亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        應(yīng)用酶聯(lián)免疫法快速檢測(cè)水產(chǎn)品孔雀石綠殘留

        2015-12-22 02:38:12王明力
        安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年14期
        關(guān)鍵詞:孔雀石殘留量水產(chǎn)品

        曾 蓉,王明力

        (1.貴州大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院,貴州貴陽(yáng) 550025;2.貴陽(yáng)市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心,貴州貴陽(yáng) 550081)

        孔雀石綠(MG)是一種帶有金屬光澤的綠色結(jié)晶體,屬三苯甲烷類染料,作為殺真菌劑和消毒劑被廣泛應(yīng)用在水產(chǎn)養(yǎng)殖上[1]。孔雀石綠被魚體吸收后會(huì)代謝為危害更大的隱形孔雀石綠(LMG)和隱形結(jié)晶紫(LCV),并沉積于脂肪組織,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)孔雀石綠具有高毒、高殘留、致畸、致癌、致突變等副作用,殘留時(shí)間達(dá)到100 d以上,目前許多國(guó)家已禁用孔雀石綠。日本、美國(guó)、歐盟已不允許其作為獸藥用于水產(chǎn)養(yǎng)殖上。我國(guó)在2002年在《動(dòng)物性食品中獸藥殘留最高限量》(農(nóng)業(yè)部公告235號(hào))中將孔雀石綠列為禁用藥[2],在動(dòng)物性食品中不得檢出。但因其價(jià)格低廉,在水霉病防治方面尚未有很好的替代品,所以在水產(chǎn)養(yǎng)殖、運(yùn)輸過程中仍有違規(guī)使用,在不同程度上存在禁而不止的現(xiàn)象[3]。

        隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,檢測(cè)水產(chǎn)品中孔雀石綠、結(jié)晶紫類物質(zhì)的手段和方法多種多樣,檢測(cè)儀器越來越靈敏。常見方法有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、ELISA試劑盒和膠體金試紙3類。2006年我國(guó)頒布了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20361-2006《水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定》[4],該標(biāo)準(zhǔn)方法的準(zhǔn)確度較高,但檢測(cè)步驟多,樣品前處理繁瑣、費(fèi)時(shí)、檢測(cè)成本高,使用有機(jī)溶液量大,儀器設(shè)備昂貴,不適于對(duì)大量樣品進(jìn)行低成本快速篩選、現(xiàn)場(chǎng)判定的需要。如何采用最快捷、最經(jīng)濟(jì)、最準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方法,是食品安全的一項(xiàng)重要研究?jī)?nèi)容,就目前的發(fā)展趨勢(shì)看食品安全檢測(cè)方法首先要體現(xiàn)快速,因?yàn)槭称飞a(chǎn)者、經(jīng)營(yíng)者、監(jiān)督者都需要準(zhǔn)確而又及時(shí)的監(jiān)控結(jié)果。鑒于此,筆者選用一種酶聯(lián)免疫試劑盒分別對(duì)市場(chǎng)抽取43份水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留量進(jìn)行了速測(cè),旨在為水產(chǎn)品安全檢測(cè)提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 儀器。電子天平(瑞士梅特勒公司)、離心機(jī)(上海安亭儀器廠)、微孔酶標(biāo)儀(美國(guó)寶特公司)、洗板機(jī)(美國(guó)寶特公司)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士Buchi公司)、氮?dú)獯蹈裳b置(瑞士Buchi公司)、離心管、微量移液器(單道 20~200 μl、100~1 000 μl)。

        1.1.2 試劑。乙酸乙酯(分析純)、冰乙酸(分析純)、正己烷(分析純)、孔雀石綠隱性高濃度標(biāo)準(zhǔn)品(2.5 μg/L)、孔雀石綠ELISA檢測(cè)試劑盒(力德力諾生物技術(shù)有限公司)。

        1.2 方法

        1.2.1 樣品制備與提取。水產(chǎn)品樣品去除非食用部分,用勻漿器均質(zhì)樣品;稱取(1.00±0.05)g勻漿樣品至50 ml離心管中,加入10 ml冰醋酸-乙酸乙酯(1∶99,V/V)溶液,劇烈振蕩2 min;室溫下4 000 r/min離心10 min,取1 ml上層液于離心管中,加入氧化劑液50 μl,輕輕搖勻后室溫避光放置3~5 min;40℃氮?dú)獯蹈?,吹干后立即加? ml樣品稀釋液,再加入1 ml正己烷,渦動(dòng)20 s混勻,4 000 r/min離心5 min;去除上層有機(jī)相,取下層水相50 μl進(jìn)行檢測(cè)。

        1.2.2 酶標(biāo)板操作。取出所需的酶標(biāo)板孔,在每孔中加入50 μl工作標(biāo)準(zhǔn)品 (0、0.1、0.3、0.9、2.7、27.0 ng/ml)和樣品于所設(shè)定的孔中。在每孔中加入50 μl抗體,輕敲微孔板邊緣1 min混勻。25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30 min。

        洗板4~5次,每次應(yīng)該加入250 μl 1倍洗液,最后一次使板盡量甩干并在吸水紙上吸干。加入100 μl酶標(biāo)物,輕敲微孔板邊緣混勻,在25℃下避光培養(yǎng)30 min。重復(fù)洗板步驟,加入底物A液50 μl,再加底物B液50 μl,輕輕振蕩混勻,25℃下避光反應(yīng)15~20 min。加入50 μl終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定每孔OD值。

        1.2.3 樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)。用已檢測(cè)的陰性樣品做基體空白,取(1.00 ±0.05)g勻漿樣品,分別加入 0.1 μg/ml孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)溶液 100、300、500 μl,每個(gè)濃度2 個(gè)平行,采用該試驗(yàn)方法測(cè)定回收率。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 孔雀石綠的標(biāo)準(zhǔn)曲線 結(jié)果表明,孔雀石綠含量(x,ng/ml)與吸光度之比(y=B/B0,%)的線性方程為:y=-22.889lnx+30.763,R2=0.998 7(圖1)。

        表1 不同濃度樣品加標(biāo)回收率

        2.2 樣品中孔雀石綠檢測(cè)結(jié)果 共檢測(cè)樣品43份,其中檢出陽(yáng)性結(jié)果樣品有3份,殘留量分別為2.137、1.581、1.439 μg/kg,檢出率為6.98%。均超過水產(chǎn)品中孔雀石綠限量標(biāo)準(zhǔn)1.000 μg/kg。

        2.3 樣品加標(biāo)回收率 由表1可知,水產(chǎn)品中孔雀石綠的平均回收率為78.27% ~88.73%,表明試驗(yàn)方法回收率穩(wěn)定、可靠。

        3 討論

        樣品檢測(cè)如為陰性結(jié)果,可直接排除水產(chǎn)品中含有孔雀石綠和隱性孔雀石綠殘留;如為陽(yáng)性結(jié)果,需進(jìn)一步用高效液相色譜法或液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜確證和定量。該試驗(yàn)中檢出的3份陽(yáng)性樣品用高效液相色譜法確認(rèn)后,均檢出含有孔雀石綠殘留。

        ELISA試劑盒的所有試劑需要恢復(fù)至20~25℃保證靈敏度,吸附試驗(yàn)中溶液每次加量要嚴(yán)格相同,酶標(biāo)板洗板時(shí)確保干凈,甩干并在吸水紙上吸干后使用。

        酶聯(lián)免疫快速檢測(cè)技術(shù)相對(duì)傳統(tǒng)和經(jīng)典的化學(xué)檢測(cè)和儀器檢測(cè)而言,其特點(diǎn)是檢測(cè)所需的時(shí)間相對(duì)較少,對(duì)儀器設(shè)備、操作人員等條件要求不高,樣品前處理簡(jiǎn)單,既快速方便又節(jié)約成本,可滿足水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留的篩選以及疑似樣品的確證,應(yīng)用前景廣闊,有利于政府監(jiān)管并指導(dǎo)企業(yè)自控,促進(jìn)水產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量的提高,保護(hù)消費(fèi)者身體健康,提高我國(guó)水產(chǎn)品的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力。

        [1]史東杰,孫向軍,梁擁軍,等.水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留檢測(cè)的ELISA與HPLC 法的比較[J].現(xiàn)代漁業(yè)信息,2009,24(4):11-14.

        [2]農(nóng)業(yè)部.中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào):動(dòng)物性食品中獸藥最高殘留限量[S].2002.

        [3]王麗玲.應(yīng)用快速檢測(cè)試劑盒預(yù)測(cè)水樣和水產(chǎn)品中孔雀石綠[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,14(6):1900 -1901.

        [4]鄭斌,趙紅萍,冷凱良,等.GB/T20361-2006,水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測(cè)定[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.

        猜你喜歡
        孔雀石殘留量水產(chǎn)品
        冰島2020年水產(chǎn)品捕撈量102.1萬噸
        多數(shù)水產(chǎn)品價(jià)格小幅下跌
        水產(chǎn)品批發(fā)市場(chǎng)價(jià)格行情
        氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中戊唑醇的殘留量
        HPLC-MS/MS法檢測(cè)花生中二嗪磷的殘留量
        黨參中二氧化硫殘留量的測(cè)定
        中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:31
        BiOBr1-xIx的制備及光催化降解孔雀石綠
        鈷摻雜Bi2O3的制備及其可見光催化降解孔雀石綠廢水的研究
        江西省4月水產(chǎn)品塘邊銷售價(jià)
        浙貝母中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量和二氧化硫殘留量分析
        水蜜桃视频在线观看入口| 中文在线а√天堂官网| 亚洲成AⅤ人在线观看无码| 国产乱人伦AⅤ在线麻豆A| 精品日韩在线观看视频| 妺妺窝人体色www在线| 99久久久无码国产精品6| 一国产区在线观看| 日本熟妇高潮爽视频在线观看| 国产精品一区二区久久久av| 医院人妻闷声隔着帘子被中出 | 狠狠色狠狠色综合日日不卡| 亚洲九九九| 91久久大香伊蕉在人线国产| 无套内射在线无码播放| 少妇高潮尖叫黑人激情在线| 国产无套视频在线观看香蕉 | 国产麻豆剧传媒精品国产av| 中国无码人妻丰满熟妇啪啪软件 | 本道无码一区二区久久激情| 亚洲中文高清乱码av中文| 妺妺窝人体色www在线| 免费a级毛片无码无遮挡| 92精品国产自产在线观看48页| 国产极品大秀在线性色| 三级做a全过程在线观看| 久久婷婷综合色丁香五月| 国产不卡一区二区av| 日韩亚洲一区二区三区四区| 国产高清av首播原创麻豆| 亚洲综合免费| 国产精品午夜福利亚洲综合网| 国产精品免费观看调教网| 婷婷综合缴情亚洲| 国产日韩AV无码免费一区二区| 丝袜美腿人妻第一版主| 97无码免费人妻超级碰碰夜夜| 久久精品国产99精品国偷| 日韩精品极品免费在线视频| 99精品国产成人一区二区| 国产日产高清欧美一区|