久　太　馮喜英　安文靜　劉洪千　(青海大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸科，青?！∥鲗帯?10001)

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肺腺癌中鋅指E-盒結(jié)合同源異型盒蛋白-1、-2和增殖細(xì)胞核抗原表達(dá)及意義

久太馮喜英安文靜劉洪千(青海大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸科，青海西寧810001)

〔摘要〕目的檢測(cè)肺腺癌中鋅指E-盒結(jié)合同源異形盒蛋白(ZEB)-1、ZEB-2和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)標(biāo)記的增殖指數(shù)的關(guān)系。方法59例肺腺癌患者臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為觀察組，同期肺腫物切除后距腫物邊緣＞3 cm腫瘤周?chē)７谓M織59例作為對(duì)照組，應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)兩組中ZEB-1、-2和PCNA的表達(dá)。結(jié)果兩組中ZEB-1、-2和PCNA的陽(yáng)性率差別顯著，觀察組中ZEB-1、-2和PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑、腫瘤的胸膜累犯密切相關(guān)，PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及是否伴有壞死密切相關(guān)。觀察組中ZEB-1和PCNA的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論

肺腺癌術(shù)后組織中ZEB-1、-2和PCNA高表達(dá)，不僅對(duì)腫瘤的形成有重要意義，還可以促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展，尤其是PCNA高表達(dá)可能對(duì)腫瘤進(jìn)展有多種生物學(xué)意義。

〔關(guān)鍵詞〕肺腺癌;鋅指E-盒結(jié)合同源異型盒蛋白(ZEB)-1; ZEB-2;增殖細(xì)胞核抗原(PCNA);免疫組化

第一作者:久太(1971-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事呼吸系統(tǒng)疾病研究。

肺腺癌目前已超過(guò)鱗狀細(xì)胞癌成為肺癌最常見(jiàn)的組織學(xué)亞型，更常見(jiàn)于不吸煙的患者，尤其是女性。肺癌常表達(dá)為周?chē)徒Y(jié)節(jié)，很少位于中央，也很少形成空洞〔1〕。病變形成過(guò)程中，常伴有明顯的基因和蛋白表達(dá)失調(diào)。鋅指E-盒結(jié)合同源異形盒蛋白(ZEB)-1、-2是非受體細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子中的重要成員，異常表達(dá)時(shí)對(duì)腫瘤的形成及進(jìn)展都有一定促進(jìn)作用〔2，3〕。增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)是細(xì)胞增殖中重要的標(biāo)記蛋白，在一定程度上可以客觀地反映細(xì)胞增殖狀態(tài)〔4〕。本研究分析ZEB-1、-2在肺腺癌中的表達(dá)特征及與PCNA的相關(guān)性。

1　資料與方法

1. 1一般資料2012年1月至2014年12月行肺腺癌根治手術(shù)的患者59例作為觀察組，留取完整臨床資料和術(shù)后蠟塊組織。均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合國(guó)際肺癌研究協(xié)會(huì)(IASLC)/美國(guó)胸科協(xié)會(huì)(ATS)/歐洲呼吸學(xué)會(huì)(ERS)國(guó)際多學(xué)科分類(lèi)中的標(biāo)準(zhǔn)。男31例，女28例;年齡45～79歲，平均62. 1歲。同期肺腫物切除后距腫物邊緣＞3 cm腫瘤周?chē)７谓M織59例作為對(duì)照組，其中男30例，女29例;年齡46～77歲，平均61. 7歲。兩組常規(guī)資料無(wú)明顯差別。

1. 2 ZEB-1、-2和PCNA表達(dá)的檢測(cè)ZEB-1、-2和PCNA蛋白的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法，DAB染色，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，并由病理科主管技師完成，做好質(zhì)量控制，減少誤差。

1. 3 ZEB-1、-2和PCNA結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)ZEB-1、-2和PCNA均以細(xì)胞核呈現(xiàn)棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞，計(jì)數(shù)10個(gè)上皮細(xì)胞集中的區(qū)域(×400倍)，計(jì)算陽(yáng)性率，取平均值作為最終結(jié)果。以＜25%為陰性，≥25%為陽(yáng)性。

1. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SAS6. 12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2　結(jié)果

2. 1兩組中ZEB-1、-2和PCNA陽(yáng)性率的比較觀察組中ZEB-1、-2和PCNA陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(P＜0. 000 1)。見(jiàn)表1。

表1　兩組中ZEB-1、-2和PCNA陽(yáng)性表達(dá)的比較〔n(%)，n=59〕

2. 2 ZEB-1、-2和PCNA在觀察組不同臨床特征中的表達(dá)觀察組中ZEB-1、-2和PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑、腫瘤的胸膜累犯密切相關(guān)，PCNA表達(dá)的陽(yáng)性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及是否伴有壞死密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

表2　 ZEB-1、-2和PCNA陽(yáng)性表達(dá)在觀察組不同臨床特征中的表達(dá)比較〔n(%)〕

2. 3觀察組中ZEB-1、-2和PCNA的相關(guān)性分析觀察組中ZEB-1和PCNA的表達(dá)呈正相關(guān)(r= 0. 51，P= 0. 035 9)，ZEB-2 和PCNA的表達(dá)無(wú)明顯相關(guān)性(r=0. 39，P=0. 058 7)。

3　討論

肺腺癌是指具有腺樣分化或有黏液產(chǎn)生的腫瘤，表現(xiàn)為腺泡狀、乳頭狀、細(xì)支氣管肺泡狀，常形成實(shí)性巢狀結(jié)構(gòu)。腫瘤細(xì)胞異型性明顯，可伴有明顯的浸潤(rùn)性生長(zhǎng)。腫瘤形成過(guò)程中增殖?；钴S，使細(xì)胞的異型性和染色質(zhì)濃集。與預(yù)后差相關(guān)的參數(shù)包括組織學(xué)分級(jí)高和血管侵犯，核分裂增加、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)相對(duì)少和廣泛的腫瘤壞死也被認(rèn)為評(píng)價(jià)預(yù)后的指標(biāo)。ZEB-1、-2是胚胎發(fā)育中必需的轉(zhuǎn)錄因子〔5，6〕。近來(lái)關(guān)于ZEB-1、ZEB-2在腫瘤中的研究較多，被認(rèn)為是與腫瘤生長(zhǎng)、增殖及遷移相關(guān)的蛋白〔7，8〕。劉亞敏等〔9〕通過(guò)對(duì)乳腺癌術(shù)后組織中ZEB-1的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)正常乳腺、乳腺增生及導(dǎo)管內(nèi)癌中ZEB-1均為陰性，而浸潤(rùn)性乳腺癌組織中的ZEB-1表達(dá)的陽(yáng)性率明顯增加，認(rèn)為ZEB-1是與乳腺癌增殖、浸潤(rùn)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)的蛋白，其可能對(duì)判斷患者的預(yù)后有一定價(jià)值。汪泉〔10〕通過(guò)對(duì)宮頸鱗狀細(xì)胞癌中ZEB-2的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)腫瘤中ZEB-2表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于癌旁黏膜組織，且ZEB-2的表達(dá)與國(guó)際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)(FIGO)分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯的相關(guān)性。PCNA是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與細(xì)胞增殖活性有關(guān)的指標(biāo)，作為DNA聚合的輔助蛋白，是DNA復(fù)制所必需的，在核內(nèi)表達(dá)量增加預(yù)示著細(xì)胞進(jìn)入S期或G1晚期〔11〕。也有研究〔12〕認(rèn)為PCNA是反映細(xì)胞增殖分?jǐn)?shù)和所處周期的客觀指標(biāo)，可以作為判定腫瘤惡性程度及預(yù)后。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示ZEB-1、-2和PCNA高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成的重要因素。ZEB-1、-2和PCNA高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)及對(duì)胸膜的侵犯。腫瘤的生長(zhǎng)是依靠細(xì)胞的增殖，細(xì)胞增殖活躍時(shí)腫瘤生長(zhǎng)快，PCNA表達(dá)高的腫瘤生長(zhǎng)快，同時(shí)ZEB-1、-2表達(dá)也升高，提示ZEB-1、-2也是促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的重要蛋白。本文結(jié)果提示PCNA的高表達(dá)可以在一定程度上促進(jìn)腫瘤的淋巴道播散，同時(shí)可以使腫瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中出現(xiàn)細(xì)胞凝固性壞死，使腫瘤的進(jìn)展加速。ZEB-1表達(dá)升高時(shí)可以促進(jìn)PCNA的高表達(dá)，使腫瘤細(xì)胞的繁殖加速，這也間接反映了ZEB-1對(duì)細(xì)胞增殖有明顯的調(diào)節(jié)作用〔13〕。雖然學(xué)者們〔9，10〕發(fā)現(xiàn)ZEB-1、-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有明顯相關(guān)性，但是本實(shí)驗(yàn)顯示ZEB-1、-2均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性，這種差異表達(dá)可能與器官差異性有關(guān)，也可能與樣本選擇等因素有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)ZEB-2和PCNA的直接關(guān)聯(lián)性，但是結(jié)果也顯示出了二者可能具有協(xié)同作用的趨勢(shì)，這可能與樣本量有關(guān)，后續(xù)研究可以繼續(xù)觀察ZEB-2和PCNA增殖的關(guān)系，以更進(jìn)一步明確二者的協(xié)同作用和相關(guān)性。

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〔2014-07-19修回〕

(編輯苑云杰)

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2015)20-5829-03;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 070

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔中圖分類(lèi)號(hào)〕R734