田海芹 樸聰雁 楊德遠(yuǎn) 王立蘭（江蘇省灌南縣畜牧獸醫(yī)站 222500）

封其善 朱紅霞（江蘇省灌南縣百祿動(dòng)物防疫檢疫所 222500）

豬瘟、豬藍(lán)耳病弱毒疫苗抗體的消長(zhǎng)關(guān)系

田海芹 樸聰雁 楊德遠(yuǎn) 王立蘭（江蘇省灌南縣畜牧獸醫(yī)站 222500）

封其善 朱紅霞（江蘇省灌南縣百祿動(dòng)物防疫檢疫所 222500）

為探索豬群免疫豬瘟、豬高致病性藍(lán)耳?。ㄋ追Q藍(lán)耳?。┤醵疽呙缰g不同組合抗體效長(zhǎng)關(guān)系，通過對(duì)灌南縣某規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行為期半年的豬瘟、藍(lán)耳病抗體水平監(jiān)測(cè)，表明兩種組合豬藍(lán)耳病弱毒苗不能對(duì)該場(chǎng)的藍(lán)耳病起到保護(hù)作用，不能有效的控制藍(lán)耳野毒感染，同時(shí)由于豬藍(lán)耳病弱毒苗的使用反而造成了豬瘟抗體水平的偏低。

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗；豬瘟；抗體；影響；試驗(yàn)

豬藍(lán)耳病與豬瘟仍是我們養(yǎng)豬業(yè)最常見的2種病毒性疾病，在生產(chǎn)實(shí)踐中，豬藍(lán)耳病、豬瘟混合感染的情況也越來越多，同時(shí)兩種疾病都有可能引起“豬高熱病綜合癥”，現(xiàn)已成為危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的最重要疾病，是疫病防控的重點(diǎn)。當(dāng)前，針對(duì)這2種疾病的防治主要是以疫苗免疫為主，但這兩種疾病免疫時(shí)間較接近，且藍(lán)耳病病毒的感染可引起機(jī)體的免疫抑制。為探索豬藍(lán)耳病弱毒苗對(duì)豬瘟抗體水平的影響，對(duì)灌南縣某1000頭商品豬規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行了為期半年的抗體水平監(jiān)測(cè)。了解其在免疫了豬藍(lán)耳病弱毒株JXA1-R后對(duì)豬瘟抗體水平的影響。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

灌南縣某500頭商品豬群規(guī)模豬場(chǎng)，每次抽取10份血清樣品檢測(cè)，共對(duì)60份血清樣品進(jìn)行檢測(cè)。

1.1.2 檢測(cè)試劑

診斷試劑：豬瘟抗體ELISA試驗(yàn)盒（BIONOTE，批號(hào)4413P0003）；藍(lán)耳抗體檢測(cè)試劑盒（BIONOTE，批號(hào)4404081）。

1.1.3 主要試驗(yàn)儀器

微量加樣器；BIO-RAD Model680型酶標(biāo)儀。

1.1.4 試驗(yàn)用疫苗

豬瘟耐熱保護(hù)劑活疫苗（細(xì)胞源），北京詩(shī)華生物制品有限公司生產(chǎn)，批號(hào)135542；高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗（JXA1-R株），吉林和元生物工程有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20140605。

1.2 試驗(yàn)方法

（1）豬瘟疫苗、藍(lán)耳病疫苗28日齡1.2頭份免疫一次注射。

（2）藍(lán)耳病疫苗28日齡1.2頭份免疫一次注射；豬瘟疫苗35日齡1.2頭份免疫一次注射。

1.3 ELISA試驗(yàn)方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）豬瘟免疫抗體采用阻斷ELISA試驗(yàn)檢測(cè)（BIONOTE），判斷標(biāo)準(zhǔn)：阻斷率＜40%為陰性；阻斷率≥40%判定為陽(yáng)性。

（2）藍(lán)耳病抗體采用ELISA試驗(yàn)檢測(cè)（BIONOTE），判斷標(biāo)準(zhǔn)：S/P＜0.4陰性；S/P≥0.4判定為陽(yáng)性，0.4≤S/P≤3.0弱毒疫苗感染，產(chǎn)生抗體；S/P＞3.0野毒感染，產(chǎn)生抗體。

1.4 數(shù)據(jù)與分析

按接種疫苗種類、接種疫苗天數(shù)分類統(tǒng)計(jì)各組的抗體檢測(cè)結(jié)果，采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

1）從表1可知，0.4≤S/P≤3.0為藍(lán)耳弱毒疫苗感染所產(chǎn)生的抗體；S/P＞3.0為藍(lán)耳野毒感染所產(chǎn)生的抗體。疫苗注射27天后藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%，野毒感染比例達(dá)到100%；疫苗注射41天藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%，野毒感染比例達(dá)到80%；疫苗注射55天藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%，野毒感染比例達(dá)到80%。疫苗注射27天后藍(lán)耳抗體離散度為8%，抗體平均值為3.74；疫苗注射41天豬藍(lán)耳抗體離散度為16.62%，抗體平均值為3.43；疫苗注射55天豬藍(lán)耳抗體離散度為10.65%，抗體平均值為3.38。結(jié)果表明，A組試驗(yàn)所有豬均藍(lán)耳野毒感染明顯，藍(lán)耳弱毒苗對(duì)該豬場(chǎng)的藍(lán)耳病不能起到保護(hù)作用。

（2）由表2可知，豬瘟抗體阻斷率≥40%為陽(yáng)性值。疫苗注射27天豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%；疫苗注射41天豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到40%；疫苗注射55天豬瘟抗體陽(yáng)性率僅達(dá)到10%。疫苗注射27天豬瘟抗體離散度為10.33%，抗體平均值為77.91%；疫苗注射41天豬瘟抗體離散度為32.55%，抗體平均值為47.03%；疫苗注射55天豬瘟抗體離散度為68.51%，抗體平均值為40.01%。結(jié)果表明，A組試驗(yàn)整個(gè)豬場(chǎng)的豬瘟抗體水平偏低，離散度不夠理想，對(duì)整個(gè)豬群的豬瘟保護(hù)率不高。

（3）從表3可知，0.4≤S/P≤3.0為藍(lán)耳弱毒疫苗感染所產(chǎn)生的抗體；S/P＞3.0為藍(lán)耳野毒感染所產(chǎn)生的抗體。疫苗注射27天后藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%，野毒感染比例達(dá)到80%；疫苗注射41天藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%，野毒感染比例達(dá)到90%；疫苗注射55天藍(lán)耳抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%，野毒感染比例達(dá)到80%。疫苗注射27天后藍(lán)耳抗體離散度為13.95%，抗體平均值為3.37；疫苗注射41天豬藍(lán)耳抗體離散度為9.94%，抗體平均值為3.42；疫苗注射55天豬藍(lán)耳抗體離散度為13.71%，抗體平均值為3.21。結(jié)果表明，B組試驗(yàn)所有豬均藍(lán)耳野毒感染明顯，藍(lán)耳弱毒苗對(duì)該豬場(chǎng)的藍(lán)耳病不能起到保護(hù)作用。

（4）由表4可知，豬瘟抗體阻斷率≥40%為陽(yáng)性值。疫苗注射27天豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到100%；疫苗注射41天豬瘟抗體陽(yáng)性率達(dá)到80%；疫苗注射55天豬瘟抗體陽(yáng)性率僅達(dá)到20%。疫苗注射27天豬瘟抗體離散度為8.76%，抗體平均值為79.25%；疫苗注射41天豬瘟抗體離散度為34.95%，抗體平均值為53.1%；疫苗注射55天豬瘟抗體離散度為23.11%，抗體平均值為31.85%。結(jié)果表明，B組試驗(yàn)整個(gè)豬場(chǎng)的豬瘟抗體水平偏低，離散度不夠理想，對(duì)整個(gè)豬群的豬瘟保護(hù)率不高。

A組表1 不同樣品藍(lán)耳病S/P比例的變化情況

A組表2 不同樣品豬瘟阻斷率的變化情況

B組表3 不同樣品藍(lán)耳病S/P比例的變化情況

B組表4 不同樣品豬瘟阻斷率的變化情況

3 討論

（1）豬瘟只有加強(qiáng)二次免疫才能獲得好的保護(hù)。本次試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果表明，仔豬接種一次豬瘟疫苗免疫保護(hù)率不高也不持久。從免疫學(xué)來講，動(dòng)物機(jī)體首次接觸外來抗原后，產(chǎn)生以IgM為主，IgM在體內(nèi)維持的時(shí)間不長(zhǎng)，且不穩(wěn)定，二次加強(qiáng)免疫后，抗原誘導(dǎo)機(jī)體記憶細(xì)胞產(chǎn)生高效的IgM抗體，抗體上升幅度大且持久穩(wěn)固。所以豬瘟一定要經(jīng)過兩次免疫才能獲得好的持久的保護(hù)。

（2）豬瘟抗體的產(chǎn)生受母源抗體影響。從28天注射豬瘟疫苗，疫苗注射后27天采血測(cè)得抗體平均值持續(xù)下降，豬瘟只有在母源抗體相對(duì)低（阻斷率＜10%）的情況免疫效果才好。

（3）豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對(duì)豬瘟免疫抗體的影響通過對(duì)本試驗(yàn)的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗（JXA1-R株）免疫后藍(lán)耳野毒感染率高達(dá)80%以上，藍(lán)耳抗體S/P平均值均已超過3.0，表明該豬場(chǎng)藍(lán)耳病病毒較活躍，已經(jīng)感染了藍(lán)耳野毒，說明該疫苗不能有效的控制藍(lán)耳病。豬瘟抗體陽(yáng)性率平均值為56.67%以上，且抗體離散度平均值達(dá)到40.64%以上，2項(xiàng)指標(biāo)均較差，說明豬瘟抗體不合格。因此，我們可以得知高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗（JXA1-R株）免疫對(duì)豬瘟細(xì)胞苗免疫產(chǎn)生明顯的干擾或抑制作用，2種疫苗免疫間隔時(shí)間7d，仍然有明顯干擾作用。這與張海燕等[1]報(bào)道免疫豬藍(lán)耳病弱毒苗對(duì)豬瘟免疫效果產(chǎn)生明顯的干擾作用基本一致。這很有可能與藍(lán)耳病病毒的發(fā)病機(jī)理有較大關(guān)系，藍(lán)耳病病毒在復(fù)制時(shí)與肺泡巨噬細(xì)胞的受體結(jié)合，直接導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞的碎裂溶解，延緩了肺泡巨噬細(xì)胞對(duì)抗原處理和遞呈作用，從而導(dǎo)致宿主發(fā)生免疫調(diào)節(jié)紊亂[2]。同時(shí)藍(lán)耳病病毒作用于免疫系統(tǒng)的T淋巴細(xì)胞，造成T淋巴細(xì)胞各亞群的比例下降[3]，從而抑制了機(jī)體對(duì)其他病原體的免疫反應(yīng)。同時(shí)藍(lán)耳病病毒還具有“抗體依賴性增強(qiáng)作用”，又對(duì)豬瘟弱毒疫苗的免疫抗體產(chǎn)生有抑制作用，由此可見藍(lán)耳病弱毒疫苗免疫是一把雙刃劍，有利有弊。因此，豬場(chǎng)應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)際情況來決定是否免疫藍(lán)耳弱毒苗。工程院院士楊漢春教授就明確指出我們應(yīng)少用藍(lán)耳弱毒苗，更加不能使用不同毒株的藍(lán)耳弱毒苗（藍(lán)耳病病毒易發(fā)生變異重組），而應(yīng)采用凈化的方式來控制藍(lán)耳病。現(xiàn)在這一觀點(diǎn)已得到絕大多數(shù)專家、學(xué)者以及規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)管理者的認(rèn)可。

[1]張海燕.豬瘟與高致病性藍(lán)耳病的免疫程序優(yōu)化試驗(yàn)[J].中國(guó)畜牧業(yè)，2014(5):64-65.

[2]楊漢春.動(dòng)物免疫學(xué)[M].中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2003.

[3]陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[M].中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2003.

田海芹（1981-），女，本科，2001年參加工作，主要從事動(dòng)物疫病血清學(xué)檢測(cè)工作。