張白冰李 健于 文代成林

絕經(jīng)婦女齦溝液中OPG及RANKL的含量與牙周炎的關(guān)系

張白冰①②李 ?、塾?文③代成林③

目的：探討絕經(jīng)婦女牙周炎患者齦溝液中骨保護(hù)素（OPG）和核因子-кB受體活化子配體（RANKL）的含量變化及意義。方法：采用吸潮紙尖法收集齦溝液（GCF）。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（enzymelinked inmunosorbent assay， ELISA）測(cè)定齦溝液中的OPG、RANKL水平。結(jié)果：健康組和牙周炎組的GI、PLI、PD、AL比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；兩組的齦溝液中RANKL、OPG及RANKL/OPG比值比較，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論：絕經(jīng)婦女齦溝液中RANKL增加、OPG減少與牙周炎的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。

齦溝液； OPG； RANKL； 絕經(jīng)婦女； 牙周炎

牙周炎是一種慢性非特異性疾病，細(xì)菌為主的多種因素的侵襲使牙周組織破壞，最終會(huì)導(dǎo)致牙齒松動(dòng)甚至脫落。有關(guān)牙周炎的發(fā)病原因目前尚未十分清楚，是多種因素共同作用的結(jié)果。但近年來在牙周炎的免疫病理中趨化因子的作用越來越受到注意及重視。OPG是骨質(zhì)改變過程中的重要影響因素[1-2]，牙周病患者的骨質(zhì)改變顯著。細(xì)胞核因子-кB受體活化子配體（receptor activator of nuclear NF-КB Ligand，RANKL）是腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor， TNF）配體超家族中的成員，骨髓基質(zhì)細(xì)胞或成骨細(xì)胞表面表達(dá)的RANKL或分泌到基質(zhì)中的RANKL和破骨細(xì)胞前體表面受體核因子-кB活化因子（receptor activator of nuclear NF-КB， RANK）結(jié)合，使信號(hào)傳到細(xì)胞內(nèi)，進(jìn)而引起破骨細(xì)胞前體分化、增值和成熟[3]。女性進(jìn)入絕經(jīng)期后，卵巢的功能會(huì)逐漸衰退而后喪失，雌激素的水平越來越低，絕經(jīng)期婦女因沒有雌激素的保護(hù)而全身骨質(zhì)逐漸丟失且疏松，故增大了牙周病的易感性[4]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，去卵巢大鼠與未手術(shù)相比，骨小梁?jiǎn)挝?、厚度、及?shù)量明顯降低，密度也明顯下降，牙槽骨變薄[5-6]。本研究對(duì)絕經(jīng)婦女齦溝液中OPG及RANKL含量進(jìn)行檢測(cè)和對(duì)比，分析其與牙周炎的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年11月-2014年3月就診于唐山市人民醫(yī)院口腔科30例健康體檢女性患者，年齡45～65歲，納入標(biāo)準(zhǔn)：絕經(jīng)年限≤3年，全身健康，無系統(tǒng)性疾病，口內(nèi)至少有20顆牙齒，3個(gè)月內(nèi)未接受牙周治療并未使用抗生素、非甾體類藥物和免疫抑制劑，不吸煙。同時(shí)選擇此階段初診30例慢性牙周炎女性患者，年齡45～65歲，絕經(jīng)年限≤3年，納入標(biāo)準(zhǔn)除健康體檢標(biāo)準(zhǔn)外還包括牙周袋≥3 mm、炎癥累及牙周深層組織。

1.2 方法

1.2.1 GCF樣本的采集和保存 常規(guī)洗手消毒后，用器械去除觀察牙牙齦上的菌斑，隔濕并干燥觀察牙。將提前裁剪好稱重并消毒過的30號(hào)吸潮紙尖小心插入健康者觀察牙的頰側(cè)近中、頰側(cè)中央、頰側(cè)遠(yuǎn)中及腭側(cè)齦溝內(nèi)或牙周炎患者牙周袋內(nèi)約1 mm，停留30 s后取出（若吸潮紙尖被血液或唾液污染則棄去）待1 min后重新取樣。將4個(gè)吸潮紙尖作為一份標(biāo)本，取出后稱重，減去原重量換算成體積。然后將吸潮紙尖一并放入干燥無菌的EP管中，加入200 μL緩沖液后至于-70 ℃冰箱內(nèi)保存待用。

1.2.2 牙周臨床指標(biāo)檢測(cè)與記錄 牙齦指數(shù)（GI按照loe和Silness標(biāo)準(zhǔn)分為4度）、菌斑指數(shù)（PLI按照Silness和loe標(biāo)準(zhǔn)分4度記錄）、探查并記錄探診深度（PD）以及附著喪失（AL）[7]。所有患者的檢查均由一個(gè)人來完成。為了避免臨床檢查影響齦溝液的質(zhì)和量，取樣后才進(jìn)行臨床指標(biāo)的檢測(cè)與記錄。

1.2.3 齦溝液中OPG及RANKL的檢測(cè) 將樣本從-70 ℃冰箱中取出，在室溫解凍樣本，然后放置于搖床1 h后，離心5 min，除去吸潮紙尖，吸取上清液。然后按照ELISA試劑盒的說明書操作，檢測(cè)各樣本OPG及RANKL的濃度并記錄。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，牙齦指數(shù)、菌斑指數(shù)、探診深度、附著喪失、OPG濃度、RANKL濃度及RANKL/OPG的比值比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床檢查結(jié)果比較 牙周健康組患者的各項(xiàng)臨床指標(biāo)（包括GI、PLI、PD、AL）均明顯高于牙周炎組患者，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

表1 兩組患者受檢牙臨床檢測(cè)指標(biāo)的比較（±s）

表1 兩組患者受檢牙臨床檢測(cè)指標(biāo)的比較（±s）

*與牙周健康組比較，P＜0.01

組別GIPLIPD（mm）AL（mm）牙周健康組（n=30）0.70±0.47 0.53±0.51 1.40±0.500牙周炎組（n=30）1.40±0.50*2.33±0.71*5.30±0.92*4.70±1.02*

2.2 GCF中OPG、RANKL及RANKL/OPG比值的比較 牙周炎組的GCF中RANKL的含量及RANKL/ OPG的比值明顯高于牙周健康組，OPG的含量明顯低于牙周炎組，兩組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表2。

表2 兩組齦溝液中RANKL、OPG及RANKL/OPG的比較（±s）

表2 兩組齦溝液中RANKL、OPG及RANKL/OPG的比較（±s）

*與牙周健康組比較，P＜0.01

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3 討論

研究顯示，OPG/RANKL系統(tǒng)的不平衡，可能與牙周炎發(fā)病機(jī)制和牙周炎患者齦溝液OPG水平有關(guān)[8]。Bostanci等[9]對(duì)健康者、牙齦炎者、廣泛侵襲性牙周炎者、慢性牙周炎者GCF中RANKL、OPG及RANKL/OPG比值進(jìn)行比較，得出結(jié)果為健康者和牙齦炎者GCF中RANKL較低，而廣泛侵襲性牙周炎者、慢性牙周炎者GCF中較高；OPG則健康者中較高；RANKL/OPG比值在健康者最低。研究發(fā)現(xiàn)，牙周炎患者齦溝液中RANKL濃度增高，OPG濃度明顯下降，表明局部RANKL和OPG之間出現(xiàn)平衡失調(diào)，促進(jìn)牙槽骨吸收[10]。

OPG及RANKL與絕經(jīng)婦女全身骨質(zhì)疏松關(guān)系密切，同時(shí)也在絕經(jīng)婦女牙周炎中起著重要作用[11]。Xie等[12]發(fā)現(xiàn)口腔剩余牙槽骨吸收的主要因素之一是雌激素的缺乏。據(jù)報(bào)道，婦女絕經(jīng)后每年骨吸收可達(dá)0.5％～1.0％，及時(shí)地補(bǔ)充雌激素，可以預(yù)防骨質(zhì)疏松?；加泄琴|(zhì)疏松的婦女與健康婦女相比，牙槽骨的密度和高度降低的幾率有所增加，絕經(jīng)牙周病婦女缺乏雌激素及骨質(zhì)疏松均是牙槽骨密度降低的危險(xiǎn)因素[13]。雌激素可以促進(jìn)牙周膜的成纖維細(xì)胞向成骨分化，能增加成骨的活力，有利于維持牙周組織的正常改建及重塑，RANKL的表達(dá)與之關(guān)系密切[14-16]。

本研究探討了絕經(jīng)婦女GCF中OPG和RANKL濃度及RANKL/OPG比值與牙周炎的關(guān)系，證明OPG及RANKL與絕經(jīng)牙周炎患者關(guān)系密切。有研究顯示，雌激素替代療法能夠提高絕經(jīng)婦女的雌激素水平，可減少牙周炎患者附著喪失及牙齦出血，能提高牙齒的保留率[17-18]。

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The Association between Levels of OPG and RANKL in Gingival Crevicular Fluid （GCF） and Periodontitis in Postmenopausal Women

ZHANG Bai-bing， LI J ian， YU Wen， et al.//Medical Innovation of China，2015，12（07）：042-044

Objective： To investigate the changes and significance of the receptor activator for osteoprotegerin（OPG） and receptor activator of nuclear factor kappa B ligand （RANKL） in gingival crevicular fluid （GCF） in postmenopausal women with periodontitis. Method： To follow careful sampling of GCF with moisture absorption paperpoint strips in patients. The level of OPG and RANKL was detected using ELISA technique. Result： The GI， PLI， PD，AL difference was significant between the two groups （P＜0.01）. There was significant difference in levels of RANKL，OPG and the ratio of RANKL/OPG in GCF between the two groups （P＜0.01）. Conclusion： The result suggests that the increasing production of RANKL and reducing production of OPG maybe associated with the initiation and progress of periodontitis.

Gingival crevicular fluid； OPG； RANKL； Postmenopausal women； Periodontitis

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.07.014

2014-11-18） （本文編輯：王宇）

①河北聯(lián)合大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 河北 唐山 063000

②河北聯(lián)合大學(xué)附屬人民醫(yī)院

③河北省唐山市人民醫(yī)院

李健

First-author’s address： Stomatological Hospital of Hebei United University， Tangshan 063000， China