胡貴賓，釋艷華

(襄陽市中心血站，湖北襄陽441021)

·輸血與檢驗(yàn)·

無償獻(xiàn)血前梅毒抗體膠體金法快速篩查的探討

胡貴賓，釋艷華

(襄陽市中心血站，湖北襄陽441021)

目的對(duì)膠體金法快速檢測(cè)獻(xiàn)血者梅毒螺旋體抗體進(jìn)行適用性評(píng)價(jià)。方法使用ELISA-TP檢測(cè)襄陽市中心血站2015年1月-5月的無償獻(xiàn)血者23666例血液標(biāo)本，陽性標(biāo)本再分組進(jìn)行梅毒螺旋體膠體金法快速檢測(cè)。結(jié)果ELISA-TP陽性率為0.418%，其中單試劑陽性標(biāo)本40例，膠體金法無一例檢出；ELISA-TP雙試劑陽性且S/CO 0.8～5.0的弱陽性標(biāo)本14例，膠體金法的檢出率為14.29%；ELISA-TP雙試劑陽性且S/CO＞5.0的標(biāo)本45例，膠體金法的檢出率為95.56%；平均檢出率為45.45%。結(jié)論膠體金法用于采血前初篩，對(duì)降低梅毒實(shí)驗(yàn)室淘汰率有顯著意義；但梅毒初篩結(jié)果的告知沒有適當(dāng)?shù)膱?chǎng)所，因此，獻(xiàn)血前梅毒初篩應(yīng)謹(jǐn)慎開展。

膠體金法；無償獻(xiàn)血；梅毒抗體

膠體金快速診斷試紙法具有簡(jiǎn)便快捷、不需要特殊儀器等優(yōu)點(diǎn)[1]，目前被很多血站應(yīng)用于采血現(xiàn)場(chǎng)獻(xiàn)血前對(duì)獻(xiàn)血者的初篩[2，3]，初篩項(xiàng)目主要是HBsAg。本文擬通過TP膠體金試紙對(duì)TP陽性樣本的檢出情況及現(xiàn)場(chǎng)操作情況，初步評(píng)價(jià)其在襄陽地區(qū)獻(xiàn)血者初篩的意義。

1 材料與方法

1．1標(biāo)本來源所有血液標(biāo)本均來自襄陽市中心血站2015年1月-5月的無償獻(xiàn)血者所獻(xiàn)血液。

1．2試劑梅毒螺旋體抗體膠體金診斷試劑(英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司，批號(hào)2014023304)；梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑盒(北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)N20130712、N20131219；英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司，批號(hào)2013097523、2013127531)。

1．3儀器Xantus全自動(dòng)加樣系統(tǒng)，F(xiàn)ame全自動(dòng)酶免后處理分析儀，Uranus全自動(dòng)加樣及酶免處理系統(tǒng)，DD-5M低溫高速離心機(jī)，移液器(法國(guó)吉爾森公司)等。

1．4方法

1.4.1 采用ELISA-TP診斷試劑盒檢測(cè)2015年1月-5月的無償獻(xiàn)血者23666例血液標(biāo)本中的抗-TP，初試OD≥0.8×Cutoff的標(biāo)本視為可疑標(biāo)本，萬泰和新創(chuàng)試劑盒檢測(cè)均可疑的標(biāo)本采用兩種試劑分別單孔復(fù)試，任一孔陽性視為陽性標(biāo)本；萬泰或新創(chuàng)試劑盒檢測(cè)可疑的標(biāo)本采用單種試劑雙孔復(fù)試，任一孔陽性視為陽性標(biāo)本。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)分組將樣本用ELISA試劑檢測(cè)后的陽性標(biāo)本依據(jù)其陽性類型和S/CO值分為A、B、C三組。A組為ELISA單試劑陽性，S/CO≥0.8；B組為ELISA雙試劑陽性，S/CO 0.8～5.0；C組為ELISA雙試劑陽性，S/CO＞5.0。

1.4.3 采用TP膠體金試劑，檢測(cè)本實(shí)驗(yàn)室酶聯(lián)免疫法抗-TP結(jié)果為陽性的血漿標(biāo)本。按說明書要求，加樣量為60～80μl，反應(yīng)溫度為22℃。結(jié)果判定：測(cè)試卡在檢測(cè)區(qū)和對(duì)照區(qū)位置出現(xiàn)兩條紫紅色條帶判定為陽性；測(cè)試卡只在對(duì)照區(qū)位置出現(xiàn)一條紫紅色條帶判定為陰性；對(duì)照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶判定為失效，結(jié)果判定時(shí)間為15min。

2 結(jié)果

2.1 2015年1月-5月23666例無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本中的抗-TP陽性標(biāo)本為99例，陽性率為0.418%。

2.2 A組膠體金法和酶聯(lián)免疫法陽性符合率為0，B組陽性符合率為14.29%，C組陽性符合率為95.56%，三組平均符合率為45.45%。詳見表1。

表1 膠體金法與ELISA法檢測(cè)99例血清TP抗體結(jié)果比較

3 討論

從表1可知，對(duì)99例ELISA-TP檢測(cè)陽性標(biāo)本分組進(jìn)行膠體金法檢測(cè)，ELISA單試劑陽性的40份標(biāo)本，膠體金法無一例檢出。ELISA雙試劑陽性且S/CO 0.8～5.0的弱陽性標(biāo)本，膠體金法的檢出率僅為14.29%，且其中一部分標(biāo)本在15min判讀時(shí)，陽性條帶相對(duì)較弱。ELISA雙試劑陽性且S/ CO＞5.0的強(qiáng)陽性標(biāo)本，膠體金法的檢出率為95.56%。

ELISA法是目前血站系統(tǒng)最常用的梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法，它采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸咐實(shí)驗(yàn)原理，用基因工程方法生產(chǎn)的TP抗原TP47和TmpA包被微孔板，檢測(cè)血清中的梅毒螺旋體特異性抗體，具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)[4-6]。膠體金法采用膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)和層析原理，定性檢測(cè)血漿樣本中的梅毒螺旋體抗體，不需要特殊設(shè)備，方便單人份檢測(cè)，具有快速，簡(jiǎn)便的特點(diǎn)[7，8]，已被很多血站用于街頭采血初篩。但是膠體金法靈敏度差，弱陽性多，容易出現(xiàn)漏檢；溶血及脂血的影響也會(huì)出現(xiàn)假陰性[9]。且本實(shí)驗(yàn)是在有相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，可以提供良好的反應(yīng)條件，準(zhǔn)確判讀弱陽性結(jié)果，但是如果在室外采血車或采血屋操作，由于溫度、濕度、光線、反應(yīng)時(shí)間等各方面的條件都不可控，就會(huì)出現(xiàn)極弱陽性的標(biāo)本顯不出條帶，較弱的陽性條帶就會(huì)誤判為陰性而漏檢。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，膠體金法檢測(cè)抗-TP陽性標(biāo)本的平均符合率僅為45.45%，襄陽地區(qū)梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)淘汰率為0.418%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于成都、廣西沿海萍鄉(xiāng)地區(qū)[10]。如果用于街頭采血初篩，將無法明顯降低梅毒實(shí)驗(yàn)室淘汰率，反而增加了血液檢測(cè)成本和工作量。

由于受街頭獻(xiàn)血環(huán)境的限制，對(duì)獻(xiàn)血者結(jié)果解釋沒有專門場(chǎng)所，給梅毒這個(gè)敏感結(jié)果的告知帶來麻煩。因此，無償獻(xiàn)血前進(jìn)行梅毒抗體膠體金法快速篩查，應(yīng)謹(jǐn)慎開展。

[1]徐樹良，趙源源，蔣理，等．金標(biāo)法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體的適用性分析[J]．中國(guó)輸血雜志，2004，17(3)：l59．

[2]徐長(zhǎng)根，朱陽泉，李浩，等．膠體金免疫層析法快速篩查獻(xiàn)血者梅毒螺旋體抗體[J]．臨床輸血與檢驗(yàn)，2009，11(3)：234-235．

[3]金志堅(jiān)，倪波，石潔，等．應(yīng)用梅毒膠體金法檢測(cè)獻(xiàn)血者中的梅毒抗體[J]．中國(guó)輸血雜志，2000，13(4)：248-249．

[4]梁慶華．3種方法聯(lián)合檢測(cè)在老年梅毒診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2009，6(7)：498-499．

[5]秦紅群，馬順高．梅毒螺旋體抗體篩查實(shí)驗(yàn)的選擇[J]．中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2008，46(28)：146-147．

[6]張波．幾種梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法的比較與分析[J]．實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31（2）：173-175．

[7]程玉根，唐郁．膠體金試劑檢測(cè)梅毒抗體在獻(xiàn)血者篩查中的應(yīng)用[J]．中國(guó)輸血雜志，2009，22(6)：473-474．

[8]張波.幾種梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法的比較與分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，31(2)：173-175.

[9]靳達(dá)芳．梅毒抗體的膠體金法檢測(cè)及弱陽性影響因素分析[J]．白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2013，11(1)：84-85．

[10]鄧日富，彭繼紅.萍鄉(xiāng)地區(qū)無償獻(xiàn)血人群中梅毒抗體陽性反應(yīng)情況調(diào)查[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(3)：297-298.

R446.62，R759.1，R193.3

A

1674-1129(2015)06-0828-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2015.06.055

2015-08-17；

2015-10-13)

釋艷華，E-mail：200745785@qq.com。