本實(shí)驗(yàn)將以任氏液作為灌流液人為地加入各濃度組織胺來(lái)改變兩棲類平滑肌收縮活動(dòng)的內(nèi)環(huán)境，從而觀察平滑肌收縮活動(dòng)的變化情況。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.實(shí)驗(yàn)材料

蟾蜍、1∶5000磷酸組織胺、任氏液、生物信號(hào)采集系統(tǒng)、電熱浴、麥?zhǔn)显〔邸C(jī)械換能器、蛙類手術(shù)器械、滴管、燒杯。

2.實(shí)驗(yàn)方法

取皮膚濕潤(rùn)、喜愛活動(dòng)的健康蟾蜍一只，用雙毀髓法破壞蟾蜍的腦和脊髓，背位固定在蛙板上。打開體腔，觀察蟾蜍消化管的活動(dòng)情況。在十二指腸起始處將腸管結(jié)扎并從結(jié)扎線以上剪斷至20cm處。用任氏液沖洗腸斷中的內(nèi)容物，再?gòu)闹虚g剪斷，每次腸斷長(zhǎng)約2cm，在腸斷的兩端分別結(jié)一個(gè)線套，一個(gè)用于掛在麥?zhǔn)显〔鄣囊易中喂苌希硪欢私Y(jié)一長(zhǎng)線，用于連接張力換能器。在放入離體平滑肌之前，將麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)任氏液溫度控制在37～38℃，每取出一段腸后，迅速將其放入調(diào)節(jié)適溫打的任氏液中。張力換能器的輸出端與生物信號(hào)采集系統(tǒng)的一個(gè)輸入通道相連。固定結(jié)扎線與張力換能器使腸斷運(yùn)動(dòng)正常。打開計(jì)算機(jī)，開始記錄平滑肌收縮曲線。

3.實(shí)驗(yàn)觀察

（1）記錄離體平滑肌在灌流37～38℃任氏液后收縮曲線，觀察收縮頻率及幅度，作為對(duì)照。

（2）加入1∶5000磷酸組織胺1～2滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

（3）等量任氏液換洗，待收縮活動(dòng)恢復(fù)正常后，加入1∶5000磷酸組織胺3～4滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

（4）等量任氏液換洗，待收縮活動(dòng)恢復(fù)正常后，加入1∶5000磷酸組織胺5～6滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

（5）等量任氏液換洗，待收縮活動(dòng)恢復(fù)正常后，加入1∶5000磷酸組織胺7～8滴，記錄并觀察收縮活動(dòng)變化。

二、結(jié)果

消化道平滑肌在任氏液中收縮緩慢而不規(guī)則。向麥?zhǔn)显〔壑械渭尤敫鳚舛冉M織胺后發(fā)現(xiàn)收縮活動(dòng)逐漸依次增強(qiáng)，收縮曲線基線逐漸依次上移，收縮頻率逐漸依次加強(qiáng)。

三、討論分析

兩棲類消化道平滑肌，對(duì)于一些理化刺激敏感。組織胺，組織胺受體有H1～H4四種亞型，組織胺激活H1受體，通過(guò)G蛋白而激活磷脂酶C，產(chǎn)生肌醇三磷酸與二酰甘油，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+增加，蛋白激酶C活化，進(jìn)而引起了消化道平滑肌興奮，收縮頻率和強(qiáng)度加強(qiáng)。

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指導(dǎo)教師：孟惠平

·編輯 李建軍