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        3 株葡萄酒非釀酒酵母的生長(zhǎng)與發(fā)酵特性

        2015-12-20 07:56:22粟春燕陳晶瑜
        食品科學(xué) 2015年19期
        關(guān)鍵詞:伊薩畢赤耐受性

        于 洋,粟春燕,陳晶瑜

        (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院,北京 100083)

        3 株葡萄酒非釀酒酵母的生長(zhǎng)與發(fā)酵特性

        于 洋,粟春燕,陳晶瑜*

        (中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院,北京 100083)

        本實(shí)驗(yàn)對(duì)篩選自我國(guó)特色釀酒葡萄產(chǎn)區(qū)的東方伊薩酵母YF-12、發(fā)酵畢赤酵母YF-19和季也蒙有孢漢遜酵母YF-28這3 株非釀酒酵母的生長(zhǎng)特性和發(fā)酵特性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:東方伊薩酵母YF-12和發(fā)酵畢赤酵母YF-19具有較好的生長(zhǎng)特性;在發(fā)酵環(huán)境耐受性方面,3 株非釀酒酵母對(duì)高質(zhì)量濃度葡萄糖和SO2都有較好的耐受性,在酒精耐受性上季也蒙有孢漢遜酵母YF-28表現(xiàn)較差;對(duì)3 株非釀酒酵母進(jìn)行純種發(fā)酵實(shí)驗(yàn)后測(cè)定揮發(fā)性物質(zhì)發(fā)現(xiàn),東方伊薩酵母YF-12和季也蒙有孢漢遜酵母YF-28產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)較多,而發(fā)酵畢赤酵母YF-19產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)種類很少。上述結(jié)果表明,東方伊薩酵母YF-12顯示出較好的生長(zhǎng)和發(fā)酵特性,適合做進(jìn)一步產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)。

        非釀酒酵母;生長(zhǎng)特性;純種發(fā)酵;揮發(fā)性物質(zhì)

        在葡萄酒釀造中,非釀酒酵母(non-Saccharomyces)是有別于釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的一大類酵母,主要包括克勒克酵母屬(Kloeckera)、有孢漢遜酵母屬(Hanseniaspora)、畢赤酵母屬(Pichia)、假絲酵母屬(Candida)、德巴利酵母屬(Debaryomyces)和伊薩酵母屬(Issatchenkia)等[1-2]。非釀酒酵母一般在發(fā)酵前期生長(zhǎng)旺盛,能夠產(chǎn)生較高含量的香氣物質(zhì),但隨著酒精體積分?jǐn)?shù)的不斷升高其優(yōu)勢(shì)逐漸被釀酒酵母所替代[3]。早期研究認(rèn)為非釀酒酵母能夠產(chǎn)生腐敗代謝產(chǎn)物對(duì)葡萄酒風(fēng)味產(chǎn)生負(fù)面影響而被加以控制,但近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),非釀酒酵母能夠產(chǎn)生大量的甘油、酯類等代謝產(chǎn)物,并且能夠產(chǎn)生一些酶將葡萄酒中的香氣前體物質(zhì)分解從而釋放出香氣物質(zhì),對(duì)葡萄酒的風(fēng)味產(chǎn)生積極影響[4-11]。葡萄酒香氣是評(píng)價(jià)葡萄酒感官質(zhì)量的重要指標(biāo),目前已經(jīng)鑒定出的香氣成分大約有800多種,主要包括醇類、酯類、有機(jī)酸類、揮發(fā)性酚、內(nèi)酯、縮醛、芳香酮、萜烯類、脂肪酸和單萜醇氧化物等,不同的香氣物質(zhì)混合在一起就賦予了葡萄酒復(fù)雜而獨(dú)特的風(fēng)味[12-13]。雖然非釀酒酵母對(duì)葡萄酒風(fēng)味的影響已經(jīng)引起了廣泛的關(guān)注,但是其在葡萄酒釀造中的應(yīng)用則尚處于起步階段,工業(yè)發(fā)酵用菌株亟待開(kāi)發(fā)。因此,研究非釀酒酵母的發(fā)酵特性并以此為依據(jù),篩選出具有優(yōu)良性狀的非釀酒酵母菌株并將其應(yīng)用于葡萄酒釀造中就顯得非常重要。

        本實(shí)驗(yàn)以篩選自我國(guó)特色釀酒葡萄產(chǎn)區(qū)的東方伊薩酵母YF-12、發(fā)酵畢赤酵母YF-19和季也蒙有孢漢遜酵母YF-28這3 株非釀酒酵母為研究對(duì)象,利用紫外分光光度法測(cè)定它們的生長(zhǎng)曲線、高糖耐受性、酒精耐受性以及SO2耐受性;同時(shí),采用模擬葡萄汁對(duì)3 株非釀酒酵母進(jìn)行純種發(fā)酵實(shí)驗(yàn),利用頂空固相微萃取和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定發(fā)酵液中的揮發(fā)性物質(zhì)。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn),對(duì)3 株非釀酒酵母的生長(zhǎng)與發(fā)酵特性進(jìn)行比較,為非釀酒酵母工業(yè)發(fā)酵菌株的篩選提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 菌株、培養(yǎng)基與儀器

        1.1.1 菌株

        東方伊薩酵母(Issatchenkia orientalis)YF-12,分離自河北昌黎產(chǎn)區(qū)的赤霞珠葡萄;發(fā)酵畢赤酵母(Pichia fermentans)YF-19,分離自山東煙臺(tái)產(chǎn)區(qū)的霞多麗葡萄;季也蒙有孢漢遜酵母(Hanseniaspora guilliermondii)YF-28,分離自河北沙城產(chǎn)區(qū)的美樂(lè)葡萄。

        1.1.2 培養(yǎng)基

        YPD液體培養(yǎng)基(g/L):酵母浸粉10、蛋白胨20、葡萄糖20。

        YPDA固體培養(yǎng)基(g/L):酵母浸粉10、蛋白胨20、葡萄糖20、瓊脂20。

        模擬葡萄汁(model synthetic medium,MSM):可以模擬標(biāo)準(zhǔn)葡萄汁的成分,適用于研究葡萄酒酵母的釀造特性[14]。其成分(g/L)為:葡萄糖100、果糖100、酒石酸3、檸檬酸0.3、L-蘋果酸0.3、KH2PO42、MgSO4·7H2O 0.2。氮源(190 mg total N/L):(NH4)2SO40.3 g,天冬酰胺0.6 g。無(wú)機(jī)鹽(mg/L):MnSO4·H2O 4、ZnSO4·7H2O 4、CuSO4·5H2O 1、KI 1、CoCl2·6H2O 0.4、(NH4)6Mo7O24·4H2O 1、H3BO31。維生素(mg/L):肌醇300、生物素0.04、硫酸銨1、吡哆醇1、煙酸1、泛酸1。脂肪酸(mg/L):棕櫚酸1、棕櫚烯酸0.2、硬脂酸3、油酸0.5、亞油酸0.5、亞麻酸0.2。脂肪酸混合物用吐溫-80及無(wú)水乙醇溶解,pH值調(diào)整為3.3。

        1.1.3 儀器與設(shè)備

        UV2800紫外分光光度計(jì) 上海尤尼柯儀器有限公司;Agilent7890A氣相色譜和Agilent5975C質(zhì)譜聯(lián)用儀美國(guó)安捷倫有限公司;PDMS/CAR/DVB固相微萃取頭(50/30 μm)和固相微萃取裝置 美國(guó)Supelco公司。

        1.2 方法

        1.2.1 種子液培養(yǎng)

        將保藏的菌株解凍后,劃線培養(yǎng)于YPDA固體培養(yǎng)基上,28 ℃條件下培養(yǎng)24 h后重復(fù)活化一次。在YPDA固體培養(yǎng)基上挑取菌落特征明顯的非釀酒酵母菌株接種于YPD液體培養(yǎng)基中,于28 ℃、150 r/min條件下培養(yǎng)24 h左右制成種子液。

        1.2.2 生長(zhǎng)特性實(shí)驗(yàn)

        1.2.2.1 生長(zhǎng)曲線測(cè)定

        將各非釀酒酵母種子液以1%的接種量接種于YPD液體培養(yǎng)基中,28 ℃條件下培養(yǎng),每隔2 h取250 μL菌液于96 孔板中,以未接種的YPD培養(yǎng)基作為空白對(duì)照,使用酶標(biāo)儀在630 nm波長(zhǎng)處測(cè)定菌懸液的OD值,每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3 次。然后根據(jù)時(shí)間和OD630 nm值繪制生長(zhǎng)曲線。

        1.2.2.2 糖耐受性測(cè)定

        將各非釀酒酵母種子液以1%的接種量分別接種于葡萄糖質(zhì)量濃度分別為100、150、200、250、300 g/L的YPD液體培養(yǎng)基中,28 ℃條件下培養(yǎng)34 h左右,使用酶標(biāo)儀測(cè)定不同糖質(zhì)量濃度下的非釀酒酵母的OD630 nm值[15]。

        1.2.2.3 酒精耐受性測(cè)定

        將各非釀酒酵母種子液以1%的接種量分別接種于酒精體積分?jǐn)?shù)分別為3%、6%、9%、12%、15%的YPD液體培養(yǎng)基中,28 ℃條件下培養(yǎng)34 h左右,使用酶標(biāo)儀測(cè)定不同酒精體積分?jǐn)?shù)下的非釀酒酵母的OD630 nm值。

        1.2.2.4 SO2耐受性測(cè)定

        將各非釀酒酵母種子液以1%的接種量分別接種于SO2質(zhì)量濃度分別為50、100、150、200、300 mg/L的YPD液體培養(yǎng)基中,28 ℃條件下培養(yǎng)34 h左右,使用酶標(biāo)儀測(cè)定不同SO2質(zhì)量濃度下的OD630 nm值。

        1.2.3 發(fā)酵特性實(shí)驗(yàn)

        1.2.3.1 純種發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

        將各非釀酒酵母種子液以1%的接種量接種于模擬葡萄汁中,使非釀酒酵母的初始菌液濃度達(dá)到105CFU/mL,并于25 ℃、90 r/min條件下培養(yǎng),每個(gè)樣品設(shè)4 個(gè)重復(fù)[16]。

        1.2.3.2 殘?zhí)橇繙y(cè)定

        參照GB/T 15038-2006《葡萄酒、果酒通用分析方法》中的直接滴定法[17]。

        1.2.3.3 揮發(fā)性物質(zhì)提取

        頂空固相微萃取方法,取發(fā)酵結(jié)束的發(fā)酵液10 mL,8 000 r/min離心10 min后取上清液5 mL加入15 mL的頂空微萃取樣品瓶中,同時(shí)加入1 g NaCl和磁力轉(zhuǎn)子,迅速擰緊樣品蓋后置于恒溫磁力攪拌加熱平臺(tái)上。將已活化的萃取頭插入樣品瓶的頂空部分,萃取頭距離液面1 cm。40 ℃條件下吸附30 min,將吸附后的萃取頭插入氣相色譜進(jìn)樣口,于250 ℃熱解析8 min[18]。

        1.2.3.4 揮發(fā)性物質(zhì)測(cè)定

        采用Agilent 5975c/7890a測(cè)定揮發(fā)性物質(zhì),氣相色譜柱為DB-5 ms(30 m×250 μm,0.5 μm);載氣為高純氦氣,流速為1 mL/min。手動(dòng)進(jìn)樣,采用不分流模式,進(jìn)樣口溫度250 ℃,熱解析8 min。柱溫箱升溫程序:40 ℃保持4 min,然后以3 ℃/min的速率升溫到230 ℃,保持2 min。質(zhì)譜接口溫度為250 ℃,離子源溫度:230 ℃,電離方式為EI,離子能量70 eV,質(zhì)量掃描范圍:20.0~500.0。

        1.3 數(shù)據(jù)分析

        生長(zhǎng)特性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果使用Origin Pro 8.5進(jìn)行處理與分析。

        揮發(fā)性物質(zhì)定性定量分析:利用質(zhì)譜全離子掃描圖譜,依據(jù)已有標(biāo)樣的色譜保留時(shí)間和質(zhì)譜信息、NIST05標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)比對(duì)結(jié)果對(duì)葡萄酒中的香氣物質(zhì)進(jìn)行定性分析。采用氣相色譜峰面積歸一化法確定各香氣組分的相對(duì)含量。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 非釀酒酵母菌株的生長(zhǎng)曲線

        圖1 非釀酒酵母菌株在YPD培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線Fig.1 Growth curves of non-Saccharomyces yeast strains cultivated in YPD medium

        對(duì)3 株非釀酒酵母菌株在YPD液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況進(jìn)行了測(cè)定,其生長(zhǎng)曲線如圖1所示。東方伊薩酵母YF-12在YPD液體培養(yǎng)基中經(jīng)歷了大約2 h的延滯期后進(jìn)入了對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,在16 h左右達(dá)到穩(wěn)定期;發(fā)酵畢赤酵母YF-19在YPD液體培養(yǎng)基中經(jīng)歷了不到2 h的延滯期后也進(jìn)入了對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,并于20 h左右達(dá)到穩(wěn)定期;季也蒙有孢漢遜酵母YF-28較之前兩株酵母生長(zhǎng)有顯著差異,其延滯期及對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期沒(méi)有明顯分界點(diǎn),對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期曲線較其他兩株酵母菌平滑且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),在28 h左右達(dá)到穩(wěn)定期。由此可見(jiàn),東方伊薩酵母YF-12和發(fā)酵畢赤酵母YF-19在YPD培養(yǎng)基中的適應(yīng)能力優(yōu)于季也蒙有孢漢遜酵母YF-28。

        2.2 非釀酒酵母菌株的耐受性

        葡萄酒發(fā)酵中,非釀酒酵母的生長(zhǎng)情況與諸多因素有關(guān),如葡萄汁的營(yíng)養(yǎng)狀況、發(fā)酵溫度、酒精體積分?jǐn)?shù)和SO2添加量等,非釀酒酵母對(duì)高質(zhì)量濃度葡萄糖、SO2和高體積分?jǐn)?shù)酒精的耐受情況直接影響其發(fā)酵活性[19]。因此,根據(jù)3 株非釀酒酵母在YPD液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)情況,取各非釀酒酵母到達(dá)穩(wěn)定期的時(shí)間點(diǎn),比較了它們對(duì)高質(zhì)量濃度葡萄糖、SO2和高體積分?jǐn)?shù)酒精的耐受情況,同時(shí)以在YPD液體培養(yǎng)基中的對(duì)應(yīng)值為對(duì)照。

        2.2.1 非釀酒酵母對(duì)葡萄糖的耐受性

        葡萄酒工業(yè)中,糖是酒精發(fā)酵的基質(zhì),也是酵母賴以生活的能源物質(zhì)。但是高質(zhì)量濃度的糖會(huì)對(duì)酵母的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制,造成葡萄糖阻遏和葡萄糖抑制作用,同時(shí),高滲透壓會(huì)導(dǎo)致酵母細(xì)胞水分流失,活性降低[20]。3 株非釀酒酵母對(duì)不同質(zhì)量濃度葡萄糖的耐受性情況如圖2所示。東方伊薩酵母YF-12的葡萄糖耐受性隨著葡萄糖質(zhì)量濃度的提高呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢(shì),且當(dāng)葡萄糖質(zhì)量濃度達(dá)到150 g/L時(shí)OD630 nm值最高,之后光密度值略有降低;發(fā)酵畢赤酵母YF-19對(duì)葡萄糖的耐受性趨勢(shì)與YF-12基本一致,但在葡萄糖質(zhì)量濃度高于150 g/L時(shí),光密度值降低速率較快,說(shuō)明YF-19對(duì)糖耐受性較YF-12差;季也蒙有孢漢遜酵母YF-28對(duì)葡萄糖耐受性較好,光密度值基本隨著葡萄糖質(zhì)量濃度增加而增加,當(dāng)葡萄糖質(zhì)量濃度高于250 g/L時(shí),才開(kāi)始下降。一般釀酒所用葡萄汁中的糖含量大約在250 g/L左右(按葡萄糖計(jì)),本實(shí)驗(yàn)所用3 株非釀酒酵母在該葡萄糖質(zhì)量濃度下生長(zhǎng)所受抑制很小,因此,在葡萄酒釀造上有一定的應(yīng)用潛力。

        圖2 非釀酒酵母菌株對(duì)葡萄糖的耐受性Fig.2 Glucose tolerance of non-Saccharomyces yeast strains

        2.2.2 非釀酒酵母對(duì)酒精的耐受性

        酒精發(fā)酵過(guò)程中,非釀酒酵母在發(fā)酵前期占有絕對(duì)優(yōu)勢(shì),但隨著發(fā)酵產(chǎn)的酒精越來(lái)越多,其優(yōu)勢(shì)被釀酒酵母所替代[21]。同時(shí),有研究發(fā)現(xiàn),接種非釀酒酵母與釀酒酵母混合發(fā)酵能夠產(chǎn)生較高體積分?jǐn)?shù)的酒精,這也為篩選出能夠耐受較高酒精體積分?jǐn)?shù)的非釀酒酵母提供了一定的依據(jù)[22]。由圖3可知,3 株非釀酒酵母對(duì)乙醇耐受性的趨勢(shì)大致相同,均是隨著酒精體積分?jǐn)?shù)的提高OD630 nm值降低。其中,東方伊薩酵母YF-12在酒精體積分?jǐn)?shù)高于12%時(shí),生長(zhǎng)完全受到抑制;發(fā)酵畢赤酵母YF-19在酒精體積分?jǐn)?shù)高于9%時(shí),生長(zhǎng)完全受到抑制;而季也蒙有孢漢遜酵母YF-28酒精耐受性最差,在酒精體積分?jǐn)?shù)高于6%時(shí),生長(zhǎng)完全受到抑制。

        圖3 非釀酒酵母菌株對(duì)酒精的耐受性Fig.3 Ethanol tolerance of non-Saccharomyces yeast strains

        2.2.3 非釀酒酵母對(duì)SO2的耐受性

        葡萄酒生產(chǎn)過(guò)程中,需加入適量的SO2達(dá)到抑制有害微生物、抗氧化以及護(hù)色等作用[23]。由圖4可知,3 株非釀酒酵母在SO2質(zhì)量濃度小于300 mg/L的范圍內(nèi),能夠很好地生長(zhǎng),且在不同質(zhì)量濃度下的生長(zhǎng)情況變化不大。這說(shuō)明3 株非釀酒酵母對(duì)SO2具有很好的耐受性。

        圖4 非釀酒酵母菌株對(duì)SO2的耐受性Fig. 4 SO2tolerance of non-Saccharomyces yeast strains

        2.3 純種發(fā)酵實(shí)驗(yàn)

        2.3.1 非釀酒酵母在純種發(fā)酵期間的生長(zhǎng)情況

        圖5 非釀酒酵母菌株在純種發(fā)酵期間的生長(zhǎng)情況Fig.5 Growth curves of non-Saccharomyces yeast strains during single species fermentation

        純種發(fā)酵開(kāi)始時(shí),將非釀酒酵母種子液稀釋到OD600 nm=1.0后接種于模擬葡萄汁中,YF-12、YF-19、YF-28的初始接種濃度分別為5.8×105、6.7×105、7.2×105CFU/mL。由圖5可知,純種發(fā)酵前2 d,各酵母菌株均大量繁殖,菌落單位數(shù)以指數(shù)形式快速增加,其中YF-12和YF-19增殖速率較快,僅在發(fā)酵第1天就已經(jīng)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),菌液濃度接近109CFU/mL。而YF-28相對(duì)較慢,在第2天才達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),且菌液濃度低于YF-12和 YF-19。在之后的發(fā)酵時(shí)期,3 株非釀酒酵母一直保持較穩(wěn)定的菌液濃度。

        2.3.2 發(fā)酵液理化指標(biāo)

        在純種發(fā)酵結(jié)束后,使用離心機(jī)離去菌體,收集上清液。取上清液分別用直接滴定法和pH計(jì)測(cè)定發(fā)酵液的殘?zhí)橇亢蚿H值,并用密度瓶法測(cè)定酒精體積分?jǐn)?shù)。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1,3 株非釀酒酵母對(duì)糖的利用率不高,但東方伊薩酵母YF-12和發(fā)酵畢赤酵母YF-19好于季也蒙有孢漢遜酵母YF-28。

        表1 酵母菌株純種發(fā)酵條件下發(fā)酵液的理化指標(biāo)Table 1 Physicochemical properties of the fermentation broths of non-Saccharommyycceess yeast strains

        2.3.3 揮發(fā)性物質(zhì)種類及含量

        表2 非釀酒酵母菌株純種發(fā)酵產(chǎn)生的揮發(fā)性化合物及其含量Table 2 Volatile compounds produced by non-Saccharommyycceess yeaasstt strains during single species fermentation

        非釀酒酵母在葡萄酒發(fā)酵過(guò)程中,不僅能產(chǎn)生多種酶類促進(jìn)香氣物質(zhì)的產(chǎn)生,其自身也能夠代謝產(chǎn)生多種香氣物質(zhì),從而達(dá)到增加葡萄酒香氣復(fù)雜性的作用[24-25]。本實(shí)驗(yàn)使用頂空固相微萃取及氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定了3 株非釀酒酵母在模擬葡萄汁中純種發(fā)酵的揮發(fā)性物質(zhì),結(jié)果如表2所示。共有24 種揮發(fā)性物質(zhì)檢出,其中醇類物質(zhì)7 種、酸類物質(zhì)4 種、酯類物質(zhì)5 種、醛酮類物質(zhì)6 種、雜環(huán)類物質(zhì)2 種。東方伊薩酵母YF-12共產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)18 種,季也蒙有孢漢酵母YF-28產(chǎn)生15 種,發(fā)酵畢赤酵母YF-19僅產(chǎn)生5 種。

        醇類化合物是葡萄酒發(fā)酵的主要產(chǎn)物,主要包括乙醇以及其他高級(jí)醇,適量的高級(jí)醇會(huì)給葡萄酒帶來(lái)良好的香氣。表2列出了3 株非釀酒酵母純種發(fā)酵產(chǎn)生醇類物質(zhì)的情況,其中發(fā)酵畢赤酵母YF-19代謝產(chǎn)生的醇類物質(zhì)最少,只能檢測(cè)到乙醇;東方伊薩酵母YF-12能夠產(chǎn)生的醇類物質(zhì)相對(duì)豐富,可以產(chǎn)生較多的乙醇和苯乙醇,且醇類物質(zhì)含量約占其產(chǎn)生總揮發(fā)性物質(zhì)的50%;季也蒙有孢漢遜酵母YF-28也能夠代謝產(chǎn)生多種醇類物質(zhì),其中主要為乙醇和1-丙醇。

        葡萄酒中含有多種有機(jī)酸,除酒石酸、蘋果酸和檸檬酸主要來(lái)源于葡萄外,其余大部分有微生物發(fā)酵生成。如表2所示,3 株非釀酒酵母產(chǎn)生的酸類物質(zhì)較少,其中YF-12代謝產(chǎn)生的酸類物質(zhì)種類最多,其中辛酸占其代謝產(chǎn)生的總酸量的71%以上;而YF-19和YF-28對(duì)酸類的代謝較差,僅能夠在發(fā)酵液中檢測(cè)出較少的癸酸。

        葡萄酒中的酯類物質(zhì)是酵母發(fā)酵的產(chǎn)物,它能夠賦予葡萄酒特殊的果香香氣。如表2所示,非釀酒酵母能夠代謝產(chǎn)生大量的酯類物質(zhì)。其中,發(fā)酵畢赤酵母YF-19產(chǎn)生酯類物質(zhì)的相對(duì)含量最多,其代謝乙酸苯乙酯的能力最強(qiáng);YF-12則能夠產(chǎn)生大量的乙酸乙酯,乙酸乙酯是葡萄酒中重要的風(fēng)味物質(zhì),其含量的多少對(duì)葡萄酒的風(fēng)味有很大影響;而季也蒙有孢漢遜酵母YF-28能夠產(chǎn)生較多的丙酸苯乙酯。

        羰基化合物和酚類物質(zhì)對(duì)葡萄酒香氣也有一定的貢獻(xiàn)。表2列舉了3 株非釀酒酵母純種發(fā)酵條件下產(chǎn)醛酮類物質(zhì)的情況,發(fā)現(xiàn)YF-28能夠代謝產(chǎn)生多種醛類物質(zhì),并且苯甲醛的相對(duì)含量最多,占總?cè)?、酮量?5%以上;而在發(fā)酵畢赤酵母YF-19的發(fā)酵液中僅能檢測(cè)出少量的壬醛;YF-12能夠產(chǎn)生相對(duì)較多的2,4-二甲基苯甲醛。

        如表2所示,3 株非釀酒酵母代謝產(chǎn)生的雜環(huán)類化合物的量都很少,發(fā)酵畢赤酵母YF-19甚至不產(chǎn)生雜環(huán)類化合物;東方伊薩酵母YF-12和季也蒙有孢漢遜酵母YF-28都能產(chǎn)生少量的苯酚,且YF-28相對(duì)含量較多。

        3 結(jié) 論

        目前大多數(shù)葡萄酒釀造采用活性干酵母接種發(fā)酵,雖然可以保證葡萄酒成品的品質(zhì),但卻使葡萄酒酒體單調(diào)、缺乏個(gè)性,相同或相近產(chǎn)區(qū)的葡萄酒風(fēng)味趨于同質(zhì)化。因此,利用現(xiàn)代技術(shù)篩選出能夠釀制出獨(dú)具特色葡萄酒的酵母菌株具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義[26]。本研究通過(guò)對(duì)季也蒙有孢漢遜酵母YF-28、東方伊薩酵母YF-12和發(fā)酵畢赤酵母YF-19這3 株非釀酒酵母的生長(zhǎng)特性、對(duì)高糖、酒精及SO2的耐受能力、發(fā)酵特性進(jìn)行比較分析,發(fā)現(xiàn)相較于發(fā)酵畢赤酵母YF-19和季也蒙有孢漢遜酵母YF-28,東方伊薩酵母YF-12在具有良好生長(zhǎng)能力及逆境耐受能力的同時(shí),能夠產(chǎn)生較為豐富的揮發(fā)性物質(zhì)。說(shuō)明東方伊薩酵母YF-12在葡萄酒釀造生產(chǎn)中具有豐富產(chǎn)品風(fēng)味、提高產(chǎn)品質(zhì)量的優(yōu)良特性,是一株頗具工業(yè)開(kāi)發(fā)潛力的非釀酒酵母菌株。

        [1] 張春芝, 江志國(guó). 微生物對(duì)葡萄酒香氣的影響綜述[J]. 中國(guó)釀造, 2013, 32(9): 28-31.

        [2] 張春暉, 李華. 葡萄酒微生物學(xué)[M]. 西安: 陜西人民出版社, 2003: 1-281.

        [3] 翟明昌, 樸永哲, 王祥余, 等. 混菌發(fā)酵中不同分子量代謝產(chǎn)物對(duì)非釀酒酵母胞內(nèi)蛋白及酒體有機(jī)酸的影響[J]. 微生物學(xué)通報(bào), 2011, 38(9): 1443-1448.

        [4] FERNANDEZ M, UBEDA J F, BRIONES A I. Typing of non-Saccharomyces yeasts with enzymatic activities of interest in winemaking[J]. International Journal of Food Microbiology, 2000, 59(1/2): 29-36.

        [5] CHATONNET P, DUBOURDIEU D, BOIDRON J N. The infl uence of Brettanomyces/Dekkera sp. yeasts and lactic acid bacteria on the ethylphenol content of red wines[J]. American Journal Enology Viticulture, 1995, 46: 463-468.

        [6] ROMANO P, SUZZI G, COMI G, et al. Higher alcohol and acetic acid production by apiculate wine yeasts[J]. Journal of Applied Microbiology, 1995, 73: 126-130.

        [7] FERREIRA A M, CLOMACO M C, FAIA A M. The role of non-Saccharomyces species in releasing glycosidic bound fraction of grape aroma components: a preliminary study[J]. Journal of Applied Microbiology, 2001, 91: 67-71.

        [8] VIANA F, GIL J V, GENOVéS S, et al. Rational selection of non-Saccharomyces wine yeasts for mixed starters based on ester formation and enological traits[J]. Food Microbiology, 2008, 25(6): 778-785.

        [9] JOHNSON E A. Biotechnology of non-Saccharomyces yeasts: the ascomycetes[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2013, 97: 503-517.

        [10] ASSIS M O, SANTOS A P C, ROSA C A, et al. Impact of a non-Saccharomyces yeast isolated in the equatorial region in the acceptance of wine aroma[J]. Food and Nutrition Sciences, 2014, 5(9): 759-769.

        [11] 徐亞男, 劉秋萍, 李琦, 等. GC-MS對(duì)非釀 酒酵母菌發(fā)酵赤霞珠葡萄酒香氣成分的檢測(cè)[J]. 中國(guó)釀造, 2014, 33(6): 135-139.

        [12] 劉麗媛, 劉延琳, 李華. 葡萄酒香氣化學(xué)研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué), 2011, 32(5): 310-316.

        [13] 林文華,游雪燕,馮濤. 對(duì)葡萄酒酒香酵母屬不良風(fēng)味抑制的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)釀造, 2013, 32(5): 5-8.

        [14] 李慧, 王惠玲, 吳雅琨, 等. 天然葡萄酒酵母菌種的分離, 鑒定和釀造性能評(píng)價(jià)[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè), 2010, 36(11): 14-20.

        [15] 易弋, 伍時(shí)華. 酒精耐受性酵母菌的篩選[J]. 廣西工學(xué)院學(xué)報(bào), 2008, 19(3): 42-46.

        [16] MOREIRA N, MENDES F, de PINHO P G, et al. Heavy sulphur compounds, higher alcohols and esters production profile of Hanseniaspora uvarum and Hanseniaspora guilliermondii grown as pure and mixed cultures in grape must[J]. International Journal of Food Microbiology, 2008, 124(3): 231-238.

        [17] 全國(guó)食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)釀酒分技術(shù)委員會(huì). GB/T 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法[S]. 北京: 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2007.

        [18] 李雙石, 李浡, 吳志明, 等. 不同酵母發(fā)酵對(duì)葡萄酒香氣成分的影響[J].食品研究與開(kāi)發(fā), 2012, 33(11): 14-18.

        [19] 娜日蘇, 蘇亞拉圖, 高鳳芹. 耐高溫耐酸耐酒精酵母的篩選與鑒定[J].草葉科學(xué), 2013, 30(10): 1625-1632.

        [20] 薛軍俠, 徐艷文, 楊瑩, 等. 野生釀酒酵母耐受性分析[J]. 釀酒科技, 2007(6): 45-47.

        [21] PINA C, SANTOS C, COUTO J A, et al. Ethanol tolerance of non-Saccharomyces wine yeasts in comparison with a strain of Saccharomyces cerevisiae-infl uence of different culture conditions[J]. Food Microbiology, 2004, 21: 439-447.

        [22] ROJAS V, GIL J, PI?AGA F, et al. Acetate ester formation in wine by mixed cultures in laboratory fermentations[J]. International Journal of Food Microbiology, 2003, 86: 181-188.

        [23] 苑偉, 王學(xué)鋒, 劉延琳. 優(yōu)選釀酒酵母菌株發(fā)酵性能研究[J]. 中國(guó)釀造, 2010, 29(9): 48-52.

        [24] VILLENA M A, IRANZO J F U, PéREZ A I B. β-Glucosidase activity in wine yeasts: application in enology[J]. Enzyme and Microbial Technology, 2007, 40(3): 420-425.

        [25] ROMANO P, FIORE C, PARAGGIO M, et al. Function of yeast species and strains in wine flavor[J]. International Journal of Food Microbiology, 2003, 86: 169-180.

        [26] DOMIZIO P, ROMANI C, COMITINI F, et al. Potential spoilage non-Saccharomyces yeasts in mixed cultures with Saccharomyces cerevisiae[J]. Annals of Microbiology, 2011, 61: 137-144.

        Growth and Fermentation Characteristics of Three Non-Saccharomyces Wine Yeasts

        YU Yang, SU Chunyan, CHEN Jingyu*(College of Food Science and Nutritional Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China)

        Non-Saccharomyces wine yeasts, widely present on grapes and winemaking equipment, have important effects on wine composition, aroma and flavor. To develop non-Saccharomyces yeasts for industrial winemaking, the growth and fermentation characteristics of three indigenous non-Saccharomyces strains, Issatchenkia orientalis YF-12, Pichia fermentans YF-19 and Hanseniaspora guilliermondii YF-28, were evaluated. The results showed that I. orientalis YF-12 and P. fermentans YF-19 grew better. All of the three strains revealed a certain tolerance to high concentrations of glucose and SO2. H. guilliermondii YF-28 had poorer tolerance to ethanol. The volatile compound analysis was performed after single species fermentation. The results showed that I. orientalis YF-12 and H. guilliermondii YF-28 produced more volatile compounds than P. fermentans YF-19. Our present study shows the potential of I. orientalis YF-12 as a promising candidate for winemaking.

        non-Saccharomyces; growth characteristics; pure culture fermentation; volatile compounds

        Q939.9

        A

        1002-6630(2015)19-0106-06

        10.7506/spkx1002-6630-201519019

        2014-11-03

        國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31101237);國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)(葡萄)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(nycytx-30-ch-03)

        于洋(1987-),男,碩士研究生,研究方向?yàn)榘l(fā)酵工程。E-mail:yuyangcarrot@163.com

        *通信作者:陳晶瑜(1978-),女,副教授,博士,研究方向?yàn)槭称肺⑸飳W(xué)。E-mail:chenjy@cau.edu.cn

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