萬(wàn)紅霞，劉仁斌，孫海燕，劉冬*

（1.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東深圳518055；2.十堰市人民醫(yī)院中醫(yī)科，湖北十堰442000）

36種蔬菜抑制肝癌HepG2和結(jié)腸腺癌Caco-2細(xì)胞增殖活性評(píng)價(jià)

萬(wàn)紅霞1，劉仁斌2，孫海燕1，劉冬*1

（1.深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東深圳518055；2.十堰市人民醫(yī)院中醫(yī)科，湖北十堰442000）

為明確36種中國(guó)主要消費(fèi)蔬菜多酚提取物的總酚含量和抑制人肝癌細(xì)胞HepG2和人結(jié)腸腺癌細(xì)胞Caco-2增殖活性，分別采用Folin-Ciocalteu法確定了蔬菜提取物的總酚含量，采用亞甲基藍(lán)法確定了其抗HepG2和Caco-2細(xì)胞增殖的活性，分析了總酚含量與抗HepG2和Caco-2細(xì)胞增殖活性之間的相關(guān)性。結(jié)果表明，36種蔬菜每百克中沒(méi)食子酸當(dāng)量：芥藍(lán)（973.09±31.29）μmol/hg，蓮藕（920.55±29.00）μmol/hg，它們的總酚含量最高；絲瓜（44.94± 4.16）μmol/hg，其總酚含量最低。在可測(cè)出抗增殖EC50值的蔬菜中，韭菜（15.96±0.88）mg/mL和蒜苔（17.54±0.03）mg/mL，它們的抗HepG2細(xì)胞增殖的活性最強(qiáng)；上海青（390.52±17.63）mg/mL和空心菜（394.25±11.89）mg/mL，它們的活性最弱。韭菜抗Caco-2細(xì)胞增殖的活性最強(qiáng)，為（21.08±1.67）mg/mL；青尖椒的活性最弱，為（390.17±4.78）mg/mL。這些蔬菜的抗HepG2和Caco-2細(xì)胞增殖活性與其總酚含量相關(guān)性均不顯著（R2＝0.027 1，p＞0.05；R2＝0.151 3，p＞0.05），表明蔬菜的抗腫瘤活性不能單從其多酚含量的高低來(lái)推測(cè)。

蔬菜；多酚；人結(jié)腸腺癌Caco-2細(xì)胞；人肝癌HepG2細(xì)胞；抗增殖活性

流行病學(xué)調(diào)查表明，膳食方式與慢性疾病如癌癥、心血管病、早老性癡呆癥有密切聯(lián)系，而膳食攝入充足的蔬菜可以有效減少這些慢性疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)［1-3］。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，蔬菜中多酚類物質(zhì)和維生素通過(guò)抗氧化、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡，調(diào)控癌基因和抑癌基因表達(dá)，調(diào)控細(xì)胞周期，調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路，調(diào)節(jié)免疫力和新陳代謝等機(jī)制，發(fā)揮抗腫瘤作用和抑制心血管病等慢性疾病的發(fā)生［4-5］。

目前，國(guó)內(nèi)外已有許多有關(guān)蔬菜抗腫瘤活性的研究報(bào)道。國(guó)外Chu等［6］對(duì)美國(guó)經(jīng)常消費(fèi)的10種蔬菜提取物抗HepG2細(xì)胞增殖的活性進(jìn)行了研究。國(guó)內(nèi)學(xué)者研究了洋蔥、大蒜、混合蔬菜粉等對(duì)癌細(xì)胞增殖的抑制活性［7-11］。這些報(bào)道多是對(duì)某種或某幾種蔬菜提取物的抗腫瘤細(xì)胞活性進(jìn)行研究，目前系統(tǒng)研究我國(guó)經(jīng)常消費(fèi)的主要蔬菜抗腫瘤細(xì)胞增殖活性的研究還未見(jiàn)報(bào)道。

蔬菜中的多酚類物質(zhì)除了少數(shù)以苷元形式可直接在小腸被吸收外［6，12］，大約有90%直接進(jìn)入結(jié)腸，經(jīng)腸道微生物酶降解后在腸道發(fā)揮抗氧化、抗腫瘤作用，或在結(jié)腸吸收進(jìn)入體內(nèi)代謝而發(fā)揮抗腫瘤作用［13-14］。為此，選用分別代表人體物質(zhì)吸收和代謝的結(jié)腸腺癌Caco-2細(xì)胞（與人體結(jié)腸上皮細(xì)胞生物學(xué)功能相似）和肝癌HepG2細(xì)胞（與人體肝細(xì)胞生物學(xué)功能相似）作為蔬菜抗腫瘤活性的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)物，對(duì)我國(guó)南北方普遍消費(fèi)的36種蔬菜的抗腫瘤活性進(jìn)行全面系統(tǒng)評(píng)價(jià)。研究結(jié)果不僅豐富了蔬菜的營(yíng)養(yǎng)保健理論，也為消費(fèi)者合理健康地食用蔬菜和預(yù)防癌癥等疾病提供了科學(xué)的依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

1.1.1蔬菜36種蔬菜均在最佳采摘時(shí)間采摘于各種蔬菜的中國(guó)主產(chǎn)區(qū)，采摘后于最佳食用時(shí)間進(jìn)行抗增殖活性評(píng)價(jià)研究。供研究的各地蔬菜有：芹菜（濰坊產(chǎn)）、番茄（淄博產(chǎn)）、紫茄子（湛江產(chǎn)）、土豆（滕州產(chǎn)）、紫洋蔥（濟(jì)寧產(chǎn)）、蒜苔（臨沂產(chǎn)）、韭菜（莘縣產(chǎn)）、長(zhǎng)豆角（青州產(chǎn)）、四季豆（聊城產(chǎn)）、青甜椒（青島產(chǎn)）、青尖椒（青州產(chǎn)）、黃瓜（莘縣產(chǎn)）、苦瓜（青州產(chǎn)）、胡蘿卜（壽光產(chǎn)）、白蘿卜（濰坊產(chǎn)）、香菇（龍泉產(chǎn)）、西蘭花（臨海產(chǎn)）、花椰菜（永年產(chǎn)）、空心菜（汕頭產(chǎn)）、芥藍(lán)（揭陽(yáng)產(chǎn)）、菜心（廣州產(chǎn)）、萵苣（定州產(chǎn)）、油麥菜（永年產(chǎn)）、生菜（永年產(chǎn)）、上海青（永年產(chǎn)）、菠菜（金鄉(xiāng)產(chǎn)）、白菜（臨海產(chǎn)）、紫包菜（新野產(chǎn)）、蓮藕（臨沂產(chǎn)）、木耳（鳳儀產(chǎn)）、紅莧菜（廣州產(chǎn)）、絲瓜（廣州產(chǎn)）、紅扁豆（莘縣產(chǎn)）、青南瓜（壽光產(chǎn)）、葫蘆（永年產(chǎn)）、冬瓜（金鄉(xiāng)產(chǎn)）。

1.1.2試劑沒(méi)食子酸、Folin-ciocalteu試劑、HEPES、非必需氨基酸（100×）、青鏈霉素混合液（100×），胰島素、氫化可的松、William’s Medium E培養(yǎng)基、臺(tái)盼藍(lán)，美國(guó)Sigma-Aldrich公司產(chǎn)品；高糖DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清（FBS）、Hank’s平衡鹽溶液（HBSS，1×）、質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.05%胰酶-EDTA，美國(guó)Life-Technologies公司產(chǎn)品；Caco-2結(jié)腸腺癌細(xì)胞株和HegG2肝癌細(xì)胞株，美國(guó)ATCC（American Type Culture Collection）提供。其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2儀器與設(shè)備

HERA cell 240型CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱，美國(guó)Thermo公司制造；DM IRB型熒光倒置顯微鏡，德國(guó)Leica儀器公司制造；Spectra Max M5e多功能酶標(biāo)儀，美國(guó)Molecular Devices公司制造；HR25850型飛利浦組織搗碎機(jī)，珠海飛利浦電器有限公司制造；T25 digital ULTRA-TURRAX勻漿機(jī)，德國(guó)IKA公司制造；5180 R型冷凍離心機(jī)，德國(guó)Eppendorf公司制造。

1.3方法

1.3.1蔬菜多酚的提取按照文獻(xiàn)［6］方法并做改進(jìn)：將蔬菜洗干凈，瀝干水，蔬菜多酚的提取做3次平行實(shí)驗(yàn)，每次平行稱取蔬菜的可食用部分鮮質(zhì)量100 g，加入預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)80%丙酮200 mL，用組織搗碎機(jī)攪拌3 min，在冰浴條件下，高速勻漿5 min。勻漿液經(jīng)Whatman 1號(hào)濾紙過(guò)濾，在濾渣中加入200 mL預(yù)冷的體積分?jǐn)?shù)80%丙酮，冰浴條件下高速勻漿5 min，過(guò)濾，濾渣再次加入200 mL預(yù)冷的80%丙酮?jiǎng)驖{5 min，過(guò)濾。合并3次濾液，濾液在45℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10 g以下，將濃縮液用超純水定容至25 mL，分裝成1 mL/管，于-80℃貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2總酚含量的測(cè)定Folin-ocalteu法［6］配制沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，37℃水浴解凍樣品，12 000 r/min離心15 min，分別取提取液及各濃度的標(biāo)準(zhǔn)液100 μL加至已加入400 μL去離子水的試管中，搖勻，加入100 μL Folin-Ciocalteu試劑，混勻，放置6 min，加入1 mL質(zhì)量濃度7 g/dL的Na2CO3溶液和0.8 mL去離子水，混勻，在室溫下反應(yīng)90 min，在酶標(biāo)儀上于760 nm測(cè)定OD值。每百克鮮菜的總酚含量用平均值±SD μmol沒(méi)食子酸當(dāng)量（GAE）/hg表示。

1.3.3細(xì)胞培養(yǎng)Caco-2細(xì)胞接種在高糖DMEM培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中含有體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清（FBS）、10 mmol/L Hepes緩沖液、體積分?jǐn)?shù)1%非必需氨基酸、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素。細(xì)胞在體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃條件下培養(yǎng)。待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.05%胰蛋白酶置于37℃培養(yǎng)箱中消化傳代。HepG2細(xì)胞接種在Complete Medium培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中含有體積分?jǐn)?shù)5%胎牛血清（FBS）、10 mmol/L Hepes緩沖液、5 μg/mL胰島素、0.05 μg/mL氫化可的松、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素。細(xì)胞在體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃條件下培養(yǎng)。待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.05%胰蛋白酶消化傳代。實(shí)驗(yàn)所用的細(xì)胞在第10—30代之間。

1.3.4蔬菜對(duì)HepG2和Caco-2細(xì)胞的毒性作用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)［15］方法進(jìn)行并稍作改進(jìn)：100 μL HepG2（或Caco-2）單細(xì)胞懸液接種到96微孔透明板中（4×104個(gè)/孔），體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃培養(yǎng)24 h后，吸出生長(zhǎng)培養(yǎng)基，1×PBS清洗貼壁細(xì)胞，加入100 μL不同濃度的蔬菜提取物（不同濃度提取物用生長(zhǎng)培養(yǎng)基稀釋制備），設(shè)空白對(duì)照組（加入生長(zhǎng)培養(yǎng)基）。體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃培養(yǎng)24 h，吸出提取物，1×PBS清洗貼壁細(xì)胞，加50 μL/孔亞甲基藍(lán)溶液（1×HBSS含質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.25%戊二醛和質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%亞甲基藍(lán)），體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃培養(yǎng)60 min，吸出亞甲基藍(lán)溶液，將微孔板輕輕浸入去離子水中清洗3次至洗凈細(xì)胞表面吸附的染料。將96孔板倒置在紙巾上控干水分，加100 μL/孔洗脫液（含體積分?jǐn)?shù)49%1×PBS、體積分?jǐn)?shù)50%乙醇、體積分?jǐn)?shù)1%冰醋酸）。將96孔板室溫旋轉(zhuǎn)振蕩20 min，置于Spectra Max M5e多功能酶標(biāo)儀中測(cè)定570 nm處的OD值。如果樣品組比對(duì)照組的OD值顯著性減少即判斷為蔬菜提取物有細(xì)胞毒性。

1.3.5蔬菜提取物抗HepG2和Caco-2細(xì)胞增殖活性抗細(xì)胞增殖活性實(shí)驗(yàn)所用的蔬菜濃度設(shè)在沒(méi)有細(xì)胞毒性的范圍內(nèi)?？乖鲋硨?shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)［15］方法并稍作改進(jìn)：100 μL HepG2（或Caco-2）單細(xì)胞懸液接種到96微孔透明板中（2.5×104個(gè)/孔），體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃培養(yǎng)4 h（Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)6 h），吸出生長(zhǎng)培養(yǎng)基，加入100 μL不同濃度的蔬菜提取物（不同濃度提取物用生長(zhǎng)培養(yǎng)基稀釋制備），設(shè)空白對(duì)照組（只加入生長(zhǎng)培養(yǎng)基）和控制對(duì)照組（只加入空白提取液），體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37℃培養(yǎng)72 h，吸出提取物，1×PBS清洗貼壁細(xì)胞，亞甲基藍(lán)染色測(cè)定OD值（染色和測(cè)定步驟同1.3.4）。細(xì)胞抑制率

上式中，ODy是樣品組吸光度值，ODk是空白對(duì)照組吸光度值。樣品組OD值達(dá)到對(duì)空白對(duì)照組OD值50%時(shí)的樣品濃度為抗增殖活性的半有效抑制濃度（EC50），EC50值越低表示抗增殖活性越高。

1.3.6統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)結(jié)果以平均值±SD表示，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)和相關(guān)性分析分別運(yùn)用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件的one-way ANOVA法（p＜0.05視為有顯著性差異）和雙變量相關(guān)法進(jìn)行分析（p＜0.05視為顯著性相關(guān)）。

2　結(jié)果與分析

2.1蔬菜總酚含量

蔬菜總酚含量見(jiàn)圖1。

圖1　36種中國(guó)主要蔬菜總酚含量Fig.1　Total phenolic content of 36 commonly consumed vegetable species in China

36種蔬菜每百克中GAE，芥藍(lán)（973.09± 31.29）μmol/hg和蓮藕（920.55±29.00）μmol/hg，總酚含量最高；其次是紫包菜（878.30±54.84）μmol/hg；其它蔬菜的總酚含量高低依次是：青尖椒（782.98± 50.33）μmol/hg，菜心（688.38±47.20）μmol/hg，紅扁豆（676.76±27.42）μmol/hg，木耳（532.71±42.87）μmol/hg，西蘭花（479.66±40.86）μmol/hg，菠菜（448.38± 23.28）μmol/hg，紅莧菜（442.80±36.41）μmol/hg，紫茄子（438.59±15.19）μmol/hg，上海青（356.20± 22.60）μmol/hg，青甜椒（350.78±16.30）μmol/hg，紫洋蔥（342.02±6.45）μmol/hg，韭菜（318.56±15.29）μmol/ hg，空心菜（314.17±9.77）μmol/hg，油麥菜（281.95± 13.11）μmol/hg，香菇（260.98±11.40）μmol/hg，花椰菜（255.27±8.93）μmol/hg，蒜苔（251.48±9.52）μmol/ hg，芹菜（228.75±11.00）μmol/hg，長(zhǎng)豆角（216.97± 11.74）μmol/hg，土豆（205.31±8.73）μmol/hg，白蘿卜（178.89±13.84）μmol/hg，生菜（141.51±4.66）μmol/ hg，四季豆（136.68±5.86）μmol/hg，番茄（125.41± 6.36）μmol/hg，白菜（122.95±10.72）μmol/hg，苦瓜（120±8）μmol/hg，萵苣（90.38±6.68）μmol/hg，胡蘿卜（84.83±8.45）μmol/hg，青南瓜（84.62±0.93）μmol/ hg，葫蘆（73.95±3.35）μmol/hg，冬瓜（56.89± 3.43）μmol/hg，黃瓜（56.17±1.86）μmol/hg；絲瓜的總酚含量（44.94±4.16）μmol/hg為最低。

Song等人［16］對(duì)美國(guó)消費(fèi)的27種主要蔬菜總酚含量的測(cè)定結(jié)果表明，菠菜的總酚含量最高，油麥菜和黃瓜的總酚含量最低。本課題研究結(jié)果與Song等人的15種相同種類蔬菜提取物總酚含量之間的相關(guān)性極顯著（R2=0.719 3，p＜0.01），但其中菠菜、西蘭花、油麥菜和芹菜的總酚含量差異較大，原因可能是蔬菜的產(chǎn)地、品種，以及采摘時(shí)間和貯存時(shí)間等因素不同造成的。本文作者所研究的36種蔬菜均在最佳采摘時(shí)間采摘于各種蔬菜的中國(guó)主產(chǎn)區(qū)，采摘后于最佳食用時(shí)間進(jìn)行抗增殖活性評(píng)價(jià)研究，這樣可以保證所研究對(duì)象的可比較性，研究結(jié)果對(duì)消費(fèi)者的指導(dǎo)意義也更具有確定性。

2.2蔬菜提取物對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性和抑制增殖活性

由蔬菜提取物對(duì)HepG2細(xì)胞的毒性和抑制增殖活性結(jié)果（見(jiàn)表1）可見(jiàn)，36種蔬菜提取物對(duì)HepG2細(xì)胞有毒性的質(zhì)量濃度各不相同。研究中抗細(xì)胞增殖活性實(shí)驗(yàn)所用的蔬菜系列質(zhì)量濃度均設(shè)置在沒(méi)有細(xì)胞毒性的提取物質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，這樣可以保證蔬菜提取物樣品的HepG2細(xì)胞抗增殖作用不是由其本身的細(xì)胞毒性作用引起，而是由樣品的抗腫瘤作用所引起（以下蔬菜提取物對(duì)Caco-2細(xì)胞的毒性和抑制增殖活性同此）。由表1可知，韭菜和蒜苔具有最高的抗HepG2細(xì)胞增殖活性，兩者的抗增殖活性相近（p＞0.05）；土豆的抗增殖活性次之；其它蔬菜的抗增殖活性高低依次是紫洋蔥﹥苦瓜≈香菇﹥紫茄子﹥西蘭花﹥芥藍(lán)﹥蓮藕≈木耳﹥菠菜﹥長(zhǎng)豆角≈菜心﹥白蘿卜﹥青尖椒≈青南瓜≈萵苣≈四季豆﹥上海青≈空心菜；紫包菜、紅扁豆、紅莧菜、青甜椒、油麥菜、花椰菜、芹菜、生菜、番茄、白菜、胡蘿卜、葫蘆、冬瓜、黃瓜和絲瓜的抗增殖活性在本實(shí)驗(yàn)條件其EC50值均未測(cè)出。

Chu等人［6］對(duì)美國(guó)消費(fèi)的10種主要蔬菜抗HepG2細(xì)胞增殖活性EC50值的測(cè)定結(jié)果表明，抗HepG2細(xì)胞增殖活性的高低依次為菠菜（42.51± 1.68）mg/mL，洋蔥（100.25±4.00）mg/mL和西蘭花（112.74±4.50）mg/mL，而土豆、萵苣、芹菜、胡蘿卜和黃瓜的抗增殖EC50值未能測(cè)出。

表1　36種蔬菜提取物抗HepG2細(xì)胞增殖的EC50值Table 1　EC50values of of antiproliferative activity of 36 vegetable extracts on HepG2 cells

蔬菜提取物的總酚含量與其抗HepG2細(xì)胞增殖活性之間的相關(guān)性不顯著（R2＝0.027 1，p＞0.05），見(jiàn)表2。但其中總酚含量相對(duì)較高的紫包菜、紅扁豆、紅莧菜和青甜椒卻未能測(cè)出抗HepG2細(xì)胞增殖的EC50值；總酚含量相對(duì)較高的芥藍(lán)、蓮藕、青尖椒和菜心，其抗HepG2細(xì)胞增殖活性也較低；苦瓜、土豆、蒜苔、韭菜和紫洋蔥的總酚含量相對(duì)較低，但其抗HepG2細(xì)胞增殖活性卻較高。蔬菜的抗增殖活性與其總酚含量的相關(guān)性與Chu等人［8］的研究結(jié)果一致，Chu等研究的10種蔬菜抗HepG2細(xì)胞增殖EC50值與其總酚含量之間的相關(guān)性不顯著（R2＝0.121 1，p＞0.05）。

表2　蔬菜總酚含量與抗HepG2和Caco-2細(xì)胞增殖EC50值的相關(guān)性分析Table 2　Correlation analysis between total phenolic content and EC50values on HepG2 and Caco-2 cells

2.3蔬菜提取物對(duì)Caco-2細(xì)胞的毒性和抑制增殖活性

蔬菜提取物的總酚含量與其抗Caco-2細(xì)胞增殖活性的相關(guān)性不顯著（R2＝0.151 3，p＞0.05）。其中總酚含量相對(duì)較高的紫包菜、紅扁豆、木耳、菠菜、紅莧菜、上海青和青甜椒卻未能測(cè)出抗HepG2細(xì)胞增殖的EC50值；總酚含量相對(duì)較高的芥藍(lán)、青尖椒、菜心和西蘭花，其抗HepG2細(xì)胞增殖活性卻較低；韭菜、土豆、蒜苔和香菇的總酚含量相對(duì)較低，但其抗Caco-2細(xì)胞增殖活性卻較高。

蔬菜提取物對(duì)Caco-2細(xì)胞的毒性和抑制增殖活性的研究結(jié)果（見(jiàn)表3）顯示，韭菜具有最高的抗Caco-2細(xì)胞增殖活性，土豆的抗增殖活性次之；其它蔬菜的抗增殖活性高低依次是蒜苔﹥香菇﹥蓮藕﹥紫茄子﹥芥藍(lán)﹥洋蔥﹥?nèi)n苣﹥西蘭花﹥菜心﹥青尖椒，它們間的抗增殖活性差異顯著（p＜0.05）；紫包菜、紅扁豆、木耳、菠菜、紅莧菜、上海青、青甜椒、空心菜、油麥菜、花椰菜、芹菜、長(zhǎng)豆角、白蘿卜、生菜、四季豆、番茄、白菜、苦瓜、胡蘿卜、青南瓜、葫蘆、冬瓜、黃瓜和絲瓜的抗增殖EC50值均未能測(cè)出。

蔬菜的總酚含量與其抗增殖活性之間相關(guān)性不顯著的結(jié)果表明，除總酚含量以外，蔬菜多酚的抗增殖活性還受到多酚的組成種類（黃酮類、花青素類或酚酸類等）及其不同酚類間的協(xié)同作用，以及其他植物化學(xué)成分的影響。因此，不能單從多酚含量的高低來(lái)推測(cè)其生物學(xué)活性［5-6］。

表3　36種蔬菜提取物抗Caco-2細(xì)胞增殖的EC50值Table 3　EC50values of of antiproliferative activity of 36 vegetable extracts on Caco-2 cells

3　結(jié)語(yǔ)

36種蔬菜提取物中GAE為：芥藍(lán)（973.09± 31.29）μmol/hg，蓮藕（920.55±29.00）μmol/hg，總酚含量最高；絲瓜（44.94±4.16）μmol/hg，總酚含量最低。在抑制細(xì)胞增殖活性方面，韭菜（15.96±0.88）mg/mL和蒜苔（17.54±0.03）mg/mL，抗HepG2細(xì)胞增殖活性最強(qiáng)；上海青（390.52±17.63）mg/mL和空心菜（394.25±11.89）mg/mL，抗HepG2細(xì)胞增殖活性最弱。韭菜抗Caco-2細(xì)胞增殖活性最強(qiáng)，為（21.08±1.67）mg/mL；青尖椒的抗Caco-2細(xì)胞增殖活性最弱，為（390.17±4.78）mg/mL。

蔬菜提取物的總酚含量與其抗HepG2細(xì)胞增殖活性之間的相關(guān)性不顯著（R2＝0.027 1，p＞0.05）；與其抗Caco-2細(xì)胞增殖活性之間的相關(guān)性也不顯著（R2＝0.151 3，p＞0.05）。表明，蔬菜的抗腫瘤細(xì)胞增殖活性不能單從其多酚含量的高低來(lái)推測(cè)，蔬菜中某些種類多酚的抗腫瘤活性值得深入研究。

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Antiproliferative Activities of 36 Vegetables in China on HepG2 and Caco-2 Cells

WAN Hongxia1，LIU Renbin2，SUN Haiyan1，LIU Dong*1
（1.Shenzhen Polytechnic，Shenzhen 518055，China；2.Traditional Chinese Medical Science Section，Shiyan Renmin Hospital，Shiyan 442000，China）

The work was to determine the phenolic contents and the antiproliferative activities on human liver cells HepG2 and human colon cancer cells Caco-2 of 36 commonly consumed vegetables in China.Based on the Folin-Ciocalteu method，Brassica alboglabra L.H.Bailey（Chinese kale）（973.09±31.29 μmol GAE/100 g of fresh vegetable）and Nodus Nelumbins Rhizomatis（lotus root）（920.55±29.00 μmol GAE/100 g of fresh vegetable）were found to have the highest totalphenolic contents，whereas Luffa cylindrica（L.）（Roem.towel gourd）（44.94±4.16 μmol GAE/100 g fresh vegetable）had the lowest phenolic content.According to the methylene blue assay for the quantifiable antiproliferative activities，A.tuberosum（Chinese chive）and galic bolt（garlic sprout）had the strongest antiproliferative activities on HepG2 cells with EC50values of 15.96±0.88 mg/mL and 17.54±0.03 mg/mL，respectively，and A.tuberosum（Chinese chive）also had the strongest antiproliferative activity on Caco-2 cells（EC50value of 21.08±1.67 mg/mL）；Brassicachinensis L.（Shanghai pakchoi）（EC50value of 390.52±17.63 mg/mL）and Ipomoea aquatica Forsk.（water spinach）（EC50value of 394.25±11.89 mg/mL）exerted the weakest antiproliferative activities on HepG2 cells，and Capsicum annuum（green chili pepper）（EC50value of 390.217±4.78 mg/mL）had the weakest activity on Caco-2 cells.The study did not prove a significant correlation between the total phenolic contents and the antiproliferative activities on HepG2（R2=0.0271，p＞0.05）and Caco-2（R2=0.151 2，p＞0.05）cells，indicating that the inhibition of cancer cells by vegetables could not be explained solely by their phenolic contents.

vegetable，polyphenol，HepG2 human liver cells，Caco-2 human colon cancer cells，antiproliferative activity

TS 201.4；R 151.3

A

1673—1689（2015）09—0995—07

2014-09-24

廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（S20111010004455）；廣東省高等職業(yè)院校珠江學(xué)者崗位計(jì)劃資助項(xiàng)目（2011）；深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目（JC201005280530A，JCYJ201303/1512222011）。

萬(wàn)紅霞（1984—），女，河南濮陽(yáng)人，工學(xué)碩士，助教，主要從事食品科學(xué)研究。E-mail：wanhongxias@szpt.edu.cn

劉冬（1968—），男，湖北十堰人，工學(xué)博士，教授，主要從事食品生物技術(shù)研究。E-mail：liudongsz@szpt.edu.cn