祁 騰，楊 孔，汪立茂，段勇軍，謝 飛，楊 軍，李光軍，譚文明

2.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院；

3.四川省疾病預(yù)防控制中心；

4.甘孜州疾病預(yù)防控制中心；

5.石渠縣疾病預(yù)防控制中心

鼠疫是由鼠疫耶爾森菌引起的人獸共患病，它引起過(guò)3次世界鼠疫大流行，給人類文明造成極大危害[1－3]。石渠縣青海田鼠鼠疫自然疫源地發(fā)現(xiàn)于1997年，位于四川與青海交界的俄多瑪鄉(xiāng)，平均海拔為4200m，該疫源地鼠疫菌為田鼠型鼠疫菌，與布氏田鼠型鼠疫菌在生物學(xué)特征上相似[4－6]。疫源地內(nèi)主要宿主是青海田鼠，次要宿主是根田鼠、長(zhǎng)尾倉(cāng)鼠等，主要媒介是細(xì)鉤蓋蚤、直緣雙蚤指名亞種，次要媒介是五側(cè)纖蚤鄰近亞種等。1997－2013年該地動(dòng)物鼠疫一直流行，研究該地鼠疫監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，有助于了解疫源地鼠疫流行的規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 數(shù)據(jù)來(lái)源 石渠縣2001－2013年鼠疫疫源地監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。

1.1.2 檢測(cè)試劑 鼠疫血凝試劑由青海省地方病預(yù)防控制所提供；鼠疫菌噬菌體由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心鼠疫布氏菌病預(yù)防控制基地提供；鼠疫赫氏干燥培養(yǎng)基由北京陸橋公司生產(chǎn)；生理鹽水由四川科倫公司提供，有效期內(nèi)按說(shuō)明書(shū)使用。

1.2 方法

1.2.1 宿主調(diào)查 青海田鼠的調(diào)查采用樣方（25m×25m），夜行鼠的調(diào)查采用5m夾線發(fā)調(diào)查，捕獲的樣本單獨(dú)裝袋計(jì)數(shù)并鑒定。

1.2.2 體蚤調(diào)查 捕獲的鼠類分別單只裝袋，乙醚麻醉后，在檢蚤盆內(nèi)用小梳梳檢鼠類體表，裝瓶進(jìn)行分類鑒定。

1.2.3 青海田鼠穴蚤調(diào)查 用工具挖開(kāi)青海田鼠巢穴后，取巢墊物及表面部分巢土單獨(dú)裝袋，扎緊袋口送回，用檢蚤盆單巢檢蚤，裝瓶進(jìn)行分類鑒定。

1.2.4 血清學(xué)檢驗(yàn)和細(xì)菌學(xué)培養(yǎng) 按照《鼠疫診斷標(biāo)準(zhǔn)（WS279－2008）》的附錄A和附錄C執(zhí)行。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析 運(yùn)用Excel和SPSS11.5進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析、圖表制作。

2 結(jié) 果

2.1 青海田鼠密度監(jiān)測(cè) 2001－2013年捕獲青海田鼠14 147只，樣方57.807ha，密度244.73只／ha，其中2002年密度最高為775.43只／ha，2012年密度最低為107.64只／ha，添加對(duì)數(shù)曲線，青海田鼠的鼠密度總體呈下降趨勢(shì)，見(jiàn)圖1。

圖1 青海田鼠密度動(dòng)態(tài)變化Fig.1 Dynamic of Microtus fuscus density

2.2 青海田鼠體蚤監(jiān)測(cè) 2001－2013年在14 202只青海田鼠體表獲蚤12 733匹，染蚤青海田鼠6 101只，染蚤率為42.96%，染蚤率最高在2003年，（65.54%），最低在2001年（22.72%）；平均蚤指數(shù)為0.90，2007年蚤指數(shù)最高（1.58），2001年最低（0.39）見(jiàn)表1。

2.3 青海田鼠巢蚤監(jiān)測(cè) 2001－2013年共取青海田鼠巢405個(gè)，獲蚤22 512匹，所有鼠巢染蚤，染蚤率為100%；巢蚤蚤指數(shù)為55.59，巢蚤蚤指數(shù)最高是2001年為79.80，最低為2012年為30.21。在青海田鼠鼠巢中，所獲蚤類經(jīng)鑒定共3科4屬8種，其中其中角葉蚤科蓋蚤屬（細(xì)鉤蓋蚤Csparsilis13 519匹、端園蓋蚤C.kozlovi68匹）、倍蚤屬（嘩倍蚤指明亞種A.c.clarus39匹）；細(xì)蚤科雙蚤亞科雙蚤屬（直緣雙蚤指明亞種A.t.tuta7 926匹，原雙蚤指明亞種A.p.primaris40匹，青海雙蚤A.qinghaiensis53匹）；纖蚤亞科纖蚤屬（五側(cè)纖蚤鄰近亞種R.d.vicina852匹、腹竇纖蚤R.li15匹）。

表1 2001－2013年青海田鼠體蚤監(jiān)測(cè)Tab.1 Fleas survey of Microtus fuscus carring from 2001to 2013

2.4 青海田鼠夜行鼠監(jiān)測(cè) 2001－2013年捕獲夜行鼠420只，捕獲率1.56%，其中2001年捕獲率最高為7.30%，2008年最低為0.70%。所捕獲的鼠類經(jīng)鑒定共3目4科5屬9種和一種未定種的水棲鼠，嚙齒目倉(cāng)鼠科田鼠亞科田鼠屬（青海田鼠Microtusfuscus231只、根田鼠Microtusoeconomus51只），嚙齒目倉(cāng)鼠科倉(cāng)鼠亞科倉(cāng)鼠屬（長(zhǎng)尾倉(cāng)鼠CricetuluslongicaudatusMilne－Edwards21只、藏倉(cāng)鼠Cricetuluskamensis2只），嚙齒目林跳鼠科林跳鼠亞科林跳鼠屬（四川林跳鼠Eozapussetchuanus3只）；兔形目鼠兔科鼠兔屬（高原鼠兔Ochotonacurzoniae105只、格氏鼠兔Ochotonagloveri1只）；食蟲(chóng)目鼩鼱科鼩鼱屬（暗色鼩鼱Sorexsinalis2只），未定水棲鼠4只，見(jiàn)表2。

表2 2001－2013年青海田鼠疫源地夜行鼠監(jiān)測(cè)Tab.2 Nocturnal mice survey of Microtus fuscus plague foci from 2001to 2013

2.5 青海田鼠和牧犬血清鼠疫F1抗體檢測(cè)2001－2013年血清學(xué)檢測(cè)青海田鼠血清1 787份，陽(yáng)性100份，陽(yáng)性率為5.60%，2014年陽(yáng)性率最高為23.08%；檢測(cè)牧犬血清784份（2008年沒(méi)有監(jiān)測(cè)牧犬血清），陽(yáng)性75份，陽(yáng)性率9.54%，2001年陽(yáng)性率最高為20.34%，青海田鼠和牧犬血清F1抗體陽(yáng)性率動(dòng)態(tài)基本一致，但總體陽(yáng)性率都在下降，見(jiàn)圖2。

圖2 青海田鼠和牧犬血清F1抗體陽(yáng)性率變化趨勢(shì)Fig.2 Serum F1positive rate trend of Microtus fuscus and shepherd

2.6 青海田鼠細(xì)菌學(xué)檢測(cè) 2001－2013年細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)自斃青海田鼠357只，其中陽(yáng)性52只，鼠疫菌檢出率為14.57%，檢出率最高在2001年63.16%，2003年自斃青海田鼠無(wú)鼠疫菌分離。檢驗(yàn)活體青海田鼠12 955只，陽(yáng)性29只，鼠疫菌檢出率為0.22%，2001年鼠疫菌檢出率最高為0.66%，2011－2013年活體青海田鼠鼠疫菌檢出數(shù)為0，活體青海田鼠的鼠疫菌檢出率在下降，見(jiàn)圖3。

圖3 青海田鼠鼠疫菌檢出率Fig.3 Rate of Y.pestis caught in live and dead Microtus fuscus

3 討 論

鼠疫是一種人獸共患病，同時(shí)也是一種自然疫源地性疾病，鼠疫菌是由假結(jié)核菌通過(guò)獲得、失活、丟失部分基因簇進(jìn)化而來(lái)，而田鼠型鼠疫菌是由古老鼠疫菌的napA硝酸鹽還原酶突變和araC基因失活演變而來(lái)。[7－8]

調(diào)查發(fā)現(xiàn)13年里石渠縣青海田鼠鼠疫自然疫源地的主要宿主青海田鼠的密度呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是密度還是較高，這樣會(huì)增加鼠與鼠交叉感染的幾率，有利于鼠疫的傳播，這是造成該疫源地鼠疫流行的主要原因之一。作為鼠疫傳播的重要媒介（蚤）[9]，主要寄生在青海田鼠體表和其巢里蚤的數(shù)量、種類對(duì)鼠疫的流行起著重要的作用，本研究發(fā)現(xiàn)青海田鼠蚤指數(shù)和染蚤率變化不大，青海田鼠蚤指數(shù)圍繞在0.90、染蚤率在42.96%上下波動(dòng)，染蚤率較高。所有的青海田鼠鼠巢全部染蚤，并且巢蚤蚤指數(shù)非常高，最低值都是30.21（2012年）。體蚤和巢蚤有著相同的蚤種分布（3科4屬8種），且主要的寄生蚤是細(xì)鉤蓋蚤和直緣雙蚤指明亞種（體蚤中分別 占 65.54%、31.52%，在 巢 蚤 中 分 別 占60.05%、35.21%）二者合計(jì)占總蚤數(shù)量的90%以上，并且細(xì)鉤蓋蚤的比例最大在60%以上，這兩種蚤都分離出鼠疫菌[10－11]，巢蚤的數(shù)量大，可以很快補(bǔ)充死去的蚤類和體蚤的數(shù)量，保障的鼠疫傳播中蚤數(shù)量的穩(wěn)定。其他寄生蚤雖然所占比重少，但是蚤種類的多樣性是鼠疫菌在疫源地內(nèi)持續(xù)存在的原因之一[12]，蚤種多樣性越高，以青海田鼠鼠巢為基礎(chǔ)的小的生態(tài)系統(tǒng)就越“健康”，對(duì)鼠疫菌的保持、傳播起著重要的作用，比如腹竇纖蚤和五側(cè)纖蚤鄰近亞種也分離出鼠疫菌[13－14]，青海田鼠體蚤和巢蚤的高染蚤率、高蚤指數(shù)和蚤的多樣性高是造成疫源地內(nèi)動(dòng)物鼠疫流行的又一重要原因。

該疫源地內(nèi)夜行鼠共有9種，數(shù)量排在前3位的是青海田鼠、高原鼠兔和根田鼠，占總數(shù)的55.00%、25.00%和12.14%。藏倉(cāng)鼠、格氏鼠兔、四川林跳鼠、暗色鼩鼱和水棲鼠除2002年捕獲外其他年份并末捕捉到，是因?yàn)檎{(diào)查的生境不同造成的，所占比重較少的夜行鼠也對(duì)鼠疫菌的儲(chǔ)存和傳播起重要的作用，根田鼠和長(zhǎng)尾倉(cāng)鼠在鼠疫細(xì)菌學(xué)上已得到證實(shí)。該地區(qū)的青海田鼠和高原鼠兔呈混合分布，相互交串頻繁，形成了寄生蚤的相互交替，這對(duì)于維持疫源性和擴(kuò)大疫情的蔓延具有重要的流行病學(xué)意義[15]。青海田鼠和牧犬血清鼠疫F1抗體的檢出，說(shuō)明該疫源地非常活躍。說(shuō)明該疫源動(dòng)物間鼠疫非?；钴S，而且動(dòng)物鼠疫會(huì)持續(xù)流行。

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