左滿花，唐俊

（1.湖北民族學院醫(yī)學院，湖北 恩施 445000；2.湖北恩施州中心醫(yī)院腎內(nèi)科，湖北 恩施 445000）

·臨床論著·

不同分期老年糖尿病腎病患者血清氧化應激、血管新生指標以及外周血T細胞含量的評估

左滿花1，唐俊2

（1.湖北民族學院醫(yī)學院，湖北 恩施 445000；2.湖北恩施州中心醫(yī)院腎內(nèi)科，湖北 恩施 445000）

目的分析不同分期老年糖尿病腎病患者的血清氧化應激、血管新生指標以及外周血T細胞含量。方法選擇2012年6月-2014年6月在該校附院接受住院治療的老年糖尿病腎病患者99例作為觀察組對象，根據(jù)病情嚴重程度分為早期糖尿病腎病組、中晚期糖尿病腎病組，另取同期在該院進行健康體檢且不伴有糖尿病腎病的老年人作為正常對照組，比較各組間血清氧化應激、血管新生指標以及外周血T細胞含量等差異。結果①早期DN組、中晚期DN組患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于正常對照組，且中晚期DN組患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于早期DN組（P＜0.05）；②早期DN組、中晚期DN組患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于正常對照組，且中晚期DN組患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于早期DN組（P＜0.05）；③早期DN組、中晚期DN組患者血清CD4+、CD4+/CD8+水平高于正常對照組，CD8+水平低于正常對照組（P＜0.05），早期DN組與中晚期DN組間差異不明顯。結論氧化應激損傷、血管新生及免疫功能紊亂均參與了糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展，并隨病情分期升級進一步失衡。

老年糖尿病腎?。谎趸瘧?；血管新生

糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是長期嚴重糖尿病導致的腎臟病變，其發(fā)病機制目前尚不明了，可能與炎癥、氧化應激等關系密切[1]。老年糖尿病患者并發(fā)腎臟損害的幾率高，故老年糖尿病腎病是DN的最大患病群體，此類患者病情更加復雜、治療更為困難[2]。為了了解老年糖尿病腎病患者的全身改變特點以更好的尋找臨床治療靶點，本次研究重點分析不同分期老年糖尿病腎病患者的血清氧化應激、血管新生指標以及外周血T細胞含量，具體匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2012年6月-2014年6月在該校附院接受住院治療的老年糖尿病腎病患者99例作為觀察組對象。根據(jù)2010年中華醫(yī)學會制定的糖尿病腎病分期標準分為早期糖尿病腎病組、中晚期糖尿病腎病組。早期糖尿病腎病組患者51例。其中，男性28例，女性23例；年齡60～71歲，平均（63.14±5.27）歲；糖尿病病程4～11年，平均（7.69±2.21）年。中晚期糖尿病腎病組患者48例。其中，男性26例，女性22例；年齡61～76歲，平均（65.71±8.66）歲；糖尿病病程7～17年，平均（11.35±3.27）年。另取同期在本院進行健康體檢且不伴有糖尿病腎病的老年人50例作為對照組。其中，男性26例，女性24例；年齡61～78歲，平均（69.37±7.88）歲。

1.2 觀察指標

1.2.1 氧化應激水平各組患者均抽取外周靜脈血，采用羥胺法檢測超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD），硫代巴比妥酸比色法檢測丙二醛（malondialdehyde，MDA），酶聯(lián)免疫吸附法測定晚期蛋白氧化產(chǎn)物（advanced oxidation protein products，AOPP）水平。

1.2.2 血管新生指標各組患者均抽取外周靜脈血，測定血清血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）、內(nèi)皮抑素（endostatin，ES）。

1.2.3 T細胞含量各組患者均抽取外周靜脈血，測定T細胞亞群含量，包括CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 18.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，三組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD法，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 氧化應激水平

方差分析顯示三組之間有差異，且經(jīng)LSD兩兩比較顯示，早期DN組、中晚期DN組患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于正常對照組，且中晚期DN組患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于早期DN組（P＜0.05），具體見表1。

表1 不同分期老年糖尿病腎病患者的血清氧化應激水平比較（±s）

表1 不同分期老年糖尿病腎病患者的血清氧化應激水平比較（±s）

組別SOD/（u/ml）MDA/（μmol/L）AOPP/（μmol/L）早期DN組132.81±10.937.09±0.8893.48±8.72中晚期DN組214.28±27.4111.37±1.73152.84±13.28正常對照組80.63±9.384.83±0.7560.33±6.32 F值9.2748.38411.372 P＜0.05＜0.05＜0.05

2.2 血管新生指標

方差分析顯示三組之間有差異，且經(jīng)LSD兩兩比較顯示，早期DN組、中晚期DN組患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于正常對照組，且中晚期DN組患者血清VEGF、PEDF及ES水平高于早期DN組（P＜0.05），具體見表2。

表2 不同分期老年糖尿病腎病患者的血清血管新生指標水平比較（±s）

表2 不同分期老年糖尿病腎病患者的血清血管新生指標水平比較（±s）

組別VEGF/（pg/ml）PEDF/（μg/L）ES/（ng/ml）早期DN組132.03±11.8359.27±6.8895.28±8.31中晚期DN組211.26±27.6683.21±7.85173.28±15.39正常對照組18.73±2.1613.21±1.8583.29±7.23 F值8.2936.49210.394 P＜0.05＜0.05＜0.05

2.3 T細胞含量

方差分析顯示三組之間CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平有差異，且經(jīng)LSD兩兩比較顯示，早期DN組、中晚期DN組患者血清CD4+及CD4+/CD8+水平高于正常對照組，CD8+水平低于正常對照組（P＜0.05），早期DN組與中晚期DN組間差異不明顯，具體見表3。

表3 不同分期老年糖尿病腎病患者的血清T細胞含量比較（±s）

表3 不同分期老年糖尿病腎病患者的血清T細胞含量比較（±s）

組別CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+早期DN組64.18±7.3238.19±6.3823.16±2.041.63±0.42中晚期DN組63.29±5.3939.02±7.2521.38±2.481.91±0.49正常對照組62.18±5.0533.29±6.3927.92±3.291.25±0.31 F值0.3925.3957.1939.284 P＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05

3 討論

較多研究顯示氧化應激在DN發(fā)生發(fā)展過程中扮演了重要角色，隨著DN病情加重機體抗活性氧能力逐步下降。超氧化物歧化酶（SOD）是生物體內(nèi)氧自由基的天然清除劑，屬于金屬蛋白酶，可以清除自由基O2，可以反映體內(nèi)氧化應激狀態(tài)[3]。丙二醛（MDA）是膜脂質過氧化最重要的產(chǎn)物之一，其產(chǎn)生可以加劇膜的損傷，可以與含游離氨基酸的蛋白質發(fā)生交聯(lián)，增加血管基膜厚度。晚期蛋白氧化產(chǎn)物（AOPP）是反映蛋白氧化程度的敏感指標，其作為沒有氧化的物質是鏈式反應的終末產(chǎn)物[4]。上述研究比較各組間血清氧化應激指標水平，結果顯示：早期DN組、中晚期DN組患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于正常對照組，且中晚期DN組患者血清SOD、MDA及AOPP水平高于早期DN組（P＜0.05），提示抗氧化應激降低是DN病情加重的重要因素之一[5-6]。

在DN中異常新生血管表達增加，此類新生血管在結構上是不成熟的，可以導致血管通透性增加、血漿蛋白外滲、腎小囊玻璃滴狀病變、小動脈透明樣變等DN的典型病理改變[7]。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）為特異性作用于血管內(nèi)皮細胞的多功能細胞因子，可以促進內(nèi)皮細胞分裂增殖、遷移，對于促進血管新生及增強血管通透性具有積極作用。生理狀態(tài)下VEGF在腎臟足細胞上表達，在伴發(fā)糖尿病時糖基化終末產(chǎn)物、各種細胞因子增多，加上腎小球高壓等因素，均導致腎臟VEGF表達上調[8-9]。內(nèi)皮抑素（ES）是一種抑制血管再生的蛋白質，是目前已知最有效的血管新生抑制因子之一，可以有效抑制VEGF等促血管生長因子誘導的內(nèi)皮細胞增殖遷移，與VEGF一起參與調控血管新生過程。色素上皮衍生因子（PEDF）屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑超家族，其與受體結合后可以激活下游信號傳導，發(fā)揮營養(yǎng)保護神經(jīng)，組織血管新生、抗炎癥等作用，是目前最高效的內(nèi)源性血管生成抑制因子[10-11]。上述研究比較了各組患者的血清血管新生指標水平，結果顯示早期DN組、中晚期DN組患者血清VEGF、PEDF、ES水平高于正常對照組，中晚期DN組患者血清VEGF、PEDF、ES水平高于早期DN組（P＜0.05），提示在DN患者體內(nèi)VEGF病理性增多的同時，機體為了達到新的平衡，反饋性促進PEDF及ES等血管抑制性因子的表達[12]。

近年來越來越多的研究證實DN患者存在明顯的細胞免疫及體液免疫異常，故免疫因素可能是DN發(fā)生的一個重要因素。機體免疫系統(tǒng)激活產(chǎn)生的炎癥因子可導致血管內(nèi)皮損傷進而促進血管并發(fā)癥的發(fā)生。上述研究比較各組患者的T細胞含量，結果顯示：早期DN組、中晚期DN組患者血清CD4+、CD4+/CD8+水平高于正常對照組，CD8+水平低于正常對照組（P＜0.05），早期DN組與中晚期DN組間差異不明顯，提示DN患者存在明顯的細胞免疫功能異常，且隨著病情加重免疫功能紊亂加劇[13]。

綜上所述，得出以下結論：氧化應激損傷、血管新生及免疫功能紊亂均參與了糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展，并隨病情分期升級進一步失衡，可以成為日后臨床治療的切入點。

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Evaluation of elderly diabetic nephropathy patients'serum oxidative stress,angiogenesis targets and peripheral blood T cells contents during different stages

Man-hua ZUO1,Jun TANG2
(1.Medical College of Hubei University for Nationalities,Enshi,Hubei 445000,P.R.China; 2.Department of Nephrology,Central Hospital,Enshi,Hubei 445000,P.R.China)

【Objective】To analyze elderly diabetic nephropathy patients'serum oxidative stress,angiogenesis targets and peripheral blood T cells contents during different stages.【Methods】99 cases of elderly diabetic nephropathy patients during different stages between June 2012 to June 2014 in our hospital were chose as study object,all patients were divided into early diabetic nephropathy group,middle-late diabetic nephropathy group,in the same period chose physical examination people(without diabetic nephropathy)in our hospital as normal control group, compared three groups'serum oxidative stress levels,angiogenesis index and content of peripheral blood T cells.【Results】Early DN group and middle-late DN group patients'serum SOD,MDA,AOPP levels were higher than normal control group people,and middle-late DN patients'serum SOD,MDA,AOPP levels were higher than early DN group patients(P＜0.05);Early DN group and middle-late DN group patients'serum VEGF,PEDF and ES levels were higher than normal control group people,and middle-late DN group patients'serum VEGF,PEDF and ES levels were higher than early DN group patients(P＜0.05);Early DN group and middle-late DN group patients' serum CD4+,CD4+/CD8+levels were higher than normal control group people,CD8+level was lower than normal control group people(P＜0.05),these levels between early DN group and middle-late DN group had no obvious difference.【Conclusion】Qxidative stress injury,angiogenesis and immune dysfunction are involved in the develop－ment of diabetic nephropathy,and loss balance as condition stage upgrade.

senile diabetic nephropathy;oxidative stress;angiogenesis

R587.1

A

1005-8982（2015）31-0074-04

2015-04-21

唐俊，Tel：13593620500，E-mail：mailzuoi80@163.com