楊本宋（福建省大田縣畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局 366110）

豬O型口蹄疫疫苗免疫效果對比觀察

楊本宋（福建省大田縣畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局 366110）

某規(guī)模豬場選擇80頭，分兩組，每組40頭，分別免疫豬0型口蹄疫合成肽疫苗和豬0型口蹄疫滅活疫苗，采用正向間接血凝試驗(yàn)、vp1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測首免后21d、28d及二次免疫后14d、91d抗體水平，同時，對接種疫苗的試驗(yàn)豬進(jìn)行免疫應(yīng)激觀察，結(jié)果顯示：注射豬0型口蹄疫合成肽疫苗的試驗(yàn)豬未出現(xiàn)不良反應(yīng)，兩種疫苗抗體檢測比較表明：豬0型口蹄疫合成肽疫苗臨床使用的安全性較高，免疫抗體合格率明顯優(yōu)于豬0型口蹄疫滅活疫苗。

豬；口蹄疫；疫苗；免疫效果；觀察試驗(yàn)

口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）FMD是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的，F(xiàn)MDV屬于小RNA病毒科，口蹄疫病毒屬，病毒顆粒無囊膜，極易發(fā)生變異，血清型多，目前共存在O、A、C，亞洲1型，以及南非1、2、3共7個血清型，不同血清型間沒有交叉保護(hù)，同一血清型又存在不同亞型，亞型之間的交叉保護(hù)差異巨大?？谔阋卟《镜牡挚沽O強(qiáng)，由口蹄疫病毒引起的以偶蹄動物為主的急性、熱性、高度接觸性傳染病，其特征是在口、舌、唇、鼻，蹄，乳房發(fā)生水泡，并潰爛形成斑。該病具有傳播速度快而廣，發(fā)病急、危害大等流行病行特點(diǎn)[1]，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為一類傳染病，口蹄疫目前沒有藥物治療，我國采用撲殺和免疫控制，疫苗免疫是目前防治口蹄疫發(fā)生和蔓延的最有效和經(jīng)濟(jì)的主要措施之一，當(dāng)前防疫使用的疫苗主要有口蹄疫合成肽疫苗和口蹄疫滅活疫苗，為了解掌握其臨床應(yīng)用效果，為制定科學(xué)的免疫程序，筆者進(jìn)行豬O型口蹄疫合成肽疫苗和滅活疫苗免疫效果對比試驗(yàn)。

本試驗(yàn)選擇某規(guī)模場30～40日齡商品豬，分兩組分別免疫豬0型口蹄疫合成肽疫苗和豬0型口蹄疫滅活疫苗進(jìn)行免疫試驗(yàn)，通過觀察試驗(yàn)豬免疫后臨床反應(yīng)和首免21d、28d及二免后14d、91d抗體水平進(jìn)行比較，現(xiàn)將試驗(yàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

選擇某規(guī)模場30～40日齡商品豬80頭。

1.2 疫苗

豬0型口蹄疫合成肽疫苗（批號：1409004）和豬0型口蹄疫滅活疫苗（批號：1410001）兩種疫苗均是中牧實(shí)業(yè)股份有限公司蘭州生物藥廠生產(chǎn)。

1.3 檢測試劑

口蹄疫0型正向間接血凝試驗(yàn)診斷液，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號：20150324201豬0型口蹄疫vp1抗體檢測試劑，上海優(yōu)耐特生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號：201408008。

1.4 方法

1.4.1 分組

80頭豬分為兩組（A組和B組）每組40頭，A組接種豬0型口蹄疫滅活疫苗，B組接種豬0型口蹄疫合成肽疫苗。

1.4.2 免疫劑量

按照說明書的免疫劑量對試驗(yàn)豬進(jìn)行免疫接種。豬0型口蹄疫滅活疫苗注射1ml，豬0型口蹄疫合成肽疫苗注射1ml。

1.4.3 應(yīng)激反應(yīng)判定標(biāo)準(zhǔn)

豬免疫后的1周內(nèi)，每天對注射家畜進(jìn)行臨床觀察，凡出現(xiàn)注射部位腫脹，體溫升高、食欲減退或厭食、嘔吐等癥狀的均判定為家畜應(yīng)激反應(yīng)。如果家畜應(yīng)激反應(yīng)嚴(yán)重的，采用腎上腺素或地塞米松脫敏進(jìn)行治療，同時做好家畜應(yīng)激反應(yīng)情況記錄。

1.4.4 樣品采集

家畜首免后21d、28d及二次免疫后14d、91d采血檢測。

1.4.5 免疫抗體檢測判定標(biāo)準(zhǔn)

按照GB18935-2003口蹄疫診斷技術(shù)，正向間接血凝試驗(yàn)，抗體效價大于或者等于1：32判定為合格；vp1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA抗體效價OD值大于或者等于（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，判定為合格。

2 結(jié)果

2.1 對免疫接種的豬3d進(jìn)行觀察和登記結(jié)果

A組有3頭豬輕度應(yīng)激反應(yīng)，主要表現(xiàn)豬第1d第2d為采食量有所下降，體溫39.1～39.6之間波動，第3d恢復(fù)正常，有1頭豬注射部位腫脹，未出現(xiàn)死亡，B組未發(fā)現(xiàn)任何不良反應(yīng)。

2.2 首免21d后抗體檢測結(jié)果

由表1可見，A組40份血清有19份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率47.5%，B組40份血清有32份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率80%。

表1 首免21d后抗體檢測結(jié)果

2.3 首免28d后抗體檢測結(jié)果

由表2可見，A組40份血清有27份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率67.5%，B組40份血清有37份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率92.5%。

表2 首免28d后抗體檢測結(jié)果

2.4 二免14d后抗體檢測結(jié)果

由表3可見，A組40份血清有35份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率87.5%，B組40份血清有39份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率97.5%。

2.5 二免91d后抗體檢測結(jié)果

由表4可見，A組40份血清有30份的抗體效價大于或者等于1：32，豬免疫抗體合格率75%，B組40份血清有39份的OD值大于0.297（臨界值）臨界值=0.23×陽性對照孔平均OD值，豬免疫抗體合格率97.5%。

3 討論

（1）從疫苗免疫后臨床應(yīng)激反應(yīng)的觀察對比，接種合成肽疫苗的豬精神狀態(tài)良好，未出現(xiàn)體溫升高，食欲下降，呼吸困難等不良反應(yīng)的癥狀，而接種的滅活疫苗的豬有3頭出現(xiàn)輕度應(yīng)激反應(yīng)，主要表現(xiàn)為體溫升高，食欲下降，局部腫脹等不良反應(yīng)的癥狀。臨床上出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)主要是由于滅活疫苗中含有大量異體蛋白，對致敏因子引起變態(tài)反應(yīng)，而合成肽疫苗采用人工多肽合成技術(shù)，是一種單一抗原，不存在異體蛋白，能有效地避免異體蛋白引起不良應(yīng)激反應(yīng)[2]，由該次試驗(yàn)臨床觀察來看，口蹄疫合成肽疫苗具有良好的生物安全性，不易產(chǎn)生過敏反應(yīng)。

表3 二免14d后抗體檢測結(jié)果

表4 二免91d后抗體檢測結(jié)果

（2）從豬血清抗體檢測結(jié)果對比，A組首免21d和28d后抗體合格率分別為47.5%和67.5%均達(dá)不到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的抗體合格率70%的要求，B組首免21d和28d后抗體合格率分別為80%和92.5%均達(dá)農(nóng)業(yè)部規(guī)定的抗體合格率70%，說明口蹄疫合成肽疫苗比口蹄疫滅活疫苗效價好，A組二免后14d抗體合格率分別為87.5%，B組二免后14d抗體合格率分別為97.5%，從而表現(xiàn)口蹄疫合成肽疫苗合格率明顯高于口蹄疫滅活疫苗合格率。A組二免后91d抗體合格率分別為75%，B組二免后91d抗體合格率分別為97.5%，B組抗體水平一直維持在一個較高的陽性值范圍內(nèi)，說明豬口蹄疫合成肽疫苗免疫抗體持續(xù)期長。

（3）綜上兩種豬O型口蹄疫疫苗免疫效果對比，說明豬口蹄疫合成肽疫苗高效、安全、副反應(yīng)小、抗體持續(xù)期長，是目前預(yù)防豬O型口蹄疫的理想疫苗。

[1]田召芳，張文娟，陳蕾，等.口蹄疫疫苗免疫效果跟蹤試驗(yàn)報告[J].中國動物檢疫，2011（7）：46-47.

[2]王江輝.豬口蹄疫新型合成肽疫苗的優(yōu)點(diǎn)及研制現(xiàn)狀[J].河南畜牧獸醫(yī)（綜合版），2007（10）：8-9.