黃正勇　吳鐵峰　錢(qián)　彩

浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬溫州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院兒科，浙江溫州325001

匹多莫德治療傳染性單核細(xì)胞增多癥的臨床療效及對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群的影響

黃正勇吳鐵峰錢(qián)彩

浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬溫州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院兒科，浙江溫州325001

目的研究匹多莫德治療傳染性單核細(xì)胞增多癥（IM）的臨床療效及對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群的影響。方法采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)了53例IM患兒和20名健康兒童外周血淋巴細(xì)胞亞群。將53例IM患兒隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組25例和干預(yù)治療組28例，兩組均給予常規(guī)處理，IM干預(yù)組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用匹多莫德，予以比較。結(jié)果①與健康組比較，IM患兒CD3+、CD8+淋巴細(xì)胞上升明顯（P＜0.01），CD4+淋巴細(xì)胞和CD4+/CD8+比值降低明顯（P＜0.01）；②匹多莫德治療兩周后，CD3+、CD8+淋巴細(xì)胞比例降低，CD4+淋巴細(xì)胞比例及CD4+/CD8+比值明顯升高，差異有顯著性（P＜0.01）；③兩組IM患兒的熱程、咽峽炎緩解時(shí)間、淋巴結(jié)腫大消退時(shí)間及住院日均有顯著差異（P＜0.05）。結(jié)論匹多莫德能改善IM患兒的細(xì)胞免疫功能，且有良好臨床療效。

傳染性單核細(xì)胞增多癥；T淋巴細(xì)胞亞群；匹多莫德

傳染性單核細(xì)胞增多癥（infectious mononucleosis，IM）主要是由EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）感染導(dǎo)致的急性傳染病，其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、咽峽炎、頸淋巴結(jié)及肝脾腫大，外周血可見(jiàn)淋巴細(xì)胞增加且出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞等為特征[1]，可進(jìn)展為慢性活動(dòng)性EBV感染（CAEBV）和EBV相關(guān)噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥（EBV-HLH），并與部分惡性腫瘤相關(guān)。這些與EB病毒感染后的細(xì)胞免疫功能缺陷有關(guān)。目前該病無(wú)特效治療，抗病毒及中藥治療效果并不明確，且部分藥物副作用明顯，故臨床上以對(duì)癥和支持治療為主。本研究將我院的IM住院患兒作為觀察對(duì)象，使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)IM患兒外周血的淋巴細(xì)胞亞群，并采用細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)劑匹多莫德對(duì)部分IM患兒進(jìn)行干預(yù)治療，探討其對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群以及臨床療效的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2012年3月～2014年2月在我院兒內(nèi)科住院治療的53例IM患兒作為觀察對(duì)象，符合IM的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，均有典型臨床癥狀體征：發(fā)熱、咽峽炎和頸淋巴結(jié)腫大，血清EBV-IgM陽(yáng)性。其中男31例，女22例，年齡1～12歲，隨機(jī)分為兩組：IM干預(yù)組（匹多莫德干預(yù)組）28例，平均（5.5±2.9）歲和對(duì)照組25例，平均（5.9±3.2）歲。兩組患兒在性別、年齡、病程以及癥狀特點(diǎn)等方面的差異無(wú)顯著性（P＞0.05），具有可比性，且近期均未使用過(guò)皮質(zhì)激素或免疫調(diào)節(jié)劑。隨機(jī)抽取本院兒保門(mén)診體檢兒童20名作為健康對(duì)照組，男12例，女8例，年齡1～12歲，平均（6.0±2.5）歲，與上述兩組年齡性別比較差異均無(wú)顯著性（P＞0.05）。三組兒童均否認(rèn)既往有免疫低下及過(guò)敏性疾病史和過(guò)敏性疾病家族史。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

IM干預(yù)組與IM對(duì)照組分別在入院時(shí)和治療后的2周時(shí)間各采集靜脈血1次，而健康對(duì)照組只采集靜脈血1次，采血量2～3 mL，均使用EDTA作為抗凝劑，然后用美國(guó)Beckman-Coulter EPICSXL型流式細(xì)胞儀分別測(cè)定三組兒童的T淋巴細(xì)胞亞群，通過(guò)測(cè)定總T淋巴細(xì)胞（CD3+）、T輔助細(xì)胞（CD4+）、T抑制細(xì)胞（CD8+）以及CD4+/CD8+比值，來(lái)分析IM患兒的細(xì)胞免疫功能改變。

1.3治療方法

IM干預(yù)組和IM對(duì)照組患兒在入院后均予以對(duì)癥與支持治療。IM干預(yù)治療組加用匹多莫德口服液（DOPPELFARMACEUTICISRL，批準(zhǔn)文號(hào)：H20090934）口服治療，每日兩次，一次0.4 g，共服兩周。

1.4觀察指標(biāo)

觀察兩組IM患兒治療前與健康兒童的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值，以及這兩組患兒在治療兩周后上述指標(biāo)的變化；觀察兩組IM患兒退熱時(shí)間、咽峽炎改善時(shí)間、頸淋巴結(jié)腫大恢復(fù)（直徑縮小一半）時(shí)間和住院天數(shù)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示；采用方差分析與t檢驗(yàn)，（表1組間采用LSD法進(jìn)行兩兩比較；表2治療前后比較用配對(duì)t檢驗(yàn)），P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1T淋巴細(xì)胞亞群比較

兩組IM患兒治療前同健康組兒童比較，各種T淋巴細(xì)胞比例均有顯著變化（P＜0.01），IM對(duì)照組與干預(yù)組患兒在治療前CD3+、CD4+、CD8+與CD4+/CD8+比值無(wú)差異（P＞0.05），見(jiàn)表1；IM對(duì)照組患兒治療前后的CD3+、CD4+、CD8+與CD4+/CD8+比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2；IM干預(yù)組患兒治療后的CD3+、CD8+下降，CD4+與CD4+/CD8+比值升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見(jiàn)表2。

表1　兩組IM患兒治療前與健康兒童的T淋巴細(xì)胞亞群監(jiān)測(cè)結(jié)果比較（x±s）

表2　IM兩組患兒治療前后的T淋巴細(xì)胞亞群監(jiān)測(cè)結(jié)果比較（x±s）

2.2臨床恢復(fù)情況

與IM對(duì)照組相比，IM干預(yù)治療組臨床癥狀改善與體征緩解要快（P＜0.05），住院時(shí)間縮短（P＜0.01），見(jiàn)表3。

表3　兩組臨床癥狀、體征緩解時(shí)間及住院日比較（x±s，d）

2.3不良反應(yīng)

所有患兒均未發(fā)現(xiàn)與藥物相關(guān)的明顯不良反應(yīng)。

3　討論

EBV屬于皰疹病毒科γ亞科，在小兒感染中非常普遍。超過(guò)90%的兒童感染過(guò)EB病毒，亞洲兒童陽(yáng)性率高于西方兒童。EB病毒感染人體，以B淋巴細(xì)胞作為靶細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞受攻擊后其抗原性發(fā)生改變，引發(fā)T淋巴細(xì)胞的防御性反應(yīng)，并形成細(xì)胞毒效應(yīng)，從而殺傷受到感染的B淋巴細(xì)胞。通常情況下，由受CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)的強(qiáng)大免疫反應(yīng)所控制[2]，EB病毒感染兒童可無(wú)明顯癥狀。部分兒童可有發(fā)熱、咽峽炎、肝脾腫大、淋巴結(jié)腫大或異常淋巴細(xì)胞增生等傳染性單核細(xì)胞增多癥的臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重的可因EB病毒感染T淋巴細(xì)胞或自然殺傷細(xì)胞（NK）的異常全身克隆擴(kuò)增，出現(xiàn)慢性活動(dòng)性EB病毒感染（CAEBV）、嗜血細(xì)胞增多癥、多器官衰竭而危及生命。EB病毒感染導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能損傷也是發(fā)生腫瘤（如Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等）的重要原因。EB病毒的負(fù)荷量與IM疾病嚴(yán)重程度無(wú)相關(guān)性[3]。監(jiān)測(cè)患兒的細(xì)胞免疫功能變化，對(duì)了解疾病的發(fā)展和預(yù)后有重要作用。

T淋巴細(xì)胞來(lái)源于骨髓中的多能干細(xì)胞，在胸腺內(nèi)發(fā)育成熟，其后定居于淋巴結(jié)、脾臟與黏膜相關(guān)淋巴組織等周圍免疫器官，發(fā)揮著細(xì)胞免疫及免疫調(diào)節(jié)等作用。CD4是輔助性T細(xì)胞（Th）的表面標(biāo)志，具有輔助細(xì)胞免疫與體液免疫的作用；CD8則是細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc）的表面標(biāo)志，可直接殺傷靶細(xì)胞或是誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡；而CD3則是所有T細(xì)胞的表面標(biāo)志。T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量的穩(wěn)定是維護(hù)人體的免疫功能的重要保障。EB病毒感染容易引起患者的免疫調(diào)節(jié)功能紊亂[4]。監(jiān)測(cè)IM患兒T淋巴細(xì)胞亞群比例的變化，可以有效評(píng)價(jià)IM患兒的細(xì)胞免疫狀態(tài)、以此來(lái)判定IM患兒的病情嚴(yán)重程度[5]。本研究中檢測(cè)了EB病毒感染IM患兒急性期時(shí)淋巴細(xì)胞亞群的數(shù)量，在與健康兒童對(duì)照組進(jìn)行比較時(shí)，發(fā)現(xiàn)IM患兒急性期CD3+、CD8+比健康兒童明顯升高且有顯著性差異（P＜0．01），CD4+、CD4+/CD8+比值較健康兒童明顯降低且有顯著性差異（P＜0．01）。可見(jiàn)EB病毒感染IM患兒是處于免疫抑制狀態(tài)，與國(guó)內(nèi)外較多文獻(xiàn)相一致[6-8]，也為臨床進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)治療提供了理論依據(jù)。

匹多莫德是一種全新合成的二肽，化學(xué)名稱：（R）-3-[（S）-（5-氧代-2-吡咯烷基]羰基]-四氫噻唑-4-羧酸，是目前唯一具有廣泛生物活性的口服免疫促進(jìn)劑。匹多莫德有益于人體免疫，具有促進(jìn)先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)增強(qiáng)的活性[9]。它能促進(jìn)中性粒細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的吞噬作用以及趨化和殺傷作用；又可促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖，尤其在免疫功能低下時(shí)促進(jìn)降低的CD4+與CD8+比值回升至正常；同時(shí)能激發(fā)γ干擾素與IL-2的產(chǎn)生來(lái)促進(jìn)細(xì)胞免疫反應(yīng)。目前臨床上較多用于反復(fù)呼吸道感染性疾病，促進(jìn)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)并取得明顯臨床療效[10，11]。鮮見(jiàn)有用于IM患兒，本次主要研究該藥物對(duì)IM患兒的細(xì)胞免疫促進(jìn)作用及臨床癥狀的恢復(fù)情況。結(jié)果顯示，匹多莫德在干預(yù)治療IM兩周以后，CD3+與CD8+T淋巴細(xì)胞比例顯著下降，而CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量與CD4+/CD8+比值顯著上升，較治療前的數(shù)據(jù)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．01），而對(duì)照組同期變化不顯著（P＞0．05）。匹多莫德治療IM患兒在臨床癥狀和體征恢復(fù)上同樣有顯著效果，匹多莫德治療組比對(duì)照組退熱時(shí)間、咽峽炎緩解時(shí)間、頸淋巴結(jié)縮小等癥狀和體征緩解快（P＜0．05），且住院日明顯縮短（P＜0．01）。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于IM的治療，臨床上有用更昔洛韋、單磷酸阿糖腺苷等抗病毒治療[12，13]或用中藥治療[14]，雖都取得一定療效。但都缺乏大規(guī)模、多中心的RCT研究；且前者抗病毒藥物的不良反應(yīng)多種多樣，多系統(tǒng)受累及[15]；中藥抗EB病毒作用的靶點(diǎn)尚不清楚，以及對(duì)細(xì)胞免疫紊亂的調(diào)節(jié)作用尚不明確。而使用匹多莫德干預(yù)治療，可有效改善IM患兒細(xì)胞免疫功能，并且有效緩解臨床癥狀與體征變化，未見(jiàn)明顯不良反應(yīng)，治療安全有效，可以作為IM的首選治療用藥之一[16-18]。當(dāng)然本研究也有不足之處，未能做好長(zhǎng)期的隨訪以及樣本數(shù)不夠大，還不能得出可以減少腫瘤發(fā)生的結(jié)論，有待繼續(xù)研究。

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Clinical efficacy of pidotimod in the treatment of infectious mononucleosis and its impact upon T-lymphocyte Subgroups

HUANG ZhengyongWU TiefengQIAN Cai

Department of Pediatrics，Wenzhou Chinese and Western Integrative Medicine Hospital（the Affiliated to Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine），Wenzhou325001，China

Objective To study the clinical efficacy of pidotimod in the treatment of infectious mononucleosis（IM）and its impact upon T-lymphocyte subgroups.Methods Flow cytometry was adopted to detect peripheral blood lymphocyte subgroups in 53 IM children patients and 20 healthy children.The 53 IM children patients were randomly divided into control group（n=25）and intervention therapy group（n=28）.Conventional therapy were performed in both groups，while intervention group+and CD8+lymphocyte were significantly elevated（P<0.01）in the IM children，while the level of CD4+lymphocyte and the CD4+/CD8+ratio decreased significantly（P<0.01）；（2）After pidotimod treatment for 2 weeks，ratios of both CD3+and CD8+lymphocyte were decreased，while the level of CD4+lymphocytes and CD4+/CD8+ratio increased obviously.The differences were statistically significant（P<0.01）；（3）The differences of the fever course，angina remission period，lymph node enlargement regression period and hospitalization days between two groups were all statistically significant（P<0.05）.Conclusion Pidotimod can improve the cellular immune function in IM children as well as holds a favorable clinical effects.

pidotimod-combined therapy additionally.Comparison was then carried out.Results（1）When compared with healthy children，the levels of CD3

Infectious mononucleosis；T-lymphocytes subgroups；Pidotimod

R725.1

A

1673-9701（2015）07-0004-04

浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012KYB193）

（2014-11-21）