董曉蕾　張霽　趙艷麗　金航　王元忠

摘要：采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法（ICP-AES）測(cè)定滇龍膽（Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.）與不同樹(shù)齡（3年、4年、5年、9年、12年和15年）茶樹(shù)（Camellia sinensis）套種后其根、莖、葉3個(gè)部位及生長(zhǎng)土壤中7種礦質(zhì)元素（B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni和Zn）的含量。結(jié)果顯示，滇龍膽中礦質(zhì)元素平均含量高低順序?yàn)镃a（5 238±2 111）μg/g、Fe（622±238）μg/g、Mn（379±301） μg/g、Cu（75±9.1） μg/g、Zn（46±13） μg/g、B（17±4.9） μg/g、Ni（5.6±3.1） μg/g，與土壤礦質(zhì)元素含量變化趨勢(shì)基本一致。根部的B、Ca、Fe、Mn、Ni元素在樹(shù)齡15年茶樹(shù)-滇龍膽套種后含量最高，分別為18、3 797、1 050、254、11 μg/g，Cu、Zn元素在樹(shù)齡12年的茶樹(shù)-滇龍膽套種中含量最高，分別為244、38 μg/g。相同營(yíng)養(yǎng)器官不同樹(shù)齡的茶樹(shù)-滇龍膽套種后礦質(zhì)元素含量具有差異，以根部的Cu、Mn元素含量差異顯著，變化范圍分別為19～244 μg/g和79～254 μg/g，分別相差12.8倍和3.2倍；樹(shù)齡15年、9年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后莖部的Cu含量分別為177、11 μg/g，相差16.1倍；樹(shù)齡3年、5年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后葉部的Cu含量分別為325、11 μg/g，相差29.5倍。不同樹(shù)齡的茶樹(shù)-滇龍膽套種后根部與土壤礦質(zhì)元素的相關(guān)性以及生物富集系數(shù)不同，樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后根部對(duì)Ca、Cu、Mn、Ni、Zn元素的富集能力較強(qiáng)，生物富集系數(shù)分別達(dá)21.0、3.3、2.2、1.8和4.7。說(shuō)明茶樹(shù)復(fù)合種植可改變土壤礦質(zhì)元素的分布，自身生物學(xué)特性與復(fù)合種植的生態(tài)環(huán)境共同影響了滇龍膽對(duì)礦質(zhì)元素吸收與運(yùn)輸?shù)哪芰Α?/p>

關(guān)鍵詞：滇龍膽（Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.）；茶樹(shù)（Camellia sinensis）；復(fù)合種植；土壤；礦質(zhì)元素

中圖分類(lèi)號(hào)：S662.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）22-5641-06

Abstract： Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl. is an important plant resource in China， analyzing the effects of compound planting on the mineral elements content in G. rigescens and Camellia sinensis of different growing years has significantly ecological and economic benefits for the sustainable development of agriculture in medicinal plants in China and provide basic data for quality control cultivation technology research of G. rigescens. 7 mineral elements （B， Ca， Cu， Fe， Mn， Ni and Zn） content in G. rigescens （root， steam and leaf） intercropped with C. sinensis of different growth years （3-year， 4-year， 5-year， 9-year， 12-year and 15-year） and the corresponding underlying soil were determined by inductively coupled plasma atomic emission spectrometry（ICP-AES）. Results the sequence of average element content in G. rigescens is Ca （5 238±2 111） μg/g， Fe（622±238） μg/g， Mn（379±301） μg/g， Cu（75±9.1） μg/g，Zn （46±13） μg/g， B （17±4.9） μg/g， Ni （5.6±3.1） μg/g， which is consistent with the change tendency of mineral elements content in the soil. In the root， the sample intercropping with C. sinensis of 15-year had the highest content of B， Ca， Fe， Mn and Ni， which was 18 μg/g， 3 797 μg/g， 1 050 μg/g， 254 μg/g and 11 μg/g， respectively. The sample intercropping with C. sinensis of 12-year had the highest content of Cu and Zn， which was 244 μg/g and 38 μg/g， respectively. Mineral elements content in the same organ in G. rigescens intercropping with C. sinensis of different growth years were significantly different， especially the content of Cu and Mn in root， and the variation range were 19 to 244 μg/g and 79 to 254 μg/g， respectively， with a difference of 12.8 times and 3.2 times respectively. The content of Cu in the steam of G. rigescens intercropping with C. sinensis of 15-year and 9-year were 177 μg/g and 11 μg/g， respectively， with a difference of 16.1 times. The content of Cu in the leaf of G. rigescens intercropping with C. sinensis of 3-year and 5-year were 325 μg/g and 11 μg/g， respectively， with a difference of 29.5 times. The relationship and the bioconcentration factors of mineral elements were different in the sample intercropping with C. sinensis of different growth years， the bioconcentration factors of Ca， Cu， Mn， Ni and Zn were higher in the root of the sample intercropping with C. sinensis of 15-year，as the bioconcentration factors is 21.0，3.3，2.2，1.8 and 4.7， respectively. G. rigescens intercropping with C. sinensis can change the soil mineral elements distribution，and the biological characteristics of G. rigescens and the ecological environment can affect the absorption of mineral elements and transport capacity.

Key words： Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.； Camellia sinensis； multiple cropping；soil；mineral elements

中藥材與農(nóng)林作物進(jìn)行復(fù)合種植是對(duì)傳統(tǒng)中藥材種植模式的優(yōu)化，這是根據(jù)不同生物學(xué)生態(tài)學(xué)特性和生態(tài)位原理，充分利用它們?cè)谏L(zhǎng)過(guò)程中的空間差和時(shí)間差，將中藥材與農(nóng)林作物進(jìn)行間作、混作、套種等復(fù)合種植的生產(chǎn)方式，其對(duì)于充分利用水土環(huán)境和光熱資源、發(fā)揮生物間的共生互補(bǔ)作用、提高種植系統(tǒng)的生態(tài)經(jīng)濟(jì)總體效益、促進(jìn)中藥事業(yè)的可持續(xù)發(fā)展等方面都具有積極的意義。復(fù)合種植使植物生長(zhǎng)環(huán)境的光照、溫度、水分等氣候條件發(fā)生變化，形成適宜生長(zhǎng)的小氣候。光照、溫度、濕度、土壤有機(jī)物、土壤pH等環(huán)境因素[1]及生物學(xué)特性、礦質(zhì)元素轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制等內(nèi)在因素影響著植物對(duì)礦質(zhì)元素的吸收和積累能力。Gove等[2]研究發(fā)現(xiàn)，遏藍(lán)菜（Thlaspi caerulescens J. et C. Presl.）與大麥（Hordeum vulgare L.）間作時(shí)大麥對(duì)Zn的吸收顯著降低；Liu等[3]研究發(fā)現(xiàn)，玉米（Zea mays L.）與東南景天（Sedum alfredii Hance）間作可顯著降低玉米對(duì)Cu和Zn的吸收；Li等[4]研究了玉米與7種豆科（Leguminosae）植物間作Cd元素積累的影響，發(fā)現(xiàn)大部分豆科植物均可顯著提高玉米對(duì)Cd元素的吸收。

植物的生長(zhǎng)年限影響立地土壤理化性狀及質(zhì)量變化，土壤作為重要的環(huán)境因子，是植物體內(nèi)礦質(zhì)元素的主要來(lái)源，影響著植物對(duì)礦質(zhì)元素的吸收和積累[5-7]。復(fù)合種植方式可改變植物生長(zhǎng)的小環(huán)境，增加地上部生物多樣性，影響地上部生態(tài)功能，改變根際微生物數(shù)量、土壤酶活性、pH等，間接改變土壤中礦質(zhì)元素的有效性，影響植物對(duì)礦質(zhì)元素的吸收利用[8]。茶樹(shù)（Camellia sinensis）與草本植物復(fù)合種植后，茶園覆蓋度增加，土壤有機(jī)質(zhì)含量提升，肥力升高[9，10]。不同樹(shù)齡的茶園土壤微生物區(qū)系、多樣性、酶活性和理化性狀變化顯著[7]。但是茶樹(shù)種植年限越長(zhǎng)，土壤酸化現(xiàn)象越嚴(yán)重[11]。微生物通過(guò)酸化作用影響土壤中礦質(zhì)元素的移動(dòng)性能，改變植物對(duì)礦質(zhì)元素的吸收能力，同時(shí)也改變礦質(zhì)元素在植物體內(nèi)的運(yùn)輸能力[12]。

滇龍膽（Gentiana rigescens Franch. ex Hemsl.）在云南省有著悠久的藥用歷史，主要用于治療肝膽患疾、皮膚病、慢性支氣管炎、急性咽炎、呼吸道感染等疾病[13，14]，是中國(guó)重要的資源植物，主要分布于云南、貴州、四川、湖南等省，是云南省10個(gè)重要瀕危藥用植物種類(lèi)之一，已被列為國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生藥材物種（三級(jí)）[15]。隨著國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)滇龍膽藥材需求量的不斷增加，加重了野生藥材的過(guò)度采挖，使其分布的范圍和種群規(guī)模日益縮小。也使得相關(guān)研究和保護(hù)工作更具有緊迫性，如何進(jìn)一步發(fā)揮復(fù)合種植優(yōu)勢(shì)、提高滇龍膽資源利用效率也就備受關(guān)注[16]。前人關(guān)于復(fù)合種植對(duì)滇龍膽生長(zhǎng)和藥效成分影響的報(bào)道較多，Zhang等[17]研究認(rèn)為，茶樹(shù)與滇龍膽復(fù)合種植對(duì)滇龍膽種子萌發(fā)、胚芽和胚根生長(zhǎng)抑制作用影響最小。楊美權(quán)等[18]認(rèn)為木瓜[Chaenomeles speciosa（Sweet）Nakai]-茶樹(shù)-滇龍膽套種后，滇龍膽根部的龍膽苦苷含量最高，三年生茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽體內(nèi)的龍膽苦苷含量最低。不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種對(duì)滇龍膽礦質(zhì)元素含量的研究未見(jiàn)報(bào)道。為弄清不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種的效果，試驗(yàn)運(yùn)用ICP-AES法對(duì)不同樹(shù)齡（3年、4年、5年、9年、12年和15年）茶樹(shù)與滇龍膽套種所產(chǎn)的滇龍膽根、莖、葉中B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn元素的含量進(jìn)行了測(cè)定分析，以期為滇龍膽藥材品質(zhì)的提升及生態(tài)復(fù)合種植技術(shù)的研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 ICPE-9000型電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀（日本島津公司）；Ethos One微波消解儀（意大利Milestone公司）；UPT-I-10L超純水處理器（成都優(yōu)越科技有限公司）；AR1140分析天平（梅特勒-托利多公司）。

1.1.2 試劑 B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn元素國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物溶液（濃度為1 000 μg/mL）和菠菜國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，根據(jù)測(cè)定需要配制成不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液；硝酸（優(yōu)級(jí)純）、過(guò)氧化氫（分析純）均購(gòu)自廣東西隴化工股份有限公司；高氯酸（有機(jī)純）購(gòu)自天津政成化學(xué)制品有限公司；氫氟酸（分析純）購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 方法

1.2.1 儀器工作參數(shù) 高頻發(fā)生器功率1 200 W，載氣流量0.7 L/min，輔助氣流量0.6 L/min。

1.2.2 滇龍膽樣品制備及測(cè)定 樹(shù)齡3年、4年、5年、9年、12年和15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種所產(chǎn)的滇龍膽樣品均采自云南省臨滄市。樣品分別用自來(lái)水、去離子水沖洗干凈后晾干，60 ℃烘干后粉碎，過(guò)100目篩備用。準(zhǔn)確稱(chēng)取0.500 0 g滇龍膽樣品，置于聚四氟乙烯消解罐中，加入8 mL硝酸，2 mL過(guò)氧化氫，1 mL去離子水，放于微波消解系統(tǒng)轉(zhuǎn)盤(pán)上，進(jìn)行樣品消解，消解程序設(shè)置見(jiàn)表1。待消解樣品冷卻至室溫后，轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，用去離子水定容，搖勻，樣品一式6份。用同樣的方法制備并測(cè)定菠菜（Spinacia oleracea L.）標(biāo)準(zhǔn)物樣品與空白溶液。采用ICP-AES方法分別檢測(cè)滇龍膽樣品和標(biāo)準(zhǔn)物中的無(wú)機(jī)元素B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn，得到各元素的特征波長(zhǎng)信息，進(jìn)一步定量滇龍膽中無(wú)機(jī)元素B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn的含量。

1.2.3 土壤樣品制備及測(cè)定 土壤樣品采用五點(diǎn)取樣法挖取滇龍膽植株根系生長(zhǎng)周?chē)?0～40 cm深的土壤，混合均勻后陰干，研碎后過(guò)100目篩備用。準(zhǔn)確稱(chēng)取0.100 0 g土壤樣品于聚四氟乙烯消解罐中，加入5 mL硝酸、1 mL高氯酸，置于通風(fēng)櫥內(nèi)的電熱板上加熱（160～170 ℃）消解至硝酸揮發(fā)完，可見(jiàn)部分高氯酸因分解出現(xiàn)大量白煙。樣品為糊狀時(shí)，取下消解罐冷卻。消解罐內(nèi)添加5 mL氫氟酸和1 mL高氯酸置于通風(fēng)櫥內(nèi)的電熱板上加熱（210～220 ℃），使硅酸鹽等物質(zhì)分解后，繼續(xù)加熱至剩余的氫氟酸和高氯酸被揮發(fā)盡。停止冒白煙后，取下冷卻。加入鹽酸5 mL，繼續(xù)加熱至殘?jiān)芙?。取下冷卻后轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，用去離子水定容，搖勻，得供試品溶液，樣品平行6份，分別測(cè)定土壤樣品中的無(wú)機(jī)元素B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn含量，同時(shí)備空白溶液1份。

1.2.4 方法學(xué)考察 采用ICP-AES法測(cè)定微波消解后的菠菜國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW10015）樣品的無(wú)機(jī)元素含量，重復(fù)6次，比較測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值的差異，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法考察測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值的線性關(guān)系，并計(jì)算回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、相關(guān)系數(shù)、檢出限等，考察試驗(yàn)方法的精密度和準(zhǔn)確度。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用Microsoft Office Excel 2003軟件進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，再用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 土壤中的礦質(zhì)元素含量

不同樹(shù)齡茶樹(shù)與滇龍膽套種后滇龍膽植株根系周?chē)寥乐械V質(zhì)元素含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。從表2可見(jiàn)，土壤中礦質(zhì)元素B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn的平均含量水平及高低排序依次為Fe（27 784±2 853） μg/g、Ca（287±13） μg/g、Mn（121±21）μg/g、B（24±2.8） μg/g、Zn（13±3.8） μg/g、Cu（7.8±3.2） μg/g、Ni（7.4±1.9） μg/g，并且茶樹(shù)樹(shù)齡影響土壤中礦質(zhì)元素的含量。不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種后土壤里的Zn元素在各個(gè)樹(shù)齡之間均存在顯著性差異（P<0.05），以15年樹(shù)齡的茶樹(shù)-滇龍膽套種的土壤中Zn含量最低，僅為7.9 μg/g，3年樹(shù)齡的茶樹(shù)-滇龍膽套種的土壤中Zn含量最高，為18.0 μg/g。說(shuō)明長(zhǎng)期種植茶樹(shù)后會(huì)導(dǎo)致土壤酸化，不同程度的酸化使礦質(zhì)元素的分布與平衡也在發(fā)生變化，從而影響土壤中礦質(zhì)元素的含量[19]。

2.2 滇龍膽中的礦質(zhì)元素含量

不同樹(shù)齡茶樹(shù)與滇龍膽套種后滇龍膽植株不同部位礦質(zhì)元素的含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。從表3可見(jiàn)，滇龍膽植株中的礦質(zhì)元素B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn的平均含量水平及高低排序依次為Ca（5 238±2 111） μg/g、Fe（622±238） μg/g、Mn（379±301） μg/g、Cu（75±9.1） μg/g、Zn（46±13） μg/g、B（17±4.9） μg/g、Ni（5.6±3.1） μg/g，與Archana Kolasani等[20]測(cè)定的50種藥用植物不同營(yíng)養(yǎng)器官中礦質(zhì)元素含量變化趨勢(shì)一致。在滇龍膽根部礦質(zhì)元素含量上，變化趨勢(shì)高低排序幾乎為Ca、Fe、Mn、Cu、Zn、B、Ni；而樹(shù)齡12年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后根部的Cu含量大于Mn，15年的根部Zn含量大于Cu。根部以樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后B、Ca、Fe、Mn、Ni元素的含量最高，分別為18、3 797、1 050、254、11 μg/g；樹(shù)齡12年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后Cu、Zn含量最高，分別為244、38 μg/g。莖部礦質(zhì)元素以樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后Ca、Cu、Fe、Mn、Ni元素含量最高，分別為6 528、177、517、454、8.2 μg/g。

植物不同器官的生理機(jī)能不同，化學(xué)元素尤其是營(yíng)養(yǎng)元素的分布也就具有差異；并且相同種植環(huán)境里不同營(yíng)養(yǎng)器官的礦質(zhì)元素含量也具有差異，通常葉部的元素含量高于莖部[21]。如試驗(yàn)里不同樹(shù)齡的茶樹(shù)-滇龍膽套種后的Mn、Fe元素，樹(shù)齡3年、4年、5年、9年和12年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后的Ca元素，樹(shù)齡3年、4年、9年、12年和15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后的B元素等，在葉部的含量均高于莖部相應(yīng)的元素含量。

植物同一器官在不同的生長(zhǎng)年限（年齡）也會(huì)對(duì)化學(xué)元素的含量產(chǎn)生影響。試驗(yàn)里滇龍膽植株各個(gè)器官的礦質(zhì)元素含量在不同樹(shù)齡的茶樹(shù)-滇龍膽套種模式下差異很大，如根部的Cu元素含量變化范圍在19 μg/g （樹(shù)齡15年）～244 μg/g（樹(shù)齡12年），兩者相差12.8倍；Mn元素含量變化范圍在79 μg/g （樹(shù)齡4年）～254 μg/g（樹(shù)齡15年），兩者相差3.2倍。莖部的Cu元素含量變化范圍在11 μg/g（樹(shù)齡9年）～177 μg/g（樹(shù)齡15年），兩者相差16.1倍。葉部的Cu元素含量變化范圍在11 μg/g（樹(shù)齡5年）～325 μg/g（樹(shù)齡3年），兩者相差29.5倍。

2.3 種植土壤與不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種的滇龍膽在礦質(zhì)元素含量方面的相關(guān)性分析

根部是滇龍膽的主要藥用部位，6個(gè)樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種的滇龍膽根部礦質(zhì)元素含量與生長(zhǎng)環(huán)境土壤里礦質(zhì)元素含量的相關(guān)性分析情況見(jiàn)表4。從表4可見(jiàn)，樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部礦質(zhì)元素含量與土壤里的Ca元素含量呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.947。樹(shù)齡3年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部礦質(zhì)元素含量與土壤里的B、Ca、Mn元素含量呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.930、0.996和0.932，與土壤中的Fe元素含量呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.889。樹(shù)齡12年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部礦質(zhì)元素含量與土壤中的Cu、Ni元素含量呈顯著正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.908、0.842，與土壤中的B元素含量呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為-0.854。其余各元素在滇龍膽根部礦質(zhì)元素含量與土壤里礦質(zhì)元素含量之間不具有顯著的相關(guān)關(guān)系。

2.4 不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種的滇龍膽礦質(zhì)元素生物富集能力比較分析

生物富集系數(shù)（Bioconcentration factor，BCF）是指植物體內(nèi)某種元素含量與其產(chǎn)地土壤中同種元素含量的比值，反映出植物對(duì)土壤元素的富集能力。6個(gè)樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種的滇龍膽根部對(duì)礦質(zhì)元素含量富集能力的分析情況見(jiàn)表5。由表5可知，6個(gè)樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根對(duì)Ca、Cu、Zn元素的富集能力較強(qiáng)，尤其是Ca、Cu元素，其中Ca元素的富集系數(shù)在5.1～21.0，Cu元素的富集系數(shù)在3.3～35.0。樹(shù)齡3年、樹(shù)齡9年、樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部對(duì)Mn元素的富集能力較強(qiáng)，富集系數(shù)分別為1.20，1.20和2.20。Ni元素在樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后富集系數(shù)>1，其余種植模式下藥材的Ni元素富集能力較小（BCF在0.45～0.90）。不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部對(duì)B、Fe元素的富集系數(shù)均<1。比較而言，樹(shù)齡9年、15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部對(duì)礦質(zhì)元素的富集能力較強(qiáng)。楊美權(quán)等[18]比較了樹(shù)齡3年、10年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根部的龍膽苦苷含量，結(jié)果是樹(shù)齡10年的套種模式下根部的龍膽苦苷含量較高。中藥中的有效化學(xué)成分可以是其中的某種或某幾種有機(jī)成分或無(wú)機(jī)成分，也有可能是它們之間反應(yīng)所形成的配合物[22，23]。滇龍膽有效化學(xué)成分含量的差別可能與不同樹(shù)齡茶樹(shù)復(fù)合種植栽培小環(huán)境的改變有關(guān)，但要確定茶樹(shù)-滇龍膽套種的茶樹(shù)合理樹(shù)齡還需進(jìn)一步深入研究。

2.5 方法學(xué)考察

采用ICP-AES方法對(duì)菠菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品的B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn元素含量進(jìn)行測(cè)定，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法考察測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值的線性關(guān)系，進(jìn)而考察試驗(yàn)方法的精密度和準(zhǔn)確度，結(jié)果分別見(jiàn)表6、表7。從表6可見(jiàn)，測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值的B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn元素回收率在96%～102%、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差都小于5%，表明測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)值基本一致，符合試驗(yàn)方法的精密度要求。從表7可見(jiàn)，B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn元素的線性范圍都在合理區(qū)間內(nèi)，相關(guān)系數(shù)在0.999 1～0.999 9，檢出限符合準(zhǔn)確度要求，表明試驗(yàn)選擇的檢測(cè)方法其精密度和準(zhǔn)確度均良好。

3 小結(jié)

茶樹(shù)-滇龍膽套種后可改變土壤礦質(zhì)元素含量的分布，影響礦質(zhì)元素在植物體內(nèi)的吸收與運(yùn)輸能力。套種后滇龍膽植株中的礦質(zhì)元素B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn的平均含量水平及高低排序依次為Ca（5 238±2 111） μg/g、Fe（622±238） μg/g、Mn（379±301） μg/g、Cu（75±9.1） μg/g、Zn（46±13） μg/g、B（17±4.9） μg/g、Ni（5.6±3.1） μg/g，

根部是滇龍膽的主要藥用部位，樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后根部B、Ca、Fe、Mn、Ni元素的含量較高，樹(shù)齡12年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后根部Cu、Zn元素的含量較高。土壤與滇龍膽中的礦質(zhì)元素含量變化趨勢(shì)基本一致，樹(shù)齡3年、12年、15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后土壤與滇龍膽根部某些礦質(zhì)元素含量具有顯著的相關(guān)關(guān)系。不同樹(shù)齡茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽對(duì)礦質(zhì)元素生物富集系數(shù)是不同的，以樹(shù)齡15年的茶樹(shù)-滇龍膽套種后滇龍膽根對(duì)Ca、Cu、Mn、Ni、Zn元素的富集能力較強(qiáng)。茶樹(shù)生長(zhǎng)年限與滇龍膽化學(xué)成分含量有關(guān)，確定合理的復(fù)合種植年限還需從栽培學(xué)、植物生理學(xué)、生態(tài)學(xué)、藥理學(xué)等方面進(jìn)行綜合認(rèn)定。

參考文獻(xiàn)：

[1] SHARMA R K， AGRAWALA M， MARSHALL F. Heavy metal contamination of soil and vegetables in suburban areas of Varanasi， India[J]. Ecotoxicology and Environmental Safety， 2007， 66： 258-266.

[2] GOVE B， HUTCHINSON J J， YOUNG S D. Uptake of metals by plants sharing a rhizosphere with the hyperaccumulator Thlaspi caerulescens[J]. International Journal of Phytoremediation， 2002，4（4）：267-281.

[3] LIU X M， WU Q T， BANKS M K. Effect of simultaneous establishment of Sedum alfridii and Zea mays on heavy metal accumulation in plants[J]. International Journal of Phytoremediation，2005，7（I）：43-53.

[4] LI N Y， LI Z A， ZHUANG P， et al. Cadmium uptake from soil by maize with intercrops[J]. Water Air Soil Pollution， 2009， 199：45-56.

[5] SUN J B， GAO Y G， ZANG P， et al. Mineral elements in root of wild Saposhnikovia divaricata and its rhizosphere soil [J]. Biological Trace Element Research，2013，153：363-370.

[6] BARTHWAL J， NAIR S， KAKKAR P. Heavy metal accumulation in medicinal plants collected from environmentally different sites[J]. Biomedical and Environmental Sciences，2008，21（4）： 319-324.

[7] 董 艷，董 坤，鄭 毅，等.種植年限和種植模式對(duì)設(shè)施土壤微生物區(qū)系和酶活性的影響[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2009，28（3）：527-532.

[8] 安玲瑤.作物間作對(duì)重金屬吸收的影響及其機(jī)制的研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2012.17-60.

[9] 吳 全，姚永宏，李中林.幼齡茶園復(fù)合種植技術(shù)研究[J].中國(guó)土壤與肥料，2007（6）：38-40.

[10] 林心炯，徐賽祿.山地茶園間種綠肥試驗(yàn)[J].茶葉科學(xué)技術(shù)，1986（4）：19-22.

[11] 林 智，吳 洵，俞永明.土壤 pH 值對(duì)茶樹(shù)生長(zhǎng)及礦質(zhì)元素吸收的影響[J].茶葉科學(xué)，1990，10（2）：27-32.

[12] KHAN A G， KEUK C， CHAUDHRY T M， et al. Role of plants， mycorrhizae and phytochelators in heavy metal contaminated land remediation[J]. Chemosphere，2000，41：197-207.

[13] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.89.

[14] YANG J L， LIU L L， SHI Y P. Phytochemicals and biological activities of Gentiana species[J]. Natural Product Communications，2010，5（4）：649-664.

[15] 李智敏，劉 莉，李晚誼，等.滇龍膽的藥用資源研究與開(kāi)發(fā)進(jìn)展[J].云南大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2009，31（S）：485-487.

[16] 李遠(yuǎn)菊，張 霽，王元忠，等.藥用植物復(fù)合種植研究進(jìn)展[J].世界科學(xué)技術(shù)：中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2013，15（9）：1941-1947.

[17] ZHANG J， ZHANG J Y， WANG Y Z， et al. Effects of tree species on seed germination and seedlings growth of Chinese medicinal herb Gentiana rigescens[J]. Allelopathy Journal，2012， 29（2）：325-332.

[18] 楊美權(quán)，張金渝，沈 濤，等.不同栽培模式對(duì)滇龍膽中龍膽苦苷含量的影響[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（1）：287-289.

[19] ZHANG M， FANG L. Tea plantation-induced activation of soil heavy metals[J]. Communications in Soil Science and Plant Analysis，2007，38（11/12）：1467-1478.

[20] KOLASANI A， XU H， MILLIKAN M. Evaluation of mineral content of Chinese medicinal herbs used to improve kidney function with chemometrics[J]. Food Chemistry，2011，127（4）： 1465-1471.

[21] PAVLOVA D， KARADJOVA I. Toxic element profiles in selected medicinal plants growing on serpentines in Bulgaria[J]. Biological Trace Element Research，2013，156（1/3）：288-297.

[22] 曹治權(quán)，王秀萍，曹廣智，等.中藥中微量元素的存在狀態(tài)與生物活性關(guān)系的研究[J].廣東微量元素科學(xué)，2004，2（10）：18-26.

[23] LANGDON-JONES E E， POPE S J A. The coordination chemistry of substituted anthraquinones：Developments and applications[J]. Coordination Chemistry Reviews，2014，269（15）：32-53.

（責(zé)任編輯 王珞）