亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定與藥敏試驗

        2015-12-02 06:44:01譚素媚聶立欣付強
        中國畜禽種業(yè) 2015年8期
        關(guān)鍵詞:放線胸膜葡萄球菌

        譚素媚 聶立欣 付強

        (1,廣東省肇慶市農(nóng)業(yè)學(xué)校 526070;2,佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 528231)

        豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定與藥敏試驗

        譚素媚1聶立欣1付強2*

        (1,廣東省肇慶市農(nóng)業(yè)學(xué)校 526070;2,佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 528231)

        豬傳染性胸膜肺炎是一種高度傳染性呼吸道疾病,影響全球養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本研究采用多種培養(yǎng)基進行接種培養(yǎng),從具有豬傳染性胸膜肺炎臨床癥狀病死豬的肺臟和胸腔滲出液分離到革蘭氏陰性桿菌,通過細(xì)菌分離、涂片染色鏡檢、衛(wèi)星現(xiàn)象試驗、V因子依賴性試驗診斷,最終確定所分離的細(xì)菌為豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌。通過藥敏實驗發(fā)現(xiàn)該分離菌對氟苯尼考、強力霉素和先鋒Ⅵ等藥物高度敏感,研究結(jié)果為豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌病的診斷及治療提供指導(dǎo)意義,同時也為進一步研究豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的致病機理奠定基礎(chǔ)。

        豬;傳染性胸膜肺炎放線桿菌;病原分離鑒定;藥敏試驗

        豬傳染性胸膜肺炎是由豬胸膜肺炎放線桿菌引起的豬的一種高度傳染性呼吸道疾病。該病主要表現(xiàn)為急性出血性纖維素性肺炎、慢性纖維素性壞死性胸膜肺炎,急性發(fā)病死亡率高,是當(dāng)今危害養(yǎng)豬業(yè)的一種重要細(xì)菌性疾病[1],嚴(yán)重危害著我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。

        在規(guī)模化養(yǎng)豬場中,豬傳染性胸膜肺炎容易引起群發(fā)性死亡,造成較大損失[2]。2014年10月,廣東省肇慶某豬場3月齡的豬發(fā)病并出現(xiàn)大量死亡。臨床主要表現(xiàn)為被毛松亂、體溫升高,耳、鼻及四肢皮膚呈藍(lán)紫色,咳嗽、呼吸極度困難,有的呈犬坐姿勢,臨死前口鼻孔流出血色或白色的泡沫。剖檢見胸腔含有粉紅色液體,心包積液,纖維素性心包炎,纖維素性腹膜炎、肺炎,胸壁和肺粘連很嚴(yán)重。為更好的控制該病,本實驗通過病原分離鑒定確定細(xì)菌,并以此為依據(jù)做藥物敏感性試驗,提出合理的防治方案。

        1 材料和方法

        1.1 試劑和培養(yǎng)基

        生化微量鑒定管、培養(yǎng)基、藥敏紙片等均購于廣州瑞舒生物科技公司;金黃色葡萄球菌及V因子(NAD,煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)為佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)實驗室保存。

        1.2 V因子需要試驗

        分離菌株分別接種于含有終濃度為0.01%V因子和無V因子的普通營養(yǎng)肉湯中,在37℃需氧和厭氧條件下培養(yǎng)24~48h后,觀察和記錄試驗結(jié)果。

        1.3 衛(wèi)星現(xiàn)象試驗

        將鮮血瓊脂培養(yǎng)基劃線接種金黃色葡萄球菌并垂直劃線分離的細(xì)菌,37℃培養(yǎng)24~48h。

        1.4 生化鑒定

        用分離菌純培養(yǎng)物進行下列試驗:硝酸鹽還原、尿素酶、靛基質(zhì)、MR、VP試驗、葡萄糖、乳糖、硫化氫、接觸酶、水楊苷、麥芽糖、蔗糖、甘露醇、果糖、木糖、檸檬酸鹽、山梨醇等糖發(fā)酵試驗[3]。接種前在發(fā)酵管中加入2μL的1%的NAD。

        1.5 藥敏實驗

        蘸取分離菌的肉湯培養(yǎng)物,接種于血瓊脂平板,將各種藥敏紙片分別平貼于培養(yǎng)基表面,37℃培養(yǎng)24h,測定抑菌環(huán)。

        2 結(jié)果

        2.1 鏡檢結(jié)果

        病料接種于巧克力培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)菌落為露珠狀、約2~3mm大小,閃光不透明。經(jīng)革蘭氏染色,可見革蘭氏陰性球桿菌,菌體細(xì)小,也可見桿狀、絲狀散在菌體(見圖1)。

        2.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)特征

        在普通平板、麥康凱培養(yǎng)基上不生長;在巧克力培養(yǎng)基上長成針尖大、灰白色、圓形隆起、閃光不透明的菌落;在鮮血瓊脂培養(yǎng)基上長成更細(xì)小的透明菌落,密集時可看到形成一片β溶血區(qū);挑取菌落染色鏡檢,符合豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的形態(tài)和染色特征。對比兩種營養(yǎng)肉湯的渾濁度發(fā)現(xiàn),添加了V因子的肉湯比不添加V因子的肉湯渾濁(見圖2),生長更旺盛,表明該分離菌生長依賴V因子。

        圖1 分離細(xì)菌的顯微形態(tài)(10×100,革蘭氏染色)

        衛(wèi)星現(xiàn)象:普通瓊脂平板上金黃色葡萄球菌線兩側(cè)有針尖大小、圓形、邊緣整齊的菌落生長,離金黃色葡萄球菌越近菌落越大,越遠(yuǎn)菌落越小,遠(yuǎn)離葡萄球菌的地方甚至不生長,呈現(xiàn)出明顯的 “衛(wèi)星現(xiàn)象”。在分離菌和金黃色葡萄球菌的分界線處出現(xiàn)明顯的溶血現(xiàn)象,表明分離菌與金黃色葡萄球菌具有協(xié)同溶血的作用。

        圖2 分離菌在營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的生長情況

        2.3 生化試驗結(jié)果

        由表1可知,分離菌能發(fā)酵葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖和麥芽糖等;脲酶試驗陽性,接觸酶陽性,硝酸鹽還原試驗陽性。

        表1 分離菌的生化實驗結(jié)果

        2.4 藥物敏感試驗結(jié)果

        試驗結(jié)果表明,該菌對氟苯尼考、強力霉素、頭孢唑啉、環(huán)丙沙星、壯觀霉素、阿米卡星、鏈霉素、先鋒Ⅵ、哌拉西林、諾氟沙星、頭孢拉定高度敏感;對紅霉素、四環(huán)素中度敏感;對卡那霉素芐青霉素、慶大霉素為低度敏感,對氨芐西林、青霉素為耐藥(見表2)。

        表2 分離菌的藥敏試驗結(jié)果

        3 討論

        本研究從肇慶市某豬場采集病料,發(fā)現(xiàn)分離菌為需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性短桿菌、球桿菌,偶爾有長絲狀的多種形態(tài)細(xì)菌;營養(yǎng)需求較高,生長依賴V因子,在巧克力瓊脂培養(yǎng)基上為透明的粘液型菌落等培養(yǎng)特性與大多APP報道的特性一致[4,5]。生化試驗發(fā)現(xiàn)尿素酶、V因子依賴性、溶血性和木糖為陽性與標(biāo)準(zhǔn)菌株的指標(biāo)一致。分離菌株大多數(shù)生化特性符合前人研究胸膜肺炎放線桿菌的結(jié)果,僅有幾項指標(biāo)與前期資料所介紹的不一致,可能由于APP營養(yǎng)要求較高而常規(guī)的生化發(fā)酵管營養(yǎng)成分不足或較低導(dǎo)致發(fā)酵遲緩,甚至出現(xiàn)假陰性。結(jié)合發(fā)病豬群的流行病學(xué)特征、臨床癥狀、病死仔豬的組織病理變化和實驗室檢驗結(jié)果,推測此分離菌為豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌。此類胸膜肺炎放線桿菌屬于生物Ⅰ型,即依賴V因子(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD輔酶)生長的原胸膜肺炎嗜血桿菌。進一步對分離菌株進行血清型鑒定和致病力研究,將有助于闡明豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的致病機制。

        分離菌對氟苯尼考、強力霉素和先鋒Ⅵ高度敏感(這三種抗菌素被推薦為臨床用藥),對四環(huán)素、鏈霉素等藥物敏感低,青霉素等不敏感,表明大多數(shù)藥物對胸膜放線桿菌敏感性不高,也有可能是與這些藥物在豬場的使用頻率高有關(guān)。由于本病的蔓延流行和抗菌藥物的長期應(yīng)用,出現(xiàn)較多的耐藥菌株,因此采用藥物治療時最好進行藥敏試驗,根據(jù)藥敏試驗結(jié)果,選擇有效敏感藥物進行治療,才可獲得較好的效果。防治本病除了使用較敏感的抗生素外,還應(yīng)進行定期的免疫接種,加強飼養(yǎng)管理,應(yīng)避免豬群擁擠,加強通風(fēng)。這次在肇慶豬場發(fā)生這種疾病,可能就是由于氣候條件的改變所引起,是否與血清型有關(guān)需要進一步的研究。

        [1]厚華艷,梁武,呂茂杰,楊保收,等.豬傳染性胸膜肺炎亞單位疫苗研究進展[J].動物醫(yī)學(xué)進展,2015,36(2):84-88.

        [2]Frey J,Beck M,Nicolet J,Toxin typing of action-bacillus pleurpneumoniae by PCR[J].Veterinary Bulletin,1996,66(8):5109.

        [3]姚火春.獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)(第2版)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002.

        [4]劉春花,張彥明,等.胸膜肺炎放線桿菌研究進展[J].中國獸醫(yī)學(xué)報,2003,23(2):206-208.

        [5]張彥明,劉春花,等.胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定及免疫預(yù)防[J].中國獸醫(yī)科技,2002,32(5):21-22.

        廣東省自然科學(xué)基金項目(2014A030310020)和廣東高校優(yōu)秀青年創(chuàng)新人才培養(yǎng)計劃項目(2014KQNCX179)資助。

        付強(1983-),男,博士,研究方向為臨床獸醫(yī)學(xué)。

        猜你喜歡
        放線胸膜葡萄球菌
        胸腔鏡下胸膜活檢術(shù)對胸膜間皮瘤診治的臨床價值
        惡性胸膜間皮瘤、肺鱗癌重復(fù)癌一例
        成人胸膜肺母細(xì)胞瘤1例CT表現(xiàn)
        如何防治兔葡萄球菌病
        新型工程測量放線裝置設(shè)計探討
        電子測試(2018年14期)2018-09-26 06:04:56
        一種多功能變壓器自動收放線裝置
        電子制作(2017年23期)2017-02-02 07:17:11
        纖支鏡胸膜活檢與經(jīng)皮胸膜穿刺活檢病理診斷對比研究
        考慮懸垂絕緣子串偏斜的張力放線計算研究
        肉雞葡萄球菌病診療
        一例水牛疥螨繼發(fā)感染葡萄球菌病的診治
        午夜人妻久久久久久久久| 午夜久久久久久禁播电影| 国产高清天干天天视频| 久久免费的精品国产v∧| 人妻激情偷乱视频一区二区三区| 亚洲一区中文字幕一区| 国产成人一区二区三中文| 无码一区二区三区中文字幕| 亚洲hd高清在线一区二区| 亚洲三级香港三级久久| 东京热加勒比无码少妇| 在线看片国产免费不卡| 亚洲精品无码成人a片| 一边摸一边做爽的视频17国产| 亚洲精品乱码久久麻豆| 久久精品一品道久久精品9| 香蕉视频在线精品视频| 久久精品国产亚洲av无码偷窥| 日本一区二区三区清视频| 久久洲Av无码西西人体| 亚洲欧洲高潮| 午夜无码片在线观看影视| 日本伊人精品一区二区三区 | 国产又爽又大又黄a片| 宅男亚洲伊人久久大香线蕉| 日韩av一区二区三区在线观看| 久久男人av资源网站无码| 天堂а√在线最新版中文| 自愉自愉产区二十四区| 亚洲youwu永久无码精品| 日本视频一区二区三区观看| 国产偷拍盗摄一区二区| 久久道精品一区二区三区| AV无码最在线播放| 丰满少妇大力进入av亚洲| 亚洲国产精品无码专区| 精品一区二区三区在线视频| 天堂丝袜美腿在线观看| 国产美女冒白浆视频免费| 国产桃色精品网站| 日韩永久免费无码AV电影|