丁飛，袁覺，王昆榮，徐莉，駱祥

（泰興市林業(yè)技術(shù)推廣中心，江蘇 泰興 25400）

不同采集期不同林齡不同部位銀杏葉黃酮含量測試

丁飛，袁覺，王昆榮，徐莉，駱祥

（泰興市林業(yè)技術(shù)推廣中心，江蘇 泰興 25400）

根據(jù)泰興地區(qū)不同時期、不同樹齡、不同采集部位銀杏葉黃酮含量測定，銀杏葉生長有兩個高峰期，即4月份黃酮含量出現(xiàn)一個高峰期，7月份是全年含量最低點，8月份以后，銀杏葉中總黃酮含量又隨著生長期的延長而逐漸上升，直到10月份達(dá)到最高峰。銀杏長枝不同部位銀杏葉黃酮含量差異極顯著，上部葉黃酮含量最高；中部葉和下部葉黃酮含量差異不顯著。銀杏中短枝不同部位銀杏葉黃酮含量差異極顯著，上部葉黃酮含量最高。

銀杏葉；采樣；黃酮；銀杏白茶

銀杏茶是利用銀杏（Ginkgo biloba）的葉子采取先進技術(shù)生產(chǎn)而成，含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、礦物質(zhì)和維生素等多種營養(yǎng)成分。關(guān)于銀杏葉不同時期黃酮含量動態(tài)消長變化的報道有不同結(jié)果[2-7]，如葉黃酮含量秋季較高，春季次之，夏季最低；葉黃酮含量在5～10月份逐漸升高；葉黃酮含量以芽期（4月份）最高，其次才是8月份的綠葉；葉黃酮含量變化規(guī)律不明顯。本試驗選擇適宜的采葉樹、采葉期及采葉部位，對銀杏茶的開發(fā)利用和質(zhì)量保證尤其重要。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

泰興市銀杏種質(zhì)資源圃銀杏園內(nèi)銀杏葉。

1.2 試驗方法

1.2.1 色譜條件

Waters Nova-pak C18色譜柱（3.9 mm×150 mm，4 μm）；流動相∶甲醇-四氫呋喃水（20：12：75）；流速0.6 mL/min；ELSD漂移管溫度100℃；載氣量2.5 L/min；進氣量20 μL。

1.2.2 供試品溶液制備

取已測過水分（2000年版《中華人民共和國藥典》一部附錄IX H第一法）的銀杏葉粉末0.8 g，精密稱定，置100 mL圓底燒瓶中，精密加入25 mL甲醇-25%、鹽酸溶液(4∶1)混合液，閉塞，稱重，沸水浴回流1 h，取出放冷，稱重，以甲醇補足減失重量，搖勻，過濾，取續(xù)濾液用0.45 μm的濾膜過濾，作為供試品溶液[1]。

1.2.3 對照品溶液的制備

精密稱取槲皮素、山奈酚、異鼠李素對照品適量加甲醇制成每毫升分別含0.315 6、0.249 2、0.140 0 mg的溶液作為儲備液，臨用前分別精密吸取1.0、0.4 mL置5 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別配制不同濃度的槲皮素、山奈酚、異鼠李素混合對照品溶液，各進樣20 μL，按色譜條件測定。

1.3 主要試劑和儀器

槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品，南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)；山奈酚標(biāo)準(zhǔn)品，南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)；異鼠李素標(biāo)準(zhǔn)品，南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司生產(chǎn)；色譜甲醇色譜純，上海陸都化學(xué)試劑廠生產(chǎn)。Waters-e2695高效液相色譜儀，美國Waters公司生產(chǎn)；101-1型干燥箱，上海儀器總廠生產(chǎn)；AL-104電子分析天平，梅特勒-托利多儀器有限公司生產(chǎn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同時期、不同樹齡銀杏葉黃酮含量

對泰興市2～6年生4至10月份銀杏葉黃酮含量進行測定，結(jié)果表明，銀杏葉在萌芽到展葉期黃酮含量較高，即4月份黃酮含量出現(xiàn)一個高峰期；隨著葉片的逐漸生長，黃酮含量反而逐日下降，7月份是全年含量最低點。8月份以后，銀杏葉中總黃酮含量又隨著生長期的延長而逐漸上升，直到10月份達(dá)到最高峰（見表1）。

表1 不同時期、不同樹齡銀杏葉黃酮含量測定結(jié)果（mg/g）

2.2 不同采集部位銀杏葉黃酮含量

2.2.1 長枝不同部位銀杏黃酮含量

按照試驗方法分別測定2～3年生銀杏樹長枝（枝長大于25 cm）枝條5月上旬的上部葉（葉梢下移3葉范圍）、中部葉（枝條中間上下移動2葉范圍）、下部葉（枝條基部葉上移3葉范圍）黃酮含量，試驗重復(fù)5次。從圖1可知，長枝上、中、下部銀杏葉平均黃酮含量分別為22.11mg/g、20.02mg/g、18.86 mg/g，三部位葉片黃酮平均值達(dá)20.33 mg/g。

表3 長枝不同部位黃酮含量多重比較分析（mg/g）

方差分析結(jié)果表明（表2），長枝不同部位銀杏葉黃酮含量差異極顯著。多重比較結(jié)果顯示（表3），上部葉黃酮含量與中、下部葉差異極顯著，且含量最高，為22.11 mg/g；中部葉和下部葉黃酮含量差異不顯著。

2.2.2 中短枝不同部位銀杏黃酮含量

按照試驗方法分別測定2～3年生銀杏樹中短枝（枝長小于25 cm）枝條5月上旬的上部葉（枝梢葉下移3葉范圍）、中部葉（枝條中間上下移動2葉范圍）、下部葉（枝條基部葉上移3葉范圍）黃酮含量，試驗重復(fù)5次。從圖2看出，上、中、下部銀杏葉平均黃酮含量分別為21.12 mg/g、19.22 mg/g、18.36 mg/g。

表4 中短枝不同部位銀杏葉黃酮含量方差分析

表5 中短枝不同部位銀杏葉黃酮含量多重分析（mg/g）

方差分析結(jié)果顯示（表4），中短枝不同部位銀杏葉黃酮含量差異極顯著。多重比較（表5）結(jié)果顯示，上部葉黃酮含量與中部和下部葉差異極顯著，且含量最高，為21.12 mg/g；中部葉和下部葉黃酮含量差異不顯著。

3 小結(jié)

根據(jù)泰興地區(qū)不同時期、不同樹齡、不同采集部位銀杏葉黃酮含量測定，參照我國名優(yōu)茶鮮葉采摘標(biāo)準(zhǔn)及制作工藝要求，2～3年生銀杏樹4、5月份中上部銀杏葉黃酮含量較高，并且制成的茶葉可塑性強，從而進一步提高了銀杏葉茶質(zhì)量。

[1]錢大瑋，鞠建明，朱玲英，等.不同樹齡銀杏葉在不同季節(jié)中總黃酮和總內(nèi)酯的含量變化[J].中藥材.2002，33（11）：1025-1027.

[2]陳秀珍.銀杏不同生長期總黃酮含量的測定[J].廣西植物，1988，8（4）：363-364.

[3]楊柳，歐陽沼湘，辜忠春，等.銀杏生長中黃酮含量變化十分復(fù)雜研究初報[J].確良湖北林業(yè)科技，1997，3：5-7.

[4]史繼孔，王發(fā)渝.銀杏樹樹齡、性別、繁殖方式及采葉期對葉片銀杏黃酮、內(nèi)酯含量的影響[C].湖北：中國林學(xué)會經(jīng)濟林分會銀杏研究會，湖北省隨州市林業(yè)局，1998，381-382.

[5]苑可武，孟憲惠.銀杏葉中黃酮含量的季節(jié)性變化[J].中草藥.1999，28（4）：211-212.

[6]潘福生，劉晚茍.銀杏資源優(yōu)化的研究.97'銀杏國際研討會[C]. 北京：97'銀杏國際研討會組委會.1997，57-59.

[7]郁青，沈兆邦.銀杏有效成分含量影響因素初探.97'中國銀杏開發(fā)研究會文集會編[C]. 北京：國家科委中國農(nóng)林技術(shù)開發(fā)中心，1997，78-83.

Measurements of the Flavonoid Contents in Leaves of Ginkgo biloba from Different Perioda,Ages and Parts

DING Fei,YUAN Jiao,WANG Kunrong,XU Li，LUO Xiang
(Taixing Municipal Center for Forestry Technology Promotion，Taixing 225400，Jiangsu，China)

The leaves of Ginkgo biloba have 2 growth peaks based on the flavonoid contents measurements in leaves of Ginkgo biloba from different periods,different ages,different regions of Taixing City,and the flavonoid contents reached the peak in April and the lowest point in July.In August and afterwords,the total flavonoid contents in leaves of Ginkgo biloba gradually increased with the extension of the growth period and reached the peak in October.The flavonoid contents were significantly different in leaves of Ginkgo biloba from different parts of long branches with the highest flavonoid contents in leaves from the upper parts while the flavonoid contents were not significantly different in leaves from the middle and lower parts.The flavonoid contents were significantly different in leaves of Ginkgo biloba from different parts of short and middle branches with the highest flavonoid contents in leaves from the upper parts.

Leaves of Ginkgo biloba;Sampling;Flavonoids;Ginkgo white tea

S792.95

A

2095-0152（2015）03-0021-02

2015-03-23

2015-05-08

丁飛（1976- ），男，林業(yè)高級工程師，主要從事林業(yè)技術(shù)推廣工作。E-mail:442187641@qq.com，

楊婷婷）