彭曉邦

（商洛學(xué)院生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院，陜西商洛 726000）

板栗葉水浸液對(duì)商洛桔梗幼苗酶活性的影響

彭曉邦

（商洛學(xué)院生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院，陜西商洛 726000）

以商洛白花桔梗種子為材料，分別采用3，5?二硝基水楊酸法和氮藍(lán)四唑法測(cè)定不同濃度板栗葉水浸液對(duì)商洛白花桔梗幼苗酶活性的影響。結(jié)果表明，不同濃度板栗葉水浸液對(duì)商洛白花桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶、淀粉酶、超氧化物岐化酶（SOD）活性的影響各不相同。低濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性的化感作用不明顯，而高濃度對(duì)桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性有明顯的抑制作用。不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗淀粉酶活性均有化感抑制作用。板栗葉水浸液在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)對(duì)桔梗幼苗超氧化物歧化酶活性有明顯的化感促進(jìn)作用。

板栗葉水浸液；桔梗；轉(zhuǎn)化酶；淀粉酶；SOD

文獻(xiàn)著錄格式：彭曉邦.板栗葉水浸液對(duì)商洛桔梗幼苗酶活性的影響［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，56（1）：58－60.

DOI 10.16178／j.issn.0528?9017.20150118

化感作用是指植物或微生物的代謝分泌物對(duì)環(huán)境中其他植物或微生物有利或不利的作用，這是生態(tài)系統(tǒng)中生物之間普遍存在的關(guān)系［1］。板栗是商洛的鄉(xiāng)土樹(shù)種，也是主要的經(jīng)濟(jì)林品種之一，板栗對(duì)高血壓、冠心病和動(dòng)脈硬化等疾病有較好的預(yù)防和治療作用［2－3］。桔梗是一種可藥用、食用和觀賞的多功能植物［4］，是“五大商藥”之一，也是商洛地區(qū)的主要經(jīng)濟(jì)作物之一。關(guān)于化感作用的研究，近年來(lái)有不少報(bào)道，研究?jī)?nèi)容涉及水稻［5］、飛機(jī)草［6］、菊科植物［7］、油松［8］、核桃［9］等植物，但有關(guān)板栗葉水浸液的化感作用卻較少［10］。通過(guò)研究不同濃度板栗葉水浸液對(duì)商洛桔梗幼苗酶活性的影響，找出其影響規(guī)律，對(duì)科學(xué)構(gòu)建林藥復(fù)合系統(tǒng)，合理選擇林下中藥材品種，提高土地利用率，增加農(nóng)民收入，促進(jìn)地方經(jīng)濟(jì)發(fā)展具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

供體材料為板栗葉，采自商洛市鎮(zhèn)安縣。受體種子為商洛地道中藥材白花桔梗，由生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院GAP科研工程中心提供。

1.2 方法

1.2.1 板栗葉水浸液的制備

將板栗葉子用自來(lái)水清洗干凈，然后用蒸餾水潤(rùn)洗幾次，烘干板栗葉，準(zhǔn)確稱取10 g，剪碎板栗葉，將其放入500 mL大燒杯中，加入200 mL蒸餾水浸泡，并在室溫下振蕩48 h，然后過(guò)濾裝于廣口瓶中，稀釋成試驗(yàn)中所用的板栗葉水浸液的濃度，分別為0.000，0.005，0.015，0.025，0.035，0.045 g·mL－1，于4℃下貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 商洛白花桔梗種子的培養(yǎng)

選取飽滿的商洛白花桔梗種子，用水清洗干凈，在燒杯中浸泡48 h。對(duì)浸泡的種子進(jìn)行消毒，濾干后備用。在提前清洗晾干的培養(yǎng)皿里放上濾紙，用板栗葉水浸液浸濕濾紙，濃度為0的加蒸餾水浸濕濾紙，溶液不宜過(guò)多，潮濕即可，然后接種，每個(gè)培養(yǎng)皿大概100顆種子，每濃度重復(fù)6次，貼好標(biāo)簽紙，放入人工氣候培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2.3 桔梗幼苗酶活性的測(cè)定

選取長(zhǎng)勢(shì)良好的幼苗，分別測(cè)定其轉(zhuǎn)化酶活性［11］、淀粉酶活性［12］和超氧化物歧化酶（SOD）活性［13］。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和圖表制作。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性的影響

轉(zhuǎn)化酶又稱蔗糖酶，是一種水解酶。植物體的庫(kù)組織中一般含有較高活性的轉(zhuǎn)化酶，它能將植物體內(nèi)的主要同化產(chǎn)物蔗糖不可逆地水解為葡萄糖和果糖，為細(xì)胞的可溶性糖類貯庫(kù)提供可利用六碳糖，以用于細(xì)胞壁、貯藏多糖及果聚糖的生物合成，并通過(guò)與呼吸作用偶聯(lián)的氧化磷酸化產(chǎn)生能量［14］。由圖1可知，不同濃度板栗葉水浸液對(duì)商洛白花桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性有不同的影響。當(dāng)濃度為0.005 g·mL－1時(shí)，桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性是0.025 0 U·g－1，略小于對(duì)照組的酶活性，是對(duì)照組的91%。當(dāng)濃度為0.015 g·mL－1時(shí)，桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性達(dá)到整個(gè)試驗(yàn)濃度范圍的最大值0.029 5U·g－1，是對(duì)照組的1.07倍。板栗葉水浸液濃度上升至0.025 g·mL－1時(shí)，轉(zhuǎn)化酶活性0.029 0 U·g－1，略高于對(duì)照組的酶活性，為對(duì)照組的1.05倍；隨著濃度的進(jìn)一步增加（0.035 g· mL－1），轉(zhuǎn)化酶活性急劇下降，為對(duì)照組的49.09%。當(dāng)濃度達(dá)到最大值（0.045 g·mL－1）時(shí)，轉(zhuǎn)化酶活性降到最低（0.011 5 U·g－1），為對(duì)照組的41.82%。板栗葉水浸液在低濃度下對(duì)桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性的化感作用不明顯，高濃度有明顯的抑制作用。

圖1 不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性的影響

2.2 不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗淀粉酶活性的影響

α?淀粉酶作為一類典型的水解酶，廣泛地存在于微生物、植物和動(dòng)物體中，能夠特異性地切割淀粉中的1，4?糖苷鍵。α?淀粉酶在谷類作物中以多種形式存在，在淀粉代謝及種子發(fā)芽過(guò)程中起著重要作用［15］。

由圖2可知，不同濃度板栗葉水浸液對(duì)商洛白花桔梗幼苗淀粉酶活性有不同的影響。在板栗葉水浸試驗(yàn)液濃度范圍內(nèi)，淀粉酶活性隨著濃度的升高呈下降趨勢(shì)。當(dāng)濃度為0.005 g·mL－1時(shí)，淀粉酶活性為8.65 U·g－1，與對(duì)照組酶活性相比降低了0.63 U·g－1。當(dāng)濃度上升至0.045 g·mL－1時(shí)，淀粉酶活性為6.35 U·g－1，是對(duì)照組酶活性的68.43%。板栗葉水浸液在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)對(duì)桔梗幼苗淀粉酶活性有明顯的化感抑制作用。

圖2 不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗淀粉酶活性的影響

2.3 不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗SOD活性的影響

SOD是活性氧清除系統(tǒng)中最重要的抗氧化酶，在保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷過(guò)程中具有重要作用［16］。

由圖3可知，不同濃度板栗葉水浸液對(duì)商洛白花桔梗幼苗SOD活性有顯著的影響。在板栗葉水浸試驗(yàn)液濃度范圍內(nèi)，SOD活性隨著濃度的升高呈上升趨勢(shì)。當(dāng)達(dá)到0.005 g·mL－1時(shí)，SOD活性為13.46 U·g－1，是對(duì)照組酶活性的2.36倍。當(dāng)濃度上升至0.045 g·mL－1時(shí)，SOD活性為82.25 U·g－1，是對(duì)照組酶活性的14.40倍。因此，板栗葉水浸液在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)對(duì)桔梗幼苗SOD活性有明顯的化感促進(jìn)作用。

圖3 不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗SOD活性的影響

3 小結(jié)和討論

化感植物可利用其化感作用抑制其他植物的生長(zhǎng)，使其自身在自然條件下處于優(yōu)勢(shì)地位，但作用強(qiáng)度取決于化感物質(zhì)活性，而活性強(qiáng)弱受其濃度、分子結(jié)構(gòu)及互作方式的影響，且化感作用強(qiáng)度首先由化感物質(zhì)的濃度決定［17］。本研究發(fā)現(xiàn)，板栗葉水浸液在低濃度下對(duì)桔梗幼苗轉(zhuǎn)化酶活性的化感作用不明顯，而高濃度有明顯的化感抑制作用。這與先前對(duì)核桃葉水浸液與商洛桔?；行?yīng)的研究結(jié)果（低促高抑的化感作用）不完全一致［9，18］，與魏小春等［19］的脫落酸與赤霉素對(duì)瓜爾豆蔗糖代謝酶類的影響研究也略有不同。分析原因可能是由于本試驗(yàn)與上述試驗(yàn)的材料不同，此外還有試驗(yàn)時(shí)間、地點(diǎn)、使用藥品及儀器等不同都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果不同。本研究中，板栗葉水浸液在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)對(duì)桔梗幼苗淀粉酶活性有明顯的化感抑制作用，這與劉建新等［12］對(duì)駱駝蓬提取物對(duì)玉米種子α?淀粉酶活性影響的研究結(jié)果相一致。本研究還發(fā)現(xiàn)，不同濃度板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗SOD活性均有明顯的化感促進(jìn)作用，這與徐立軍等［10］對(duì)半夏的研究結(jié)果一致。但韋美玉等［20］的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，脅迫環(huán)境下植物SOD活性呈低濃度促進(jìn)、高濃度抑制的變化規(guī)律，可能是化感物質(zhì)不同，其對(duì)受體植物的生理影響也就有所不同，且同一作物不同時(shí)期對(duì)不同濃度的化感分泌物產(chǎn)生的影響也往往不同。因此，板栗葉水浸液對(duì)桔梗幼苗的化感作用還有待進(jìn)一步研究。

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（責(zé)任編輯：張瑞麟）

S 567

A

0528?9017（2015）01?0058?03

2014?09?21

陜西省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2014KJXX?79）；商洛學(xué)院科研基金（11SKY?FWDF005）

彭曉邦（1980－），男，陜西周至人，副教授，博士，從事植物生態(tài)學(xué)領(lǐng)域的教學(xué)科研工作。E?mail：xbpeng1898＠sina.com。