楊輝,曾春萍
(1.河北北方學(xué)院藥學(xué)系,河北張家口075000;2.張家口市食品藥品檢驗(yàn)中心,河北張家口075000)
三種野菜水提液對(duì)高脂小鼠血脂代謝的影響
楊輝1,曾春萍2
(1.河北北方學(xué)院藥學(xué)系,河北張家口075000;2.張家口市食品藥品檢驗(yàn)中心,河北張家口075000)
比較桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜3種野菜水提液對(duì)高血脂小鼠血脂代謝的影響。制備高血脂小鼠模型,采用試劑盒方法測(cè)定血漿中血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)和丙二醛(MDA)的水平以及超氧化物歧化酶(SOD)活力。桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜3種野菜水提液均能降低高血脂小鼠TC、LDL-C和MDA的水平,提高HDL-C水平和SOD酶活力。與高血脂模型組相比,處理各組有顯著差異,并呈現(xiàn)劑量依賴性。桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜3種野菜水提液都具有良好的降血脂作用,其機(jī)制可能與阻斷脂質(zhì)過氧化有相關(guān),并且桃葉鴉蔥水提液降低TG水平,提高HDL-C水平和SOD酶活力的效果優(yōu)于蕨菜、苦菜水提液,苦菜水提液降低TC的作用優(yōu)于桃葉鴉蔥、蕨菜水提液。
桃葉鴉蔥;蕨菜;苦菜;血脂蛋白;超氧化物歧化酶;丙二醛
心血管疾病是當(dāng)今世界威脅人類健康的嚴(yán)重疾病之一,發(fā)病率和死亡率呈逐年上升的趨勢(shì)。近年利用食物和食物中的某種成分達(dá)到降血脂目的的研究日益受到人們的重視。桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜等3種野菜于河北省張家口地區(qū)均有分布,對(duì)其化學(xué)成分及生理活性已有報(bào)道[1-3],但是有關(guān)其提取物對(duì)血脂代謝的影響并不多見,本文探討了此3種野菜水提取物對(duì)高脂血癥小鼠的降血脂作用。
1.1 材料與主要儀器
1.1.1 供試材料
桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜采自河北省赤城縣,總膽固醇測(cè)定試劑盒、甘油三脂檢測(cè)試劑盒、高密度脂蛋白-膽固醇檢測(cè)試劑盒、低密度脂蛋白-膽固醇檢測(cè)試劑盒、超氧化物歧化酶檢測(cè)試劑盒、丙二醛檢測(cè)試劑盒(均購于南京建成生物工程研究所)。血脂康膠囊(北京北大維信生物科技有限公司)。
1.1.2 主要儀器
SAFIRE2多功能全波長酶標(biāo)儀:瑞士TECAN集團(tuán)公司;賽多利斯CPA323S電子天平:賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司;FW177型中草藥粉碎機(jī):天津市泰斯特儀器有限公司;RE-5298A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:上海亞榮生化設(shè)備儀器有限公司;YQ-220A型超聲波清洗器:上海易凈超聲波儀器公司。
1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
昆明種小鼠,體質(zhì)量(25±2)g,雌雄兼用,購于河北北方學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。高脂飼料配方:78.8%基礎(chǔ)飼料中加入1%膽固醇,10%豬脂肪油,10%蛋黃粉,0.2%膽酸鹽。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 供試液的制備
1.3.1.1 桃葉鴉蔥水提液、蕨菜水提液、苦菜水提液的制備
分別取桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜適量,于60℃干燥,粉碎為粗粉,加6倍蒸餾水,超聲輔助提取3次,每次30min,過濾,分別合并超聲液,濃縮得水提液,濃度為4 g藥材/1mL。
1.3.1.2 陽性對(duì)照血脂康溶液的制備[4]
取血脂康膠囊內(nèi)容物溶于適量蒸餾水,制備為濃度為15mg/mL的溶液。
1.3.2 高血脂模型的制備[5]
昆明種小鼠120只,經(jīng)1周適應(yīng)性喂養(yǎng)后,禁食12 h,尾靜脈取血測(cè)定總膽固醇,根據(jù)測(cè)定的膽固醇水平分為12組,每組10只,各組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。12組分別為對(duì)照組(飼喂基礎(chǔ)飼料),高血脂模型組(飼喂高脂飼料),陽性對(duì)照高脂飼料+血脂康組,高脂飼料+桃葉鴉蔥高、中、低劑量組,高脂飼料+蕨菜高、中、低劑量組及高脂飼料+苦菜高、中、低劑量組。腹腔注射給藥,高、中、低劑量分別為0.4 g/10 g體質(zhì)量、0.2 g/10 g體質(zhì)量、0.1 g/10 g體質(zhì)量。高脂飼料+血脂康組腹腔注射血脂康1.5mg/10 g體質(zhì)量,對(duì)照組和高血脂模型組每天注射等體積生理鹽水。每日一次,實(shí)驗(yàn)期間自由飲水和進(jìn)食,連續(xù)8周。末次給藥后,所有動(dòng)物禁食12 h,斷頭取血,血液置于肝素化的塑料離心管中,3500 r/min離心15min,分離血清,用試劑盒測(cè)定TC、TG、HDL-C、LDL-C、SOD、MDA。
1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析
2.1 高血脂模型小鼠的建立
末次給藥后,與對(duì)照組比較,高脂飼料飼喂的小鼠體質(zhì)量、TC和TG水平分別上升了20.1%、50.7%和42.0%,方差分析顯示有顯著差異(P<0.01),小鼠高脂模型構(gòu)建成功,見表1。
表1 建模過程小鼠體質(zhì)量及血脂水平的變化(n=10)Table 1 Body weight and blood lipids of mice changes in setup models(n=10)
2.2 桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液對(duì)高脂小鼠血漿脂蛋白的影響
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與高血脂組相比,桃葉鴉蔥低、中、高劑量組TC水平分別降低12.6%、17.4%和22.2%;蕨菜低、中、高劑量組分別降低6.3%、11.4%和17.1%;苦菜低、中、高劑量組分別降低14.7%、20.4%和24.9%,其中苦菜高劑量組降低TC的作用接近血脂康組。與高血脂組相比,桃葉鴉蔥低、中、高劑量組TG水平分別降低4.0%、8.8%和24.0%;蕨菜低、中、高劑量組分別降低0.8%、4.8%和13.6%;苦菜低、中、高劑量組分別降低3.2%、9.6%和18.4%,其中桃葉鴉蔥高劑量組降低TG的作用接近血脂康組。與高血脂組相比,桃葉鴉蔥低、中、高劑量組HDL-C水平分別升高18.3%、25.7%和37.6%;蕨菜低、中、高劑量組分別升高18.3%、24.8%和31.2%;苦菜低、中、高劑量組分別升高17.4%、26.6%和33.9%。與高血脂組相比,桃葉鴉蔥低、中、高劑量組LDL-C水平分別降低10.9%、12.6%和19.4%;蕨菜低、中、高劑量組分別降低14.2%、15.4%和22.7%;苦菜低、中、高劑量組分別降低7.2%、13.8%和21.5%,結(jié)果見表2。
表2 桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液對(duì)高血脂小鼠血脂水平的影響(n=10±s)Table2 Effect of Water Extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on serum lipids in hyperlipidemia mice(n=10±s)
表2 桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液對(duì)高血脂小鼠血脂水平的影響(n=10±s)Table2 Effect of Water Extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on serum lipids in hyperlipidemia mice(n=10±s)
注:與高血脂組比較,*P<0.05,**P<0.01。
LDL-C/(mmol/L)對(duì)照組 2.21±0.45 0.88±0.14 1.81±0.21 1.77±0.12高脂模型組 3.33±0.63 1.25±0.09 1.09±0.33 2.47±0.41高脂模型+血脂康組組別 TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)2.48±0.26**0.91±0.10**1.69±0.22**1.82±0.12**桃葉鴉蔥低劑量組2.91±0.29* 1.20±0.11* 1.29±0.11**2.20±0.31**桃葉鴉蔥中劑量組2.74±0.26**1.14±0.12**1.37±0.29**2.16±0.24**桃葉鴉蔥高劑量組2.59±0.28**0.95±0.08**1.50±0.18**1.99±0.11**蕨菜低劑量組 3.12±0.41 1.24±0.17 1.29±0.17**2.12±0.26**蕨菜中劑量組 2.95±0.48* 1.19±0.14* 1.36±0.31**2.09±0.14**蕨菜高劑量組 2.76±0.38**1.08±0.07**1.43±0.24**1.91±0.21**苦菜低劑量組 2.84±0.59** 1.21±0.07* 1.28±0.13** 2.29±0.26*苦菜中劑量組 2.65±0.34**1.13±0.19**1.38±0.25**2.13±0.14**苦菜高劑量組 2.50±0.44**1.02±0.08**1.46±0.12**1.94±0.21**
2.3 桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液對(duì)高脂小鼠SOD活力及MDA水平的影響
高、中、低劑量的桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液顯著提高高血脂小鼠血清中SOD酶活力,其作用呈劑量依賴性(P<0.01),高劑量桃葉鴉蔥和苦菜水提液提高SOD活力近于血脂康。高、中、低劑量的桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液顯著降低高血脂小鼠血清中MDA,并呈現(xiàn)劑量依賴性(P<0.01)。高劑量桃葉鴉蔥和苦菜水提液降低MDA作用與血脂康相近,結(jié)果見表3。
目前,臨床上用于治療高脂血癥的藥物主要有降甘油三酯為主的貝特類藥物和降膽固醇為主的他汀類藥物,但是,由于高脂血癥需長期服藥,這些藥物不可避免地產(chǎn)生較多的不良反應(yīng)。從中藥中開發(fā)有效、長效的降脂藥物具有重要的臨床意義。
作為體內(nèi)重要的氧自由基清除劑,SOD對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著重要的作用。SOD通過清除體內(nèi)的氧自由基而避免脂質(zhì)過氧化產(chǎn)生丙二醛。SOD活力和MDA水平的高低可反應(yīng)機(jī)體清除氧自由基的能力和機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果顯示,高脂模型組小鼠血清中MDA含量明顯高于正常對(duì)照組,而SOD活性顯著降低,表明高脂血癥小鼠機(jī)體氧化-抗氧化狀態(tài)失衡;而給以桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜水提液處理后,小鼠血清的MDA含量顯著降低,SOD活性顯著升高,表明桃葉鴉蔥、蕨菜、苦菜能提高高脂小鼠的抗氧化能力,降低脂質(zhì)過氧化水平。桃葉鴉蔥、蕨菜及苦菜中均含有黃酮等抗氧化活性成分[6-8],有助于解釋其抗氧化作用。說明其降血脂的機(jī)制之一可能與抗氧化途徑有關(guān)。實(shí)驗(yàn)中桃葉鴉蔥和苦菜表現(xiàn)出良好的降脂作用,有望開發(fā)成為安全有效的降脂藥,其深層次機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
表3 桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液對(duì)高血脂小鼠SOD與MDA的影響(n=10,±s)Table3 Effect of water extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on SOD and MDA in hyperlipidemia mice(n=10,±s)
表3 桃葉鴉蔥、蕨菜和苦菜水提液對(duì)高血脂小鼠SOD與MDA的影響(n=10,±s)Table3 Effect of water extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on SOD and MDA in hyperlipidemia mice(n=10,±s)
注:與高血脂組比較,**P<0.01。
組別 血清SOD/(mmol/L) 血清MDA/(mmol/L)對(duì)照組 218.7±17.6 2.285±0.571高脂模型組 143.5±19.5 4.103±1.025高脂模型+血脂康組 198.9±25.1** 3.285±0.887**桃葉鴉蔥低劑量組 168.1±15.2** 3.440±0.691**桃葉鴉蔥中劑量組 184.1±17.3** 3.319±0.834**桃葉鴉蔥高劑量組 193.9±21.7** 3.296±0.793**蕨菜低劑量組 163.9±12.6** 3.674±1.009**蕨菜中劑量組 173.5±10.4** 3.527±0.735**蕨菜高劑量組 190.2±14.6** 3.446±0.961**苦菜低劑量組 168.5±15.1** 3.452±0.692**苦菜中劑量組 184.1±17.4** 3.334±0.834**苦菜高劑量組 193.9±21.6** 3.300±0.798**
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Effects of Water Extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on Plasma-lipids Metabolism in Mice Fed High Fats Diet
YANG Hui1,ZENG Chun-ping2
(1.Department of Pharmacy,Hebei North University,Zhangjiakou 075000,Hebei,China;2.Zhangjiakou Food and Drug Inspection Center,Zhangjiakou 075000,Hebei,China)
To compare the effects of water extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on plasma-lipids metabolism in mice fed high fats diet.Experimental hyperlipidemia mice were formed after feeding fatty diet.Plasma total cholesterol(TC),triglycerides(TG),high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C),low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)and superoxide dismutase(SOD)activity were assayed.Water extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L. could decrease the level of TC,LDL-C and MDA,while increasing HDL-C and SOD activity in mice fed high fats diet.Compared with the hyperlipidemia group,there were significant differences among each treatment group with dose-dependent relationship.Water extract from Scorzonera sinensis Lipsch,Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.whose mechanism may relate to block lipid peroxidation all have a better lipid-lowering effect.The effect of water extract from Scorzonera sinensis Lipsch is better than that of water extract from Pteridium aquilinum and Sonchus oleraceus L.on reducing TG,and increasing HDL-C and SOD activity.The effect of water extract from Sonchus oleraceus L.was better than that of water extract from Scorzonera sinensis Lipsch and Pteridium aquilinum on reducing TC.
Scorzonera sinensis Lipsch;Pteridium aquilinum;Sonchus oleraceus;blood lipoprotein;super-oxide dismutase;malondialdehyde
10.3969/j.issn.1005-6521.2015.06.003
2014-05-27
河北省高等學(xué)??茖W(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(Z 2013006)
楊輝(1972—),男(漢),副教授,碩士,研究方向:從事藥物化學(xué)教學(xué)和科研工作。