成偉偉，彭靖雯，張克山，劉永杰，孔漢金，尚佑軍，劉湘濤，劉 磊

2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，蘭州 730070

衣原體是一類專性細(xì)胞內(nèi)寄生、有獨(dú)特的發(fā)育周期的、介于細(xì)菌和病毒之間的革蘭氏陰性微生物[1]?？筛腥救撕捅姸嗟膭?dòng)物以及鳥(niǎo)類，引起衣原體性疾病，該病是重要的人獸共患傳染病[2]。衣原體科病原被分為衣原體屬（Chlamydia）和嗜衣原體屬（Chlamydophila）[3]。衣原體屬包括沙眼衣原體（Ct）、豬衣原體（C.suis）和鼠衣原體（C.muridar－um）；嗜衣原體屬包括流產(chǎn)嗜衣原體（Ch.abortus）、豚鼠 嗜 衣 原 體 （Ch.caviae）、貓 嗜 衣 原 體 （Ch.felis）、家畜嗜衣原體（Ch.pecorum）、肺炎嗜衣原體（Cpn）和鸚鵡熱嗜衣原體（Ch.psittaci）。流產(chǎn)嗜衣原體（Ch.abortus）一般引起反芻動(dòng)物流產(chǎn)，是造成羊傳染性流產(chǎn)的最普遍的原因之一，它主要通過(guò)感染羊的胎盤，產(chǎn)生炎癥和組織損傷，從而導(dǎo)致流產(chǎn)，通常稱為羊地方性流產(chǎn)（Enzootic Abortion of Ewes，EAE），在國(guó)內(nèi)多稱為羊衣原體病，是全球性引起綿羊山羊流產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)損失的重要病原[4－5]。此外家畜嗜衣原體也常被在健康綿羊的腸道內(nèi)發(fā)現(xiàn)[6]。流產(chǎn)嗜衣原體引起的羊地方性流產(chǎn)不僅對(duì)養(yǎng)羊業(yè)造成了重大經(jīng)濟(jì)損失，而且威脅人員健康，在飼養(yǎng)或處理被感染羊只過(guò)程中病原體可由呼吸道進(jìn)入人體而造成人員的感染，被感染人員會(huì)出現(xiàn)輕微流感樣癥狀，甚至導(dǎo)致衣原體性腦膜炎、結(jié)膜炎、肺炎和懷孕婦女的流產(chǎn)[7－8]。

羊衣原體病常呈地方流行性，山羊和綿羊均可發(fā)生，但以山羊衣原體性流產(chǎn)報(bào)道較多。羊衣原體病在我國(guó)大部分地區(qū)流行且危害嚴(yán)重，如青海、甘肅、內(nèi)蒙、西藏、寧夏、陜西、廣西和北京等地區(qū)的畜牧業(yè)都存在此病的危害。間接血凝是一種簡(jiǎn)單快速的檢測(cè)抗體的免疫學(xué)方法，具有敏感性高、特異性強(qiáng)、凝集清晰和易于判斷等優(yōu)點(diǎn)[9－10]，已成為動(dòng)物疾病診斷和控制不可缺少的重要手段之一為了解我國(guó)一些地區(qū)的羊衣原體病的流行情況，本試驗(yàn)采用間接 血 凝 試 驗(yàn) （Indirect Hemagglutination Test，IHA）對(duì)我國(guó)8個(gè)?。▍^(qū)）的綿羊與山羊的羊衣原體感染情況進(jìn)行了調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 血清 742份血清采自全國(guó)8個(gè)省份，其中新疆304份；吉林131份；安徽119份；山東91份；四川36份；寧夏31份；湖北20份；甘肅10份。采血后均常規(guī)分離血清，－20。C冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑 衣原體IHA凍干抗原、陰性血清、陽(yáng)性血清、稀釋液，均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所提供，批號(hào)120809。

1.3 檢測(cè)方法 用微量加樣器將稀釋液加入110°V型反應(yīng)板中，每孔75μL；取被檢血清25μL加入第一孔，呈4倍遞增稀釋5孔（即1∶4、1∶16、1∶64、1∶256、1∶1 024）。第5孔棄去25μL，同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照各2孔；每孔加抗原25μL，置微型震蕩器上震蕩2min，蓋上玻璃板在37。C作用2h判定結(jié)果。陽(yáng)性對(duì)照孔的各稀釋度完全凝集，陰性對(duì)照孔、空白對(duì)照孔不發(fā)生凝集，試驗(yàn)成立。被檢血清1∶16孔出現(xiàn)“＋＋”及以上凝集者為陽(yáng)性；1∶4孔出現(xiàn)“＋”及以下凝集者為陰性；1∶4孔出現(xiàn)“＋＋”至1∶16孔出現(xiàn)“＋”以下者為可疑。

2 結(jié) 果

被檢的742份羊血清中檢出陽(yáng)性血清342份，陽(yáng)性率為46.09%。甘肅省、寧夏省、湖北省、山東省、吉林省、安徽省、新疆省、四川省的陽(yáng)性率分別為90.00% （9／10）、67.74% （21／31）、60.00% （12／20）、52.75%（48／91）、51.91%（68／131）、42.86%（51／119）、40.13（112／304）、30.56（11／36），見(jiàn)圖1。被檢的綿羊和山羊陽(yáng)性率分別為47.27%（268／567）和42.28%（74／175）。

圖1 各省份陽(yáng)性率Fig.1 Positive rate for provinces

表1 5省綿羊與山羊衣原體抗體陽(yáng)性率Tab.1 Positive rate of chlamydia from sheep and goats come from 5provinces in China

3 討 論

流產(chǎn)嗜衣原體引起的羊地方性流產(chǎn)作為一種重要的人獸共患傳染病，不僅給養(yǎng)羊業(yè)造成了相當(dāng)大的經(jīng)濟(jì)損失，也危及人員健康。懷孕期的婦女被流產(chǎn)嗜衣原體感染可能會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的敗血癥進(jìn)而發(fā)生流產(chǎn)或產(chǎn)下死胎。流產(chǎn)嗜衣原體一般通過(guò)口腔或呼吸道進(jìn)行傳播，被感染的羊只在通常情況下沒(méi)有明顯的臨床癥狀，但當(dāng)母羊懷孕時(shí)就會(huì)造成流產(chǎn)或產(chǎn)下虛弱的羔羊，羔羊一般不會(huì)存活[12－13]。羊地方性流產(chǎn)危害嚴(yán)重，血清流行病學(xué)調(diào)查成為掌握和防控該病的有利支持。

前期血清學(xué)調(diào)查資料表明，我國(guó)羊衣原體的感染率普遍相對(duì)較高。甘肅26.29%（王翠英，2009）、寧夏19.30%（何存利，2009）、吉林6.03%（肖成蕊，2005）、新疆 17.97%（張德昆，1989）、湖北6.82%（楊宜生，1992）、貴州89.47%（洪尼寧，2012）、青海13.60% （李 娟，2011）、北 京 21.00% （楊 秀 環(huán)，2003）。

本文對(duì)采自我國(guó)8?。▍^(qū)）湖北、安徽、山東、新疆、吉林、四川、寧夏和甘肅的742份羊血清進(jìn)行羊衣原體抗體檢測(cè)，結(jié)果表明各省份均存在羊衣原體感染，但各省的陽(yáng)性率高低差別明顯，高的如甘肅省，達(dá)90.00%、寧夏67.74%；最低的四川省僅30.56%。從甘肅、寧夏、吉林、新疆和湖北等?。▍^(qū)）的前后資料對(duì)比中顯示，羊衣原體的感染率在逐年升高，一方面是隨著國(guó)民經(jīng)濟(jì)的提高，養(yǎng)羊業(yè)在逐漸擴(kuò)大，羊只的流動(dòng)率也在不斷的增高，加劇了該病的蔓延；另一方面是對(duì)該病的防控還存在不足，由于羊只除妊娠后期外，感染衣原體后不會(huì)出現(xiàn)明顯的臨床癥狀，但感染后一般會(huì)在妊娠的最后2～3周發(fā)生流產(chǎn)[14]，因此，飼養(yǎng)人員經(jīng)常會(huì)忽視或不去檢測(cè)被衣原體感染的羊只，而造成該病的廣泛傳播和經(jīng)濟(jì)損失。

從檢測(cè)結(jié)果看出甘肅省的陽(yáng)性檢出率最高，寧夏、湖北的檢出率次之，四川省最低。似乎說(shuō)明羊衣原體感染可能與地區(qū)差異以及氣候變化等有關(guān)。

綿羊衣原體抗體陽(yáng)性檢出率明顯高于山羊衣原體抗體陽(yáng)性檢出率，這可能與山羊、綿羊?qū)Ρ静〉母惺苄圆煌嘘P(guān)。

檢測(cè)顯示8省區(qū)本病的感染陽(yáng)性率普遍較高，前后調(diào)查數(shù)據(jù)相比（見(jiàn)表1），感染率整體呈逐年上升趨勢(shì)。因此，應(yīng)建立和實(shí)施合理有效的衣原體疫苗免疫計(jì)劃，加強(qiáng)養(yǎng)羊業(yè)的科學(xué)飼養(yǎng)管理，加大各省進(jìn)出口的檢疫以及對(duì)被感染羊只有償性淘汰工作。飼養(yǎng)人員也應(yīng)該重視該病對(duì)人員的危害，及時(shí)做好防范和治療措施。

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