趙琳靜,喬妍,王斌,管秀艷,徐悅,王磊,齊閻春曉,邵卓,李洪森,燕方龍
(上海工程技術(shù)大學(xué) 化學(xué)化工學(xué)院,上海,201620)
食品在儲藏和運輸過程中不僅容易受到微生物作用發(fā)生腐敗變質(zhì),也易與空氣中氧發(fā)生氧化反應(yīng),造成油脂及富脂食品色、香、味與營養(yǎng)價值等方面的劣化。此外,霉菌和害蟲也是造成農(nóng)產(chǎn)品倉儲損失的重要原因。目前,在食品農(nóng)產(chǎn)品領(lǐng)域廣泛使用的抑菌劑、抗氧化劑及殺蟲劑仍以化學(xué)合成為主,其帶來的環(huán)境污染、抗性、殘留及對健康的危害[1,2]被廣為關(guān)注。安全高效的天然抗菌劑、抗氧化劑及殺蟲劑的研究開發(fā)對食品工業(yè)具有重要的現(xiàn)實意義。
檸檬草(lemongrass),學(xué)名 Cymbopogon citratus(DC.)Stapf,禾本科香茅屬多年生草本植物,原產(chǎn)于亞洲熱帶和亞熱帶地區(qū),在南美、非洲及其他熱帶國家也有廣泛種植。我國檸檬草資源主要分布于福建、臺灣、海南、廣東、湖南、四川、貴州、云南等省。檸檬草精油(lemongrass essential oil,LEO)是從檸檬草中提取出來的具強(qiáng)烈檸檬香味的黃色油狀液體,在國際芳香油市場上占有重要地位。近年來,國內(nèi)外學(xué)者圍繞LEO作了大量基礎(chǔ)研究工作。本文對LEO的化學(xué)成分、生物活性、安全性及在食品保藏中的應(yīng)用性研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。
LEO化學(xué)成分以萜類及萜類系化合物為主,醛類含量最高,其次為烯類、醇類、酸類、酮類和酯類,具體包括橙花醛(neral)、香葉醛(geranial)、香葉醇(geraniol)、檸檬烯(limonene)、香茅醛(citronellal)、月桂烯(myrcene)等,結(jié)構(gòu)如圖1所示[3]。其中,橙花醛和香葉醛是LEO兩種最主要的成分,兩者互為順反異構(gòu)體,通常反式結(jié)構(gòu)香葉醛的含量略高于其順式結(jié)構(gòu)橙花醛。
圖1 檸檬草精油主要成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)[3]Fig.1 Chemical structure of the major constituents of essential oil from lemongrass
不同產(chǎn)地的LEO的化學(xué)成分存在一定差異,這些差異與其生長的土壤及氣候條件、種源、采收季節(jié)等均有關(guān)系。董曉敏等[4]對廣西田林栽培的檸檬草葉揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行分析,鑒定了39種成分,主要為單萜及含氧倍半萜、倍半萜及含氧倍半萜、萜烯和醇類等化合物,其中相對含量大于1%的成分有8種,包括香葉醛(37.40%)、橙花醛(31.97%)、月桂烯(15.65%)、橙花醇(2.56%)、反式香芹醇(1.55%)、香葉醇(1.35%)、芳樟醇(1.12%)、香茅醇(1.10%)。陳集雙等[5]對杭州栽培的引種自西非喀麥隆的檸檬草葉揮發(fā)油進(jìn)行了分析,共鑒定33種成分,主要包括香葉醛(35.75%)和橙花醛(28.70%)、β-香葉烯(14.16%)、香葉醇(7.86%)、乙酸香葉酯(3.66%)、香葉酸(1.40%)、芳樟醇(1.00%)等。劉家欣等[6]對湘西地區(qū)栽培的引種自廣東湛江的檸檬草揮發(fā)油進(jìn)行分析,鑒定了23種成分,發(fā)現(xiàn)其主要成分為檸檬醛(39.12%)、橙花醛(29.45%)、香葉烯(4.93%)、牻牛兒醇(4.03%)、2-戊烯(3.59%)、牻牛兒酸(2.98%)、朱欒倍半萜(1.86%)、反-β-羅勒烯(1.29%)等。
粉碎、干燥等前處理方法不同會造成LEO中各種化學(xué)成分含量的差異。Barbosa等[3]從巴西產(chǎn)11種檸檬草中提取精油,發(fā)現(xiàn)同種產(chǎn)地的檸檬草經(jīng)粉碎后蒸餾得到的精油產(chǎn)量下降了40%~68%;進(jìn)一步通過GC/MS分析發(fā)現(xiàn),檸檬草袋泡茶及檸檬草粉中的月桂烯含量明顯低于未粉碎的干燥葉,說明粉碎過程中精油的揮發(fā)不僅導(dǎo)致最終出油率降低,也會造成精油中鎮(zhèn)痛活性物質(zhì)月桂烯含量的減少。此外,Hanaa等人[7]發(fā)現(xiàn),采用不同干燥方式處理的檸檬草葉,蒸餾得到的精油成分也有明顯差別,其中橙花醛和香葉醛的含量變化為:陰干>45℃烘干>曬干,而月桂烯含量與之相反,曬干>45℃烘干>陰干;此外,采用烘干檸檬草葉提取得到的精油收率明顯高于陰干及曬干后提取的結(jié)果。
LEO成分含量的差異還與提取時間與提取方法有關(guān)。Cannon等[8]系統(tǒng)考察了蒸餾時間對LEO產(chǎn)率及組成的影響,結(jié)果表明,常規(guī)水蒸氣蒸餾提取20 min時LEO產(chǎn)率達(dá)到最大,在20~160 min內(nèi),LEO產(chǎn)率未發(fā)生顯著變化,而蒸餾提取240 min時,LEO產(chǎn)率比20~160 min下降約40%,與延長提取時間后精油揮發(fā)有關(guān);LEO中主要成分橙花醛和香葉醛的產(chǎn)率和含量在40 min內(nèi)均隨提取時間的延長而增加,但提取時間超過40 min后,兩者的產(chǎn)率和含量均隨提取時間延長而降低。此外,黎華壽等[9]采取固相微萃取技術(shù)直接收集檸檬草莖葉揮發(fā)的氣體成分,測得的檸檬醛和Z-檸檬醛(即橙花醛)含量(53.98%和34.40%)明顯高于上述使用常規(guī)水蒸氣蒸餾法提取的結(jié)果。
目前,國內(nèi)外研究者對檸檬草葉精油的研究報道較多,關(guān)于檸檬草其他部位精油成分的報道尚不多見。黎華壽等[9]對檸檬草根揮發(fā)物的化學(xué)成分進(jìn)行分析,結(jié)果表明,檸檬草根精油中的成分均為萜烯類化合物及其含氧衍生物,主要成分為長葉松烯(56.67%),其次為芹子烯內(nèi)酯(20.03%),此外還包括欖香烯(5.66%)、依蘭烯(4.33%)等,與其葉揮發(fā)物成分明顯不同。
LEO具有抗炎、抑菌、鎮(zhèn)痛、抗氧化、中樞調(diào)節(jié)、抗癌、降膽固醇、驅(qū)蟲等多種活性,本文僅對近年來LEO在抑菌、殺蟲及抗氧化活性方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。
研究人員通過離體方法,發(fā)現(xiàn)LEO溶液及其蒸氣具有優(yōu)良的抗食源性腐敗菌和致病菌活性。
Tyagi等[10]考察了LEO對多種導(dǎo)致食品腐敗的酵母菌的抑制活性,包括釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、拜氏接合酵母(Zygosaccharomyces bailii)、黑酵母(Aureobasidium pullulans)、假絲酵母(Candida diversa)、發(fā)酵畢赤酵母(Pichia fermentans)、異常畢赤酵母(Pichia anomala)和漢遜酵母(Hansenula polymorpha)等,發(fā)現(xiàn)LEO對上述幾種酵母菌的最低抑菌濃度為0.28~1.3 mg/mL,最低殺菌濃度為0.56~4.5 mg/mL;致死時間實驗(kill time assay)表明,在最低殺菌濃度下,LEO在24 h內(nèi)使S.cerevisiae總數(shù)減少最多。
LEO對黃曲霉導(dǎo)致的真菌性腐敗也有抑制作用。Paranagama等[11]從貯藏稻米中分離黃曲霉(Aspergillus flavus Link.)并考察LEO的抑制效果,結(jié)果表明,LEO的最低抑菌濃度和最低殺菌濃度分別為0.6和1.0 mg/mL,且0.1 mg/mL的LEO能完全抑制黃曲霉毒素的產(chǎn)生;進(jìn)一步觀察經(jīng)LEO熏蒸毒化的黃曲霉菌絲體變化,發(fā)現(xiàn)2.80 mg/mL和3.46 mg/mL LEO能分別抑制黃曲霉菌孢子的萌發(fā)和菌絲體生長從而引起細(xì)胞死亡。
吳慧清等[12]系統(tǒng)比較了LEO在內(nèi)的42種植物精油對大腸桿菌(Escherichia coli)8099、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC6538、枯草桿菌黑色變種(Bacillus subtilis)ATCC9372、白色念珠菌(Candida albicans)ATCC10231和黑曲霉(Aspergillus niger)ATCC16404的抑菌效果,結(jié)果表明,在所測定的42種精油中,LEO對上述5種菌的抑制活性僅次于肉桂和百里香精油。
此外,LEO對植物病原菌也顯示出抑制活性。趙杰等[13]采用生長速率法測定了LEO對梨樹腐爛病菌、柑橘樹脂病菌、柑橘黑腐病菌、西瓜炭疽病菌、甜瓜枯萎病菌、甜瓜葉斑病菌、甜瓜蔓枯病菌、蠶豆輪紋病菌的抑菌活性,結(jié)果表明,LEO對這些病原真菌都具有很好的抑菌活性,其EC50分別為308.052 2、433.319 6、399.733 8、319.010 3、366.895 7、279.126 1、270.738 8 和333.495 6 μL/L;此外,通過抑菌圈實驗發(fā)現(xiàn),LEO對桃細(xì)菌性穿孔病菌也具有一定的抑菌作用,最低抑菌濃度為500 μL/L。
目前,LEO中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)很多抑菌效果明顯的單體成分。Taweechaisupapong等[14]報道了 LEO中主要成分檸檬醛和香葉醇具有良好的抗真菌能力,兩者對C.albicans和克柔念珠菌(Candida krusei)的最小抑菌濃度分別為0.25~0.5 μL/mL,最小殺菌濃度為0.5~1 μL/mL。單核細(xì)胞李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一種常見的危害較大的食源性致病菌。Leonard等人[15]利用結(jié)晶紫染色與激光共聚焦掃描顯微鏡觀察相結(jié)合的方法,考察了LEO及其主要成分對李斯特菌生物被膜形成的影響,發(fā)現(xiàn)檸檬醛和橙花醇對李斯特菌生物被膜形成有較好抑制作用。
近年來,低毒、低殘留、環(huán)境友好型植物源殺蟲劑的開發(fā)日益成為倉儲害蟲控制的研究熱點。大量文獻(xiàn)報道了包括LEO在內(nèi)的許多植物精油對蚊、蠅、虱、螨、蟻、倉儲害蟲等具有熏蒸、觸殺、驅(qū)避、拒食、殺卵和生長抑制等作用。
Olivero-Verbel[16]報道了南美哥倫比亞種植的LEO對赤擬谷盜表現(xiàn)出良好的驅(qū)避性,4h內(nèi)平均有效驅(qū)避劑量為 0.021 mL/L,明顯低于陽性對照IR3535(0.686 mL/L)。Caballero-Gallardo[17]進(jìn)一步比較了LEO及其他2種植物精油——玫瑰草(Cymbopogon martinii)及野生牛至(Lippia origanoides)對赤擬谷盜的驅(qū)避和觸殺作用,結(jié)果表明,濃度為0.2 μL/cm2的上述3種植物精油在更短時間(2 h)內(nèi)對赤擬谷盜的驅(qū)避率高達(dá)93%~95%,明顯高于對照組IR3535(72%);但是,上述3種精油對赤擬谷盜的觸殺效果均較弱,在0.5 μL/cm2濃度下,僅LEO在24 h對赤擬谷盜開始表現(xiàn)出觸殺活性,3種精油在1.2 μL/cm2濃度暴露72 h致死率均低于20%。此外,肖洪美[18]和 Stefanazzi等[19]還報道了 LEO 對儲糧害蟲玉米象(Sitophilus oryzae)也有驅(qū)避活性;1.5 mg/mL和1.0 mg/mL的LEO對玉米象成蟲的種群抑制率在第6天均達(dá)到100%,具有作為儲糧保護(hù)劑的開發(fā)潛力。
蔣小龍等[20]發(fā)現(xiàn),除了赤擬谷盜和玉米象,LEO還對印度谷螟(Plodia interpunctella)、綠豆象(Callosobruchus chinensis)成蟲及黃粉蟲(Tenebrio moliter)成蟲和幼蟲具有明顯熏殺作用。Ketoh等[21]也發(fā)現(xiàn)LEO對四紋豆象(Callosobruchus maculatus)成蟲有良好殺滅作用,半數(shù)致死濃度為2.7 μL/L。
Hanifah等[22]考察了 LEO和印楝(Azadirachta indica)精油的殺螨效果,結(jié)果表明,無論采用接觸法還是點滴法,50%濃度的LEO在24 h對Dermatophagoides farinae和Dermatophagoides pteronyssinus的致死率均高于91%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于印楝精油。
Pandey等人[23]研究了包括LEO在內(nèi)的7種植物精油對印度白蟻(Odontotermes assamensis)的毒殺作用,發(fā)現(xiàn)各精油在2.5 mg/g濃度下對白蟻均有一定毒殺作用,實驗第8天的致死率分別為30%~90%,7種精油中以LEO的毒殺活性最高;研究者進(jìn)一步通過GC/MS對這些精油的化學(xué)成分進(jìn)行分析,并對丁子香酚、乙酸香葉酯、檸檬醛、α-蒎烯等13種活性成分對白蟻的毒殺效果進(jìn)行考察,發(fā)現(xiàn)酚類成分毒殺白蟻作用最好,其次為醇類、酯類和醛類,而烴類和酮類活性最低。
此外,Gupta等人[24]研究發(fā)現(xiàn)LEO還具有一定的殺線蟲(Meloidogyne incognita)能力,濃度1 000 μL/L的LEO 18 h即可100%殺死線蟲,125 μL/L的LEO 48 h對線蟲的致死率約為80%。
研究人員通過油脂抗氧化試驗考察LEO作為天然抗氧化劑在脂溶性食品中的應(yīng)用效果。李楠[25]采用微波輔助技術(shù)提取LEO,發(fā)現(xiàn)其在豬油中表現(xiàn)出與二丁基羥基甲苯(BHT)相近的抗氧化活性;黃國平等[26]研究發(fā)現(xiàn),LEO在植物性油脂中的抗氧化能力與VE近似;LEO聯(lián)合VE對抗氧化活性具協(xié)同效應(yīng),可替代合成抗氧化劑丁基羥基茴香醚(BHA)。
楊欣等[27]采用自由基清除試驗發(fā)現(xiàn),在一定濃度內(nèi),LEO在總抗氧化性和清除羥基自由基方面略低于合成抗氧化劑沒食子酸丙酯(PG),而對超氧陰離子自由基清除能力強(qiáng)于PG。此外,Saeio等[28]也報道了LEO清除ABTS自由基的能力和較好的鐵還原抗氧化能力(ferric reducing antioxidant power,F(xiàn)RAP);Sacchetti等[29]通過 DPPH 自由基法、β-胡蘿卜素漂白法及魯米諾化學(xué)發(fā)光法,發(fā)現(xiàn)了LEO具有一定的體外抗氧化活性。
精油的抗氧化活性成分非常復(fù)雜,而萜類(單萜、倍半萜、二萜等)、芳香族(苯丙素及其衍生物等)、脂肪族、含氧雜環(huán)及含硫化合物等不同結(jié)構(gòu)類型物質(zhì)的抗氧化作用機(jī)制各不相同[30]。通常認(rèn)為,酚類物質(zhì)是芳香精油中最主要的抗氧化活性成分,而其它成分對抗氧化活性有協(xié)同增效作用。對于酚類物質(zhì)含量極少的檸檬草揮發(fā)油的抗氧化機(jī)制研究還有待進(jìn)一步深入。
雖然檸檬草藥用歷史悠久,但鑒于其精油成分的復(fù)雜性,在正式作為食品用途前,對其進(jìn)行全面的安全性評價必不可少。Costa等[31]研究了LEO對Swiss小鼠的急性毒性、蓄積毒性和遺傳毒性,發(fā)現(xiàn)LEO對小鼠經(jīng)口半數(shù)致死劑量(LD50)約為3 500 mg/kg.bw;低、中、高3 種劑量(1、10、100 mg/kg b.w.)的LEO連續(xù)灌胃21 d,與對照組相比,小鼠體重、尿液生化指標(biāo)(尿肌酐、尿蛋白等)及臟器重量均無顯著變化(P<0.05);組織病理研究也未發(fā)現(xiàn)其對腦、心、肝、肺、胃、脾、膀胱等臟器的損害;進(jìn)一步通過慧星試驗發(fā)現(xiàn),LEO對實驗小鼠血細(xì)胞DNA無明顯損傷。上述研究表明,在100 mg/kg b.w.劑量范圍內(nèi)LEO對嚙齒類動物無明顯的蓄積毒性和遺傳毒性。Saeio等[32]采用四唑鹽(MTT)比色法考察了LEO對正常人外周血單核細(xì)胞(PBMCs)的細(xì)胞毒性,LEO溫育細(xì)胞48h,細(xì)胞存活比例近100%,無細(xì)胞毒性。Silva等[33]同樣證實,在200 mg/kg內(nèi),LEO未引起人中性粒細(xì)胞乳酸脫氫酶釋放增加,不具細(xì)胞毒性??梢?,無論是動物體內(nèi)毒性評價還是在體外細(xì)胞實驗中,LEO均未表現(xiàn)出毒性。
在自然界存在的約10萬種真菌中,約有100種植物性病原菌造成果蔬的各種病害。迄今,已有一些文獻(xiàn)報道了LEO在體內(nèi)實驗中可一定程度控制腐敗菌和食源性致病菌生長,有望替代化學(xué)合成抗真菌劑用于果蔬采后保鮮。
Arrebola等[34]以灰霉菌(Botrytis cinerea)、青霉菌(Penicillium expansum)和匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)為供試菌種,篩選抑菌效果最好的植物精油用于采后桃果的活體防效和貯藏保鮮實驗。結(jié)果表明,在測試的10種精油中,LEO和百里香(Thymus vulgaris L.)精油對上述3種致病菌的孢子萌發(fā)抑制效果最好;8 μL/plate LEO和百里香精油對3種致病菌的菌絲體生長抑制率分別為25%和50%,但兩者混合液并不具備增效作用;研究人員進(jìn)一步比較了陽性對照抗真菌劑 PPCB004、LEO、百里香精油、PPCB004+LEO、PPCB004+百里香精油噴灑處理對分別接種B.cinerea,P.expansum和 R.stolonifer病菌的新鮮桃果病害發(fā)生率的影響,結(jié)果表明,新鮮桃接種病菌后于25℃放置5 d,采用上述幾種處理方法均能降低發(fā)病率,其中PPCB004+LEO復(fù)合溶液處理效果最好,可使發(fā)病率分別降低50%,42%和82%,具有明顯的協(xié)同增效作用;而且,PPCB004+LEO復(fù)合溶液與氣調(diào)包裝(modifed atmosphere packaging,MAP)結(jié)合使用,可保持桃果品質(zhì),延長貯存貨架期,具有潛在的商業(yè)應(yīng)用價值。此外,Hyun等人[35]也報道了LEO蒸氣在氣調(diào)保鮮環(huán)境中對嗜溫菌有良好的抑制活性,能有效延長新鮮卷心菜的貯存期。
Ali等[36]研究了LEO對辣椒炭疽病菌(Colletotrichum capsici)的抑制活性,并考察了LEO與殼聚糖復(fù)合涂膜對新鮮柿子椒的保鮮效果。0.5%和1.0%的LEO在體外試驗中能有效抑制辣椒炭疽病菌的生長;進(jìn)一步通過對1.0%殼聚糖溶液、0.5%LEO溶液、1.0%LEO溶液、1.0%殼聚糖+0.5%LEO復(fù)合溶液、1.0%殼聚糖+1.0%LEO復(fù)合溶液涂膜處理柿子椒的比較,發(fā)現(xiàn)室溫放置21 d,5種方法均能降低柿子椒失重率、減少顏色變化,延緩可滴定酸及可溶性固形物含量,其中1.0%殼聚糖+0.5%LEO復(fù)合涂膜劑的保鮮效果最佳。此外,Maqbool等人[37]也報道了0.05%LEO對香蕉和木瓜炭疽病致病菌(Colletotrichum musae,Colletotrichum gloeosporioides)具有明顯的抑制作用,體外實驗抑制率分別為73.4%和71.3%;采用10%阿拉伯膠與0.05%LEO的復(fù)合溶液處理新采收的香蕉和木瓜,低溫貯藏28 d及室溫貯藏5 d后,炭疽病評分明顯低于空白對照。
Regnier等人[38]系統(tǒng)比較了59種商業(yè)精油及其主要成分對柑橘酸腐致病菌(Geotrichum citri-aurantii)的抑制作用,發(fā)現(xiàn)其中檸檬草等9種精油在1 000 μL/L濃度下能100%抑制G.citri-aurantii菌絲體生長;而且,5 μL LEO揮發(fā)后,熏蒸處理4 d能100%抑制G.citri-aurantii菌絲體生長,活性明顯高于玫瑰草、牛至、百里香精油(29%,37.7%和28.7%)。此外,500、750、1 000 μL/L 的 LEO 還可100%抑制柑橘綠腐病菌(Penicillium digitatum)和藍(lán)腐病致病菌(Penicillium italicum),而對照化學(xué)合成抗真菌劑200SL在1 000 μL/L濃度下對 P.digitatum和 P.italicum抑制率僅為35.2%和41.0%。此外,該研究小組[39]還評估了40種精油、7種萜類化合物及1個苯丙素類化合物對有害疣孢霉(Mycogone perniciosa)的體外抑制效果,發(fā)現(xiàn)檸檬草等3種精油對M.perniciosa的抑制效果最好,且對雙孢菇(Agaricus bisporu)的毒性最低,提示這3種植物精油可用于預(yù)防常見蘑菇病害濕泡病(又稱褐腐病)的發(fā)生。
近年來,冷藏保鮮包裝的果蔬切片在國內(nèi)有較大市場??墒承酝磕な沁@類產(chǎn)品貯藏保鮮的一種重要方式,在成膜劑中添加植物精油或植物提取液可提高涂膜對果蔬的保鮮效果。
Azarakhsh等人[40]考察了添加LEO的海藻酸鈉可食膜對保持鮮切菠蘿品質(zhì)、延長其貯存貨架期的影響。結(jié)果表明,與未涂膜及海藻酸鈉涂膜處理相比,在海藻酸鈉涂膜劑中添加0.3%和0.5%LEO均可顯著降低預(yù)切菠蘿中的酵母菌及霉菌數(shù)量(p<0.05),但添加0.5%LEO的海藻酸鈉涂膜處理顯著降低了菠蘿切片貯藏期間的硬度和感官效果(p<0.05)。因此,添加0.3%LEO的海藻酸鈉可食性涂膜劑可用于鮮切菠蘿保鮮,延長其貨架期。
此外,Raybaudi-Massilia等人[41]比較了蘋果酸、LEO、肉桂(Cinnamomum zeylanicum)葉精油、玫瑰草(Cymbopogon martini)精油及它們的抑菌活性成分丁香酚、香葉醇和檸檬醛分別作為可食性涂膜添加劑對延長鮮切甜瓜貯存貨架期的作用,并使用Gompertz模型描述了添加或不添加精油涂膜劑的甜瓜切片中腐敗菌的生長情況。結(jié)果表明,不同添加劑及濃度對細(xì)菌最大比生長速率μm和延滯時間λ的影響明顯,其中添加蘋果酸+0.7%LEO的可食膜對嗜溫菌、嗜冷菌、酵母菌和霉菌均有一定抑制作用,延滯時間分別為12.65、3.54和12.2 d,但是添加LEO的可食涂膜會對鮮切甜瓜貯藏期間的硬度和色澤造成影響。
de Oliveira 等[42]以腸炎沙門氏菌(S.enterica Enteritidis)S64為供試菌,分別對LEO和牛至(Origanum vulgare L.)精油進(jìn)行體外抑菌試驗,發(fā)現(xiàn)兩者對受試菌的最小抑菌濃度均為3.90 μL/mL;研究者進(jìn)一步考察了3.9、7.8及15.5 μL/g濃度的2種精油對接種受試菌的冷卻碎牛肉的抑菌效果,結(jié)果表明,在所有測試濃度下,LEO對腸炎沙門氏菌的抑制效果優(yōu)于牛至精油,在冷卻碎牛肉中添加3.9 μL/g的LEO,于4℃貯藏,在貯藏初期就能顯著降低腸炎沙門氏菌的數(shù)量(比對照樣含菌量降低2 log10CFU/g以上),而添加濃度為15.5 μL/g的LEO,在4℃貯藏6 d期間,碎牛肉中腸炎沙門氏菌的數(shù)量均小于1.0 log10CFU/g,說明LEO可應(yīng)用于提高冷卻肉品質(zhì)并延長其貨架期。
LEO對冷卻魚類食品的保藏也有較好效果。Ahmad等[43]報道了采用添加25%LEO的明膠膜對黑鱸切片進(jìn)行包裝,與對照組及未添加LEO的明膠膜包裝組相比,在4℃儲藏12 d期間,添加LEO的明膠膜包裝不僅能顯著抑制乳酸菌、嗜冷菌及腐敗菌(如產(chǎn)H2S菌、腸桿菌等)的生長(P<0.05),而且能保持更好肉色,降低肉質(zhì)氧化,延長產(chǎn)品的貨架期。
Friedman 等[44]研究發(fā)現(xiàn),分別添加 LEO、牛至精油、苦杏仁精油的紅酒在pH 3.6和pH 7.0條件下對兩種危害較大的食源性致病菌——腸出血性大腸埃希氏菌(Escherichia coli O157:H7)和沙門氏菌S.enterica均有抑制活性,酸性條件下的抑菌作用更強(qiáng);隨著溫度升高,抑菌作用增加;pH 3.6條件下,LEO對紅酒中E.coli O157:H7和S.enterica的抑制活性最高,有望發(fā)展成為一種優(yōu)良的液體食物抗菌劑。
(1)檸檬草易于栽培,生長周期短,投資低,有明顯的資源優(yōu)勢。檸檬草油具有良好的抗食源性腐敗菌及致病菌活性、驅(qū)避或殺滅倉儲害蟲活性及抗氧化活性,在嚙齒動物和人細(xì)胞試驗中未見毒性,且在氣味感官性質(zhì)上較其他精油有明顯優(yōu)勢,因此,在食品工業(yè)領(lǐng)域有極大的開發(fā)利用前景。
(2)由于土壤和氣候條件的差異,不同產(chǎn)地種植的檸檬草化學(xué)成分存在較大差別。而目前國內(nèi)外對檸檬草油的化學(xué)成分及其生活活性之間的相關(guān)性研究數(shù)據(jù)還較欠缺,迫切需要對此進(jìn)行深入分析,以推進(jìn)我國檸檬草資源良種化,提高檸檬草油的品質(zhì)。
(3)關(guān)于檸檬草油的生物活性機(jī)理的研究已引起普遍重視。但目前還僅限于含量較高的幾種成分如香葉醛、橙花醛、香葉醇、月桂烯等。雖然人們已意識到其他成分對抑菌、殺蟲、抗氧化等作用具有協(xié)同效應(yīng),但由于數(shù)目眾多,含量微小,尚缺乏相關(guān)探討,值得開展更為系統(tǒng)的研究和分析。
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