許桂芬 吳志輝 翁智遠 鄭 勇

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福州地區(qū)漢族冠脈介入患者CYP2C19基因多態(tài)性的研究

許桂芬 吳志輝 翁智遠 鄭 勇

福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科

目的：探討福州地區(qū)漢族冠脈介入患者CYP2C19基因分布情況。方法：選取323名無血緣關系并行冠脈介入（PCI）治療的福州地區(qū)漢族患者，應用PCR-基因芯片法分析氯吡格雷代謝相關CYP2C19基因型及等位基因的頻率。結果：福州地區(qū)漢族冠脈介入患者CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*2、CYP2C19*2/*3和CYP2C19*3/*3基因型頻率分別為41.5%、39.9%、5.6%、10.2%、2.5%、0.3%。CYP2C19代謝型以中間代謝型的頻率最高，為45.5%,最低的為慢代謝型（為13.0%）。CYP2C19*1、*2和*3的頻率分別為64.3%、31.4%和4.3%，該結果與中國其他地區(qū)漢族人群的差異無統(tǒng)計學意義(P<0.05)。CYP2C19基因在男性組和女性組無顯著差別。結論：福州地區(qū)漢族人群CYP2C19基因多態(tài)性與中國其他地區(qū)相近，存在較多的氯吡格雷代謝功能缺失基因,性別不是CYP2C19遺傳多態(tài)性的主要影響因素。

CYP2C19 基因型 等位基因

抗血小板藥物氯吡格雷在冠心?。ü跔顒用}粥樣硬化性心臟病）介入治療中發(fā)揮重要作用，但其作為無活性前體藥物，需經(jīng)由CYP2C19基因編碼的肝臟細胞色素P450（CYP）酶系活化為有活性的代謝產(chǎn)物才能發(fā)揮其重要的抑制血小板聚集作用。CYP2C19至少存在14種突變基因和18種等位基因突變[1]，99%以上中國人群的基因突變類型為CYP2C19*2/*3。編碼正常催化酶活性的為野生型基因CYP2C19*1，而等位基因*2、*3所編碼的酶無活性[2,3]。對氯吡格雷藥物代謝的能力也隨著等位基因的不同組合而呈現(xiàn)出一定的規(guī)律性。其代謝分型可分為：快代謝基因型(CYP2C19*1/*1)、中間代謝型(CYP2C19*1/*2和*1/*3)和慢代謝型(CYP2C19*2/*2、*2/*3和*3/*3)。CYP2C19等位基因突變使酶活性下降，基因多態(tài)性導致所編碼的蛋白質(zhì)（酶）活性存在明顯個體差異。為此，本文對福州地區(qū)漢族冠脈介入患者CYP2C19基因多態(tài)性進行研究，進而為臨床治療中合理用藥提供相關的理論支持。

1 材料和方法

1.1 研究對象

2014年1月至2014年12月入住福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科并行冠脈介入治療的漢族患者323例，其中男性252例，女性71例，年齡37~90歲，均否認家族遺傳病，且相互之間無血緣關系。

1.2 試劑和儀器

上海Baio公司的DNA提取試劑盒、聚合酶鏈式反應（PCR）試劑、雜交顯色試劑盒、BR-526-24全自動雜交儀、BE-2.0 生物芯片識讀儀、Array Doctor V2.0 芯片圖像分析軟件。

1.3 研究方法

本研究主要檢測人CYP2C19基因*2G681A和*3G636A兩個位點。CYP2C19基因型分為：野生型CYP2C19*1/*1、突變雜合型CYP2C19*1/*2、*1/*3和突變純合型CYP2C19*2/*2、*2/*3、*3/*3?；蛐筒煌?，則患者對氯吡格雷的藥物代謝亦存在較大的差異，其中野生型基因CYP2C19*1/*1為快代謝型，突變雜合型CYP2C19*1/*2、*1/*3為中間代謝型，突變純合型CYP2C19*2/*2、*2/*3、*3/*3為慢代謝型。

用EDTA管抽取患者靜脈血2mL，按DNA提取試劑盒說明書操作步驟提取DNA，根據(jù)上海Baio公司提供的聚合酶鏈式反應（PCR）試劑進行PCR產(chǎn)物擴增，嚴格按照Baio公司提供的基因分型系統(tǒng)操作步驟進行檢測，從而得出每個患者的基因分型。

1.4 統(tǒng)計學分析

將所獲得的數(shù)據(jù)以Hardy-Weinberg平衡檢驗樣本數(shù)據(jù)的群體代表性，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 CYP2C19基因型的分布情況

本研究對323名（男性252名，女性71名）冠心病介入治療患者的CYP2C19基因型及其多態(tài)性進行檢測分析，其檢測結果符合Hardy-Weinberg平衡定律，說明該研究結果具有代表性。CYP2C19*1／*1基因型的發(fā)生率為41.5%(134例）,*1／*2基因型為39.9%（129例），*1／*3基因型為5.6%（18例），*2／*2基因型為10.2%（33例），*2／*3基因型為2.5%（8例），*3／*3基因型為0.3%（1例）。CYP2C19快代謝型134例(41.5%),中代謝型147例(45.5%),慢代謝型42例(13.0%)，其中以中間代謝型的發(fā)生率最高。

2.2 不同性別CYP2C19基因型和等位基因頻率分布

本研究根據(jù)性別分為兩個組：男性組（252例）和女性組（71例），初步分析不同性別之間基因CYP2C19遺傳多態(tài)性分布情況（表1）。男性組基因型CYP2C19*1／*3、*2／*3頻率（分別為6.7%，2.8%）略高于女性組（分別為1.4，1.4），而基因型CYP2C19*2／*2（8.7%）略低于女性組（15.5%）。男性組等位基因CYP2C19*2頻率（30.2%）比女性組（35.9%）低，而CYP2C19*3（5.2%）比女性組（1.4%）高。雖然不同性別之間CYP2C19基因型和等位基因的頻率存在一定差異，但是并無統(tǒng)計學意義（P>0.05)。

表1 不同性別CYP2C19等位基因和基因型頻率分布

2.3 我國不同地區(qū)CYP2C19基因分布的比較

福州地區(qū)人群（漢族）CYP2C19基因型以野生型為主，等位基因CYP2C19*1、*2和*3 的發(fā)生頻率分別為64.3%、31.4%和4.3%。結合本研究結果及既有的文獻報道結果，對福州、重慶及沈陽等不同地區(qū)漢族人群CYP2C19的等位基因頻率進行比較（表2），發(fā)現(xiàn)我國不同地區(qū)之間漢族人群CYP2C19的等位基因頻率無顯著性差異（P<0.05）。

表2 我國不同地區(qū)漢族人群中CYP2C19基因頻率

3 討論

既往研究表明，攜帶CYP2C19*2、*3的冠心病患者服用氯吡格雷后，心肌梗死、腦卒中、支架內(nèi)血栓等風險增高[10-12]。突變基因CYP2C19*2、*3所編碼的酶無催化活性，因此被稱為氯吡格雷代謝功能缺失等位基因。攜帶CYP2C19*2、*3是氯吡格雷抵抗的主要原因。本研究結果顯示福州地區(qū)漢族人群CYP2C19*2和*3的發(fā)生頻率分別31.4%和4.3%，與既往研究結果相一致，提示CYP2C19的基因分布在我國不同地區(qū)漢族人群中無統(tǒng)計學上差異。本研究結果提示，等位基因CYP2C19*2頻率明顯高于*3的頻率，說明*2是福州地區(qū)漢族人群冠脈介入患者最常見的氯吡格雷代謝功能缺失等位基因。

福州地區(qū)冠脈介入患者CYP2C19慢代謝基因型比例為13.0%，也就是說在福州至少有13%左右的冠脈介入患者服用氯吡格雷可能無效。本研究數(shù)據(jù)可見，中代謝基因型的比例要遠高于其他代謝類型，中、慢代謝型所占比例高達58.5%。中代謝基因型患者亦容易產(chǎn)生氯吡格雷抵抗現(xiàn)象，那么筆者推算，可能有接近6成的福州冠脈介入患者存在輕度或者重度氯吡格雷抵抗現(xiàn)象。美國食品和藥物管理局(FDA)建議使用氯吡格雷之前需注意CYP2C19的基因型以便了解患者藥物代謝能力[13]。CYP2C19基因與多種藥物代謝相關，其多態(tài)性越來越受到臨床廣大醫(yī)務工作者的重視。對于攜帶CYP2C19*2、*3的患者，建議氯吡格雷加量或者換藥，為患者提供個體化治療方案。

筆者對不同性別的CYP2C19基因遺傳多態(tài)性進行比較發(fā)現(xiàn)，兩組之間的基因頻率以及基因型頻率均有一定的區(qū)別，但無統(tǒng)計學意義，這與以往的研究一致。說明性別不是CYP2C19基因遺傳多態(tài)性的主要影響因素。本研究比較系統(tǒng)地對福州地區(qū)行冠脈介入治療的漢族人群CYP2C19基因分布情況進行分析，樣本量相對較大，具有代表性。我們發(fā)現(xiàn)福州地區(qū)漢族冠脈介入患者CYP2C19基因存在多態(tài)性，與中國其他地區(qū)漢族人群相近。福建地區(qū)冠心病介入患者中占有較多的氯吡格雷代謝功能缺失基因，在氯吡格雷等藥物使用之前建議注意檢測CYP2C19基因情況，以便選擇藥物種類或者藥物劑量。

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