王丹　曹志　肖應(yīng)輝

摘 要 水稻（Oryza sativa）作為世界上主要的糧食作物之一，它的生產(chǎn)關(guān)系糧食安全。稻瘟病是由真菌病原物Magnaporthe oryzae引起的，是水稻最嚴(yán)重的病害之一，嚴(yán)重威脅著世界的糧食生產(chǎn)。簡述國內(nèi)外水稻抗稻瘟病基因的研究進(jìn)展，

關(guān)鍵詞 水稻；稻瘟??；抗性基因

中圖分類號：S511 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號：1673-890X（2015）30-0-03

水稻（Oryza sativa）作為世界上主要的糧食作物之一，它的生產(chǎn)關(guān)系糧食安全。稻瘟病是由真菌病原物Magnaporthe oryzae引起的，是水稻最嚴(yán)重的病害之一，嚴(yán)重威脅著世界的糧食生產(chǎn)[1]。據(jù)統(tǒng)計，從1975-1990 年間，全世界由稻瘟病導(dǎo)致的水稻產(chǎn)量損失高達(dá)1.57億t[2]。自20世紀(jì)末以來，我國稻瘟病每年發(fā)生面積均超過380萬hm2，所造成的產(chǎn)量損失達(dá)數(shù)億公斤每年[3]。實踐證明，控制此病害最經(jīng)濟、有效和環(huán)保的方法是利用寄主的抗性培育和種植抗病品種[1，4]，而應(yīng)用分子標(biāo)記輔助選擇（Marker-assisted Selection，MAS）技術(shù)將多個具有不同抗譜的稻瘟病抗性基因聚合到同一個品種中，是培育具有持久抗瘟性品種的有效措施之一[5]。

1 稻瘟病的抗性遺傳

稻瘟病抗性可分為兩種類型：完全抗性和部分抗性。完全抗性是指寄主與病原菌之間以一種不親和的方式互作，病原菌不能在寄主上完成生長世代；這種抗性一般是由單個主效抗病基因控制的，這種抗性對病原菌具有小種專一性，在特定的品種中抗性的壽命有限，原因是它對病原菌進(jìn)化的選擇壓很大。而部分抗性是指寄主與病原菌以一種親和方式互作，但其能減輕病原菌的侵染程度；一般認(rèn)為，部分抗性是由多個基因控制的[6]，每一個微效基因又稱為數(shù)量性狀基因座QTL。

2 稻瘟病抗性基因定位與克隆

20世紀(jì)60年代中期，日本率先開展了水稻抗稻瘟病基因的遺傳研究，并取得了一系列的研究成果。隨著分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，各種類型分子標(biāo)記的開發(fā)和應(yīng)用，推動了水稻稻瘟病抗性基因定位與克隆研究迅速發(fā)展。截至目前，已至少報道了69個抗稻瘟病位點和83個主效基因，這些抗性基因或主效QTL大多被精細(xì)定位。其中，Pib、Pita、Pi9、Pi2、Piz-t、Pid2、Pi36、Pi37、Pik-m、Pid3、Pi-t、Pi5、Pish、Pi54、Pik、Pik-p、Pia、Pi25、Pi1、 Pi56、Pi63、PiCO39、Pi64、Pi50、pi21和Pb1等26個基因被成功克隆，這些基因分布于除第3 染色體外的其余11條染色體上，其中第6、11和12染色體分布最多。稻瘟病抗性基因在染色體上往往成簇分布，如Pi2、Pi9和Piz-t同為Piz位點上的復(fù)等位基因，Pi1、Pik-h/Pi54、Pik-m和Pik-p同為Pik位點上的復(fù)等位基因，Pid3與Pi25等位，Pia與PiCO39等位。

第6染色體Pi9/2位點是稻瘟病抗性基因密集區(qū)域，到目前為止至少有10個以上的基因被定位，分別是Pigm、Pi2、Piz–t、Pi2–2、Pi9、Pi26、Pi40、Pi50、Piz和qBR6。廣譜抗稻瘟病基因Pi9首先由Amante Bordeos等[7]從小粒野生稻導(dǎo)入栽培稻中并命名，并獲得了與之緊密連鎖的RFLP標(biāo)記RG64和R2132，遺傳距離分別2.8cM和2.7cM；后被精細(xì)定位于水稻第6染色體短臂的NIP基因和PK基因之間。在抗譜表現(xiàn)方面，Pi9抗譜相當(dāng)廣，對來自13個國家的43個稻瘟病菌株均表現(xiàn)出很高的抗性。Qu等利用圖位克隆方法最終克隆了Pi9[8]。Pi2為Pi9同一位點上的抗瘟基因，Mew[9]、Yu[10]和吳金紅[11]等的研究將抗性基因Pi2（t）最終定位在標(biāo)記RG64和AP22之間，遺傳距離分別是0.9cM和1.2cM。Zhou等利用圖位克隆方法克隆了Pi2，Pi2和Pi9同源性很高，只存在幾個氨基酸的差異，抗譜也只有幾個稻瘟菌生理小種差異[12]。吳建利等在谷梅2號第6號染色體定位了2個抗稻瘟病基因Pi-25和Pi-26。Pi-25對中國稻瘟菌菌系92-183（小種ZC15）有較強的葉瘟和穗瘟抗性，定位于水稻第6染色體標(biāo)記A7和RG456之間，圖距分別是1.7cM和1.5cM；Pi-26對菲律賓稻瘟菌菌系Ca89有較強的葉瘟抗性，定位于水稻第6染色體上標(biāo)記B10和R674之間，圖距分別是5.7cM和25.8cM[13]。此外，江南等研究發(fā)現(xiàn)，分子標(biāo)記AP4007、AP4791、AP5659-5和AP5930與谷梅2號中的主效抗病基因共分離[14]。Deng[15]等通過開發(fā)新的標(biāo)記，定位了谷梅4號中的廣譜抗性基因Pigm，將其定位在水稻第6染色體上CAPS標(biāo)記C5483與C0428之間的70kb區(qū)間內(nèi)，與廣譜抗性基因Pi2/Pi9緊密連鎖或等位。此外，他還發(fā)現(xiàn)Pi26基因可能也在同一位點。王悅[16]等對天津野生稻中的主效抗稻瘟病基因Pi2–1進(jìn)行了定位，將其定位在第6號染色體上Pi9/2位點，位于SSR標(biāo)記AP5659–5和RM7213之間，與兩標(biāo)記的遺傳距離分別為0.9cM和1.4cM。

此外，黃紅梅[17]將湘資3150中的抗稻瘟病基因Pi47定位在第11染色體上，位于標(biāo)記RM224和RM206之間。而后史學(xué)濤[18]對湘資3150中的抗稻瘟病基因Pi47進(jìn)行了精細(xì)定位，將Pi47定位在水稻第11染色體長臂端，位于SSR標(biāo)記RM224和STS標(biāo)記K134之間；而后又通過開發(fā)新的分子標(biāo)記，最終將Pi47定位在CAPS標(biāo)記S32和K33之間，與兩標(biāo)記的遺傳距離分別為0.21 cM和0.03 cM，分子標(biāo)記S10與其共分離。

Rybka等利用RFLP標(biāo)記和RAPD標(biāo)記定位了位于第十二號染色體中部的兩個抗稻瘟病基因Pi-ta2和Pi-ta，它們是緊密連鎖的，后來對兩個基因進(jìn)行深入研究發(fā)現(xiàn)含有Pi-ta2基因的水稻品種都具有Pi-ta基因，Tetep等通過接種實驗發(fā)現(xiàn)Pi-ta2 比Pi-ta抗譜更廣。Wu等從1440個RAPD引物產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了3個標(biāo)記與目的基因Pi-ta的遺傳距離小于0.5cm，為Bryan等最終克隆該基因奠定了良好的基礎(chǔ)[19]。此外，王悅等又將天津野生稻中另一個主效抗稻瘟病基因Pi51（t）定位在第12染色體上位于標(biāo)記RM5364和RM27990之間，與兩標(biāo)記的遺傳距離分別為0.4 cM和0.8cM[20]。此外，黃紅梅將湘資3150中的另一主效抗稻瘟病基因Pi48定位在第12染色體上，位于標(biāo)記RM5364和RM7102之間4.2cM的區(qū)間內(nèi)[21]。劉楊對Pi48基因進(jìn)行了精細(xì)定位，將Pi48定位于第12號染色體著絲粒附近，標(biāo)記LY-2與Pi48之間的遺傳距離只有0.025cM左右，并且該標(biāo)記與Pi48共分離[22]。

隨著對稻瘟病抗病基因和致病機理以及抗病基因在寄主和病原菌之間相作深入研究，對水稻抗稻瘟病侵染全過程的詳細(xì)了解以及新生物技術(shù)手段發(fā)展和應(yīng)用，一定能夠?qū)⒌疚敛〉奈：χ饾u減小的。

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（責(zé)任編輯：趙中正）