郭元晟,張 敏(.錫林郭勒職業(yè)學(xué)院,內(nèi)蒙古錫林郭勒06000;.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),內(nèi)蒙古呼和浩特0008)
硒作為動物必需的微量元素之一,參與機體生長、繁殖、預(yù)防疾病和保護組織的完整性等過程。缺硒可以導(dǎo)致羊生長緩慢、免疫機能下降、羔羊白肌病、母羊不孕和羔羊腹瀉等癥狀[1-2],但過量的硒會引起家畜中毒,導(dǎo)致蹣跚癥和動物堿病等疾病[3]。據(jù)中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究確定我國72%的面積為缺硒地區(qū),其中內(nèi)蒙古錫林郭勒盟地區(qū)為缺硒嚴重地區(qū)。因此,在該地區(qū)肉羊日糧中添加適宜的硒源是非常必要的。硒可分為無機硒與有機硒2種化學(xué)形態(tài),硒酸鹽和亞硒酸鹽為常見的無機硒,是使用比較普遍的硒源[4]。有機硒的主要形態(tài)包括酵母硒、硒氨基酸和硒蛋白。Se-Met、Se-Cys與硒胱氨酸(Selenocystine)等為常見的硒氨基酸,其中Se-Met與Se-Cys是食物中廣泛存在的形式[5],它們與常規(guī)氨基酸的唯一不同是硒取代了硫原子。有機硒與無機硒最大的差異在于有機硒易于被動物體吸收與利用、安全無副作用并且減少對環(huán)境的污染[6-7]。目前,國內(nèi)的補硒來源主要是亞硒酸鈉,但大量研究已證實無論在生物利用率、組織器官中的沉積率、抗氧化效果、提高免疫力與繁殖性能等方面有機硒都優(yōu)于無機硒[8-12]。酵母硒是一種安全、穩(wěn)定、生物利用率高、低污染的一種常見的有機硒,其中大部分的硒是以蛋白和多糖的形式存在于酵母中[13]。酵母硒正逐步取代亞硒酸鈉在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用。筆者從生長性能、抗氧化功能及免疫功能等方面研究有機硒在蒙古羊養(yǎng)殖中的使用效果,確定適合錫盟地區(qū)蒙古羊日糧中有機硒的適宜添加劑量,提高飼料硒源的利用率,旨在為進一步推進錫盟肉羊的舍飼圈養(yǎng)、在草蓄平衡前提下增加牲畜飼養(yǎng)量和提高農(nóng)牧民收入提供可靠的科學(xué)依據(jù)。
1.1 試驗動物與試驗設(shè)計 選擇5~6月齡體重相近的240只健康蒙古羊作為試驗動物。試驗采用單因子隨機試驗設(shè)計,將240只健康蒙古羊分成4組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),每組6個重復(fù),每個重復(fù)10只。其中,Ⅰ組為對照組,日糧添加無機硒(亞硒酸鈉)0.3 mg/kg DM;其他3組為有機硒組,日糧中分別添加 0.3、0.6、0.9 mg/kg DM 的有機硒(酵母硒),預(yù)飼期15 d,正飼期60 d。
1.2 飼養(yǎng)管理及試驗日糧 試驗羊進欄前對羊舍進行全面消毒,預(yù)飼期間對羊只進行健康檢查、驅(qū)蟲、健胃等。每天清掃圈舍,以保持圈內(nèi)清潔,整個圈舍采取自然通風(fēng),所有圈舍進行不定期消毒。試驗由專人管理,預(yù)飼期讓試驗肉羊自由采食,以估測其每天的采食量,確定試驗日糧的給量,并及時收集剩料,每天飼喂2次,即每天7:00和18:00各飼喂1次,先粗后精,自由飲水。
試驗日糧參照國內(nèi)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)NY/T816-2004飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn),并做出適當(dāng)調(diào)整,其配方及營養(yǎng)水平見表1。將無機硒及有機硒按“1.1”中方法均勻混合于精料當(dāng)中。
1.3 測定指標(biāo)與方法
1.3.1 生長性能指標(biāo)。在試驗第1、30和60天早晨對試驗羊進行空腹稱重,并記錄各重復(fù)耗料量,按照以下公式分別計算各日糧處理組平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)及增重耗料比(G/F):
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平
1.3.2 樣品采集。在試驗第1、30和60天早晨,每個重復(fù)隨機選取2只羊,每處理組共12只,進行靜脈采血,離心制備血清,置于-20℃低溫冰箱中凍存?zhèn)溆谩?/p>
1.3.3 血清測定指標(biāo)及方法。血清中 GSH-Px、MDA、SOD、IgG、IgM、IgA的含量使用相關(guān)試劑盒測定(購自南京建成生物有限公司),具體操作見說明書。
1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗數(shù)據(jù)采用EXCEL2007進行整理統(tǒng)計后,利用SAS9.0軟件的ANOVA統(tǒng)計程序進行顯著性檢驗和多重比較,其中P<0.05表示處理組間差異顯著。
2.1 有機硒對蒙古羊生長性能的影響 從表2可以看出,添加有機硒可以顯著提高Ⅲ組、Ⅳ組蒙古羊0~30 d和30~60 d的平均日增重(P<0.05),然而對平均日采食量和飼料增重比沒有影響。
表2 有機硒對蒙古羊羔羊生長性能的影響
2.2 有機硒對蒙古羊抗氧化性能的影響 從表3可以看出,Ⅲ組、Ⅳ組在30 d和60 d血清中GSH-Px和SOD的活性均顯著高于對照組,在60 d血清中MDA的含量顯著低于對照組(P<0.05)。但是,添加有機硒對30 d血清中MDA含量沒有影響。
表3 有機硒對蒙古羊血清中GSH-Px、SOD活性和MDA含量的影響
2.3 有機硒對蒙古羊免疫機能的影響 從表4可以看出,添加有機硒可以顯著提高60 d蒙古羊血清中的IgG、IgM和IgA及30 d血清中的IgG和IgM的含量(P<0.05),但對30 d血清中IgA的含量沒有影響。
表4 有機硒對蒙古羊血清中免疫球蛋白含量的影響 g/L
3.1 有機硒對蒙古羊生長性能的影響 國內(nèi)外大量關(guān)于日糧中添加硒對動物生長性能的影響的研究及報道,結(jié)果卻大相徑庭。林長光研究給育肥豬飼喂酵母硒可以顯著提高其生產(chǎn)性能,但張乙山[14]等報道將納米硒、酵母硒和亞硒酸鈉3種硒源飼喂生長肥育豬,其生長性能無顯著差異(P>0.05)。黃志秋[15]研究表明精料中補充0.245 mg/kg 亞硒酸鈉,青年荷斯坦母牛體增重效果顯著,比對照組平均體增重提高34.89%。同時,徐娥等[16]研究添加有機硒可以顯著提高肉牛的飼料轉(zhuǎn)化率和平均日采食量。郭孝等[17]研究表明在杜泊羊日糧中添加15%高硒苜蓿青干草,體增重和飼料轉(zhuǎn)化率均達到極顯著水平,但黃玉邦[18]等在灘羊羔羊日糧中添加0.1 mg/kg DM亞硒酸鈉和富硒酵母60 d后,其富硒酵母組羔羊的生長性能與亞硒酸鈉組差異不顯著。該試驗結(jié)果表明在日糧中添加0.6 mg/kg DM及0.9 mg/kg DM的有機硒可以顯著提高蒙古羊的平均日增重,這與多數(shù)試驗在日糧中添加一定量的硒具有提高肉羊生長性能的報道相一致[19]。產(chǎn)生這一結(jié)果的主要原因可能是添加硒能夠促進瘤胃微生物的生長[20-21],并可以提高瘤胃消化日糧營養(yǎng)物質(zhì)的能力[22-23]。同時,硒具有調(diào)節(jié)甲狀腺素、類胰島素生長因子的活性,能增強動物機體對糖原、蛋白質(zhì)和脂肪的分解,有利于機體能量的供給,促進生長[24]。此外,硒還具有提高動物機體抗應(yīng)激、抗氧化及免疫作用,間接地促進動物生長[25]。
3.2 有機硒對蒙古羊抗氧化性能的影響 動物機體靠新陳代謝活動來保持自身與環(huán)境的平衡,當(dāng)動物機體受到外部環(huán)境與內(nèi)在因素的影響會造成體內(nèi)產(chǎn)生自由基和活性氧,活性氧會直接攻擊生物分子,或間接活化蛋白酶及核酸酶,造成DNA斷裂、脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)及DNA傷害,DNA傷害可能引起或促進細胞癌化。李素娟[26]報道硒既是抗氧化酶的組分又可以直接清除血液自由基。此外,硒還可以與細胞膜結(jié)合來以保護細胞膜結(jié)構(gòu)完整進而發(fā)揮其抗氧化作用[27]。機體抗氧化能力的指標(biāo)主要有GSH-Px、SOD、MDA等,血液中GSH-Px活性與硒濃度間呈高度正相關(guān)。Arthington[28]研究表明肉用閹牛日糧中添加硒組(每頭2.5 mg/d)在試驗60 d和90 d其肝臟、血漿中的硒含量和血漿中谷胱甘肽過氧化物酶活性都比不添加組有明顯升高。倪麗麗[29]研究表明奶牛日糧中添加酵母硒可以提高血清中T-AOC、GSH-Px和SOD的活性,降低了MDA的含量。Juniper[30]在奶牛、肉牛、小牛和山羊的日糧中都加入酵母硒6.63 mg/kg(DM),結(jié)果表明添加組的血硒含量與谷胱甘肽過氧化物酶的活性均顯著高于不添加組。黃玉邦等研究發(fā)現(xiàn)添加有機硒可以顯著提高羔羊的抗氧化能力。石磊等[31]研究表明飼喂酵母硒可以顯著提高妊娠母羊血清中T-AOC、GSH-Px和SOD的活性,降低了MDA的含量。該試驗結(jié)果與上述結(jié)果基本一致,添加有機硒可以顯著提高蒙古羊血清中GSH-Px和SOD的活性,降低MDA的含量,其中以添加0.6 mg/kg DM和0.9 mg/kg DM 2組效果最為明顯。
3.3 有機硒對蒙古羊免疫機能的影響 硒是免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)的重要組分,主要參與調(diào)節(jié)T淋巴細胞、B淋巴細胞及非特異性免疫的效應(yīng)細胞的功能[32]。關(guān)于硒對反芻動物體液免疫影響報道并不一致,Swecker等[33]發(fā)現(xiàn)奶牛補硒后可以增加初乳及犢牛血清IgG水平,但對IgM無影響。雒國彬[34]報道隨著酵母硒添加量的提高,奶牛血清IgM、IgG和IgA的含量先升高后降低。Kanada等[35]報道給缺硒犢牛適量加硒可以提高新生犢牛血漿IgA水平。Rock等[36]研究報道母羊補硒后及其所產(chǎn)羔羊的IgG水平均比對照組的高。該試驗結(jié)果表明添加相同劑量的有機硒與無機硒對蒙古羊血清中IgM、IgG和IgA的含量無顯著影響,而添加高劑量的有機硒與添加無機硒相比可以顯著提高蒙古羊血清中IgM、IgG和IgA的含量,其中以添加0.6 mg/kg DM時效果最好。體液免疫的關(guān)鍵是抗體的產(chǎn)生,缺硒時會降低機體合成免疫球蛋白的功能[37],IgG、IgA 和 IgM 滴度下降[38],但硒攝入過量則會抑制體液免疫功能[39-40]。目前關(guān)于硒對肉羊體液免疫的影響的報道較少,且試驗結(jié)果也存在一定的差異,其影響機制尚未得到定論,有待于進一步研究。
在蒙古羊日糧中添加有機硒可以顯著提高均日增重、血清的抗氧化力及血清中免疫球蛋白的含量。綜合考慮有機硒對蒙古羊生產(chǎn)性能、抗氧化能力、免疫機能的影響結(jié)果、飼料成本、環(huán)境保護等方面,確定錫盟地區(qū)蒙古羊日糧中有機硒的最適添加劑量為0.6 mg/kg DM。
[1]BECK M A,ESWORTHY R S,HO Y S,et al.Glutathione peroxidase protects mice from viral-induced myocarditis[J].FASEB J,1998,12(12):1143-1149.
[2]PEHRSON B G.Selenium in nutrition with special reference to the biopotency of organic and inorganic selenium com pounds[C]//LYONS T P.Biotechnology in the Feed Industry,Proceedings of Alltech's Ninth Annual Symposium.Nottingham:Nottingham University Press,1993:71-89.
[3]MASTERS D G.綿羊礦物質(zhì)營養(yǎng)研究的最新進展及其對中國養(yǎng)羊生產(chǎn)可能產(chǎn)生的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,1998,10(1):1-11.
[4]LEXANDROVA R,RASHKOVA G,TSENOVA W.Selenium-the known and unknown[J].Exp Pathol Parasitol,2003,12:14-23.
[5]SCHRAUZER G N.Selenomethionine:a review of its nutritional significance,metabolismand toxicity[J].Nutr,2000,130:1653-1656.
[6]沈銀書,丁宏標(biāo).富硒酵母的營養(yǎng)價值研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2008(13):251-254.
[7]周元軍.硒在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用與開發(fā)[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,33(10):1917-1918.
[8]杭紅仙,毛玉龍,張金仙,等.日糧中添加有機硒對種公豬精液質(zhì)量的影響[J].當(dāng)代畜牧,2001(10):23-24.
[9]孟凡立,盛永杰,陳維多.兩種形式的硒對奶牛紅細胞內(nèi)幾種抗氧化酶活力影響的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2002(3):17-18.
[10]邱榕生,咼于明.有機鎂與有機硒對肉雞機體組織抗氧化機能的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報,2003,34(6):542-547.
[11]危克周,潘志雄,吳宗萬,等.添加適量有機硒對種公牛精子活力的影響[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報,2004,23(6):539-540.
[12]袁纓,郝智慧,郭東新.兩種來源硒對肉仔雞體內(nèi)硒沉積和谷胱甘肽過氧化物酶活性的影響[J].中國畜牧雜志,2002,38(4):21-22.
[13]鐵梅,李晶,臧樹良等.Se酵母中可溶態(tài)Se的形態(tài)分析[J].遼寧大學(xué)學(xué)報,2006,33(2):108-111.
[14]張乙山,邊連全,游思親.三種硒源對生長肥育豬組織硒沉積及抗氧化能力的影響[J].飼料工業(yè),2008,29(1):18-20.
[15]黃志秋,何學(xué)謙,吉牛拉惹,等.補飼Se-VE對青年中國荷斯坦母牛生長發(fā)育的影響[J].云南畜牧獸醫(yī),2002(1):9.
[16]徐娥,夏先林,韓勇,等.有機硒對育肥牛生產(chǎn)性能和肉質(zhì)的影響[J].草食家畜,2009(2):62-66.
[17]郭孝,介曉磊,李明,等.高硒或高硒鈷苜蓿青干草對杜泊羊生長和生產(chǎn)性能的調(diào)控[J].中國草食動物,2008,28(5):28-31.
[18]黃玉邦,孫永武,周進勤,等.有機硒對羔羊生長性能及抗氧化能力的影響[J].畜牧與飼料科學(xué),2009(9):22-24.
[19]張春香,張建新,任有蛇,等.羊微量元素硒營養(yǎng)的研究進展[J].飼料研究,2011(3):57-59.
[20]NAZIROGLU M,AKSAKAL M,CAY M,et al.Effects of vitamin E and selenium on some rumen parameters in lambs[J].Acta Veterinaria Hungaria,1997,45:447-456.
[21]HUDMAN J F,GLENN A R.Selenite uptake and incorporation by Selenomonas ruminantium[J].Archive Microbiology,1984,140:252-256.
[22]那日蘇.硒對反芻動物的營養(yǎng)[J].動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué),2003,9(20):57-59.
[23]王海宏,謝忠枕.硒的生物學(xué)功能及其機理的研究[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2003,15(3):6-11.
[24]倪銀星.硒蛋白、硒與內(nèi)分泌激素的關(guān)系研宄進展[J].國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊,2002,29(1):38-41.
[25]RAYMOND F,BURK M D.Selenium,an antioxidant nutrient[J].Nutr.Clin.Care,2002,5(2):75-79.
[26]李素娟.硒與人體健康[J].中華臨床與衛(wèi)生,2002,1(3):51-52.
[27]倪銀星.含硒中藥抗氧化作用研究進展[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,1996,21(2):185-188.
[28]ARTHINGTON J D.Effects of supplement type and selenium source on measures of growth and selenium status in yealing beef steers[J].Journal of Animal Science,2008,86:1472-1477.
[29]倪麗麗.有機硒對奶牛瘤胃發(fā)酵、抗氧化功能及免疫功能的影響[D].呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2011.
[30]JUNIPER D T,PHIPPS R H,GIVENS D I,et al.Tolerance of rumiant animals to high dose in-feed administration of a selenium-enrich yeast[J].Journal of Animal Science,2008,86:197-204.
[31]石磊,趙輝,姚曉磊,等.不同水平酵母硒對黎城大青羊妊娠母羊血液抗氧化能力的影響[J].中國草食動物科學(xué),2013,33(40):18-21.
[32]DYLEWSKI M L,MASTRO A M,PICCIANO M F.Matemal Se nutrition and neonatal immune system development[J].Bio.Neonate,2002,82:122-127.
[33]SWECKER W S,THATCHER C D,EVERSOLE D E,et al.Effect of selenium supplementation on colostral IgG concentration in cows grazing selenium-deficient pastures and on postsuckle seurm IgG concentration in their calves[J].Am J Vet Res,1995,56:450-453.
[34]雒國彬,趙洪波,文奇男,等.酵母硒對圍產(chǎn)前期奶牛全血硒含量和血液抗氧化能力的影響[J].中國飼料,2010(16):34-36.
[35]KANADA H,NONAKA I,UEDA Y,et al.Se addition to colostrums increases immunoglobulin G absorption by newborn calves[J].Dairy Sci,2007,90:5665-5670.
[36]ROCK M J,KINCAID R L,CARSTENS G E.Effects of prenatal source and level of dietary selenium on passive immunity and thermometabolism of newborn lambs[J].Small Rumin Res,2001,40(2):129-138.
[37]ONGELE,ASHRAF M,NEBITT R A,et al.Effeets of Se deficiency in the development of trypanosomes and homoral immune responses in mice infected with Trypanosoma musculi[J].Parasitol Res,2000,88:540-545.
[38]SPALLHOLZ J E,MARTIN J L.Immunologic responses of mice fed diets supplemented with selenite Se[J].Proc Soc Exp Med Bio,1973,143:685-689.
[39]MCKENZIE,RAFFERTY R C,BECKETT T S,et.al.Se:an essential element for immune function[J].Immunol Today,1998,19:342-345.
[40]SPALLHOLZ J E,BOYLAN L M,LARSEN H S.Advanees in understanding Se's role in the immune system[J].Ann NY Acad.Sci,1990,587:123-139.