康照昌，李玉榮

（湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖北孝感432000）

生姜透皮帖對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔血脂及內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響

康照昌，李玉榮

（湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖北孝感432000）

目的探討生姜透皮帖對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化（AS）家兔血脂的調(diào)節(jié)作用及對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響。方法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成正常組、模型組、生姜透皮帖小劑量組、生姜透皮帖中劑量組、生姜透皮帖大劑量組。正常組給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，其余4組均給予高脂飼料喂養(yǎng)，6周后，生姜透皮帖小、中、大劑量組按組別分別給予相應(yīng)劑量的生姜透皮帖（相當(dāng)于生姜浸膏50 mg/kg、100mg/kg、200mg/kg）貼在臍部。結(jié)果生姜透皮帖能調(diào)節(jié)AS家兔血脂，降低血清中升高的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、ApoB含量（P＜0.05），升高高密度脂蛋白（HDL-C）、ApoA1含量（P＜0.05），能調(diào)節(jié)HDL-C/LDLC、ApoA1/ApoB的比值，且具有明顯的量效關(guān)系（P＜0.05）；同時(shí)能提高血液中一氧化氮（NO）含量（P＜0.05），降低血漿內(nèi)皮素-1（ET-1）的含量（P＜0.05），調(diào)節(jié)、恢復(fù)兩者之間的相對(duì)平衡。結(jié)論生姜透皮帖具有調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的功能。

生姜透皮帖；血脂；內(nèi)皮細(xì)胞功能；動(dòng)脈粥樣硬化

生姜是食藥兼用、資源豐富的天然植物，應(yīng)用現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)在生姜有效成分提取、化學(xué)成分分析、藥理作用研究和臨床應(yīng)用等方面均取得了較大進(jìn)展。本研究旨在探討生姜透皮帖調(diào)節(jié)血脂和保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用機(jī)制，現(xiàn)介紹如下。

1 材料與方法

1.1 生姜透皮帖制備

生姜（經(jīng)華中科技大學(xué)鑒定）清洗去雜質(zhì)切碎，雙蒸水浸泡，閃式提取器提取，過(guò)濾，濾液減壓濃縮至浸膏狀，將生姜浸膏按50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg與氮酮混勻，制成3 cm×4 cm小、中、大劑量帖劑，另用氮酮制作空白帖劑備用。

1.2 動(dòng)物造模與分組

健康雄性家兔，3～4月齡，體重（2.5±0.4）kg，共50只，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SYXK（鄂）2012-0019。高脂飼料由94%的基礎(chǔ)飼料、1%膽固醇、5%豬油配制而成。分組與給藥：基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后隨機(jī)分組，設(shè)正常組，模型組，生姜透皮帖小、中、大劑量組，每組10只。正常組給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，其余4組均給予高脂飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)6周后形成動(dòng)脈粥樣硬化（AS），生姜透皮帖組按組別分別給予相應(yīng)劑量的生姜透皮帖（相當(dāng)于生姜浸膏50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg）貼在臍部；正常組、模型組給予空白透皮帖，共6周。

1.3 標(biāo)本采集與處理

給藥6周后，停止高脂飼料喂養(yǎng)，給予普食喂養(yǎng)2天，目的是盡量避免因家兔食量的差異而導(dǎo)致血脂含量的不穩(wěn)定。烏拉坦麻醉家兔，打開(kāi)胸腔，抽取下腔靜脈血2m l用于血脂檢測(cè)，另抽取下腔靜脈血2 m l用于血清一氧化氮（NO）檢測(cè)，取1.8 ml靜脈血注入含10%EDTA二鈉30μl和抑肽酶40μl的試管中，用于血漿內(nèi)皮素-1（ET-1）檢測(cè)（NO和ET-1是影響內(nèi)皮細(xì)胞功能的指標(biāo)）。

1.4 主要試劑及檢測(cè)方法

（1）全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、ApoA1（載脂蛋白A1）、ApoB（載脂蛋白B）。（2）NO檢測(cè)：硝酸銀法，721分光光度計(jì)測(cè)定NO含量，NO試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，批號(hào)：060101。（3）放射免疫法測(cè)定血漿ET-1：取靜脈血1.8ml注入含10%EDTA二鈉30μl和抑肽酶40μl的試管中，混勻，4℃，3 000 r/min離心10分鐘，分離血漿，采用GC-1200放射免疫器測(cè)定。ET-1試劑盒、10%EDTA二鈉、抑肽酶均由南京建成生物工程研究所提供，批號(hào)：20120011。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 生姜透皮帖對(duì)血脂的影響（見(jiàn)表1）

由表1可知，與正常組比較，生姜透皮帖組HDL-C、ApoA1含量明顯升高（P＜0.05），并能上調(diào)HDL-C/LDL-C、ApoA1/ApoB的比值，以大劑量組作用最強(qiáng)（P＜0.05）。

2.2 生姜透皮帖對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響（見(jiàn)表2）

由表2可知，高脂喂養(yǎng)所致家兔AS早期血漿中NO含量明顯降低（P＜0.05），ET-1含量明顯升高（P＜0.05）。生姜透皮帖能提高血液中NO的含量，3個(gè)劑量組呈明顯的量效關(guān)系（P＜0.05），其中生姜透皮帖大劑量組最為顯著，NO含量基本接近正常水平。同時(shí)，生姜透皮帖抑制ET-1水平，3個(gè)劑量組的抑制作用呈明顯的量效關(guān)系（P＜0.05），其中大、中劑量組作用較為顯著。

表1 生姜透皮帖對(duì)血脂的影響（±s）

表1 生姜透皮帖對(duì)血脂的影響（±s）

注：與正常組比較，△P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05；與正常組比較，oP＜0.05

組別家兔（只）TC（mmol/L）TG（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C/LDL-C ApoA1（g/L）ApoB（g/L）ApoA1/ApoB正常組10 0.67±0.15 0.71±0.11 0.33±0.05 0.55±0.18 0.59±0.18 0.08±0.02 0.11±0.02 0.71±0.13模型組10 25.68±5.78△1.42±0.71△1.71±0.44△8.98±0.55△0.13±0.01△0.10±0.03△0.72±0.13△0.11±0.01△生姜透皮帖小劑量組10 19.21±6.43*1.01±0.18*1.66±0.63*o7.76±1.12*0.31±0.02*o0.13±0.03*o0.50±0.19*0.19±0.03*o生姜透皮帖中劑量組10 16.76±5.86*0.79±0.19*1.58±0.23*o5.23±0.36*0.35±0.11*o0.15±0.02*o0.40±0.05*0.29±0.07*o生姜透皮帖大劑量組10 11.21±3.22*0.73±0.18*1.02±0.21*o2.23±0.44*0.48±0.09*o0.18±0.04*o0.35±0.04*0.52±0.22*o

表2 生姜透皮帖對(duì)家兔血漿NO、ET-1的影響（±s）

表2 生姜透皮帖對(duì)家兔血漿NO、ET-1的影響（±s）

注：與正常組比較，△P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05

組別家兔（只）NO（μmol/L）ET-1（μmol/L）正常組10 27.12±4.66 42.91±7.99模型組10 15.12±3.03△58.98±7.87△生姜透皮帖小劑量組10 19.77±4.68*52.55±4.98*生姜透皮帖中劑量組10 23.81±5.01*49.81±6.54*生姜透皮帖大劑量組10 25.78±5.15*44.76±5.03*

3 討論

流行病學(xué)調(diào)查表明，血清膽固醇水平升高與AS呈正相關(guān)（P＜0.05）。Bhandari等[1]給家兔喂高脂飼料10周建立高脂模型，其血清中TC、TG、血清載脂蛋白和磷脂顯著增加（P＜0.05）。而給予生姜乙醇提取物（200 mg/kg）和高脂飼料喂家兔10周，上述指標(biāo)均明顯降低，且HDL-C升高，證實(shí)生姜能降低膽固醇，減輕家兔AS的程度。Fuhrman等[2]報(bào)道，將250 g生姜汁（1 g含有40mg總姜辣素、90mg酚類物質(zhì)、14m l姜精油）放入1升1.1%的乙醇中，喂養(yǎng)小鼠10周，可使小鼠血清中TC、TG、LDL-C減少，主動(dòng)脈粥樣硬化程度減輕。

本實(shí)驗(yàn)亦證明生姜透皮帖能調(diào)節(jié)AS家兔血脂，降低血清中升高的TC、TG、LDL-C、ApoB含量（P＜0.05），逐步升高HDL-C、ApoA1的含量（P＜0.05），能上調(diào)HDL-C/LDL-C、ApoA1/ApoB的比值（P＜0.05）。具有保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞的功能，提高血液中NO含量（P＜0.05），降低ET-1含量（P＜0.05），調(diào)節(jié)、恢復(fù)兩者之間的相對(duì)平衡，從而發(fā)揮其抗AS的作用。

[1]Bhandari U，Sharma JN，Zefar R.The protective action of ethanolicginger（Zingiber，officinale）extractinCholesterolfed rabbits[J].Journalof Ethnopharmacology，1998，61（2）：167-171.

[2]Fuhrman B，Rosenblat M，Hayek T，et al.Gillger extract consumption reduces plasma cholesterol.inhibits LDL oxidation and attenuats development of atherosclerosis in atherosclerotic，apolipoprotein Edeficient mice[J].Journal of Nutrition，2000，130（5）：1124-1131.

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1671-1246（2015）02-0102-02