良菌種的缺乏仍是制約產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問題，因此，篩選出周期短、高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的菌株有助于發(fā)展杏鮑菇的規(guī)?；⒐S化栽培。本文對16個杏鮑菇菌株的生物學特性及親緣關(guān)系進行比較研究，明確各菌株的親緣關(guān)系，分析比較各菌株的菌絲生長特性、生物學效率及子實體性狀特征，為杏鮑菇工廠化栽培優(yōu)良菌種的選育提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1供試菌株

供試杏鮑菇菌株情況見表1。

表1 供試杏鮑菇菌株Tab.1 The tested strains of Pleurotus eryngii

1.2試驗配方

一級種（母種）配方：PDA培養(yǎng)基，去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g，蒸餾水1000 mL，pH自然。

二級種（原種） 配方：棉籽殼40%、細木屑35%、麥麩20%、石灰1.5%、石膏粉1.0%、普鈣1.0%、白糖1.5%。

杏鮑菇栽培料配方：玉米芯25%、麥麩20%、棉籽殼21%、木屑28%、石灰2.0%、石膏2.0%、普鈣1.0%、白糖1.0%。加入0.08%的多菌靈。菌包干重0.3 kg，含水量60%。

1.3試驗方法

1.3.1 菌絲拮抗試驗

將不同菌株活化后，在同一平板上按“品”字形接種3個菌株，25℃下培養(yǎng)，每個處理3個重復，觀察菌絲間的拮抗反應情況。

1.3.2 菌絲生長特性試驗

一級菌種（母種）：每個品種接10支試管，放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察并記錄各個菌株母種菌絲的顏色、長勢、滿管時間、疏密度、平均生長速度等情況。

二級菌種（原種）：在一級種的基礎(chǔ)上，每個品種接30瓶二級種，放在25℃恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，觀察并記錄各個菌株原種菌絲的顏色、長勢、滿瓶時間、平均生長速度等情況。

1.3.3 出菇試驗

（1）出菇袋的培養(yǎng)

將接好菌的出菇袋搬進20℃～25℃的培養(yǎng)室內(nèi)進行培養(yǎng)，培養(yǎng)室要求通風、清潔、黑暗，空氣相對濕度保持60%～70%，每隔10 d左右翻堆1次，使發(fā)菌一致，一般40 d左右滿袋，培養(yǎng)中記錄各個品種長滿菌袋的時間。

（2）催蕾

后熟培養(yǎng)：菌絲滿袋后，繼續(xù)培養(yǎng)10 d～15 d左右，使菌絲達到生理成熟才能進入出菇房。

催蕾管理：菌絲達到生理成熟后，菌包便可移入已消毒的育菇房降溫催蕾，先去掉過濾棉蓋，拉高套環(huán)，使栽培包袋口成錐形氣室，當有原基出現(xiàn)時，原基分化出菇柄、菇蓋，去掉套環(huán)，出菇袋口打開，加強通風，每天通風2次～3次，每次30 min，保持空氣新鮮。溫度保持12℃～15℃，早中晚在地面上澆水3次，保持空氣相對濕度90%～95%。在此階段，需要少量的散射光刺激，一般7 d～8 d形成原基，原基發(fā)生后，經(jīng)過2 d～3 d就可以分化成菇蕾。

（3）疏蕾管理

菇蕾長到2 cm左右時，菌袋出菇一般保留2個～3個菇蕾，才能發(fā)育成柄長、柄粗、外形美觀、品質(zhì)優(yōu)良的子實體，其余菇蕾用刀或用手清除掉。

（4）子實體生長階段管理

杏鮑菇以棍棒形、保齡球形為首選育菇對象。育菇室內(nèi)通過地面灑水或向空氣中噴霧化水的方式保持濕度在85%～90%，原則上少量多次，切勿直接向菇體上噴水，防止子實體變黃、腐爛。溫度應保持在13℃～16℃，溫度高于18℃容易受到假單胞桿菌污染，出菇期間及時調(diào)整通風量，通風太少則菌蓋小，菌柄粗；通風太強則菌蓋大，菌柄細。子實體生長發(fā)育階段需要一定散射光照，以促使其整齊生長。

（5）采收

一般現(xiàn)蕾后15 d左右，當菌柄長至10 cm，菌蓋達4 cm～5 cm時即可采收。采收時，一手握緊菌袋，一手握緊菌柄，輕輕一扭便可采下，做到輕采輕放，勿損傷菇蓋。

2 結(jié)果與分析

2.1不同杏鮑菇菌株菌絲拮抗試驗

拮抗試驗是鑒定菌株間遺傳差異的傳統(tǒng)方法，菌絲之間的拮抗反應是菌株間不同遺傳特性的重要表現(xiàn)，表明不同菌株分別屬于不同親和群。結(jié)果見表2。

表2 不同菌株菌絲的拮抗作用Tab.2 The antagonistic action of different strains on stock culture

由表2可以看出，杏01、杏05、杏11、杏13、杏14菌株兩兩之間都沒有明顯拮抗作用，屬于一個親和群，其中杏01與杏11是來源地不同的同一品種；杏01、杏05、杏11、杏14兩兩沒有拮抗作用，可能是同種異名的菌株，杏13與杏01、杏11拮抗作用不明顯，說明杏13與杏01、杏11菌株的親緣關(guān)系較近；菌株杏02與杏04沒有拮抗作用，屬于一個親和群，可能是同一個種；菌株杏03、杏06、杏09、杏10、杏15兩兩之間都沒有明顯拮抗作用，屬于一個親和群，親緣關(guān)系很近，其中杏06和杏09可能是來源地不同的同一品種，杏03、杏10、杏15與杏06、杏09可能為同種異名的菌株；杏02與杏15為來源不同的相同品種名稱菌株，但2個菌株有明顯的拮抗作用，說明這兩個菌株的親緣關(guān)系較遠，可能是同名異種的菌株；杏07、杏08、杏12和杏16菌株各自為一個親和群。

2.2菌絲生長特性試驗

16個杏鮑菇菌株一級種菌絲生長特性見表3。

由表3可以看出，16個菌株菌絲顏色均為潔白色，菌株污染率均為0，菌株的滿管時間為9 d～12 d。杏01、杏04、杏05和杏09菌株的滿管時間最短為9 d，菌絲的平均生長速度最快，為0.84 cm·d-1；杏02、杏07和杏15菌株的滿管時間最長，為12 d，菌絲平均生長速度也最慢，為0.63 cm·d-1，與其他菌株相比有顯著差異。從菌絲長勢來看，杏01、杏04、杏09、杏10、杏12、杏13、杏15、杏16菌株的菌絲長勢旺盛，菌絲濃密，杏02、杏07菌絲長勢弱，菌絲稀疏。16個杏鮑菇菌株二級種菌絲生長特性見表4。

表3 不同菌株一級種菌絲生長特性Tab.3 The growth conditions of different strains on stock culture

表4 不同菌株二級種菌絲生長特性Tab.4 The growth conditions of different strains on pre-culture spawn

由表4可以看出，16個菌株菌絲顏色均為潔白色，污染率最低的是菌株杏01、杏04、杏05、杏10、杏11、杏13，污染率為0；菌株杏07、杏16的污染率最高，為10%。從菌絲長勢來看，菌株杏02、杏03、杏14的菌絲長勢一般，其余菌株菌絲長勢較好。16株杏鮑菇二級種的滿瓶時間為31 d～45 d，滿瓶時間最短的是杏01，為31 d，菌絲的平均生長速度也最快，為0.41 cm·d-1；滿瓶時間最長的是杏08、杏16，為45 d，菌絲平均生長速度最慢，分別為0.27 cm·d-1、0.24 cm·d-1，與其他菌株相比有顯著差異。

2.3不同杏鮑菇菌株出菇特性比較

不同杏鮑菇菌株生物學效率比較見表5。

由表5可以看出，16個杏鮑菇菌株中，接種至原基分化時間為55 d～59 d，原基分化最快的是菌株杏01、杏13、杏14，為55 d，杏08、杏16原基分代最慢，為59 d；栽培周期最短的是杏01、杏12、杏13，采收時間為70 d，杏10最長，為76 d。從子實體產(chǎn)量和生物學效率來看，杏01、杏11、杏13三個菌株的生物轉(zhuǎn)化率大于60%，其中杏01、杏13菌株的平均產(chǎn)量和生物學效率最高，平均產(chǎn)量分別為0.221 kg和0.213 kg，生物學效率均大于70%，分別為73.62%和71.00%，方差分析表明，這兩個菌株的生物學效率明顯高于其他菌株，差異顯著。杏05、杏08、杏10、杏12菌株的生物轉(zhuǎn)化率大于50%。杏02、杏03、杏04、杏06、杏07、杏09、杏14、杏15、杏16九個菌株的生物學效率低于50%，生物學效率最低的是杏04，平均產(chǎn)量為0.110 kg，生物學效率僅為36.82%。不同杏鮑菇菌株子實體性狀比較情況見表6。

表5 不同杏鮑菇菌株生物學效率比較Tab.5 The fruiting yield of different strains of Pleurotus eryngii

表6 不同杏鮑菇菌株子實體性狀的比較Tab.6 The agronomic characters of different strains of Pleurotus eryngii

由表6可以看出，16個杏鮑菇菌株中，杏鮑菇菌株01、杏02、杏05、杏06、杏09、杏11和杏13子實體組織致密，子實體硬，其中菌株杏01、杏06、杏09、杏13菌蓋大小適中，菌柄長且粗壯，子實體個體大，單菇重量大，子實體各項性狀優(yōu)良。

綜合16個杏鮑菇菌株生物學效率和子實體性狀，菌株杏01、杏13生物學效率高，子實體性狀好，栽培周期短，明顯優(yōu)于其他菌株，可作為優(yōu)良菌株進行栽培推廣。

3 結(jié)論與討論

杏鮑菇菌株拮抗試驗表明，16個杏鮑菇菌株中，相同品種名稱的菌株有明顯的拮抗作用，不同品種名稱的菌株卻沒有產(chǎn)生拮抗作用或拮抗作用不明顯，說明了目前杏鮑菇栽培品種比較混亂，同種異名、同名異種的現(xiàn)象較為嚴重。16個菌株分為7個親和群，相同親和群中如菌株杏14、杏05與杏01、杏11、杏13的菌絲特性和生物學效率存在顯著差異，可能是在栽培過程中菌種轉(zhuǎn)代次數(shù)過多或在保藏過程中引起了菌種的退化，這一結(jié)果與王振河等[11]的研究結(jié)果相符。

杏鮑菇菌株菌絲生長特性及出菇試驗表明，杏01、杏13兩個菌株的菌絲生長較快，長勢較好，菌絲濃密，原基分化快，栽培周期最短；出菇產(chǎn)量較高，生物學效率均大于70%，菌蓋大小適中，菌柄長且粗壯，子實體個體大，單菇重量大，組織致密，子實體各項性狀優(yōu)良。在工廠化栽培中，較短的栽培周期可以節(jié)約成本，提高經(jīng)濟效益。本試驗篩選出的菌株杏01和杏13，栽培生長周期短，子實體產(chǎn)量較高，性狀良好，可以用于工廠化栽培。但在應用于大規(guī)模工廠化栽培前，應進一步進行中試，摸索其最適的栽培環(huán)境參數(shù)，優(yōu)化栽培工藝，從而獲得更高的經(jīng)濟效益。

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Biological Characteristic and Phylogenetic Relationship of 16 Pleurotus eryngii Strains

LIU Shao-xiong1,SHANG Lu-e1,CHEN Guan-yu1,LUO Xiao-kun1,GUO Yong-hong1,2
(1.Acadamic Insitute of Yunnan Federation of Supply and Marketing Cooporatives,Kunming 650223,China; 2.Yunnan Edible Fungi Biotechnology and Engineering Research Center,Kunming 650223,China)

The hyphae antagonism,hyphae growth characteristics,biological efficiency and fruit body morphology of 16 different strains of Pleurotus eryngii were comparatively studied,the results showed that P.eryngii varieties were confused,and phenomenon of different species with the same names and different names with the same species were seriously,strains of different names with the same species showed significant differences on biological characteristics.P.eryngii No.1 and P.eryngii No.13 were better than others,because their hyphae grew faster,better and thicker,and fast primordium differentiation led to short cultivation period.At the same time,their mushroom yield were also higher than others,and biological efficiency were greater than 70%.Cap size was moderate,stipe looked long and thick,and fruiting body was big and heavy,dense organization,fruiting body traits were superiored.On the whole,based on so many advantages,P.eryngii No.1 and P.eryngii No.13 could be used wildiy as good P.eryngii strains.

Pleurotus eryngii;antagonistic action;biological characteristic;phylogenetic relationship

A

1003-8310（2015）04-0025-06

10.13629/j.cnki.53-1054.2015.04.006

**基金項目：云南省社會發(fā)展科技計劃項目（2012CF009）。

劉紹雄（1987-），男，碩士，研究實習員，主要從事食用菌栽培技術(shù)研究。E-mail:305475365@qq.com

**通信作者：郭永紅（1964-），女，碩士，研究員，從事食用菌栽培、保鮮加工研究。E-mail:guoyonghong64@126.com

2015-05-05