范紅松

【摘要】目的探討化學(xué)發(fā)光免疫法（CLIA法）應(yīng)用于檢測(cè)梅毒螺旋體抗體（TPA）的臨床價(jià)值。方法隨機(jī)選取2014年12月一2015年1月間的100例健康人為對(duì)照，將300例TPA陽(yáng)性患者作為研究對(duì)象，分別進(jìn)行TPPA和TRUST檢測(cè)和CLIA法檢測(cè)，以cv、靈敏度等為指標(biāo)，評(píng)價(jià)CLIA法的臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果①組內(nèi)、組間在不同TPA濃度下的CV均<10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（I/80），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)義（P<0.05）。②CLIA、TPPA檢測(cè)的陽(yáng)性率分別為87.7%（264/300）、86.3%（250/300），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但均高于TRUST法42.3%（127/300）（P<0.05）。其中陰性組患者血清檢測(cè)的陰性率均為100%。結(jié)論CLIA法檢測(cè)TPA的結(jié)果準(zhǔn)確率高，CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在十?dāng)_和限制、攜帶污染率低，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法；梅毒螺旋體抗體；臨床應(yīng)用

【中圖分類號(hào)】R446.6

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1674-0742（2015）08（a）-0072-02

梅毒螺旋體（TP）是梅毒病的常見(jiàn)致病因素之一，其臨床表現(xiàn)復(fù)雜、具有傳播性和全身性，很容易誤診、漏診，嚴(yán)重者可致全身的病變、損害等。據(jù)相關(guān)的調(diào)查結(jié)果顯示，從2006年至今，梅毒發(fā)病率呈現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)，檢測(cè)患者血清中的TPA是其目前診斷方法的主要根據(jù)之一。因此，怎樣才能對(duì)患者進(jìn)行有效的、準(zhǔn)確的、迅速的檢測(cè)有著十分重要的臨床意義，CLIA的研究能夠?yàn)樵\斷梅毒病提供可靠的檢測(cè)依據(jù)，以保證盡早治療，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。該研究選取2014年12月-2015年1月間該院收治的400例患者為研究對(duì)象，對(duì)比分析了使用CLIA檢測(cè)和其他方法檢測(cè)的結(jié)果，得到較滿意結(jié)果，現(xiàn)將其總結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究中研究對(duì)象共400例：陽(yáng)性患者共300例，均是于2014年12月-2015年1月來(lái)該院就診的，且符合梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)，另外陰性對(duì)照患者共100例。其中，年齡8-20歲37例，21-30歲96例，31-40歲245例，41-50歲22例，平均年齡（38±1.8）歲。陽(yáng)性患者組男、女患者分別有219例、181例。陰性患者組男、女患者分別有67例、33例。

人選標(biāo)準(zhǔn)：年齡在8-50歲之間；自愿作為試驗(yàn)對(duì)象者。臨床診斷明確者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：需要維持服用精神類安定藥、鎮(zhèn)靜藥的患者以及心臟、肝、腎功能有損害者；患有其他重癥疾病者。

1.2 方法

①采集本試驗(yàn)中所有研究對(duì)象的血清（空腹?fàn)顟B(tài)下）、留樣。②將留取的血清標(biāo)本置于備好的真空促凝管內(nèi)，分離血清，低溫冷藏（4-8℃）。③檢測(cè)：用CLIA（試劑盒，12000型，雅培，美國(guó)）、TPPA（試劑盒，日本）、TRUST（試劑盒，中國(guó)）方法參照其各白說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。④重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：取s/c0（吸光度/lia界值）24（高）、3（中）、0.05（低）的三個(gè)水平，對(duì)組內(nèi)及組間分別在連續(xù)的2h和20d內(nèi)進(jìn)行TPA標(biāo)準(zhǔn)品的CLIA檢測(cè)5次、2次。計(jì)算其靈敏度。⑤檢測(cè)攜帶污染率：參照國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，使用富士G1200CLIA分析儀對(duì)TPA的高、低值標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測(cè)，各連續(xù)、平行三次得h_{1、h2、h3、l1、l2、l3值。⑥十?dāng)_試驗(yàn)：將十?dāng)_物（膽紅素、三酰甘油、血紅蛋白）加入到不同TPA濃度的患者血清中，以富士（；1200CLIA分析儀進(jìn)行檢測(cè)，記錄、計(jì)算。⑦在CLIA檢測(cè)后，對(duì)陽(yáng)性組、陰性組患者分別進(jìn)行TPPA、TRUST檢測(cè)，對(duì)比3種方法的結(jié)果，進(jìn)行分析。}

1.3 觀察指標(biāo)

①以變異系數(shù)（cv）為觀察指標(biāo)評(píng)價(jià)儀器重復(fù)性。②以攜帶污染率為指標(biāo)評(píng)價(jià)其儀器攜帶污染情況。攜帶污染率=（l_{1-l3）/（h3-l3）×100%。}

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對(duì)計(jì)數(shù)資料采用x?檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，分析數(shù)據(jù)結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2 結(jié)果

2.1 組內(nèi)、組間重復(fù)性和靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，組內(nèi)、組間在不同TPA濃度下的cv分別為6.72、8.31、8.51和6.69、8.44、8.49，均<10%。且CLIA分析儀的靈敏度（1/16）高于TPPA（1/80），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X?=6.442，P<0.05）。

2.2 干擾實(shí)驗(yàn)、攜帶污染率結(jié)果

經(jīng)CLIA分析儀檢測(cè)的TPA攜帶污染率為0.14%，且十?dāng)_物加入前后測(cè)得的結(jié)果差異為3.21%（S/CO）。

2.3.3 種方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

CLIA、TPPA、TRUST法的陽(yáng)性率分別為87.7%（264/300）、86.3%（250/300）、42.3%（127/300），前兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X?=0.768，P>0.05），但均高于TRUST法（X?=45.300，X?=42.169，P<0.05）。其陰性組患者血清檢測(cè)的陰性率均為100%。

3 討論

目前，在世界范圍內(nèi)梅毒發(fā)病率已經(jīng)逐年上升，其嚴(yán)重危害著人類的健康生活。因此，各種診斷方法也不斷發(fā)展、應(yīng)用，但早期的、有效的診斷方法尚不完善，有待于進(jìn)一步研究，它們各有各的優(yōu)勢(shì)和缺點(diǎn)，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、科研與科技的不斷發(fā)展和進(jìn)步，人們更加傾向于特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確、有效的TPA檢驗(yàn)方法。TPA是一種特異性的TP感染患者體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體，其往往最早出現(xiàn)，卻遲遲不消失，甚至在治愈后、乃至終生的患者仍然可以檢出TPA。梅毒患者經(jīng)感染后還可以產(chǎn)生一種nTsAh，這種抗體無(wú)特異性，容易受到多種因素、多種疾病的影響，所以經(jīng)常使患者血清檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)假陽(yáng)性。同時(shí)，在使用TPPA法對(duì)患者進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候也會(huì)得出假陰性結(jié)果，故這種檢測(cè)方法在梅毒患者不同期中都存在一定的盲區(qū)，都不如CLIA法準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)。

該研究經(jīng)對(duì)正常人和TP患者血清的檢測(cè)，從靈敏度、重復(fù)性、特異性、準(zhǔn)確度等方面探討了CLIA法的應(yīng)用特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，結(jié)果為：CLIA分析儀的靈敏度為1/16；且該法的TPA攜帶污染率、陽(yáng)性率、陰性率分別為0.14%、87.7%（264/300）、100%。表明CLIA法重復(fù)性良好、精密度優(yōu)良，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，且優(yōu)于TPPA和TRUST。林炳柱等研究者通過(guò)應(yīng)用3種不同的方法（RPR法、CLIA法、TPPA法）檢測(cè)研究對(duì)象的血清TPA，進(jìn)而探討了其各白臨床價(jià)值，研究發(fā)現(xiàn)：CLIA法準(zhǔn)確、方便、特異性強(qiáng)，與該研究結(jié)果相似。

綜上所述，使用CLIA法作為檢驗(yàn)TPA的手段，其結(jié)果準(zhǔn)確率高；并且CLIA分析儀靈敏度高、不易受諸多外在十?dāng)_和限制、攜帶污染率低，值得推廣應(yīng)用。