朱 倩，翟 偉，白 金，柴龍會(huì)，黃璞祎，程李芳 (東北林業(yè)大學(xué)野生動(dòng)物資源學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150040)

葛氏鱸塘鱧(Perccottus glenii)屬于鱸形目塘鱧科，主要分布于黑龍江流域的淺水湖泊和沼澤，因其味道鮮美、營養(yǎng)價(jià)值高而深受人們喜愛，具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。但是關(guān)于一些常用農(nóng)藥對(duì)葛氏鱸塘鱧毒性效應(yīng)的研究很少。

有機(jī)氯農(nóng)藥硫丹和菊酯類農(nóng)藥高效氯氟氰菊酯是農(nóng)業(yè)上應(yīng)用廣泛的2種殺蟲劑，其對(duì)魚類等水生生物的影響已經(jīng)受到越來越多的關(guān)注［1－3］。SOD等抗氧化酶的活性變化常常作為農(nóng)藥對(duì)魚類的生物標(biāo)志物，以評(píng)價(jià)環(huán)境污染物對(duì)魚類的生物學(xué)效應(yīng)［2，4］。筆者研究了有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥對(duì)葛氏鱸塘鱧抗氧化酶活性的影響，旨在為評(píng)價(jià)該2類常用農(nóng)藥對(duì)葛氏鱸塘鱧的急性毒性效應(yīng)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 材料

1．1．1 試驗(yàn)用魚。葛氏鱸塘鱧采自黑龍江哈爾濱市松花江濕地(道外區(qū)紅星村)，體長為(6．97 ±0．79)cm，體重為(5.02±1．81)g。室內(nèi)暫養(yǎng)14 d后進(jìn)行試驗(yàn)，暫養(yǎng)期間每日定時(shí)投喂搖蚊幼蟲，自然死亡率低于1%，試驗(yàn)前1 d停止投餌，選取活潑健康的個(gè)體進(jìn)行隨機(jī)分組。

1．1．2 試驗(yàn)藥物。硫丹(乳油)，化學(xué)名為1，2，3，4，7，7-六氯雙環(huán) 2．2．1 庚-2-烯-5，6-雙羥甲基亞硫酸酯，購于拜耳作物科學(xué)(中國)有限公司，有效成分為35%;高效氯氟氰菊酯(微乳劑)購于山東曹達(dá)化工有限公司，有效成分為2．5%。

1．1．3 試驗(yàn)條件。試驗(yàn)在60 cm×40 cm×50 cm的玻璃水族箱中進(jìn)行，水溫為(24±1)℃，溶解氧大于5 mg/L。試驗(yàn)用水為充分曝氣2 d以上的自來水。

1．2 試驗(yàn)方法 硫丹濃度梯度設(shè)置 1．25、2．50、3．75、5．00和6．25 μg/L 5 個(gè)濃度;高效氯氟氰菊酯設(shè)置 0．50、1．00、1．50、2．00 μg/L 4 個(gè)濃度，每個(gè)濃度梯度設(shè)置 3 個(gè)平行組，2個(gè)對(duì)照組，每組放置試驗(yàn)魚5尾。試驗(yàn)周期為96 h。試驗(yàn)期間停食，每隔24 h更換一次藥液。SOD活性采用南京建成生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

1．3 數(shù)據(jù)處理 采用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。應(yīng)用單因素方差分析2種農(nóng)藥對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性的影響是否顯著;應(yīng)用Dunnett多重比較分析不同濃度處理組的SOD活性與對(duì)照組是否存在顯著差異。試驗(yàn)結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2．1 硫丹對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性的影響 由圖1可知，葛氏鱸塘鱧在暴露于硫丹 96 h后，1．25、2．50 和 3．75 μg/L處理組的SOD活性較對(duì)照組略有升高;而在較高濃度5．00和6．25 μg/L處理組的SOD活性出現(xiàn)下降趨勢(shì)。雖然單因素方差分析表明，硫丹對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織的SOD活性影響不顯著，但仍可看出硫丹在較低濃度時(shí)會(huì)誘導(dǎo)SOD活性，而在較高濃度時(shí)會(huì)抑制SOD活性。

2．2 高效氯氟氰菊酯對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性的影響 由圖2可知，葛氏鱸塘鱧在高效氯氟氰菊酯暴露96 h后，各濃度處理組的SOD活性呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)。單因素方差分析表明，高效氯氟氰菊酯對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織的SOD活性存在顯著影響;Dunnett多重比較顯示，1．50和2．00 μg/L處理組的SOD活性顯著高于對(duì)照組，說明高效氯氟氰菊酯明顯誘導(dǎo)了葛氏鱸塘鱧肝組織的SOD活性。

3 討論

3．1 硫丹對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性的影響 SOD是生物體重要的抗氧化酶，可以通過清除生物體內(nèi)的活性氧自由基如，使機(jī)體免受不完全還原氧的侵害。眾多研究表明，魚類在應(yīng)對(duì)環(huán)境變化過程中會(huì)引發(fā)體內(nèi)抗氧化酶的積極響應(yīng)，以此應(yīng)對(duì)自由基對(duì)機(jī)體的脅迫［1，3］。因此，SOD作為清除自由基的重要抗氧化酶，其活性變化可以間接反映環(huán)境脅迫的程度［2，5］。

葛氏鱸塘鱧在受到較低濃度硫丹的脅迫時(shí)，SOD活性有小幅度升高，這可能是由于魚體內(nèi)需要更多的SOD以清除由于脅迫而產(chǎn)生的過量，這與 Salvo等［7］的研究結(jié)論“鯉魚(Cyprinuscarpio)幼魚暴露于低濃度的硫丹(1．00 μg/L)15 d后，肝組織的SOD活性顯著高于對(duì)照組”［6］基本一致。該研究還發(fā)現(xiàn)，在較高濃度硫丹脅迫下，葛氏鱸塘鱧肝組織的SOD活性受到抑制，這可能是由于機(jī)體無法提供足夠的SOD來消除過量的，引起肝組織細(xì)胞受損，無法完成正常的生理功能，最終導(dǎo)致SOD活性降低。隨硫丹濃度的增加，葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性表現(xiàn)出的這種先誘導(dǎo)后抑制的趨勢(shì)，與前人關(guān)于硫丹對(duì)斑馬魚(Danio rerio)［3］、草魚(Ctenopharyngodon idellus)［4］和南美慈鯛(Australoheros facetus)［7］肝組織SOD活性影響的研究結(jié)果相似。

3．2 高效氯氟氰菊酯對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性的影響 以往研究表明，高效氯氟氰菊酯往往會(huì)引起魚類肝組織SOD活性的增強(qiáng)［1，8］。王軍等研究發(fā)現(xiàn)，高效氯氟氰菊酯乳油對(duì)黃河鯉魚肝胰臟SOD活性影響較大，0．01和0．02 μg/L處理組在給藥12、24 h后，SOD活性顯著高于對(duì)照組［1］。類似地，虹鱒(Oncorhynchus mykiss)暴露于高效氯氟氰菊酯48 h后，肝組織的SOD活性顯著增加［8］。該研究結(jié)果也表明高效氯氟氰菊酯對(duì)葛氏鱸塘鱧肝組織SOD活性具有明顯誘導(dǎo)作用，而且存在明顯的濃度效應(yīng)關(guān)系，說明高效氯氟氰菊酯可以引起葛氏鱸塘鱧的氧化壓力，而SOD具有使魚類免受高效氯氟氰菊酯毒性的作用。

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