鹽城市藥品檢驗所（224002）王蕾 仇其原

感愈膠囊是由板藍(lán)根、金銀花、人工牛黃、對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺等制備而成的中西結(jié)合的復(fù)方制劑。主要用于風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱，有汗，鼻塞，咽喉痛，咳嗽，是一種常用的清熱解毒，疏風(fēng)解表藥?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)用HPLC法測定對乙酰氨基酚的含量，用非水滴定法測定鹽酸金剛烷胺的含量[1]，筆者參考文獻(xiàn)[2][3]，建立了HPLC-ELSD法同時測定感愈膠囊中鹽酸金剛烷胺及對乙酰氨基酚的含量，該法簡便、靈敏、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 高效液相色譜系統(tǒng)：Agilent 1200 Series 高效液相色譜儀（G1311A四元泵高效液相色譜儀，G1316A柱溫箱）（美國Agilent公司），Varian 380- LC ELSD檢測器；XS205DU電子天平（梅特勒有限公司）；KQ-300V型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.2 試藥 鹽酸金剛烷胺對照品（批號：100426-200301，中國藥品生物制品檢定所）對乙酰氨基酚對照品（批號：100018-200408，中國藥品生物制品檢定所）；感愈膠囊（通藥制藥集團(tuán)股份有限公司，批號為130503、130621、131015）；甲醇為色譜純；乙腈為色譜純；水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：CAPCELL PAK MGⅡC18(4.6mm×150mm，5μm)；流動相為乙腈-0.06%三氟乙酸溶液（20∶80），流速0.6mL·min-1，柱溫30℃，進(jìn)樣量10μL，ELSD檢測器漂移溫度為100℃，霧化氣體為空氣，氣流速度為2.0L·min-1。

附表1 鹽酸金剛烷胺和對乙酰氨基酚加樣回收試驗結(jié)果

附表2 供試品含量測定結(jié)果

附圖 感愈膠囊色譜圖

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸金剛烷胺對照品105.92mg與對乙酰氨基酚對照品248.70mg，置于50mL量瓶中，加甲醇適量溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品貯備液。精密量取貯備液4mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得每1mL含鹽酸金剛烷胺0.8474mg、對乙酰氨基酚1.990mg的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取感愈膠囊10粒，精密稱定裝量，研細(xì)內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸金剛烷胺80mg）置100mL量瓶中，加甲醇適量超聲處理30min，取出，放置至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2.2.3 陰性對照溶液的制備 按處方比例制備不含鹽酸金剛烷胺和對乙酰氨基酚的陰性樣品，取0.34g，按“2.2.2”項下方法制備陰性對照溶液。

2.3 專屬性試驗 分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10μL，注入液相色譜儀測定，結(jié)果表明，在此條件下，對乙酰氨基酚與鹽酸金剛烷胺的分離度符合規(guī)定，峰形良好，陰性樣品無干擾。結(jié)果見附圖。

2.4 線性關(guān)系的考察 精密吸取對照品貯備液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0mL，分別置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，按上述“2.1”色譜條件測定。以進(jìn)樣量對數(shù)值（X）為橫坐標(biāo)，峰面積對數(shù)值（Y）為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得鹽酸金剛烷胺的線性回歸方程為Y=0.6811X-1.8772，r=0.9999；對乙酰氨基酚的線性回歸方程為：Y=0.6852X-1.9099，r=0.9999。鹽酸金剛烷胺和對乙酰氨基酚分別在2.1184～12.7104μg、4.9736～29.8416μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.5 精密度試驗 精密吸取對照品溶液10μL，在上述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜峰面積。峰面積的RSD（n=6）分別為：0.85%，1.09%。結(jié)果表明精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗 取同一批次樣品5份（批號130503），按“2.2.2”項下供試品溶液的制備方法，制備供試品溶液，按“2.1”項下色譜條件測定，結(jié)果對乙酰氨基酚含量平均為100.2%， RSD=0.91%；鹽酸金剛烷胺含量平均為9 9.3%，RSD=0.95%。

2.7 穩(wěn)定性試驗 取同一批次樣品，按樣品溶液制備方法制備供試品溶液，分別精密吸取同一供試品溶液10μL，于0、2、4、8、12、24h進(jìn)樣，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄色譜峰面積。結(jié)果鹽酸金剛烷胺與對乙酰氨基酚的峰面積的RSD分別為0.91%，0.78%（n=6），說明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.8 加樣回收率試驗 取已知含量的感愈膠囊（批號：130503）內(nèi)容物，研細(xì)，混勻，取粉末約33.72mg共6份，精密稱定，分別置20mL量瓶中，分別精密加入對照品溶液10mL，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定含量，計算回收率。結(jié)果見附表1。

2.9 樣品含量測定 取供試品溶液，濾過，進(jìn)樣，測定，按外標(biāo)法計算含量，測定3批的含量，結(jié)果見附表2。

3 討論

3.1 流動相的選擇 參考相關(guān)文獻(xiàn)資料，曾經(jīng)試驗采用不同的流動相按不同比例進(jìn)行檢測，結(jié)果表明以乙腈-0.06%三氟乙酸（20∶80）為流動相效果最好，所以可作為本實驗流動相。

3.2 現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)用HPLC法測定對乙酰氨基酚的含量，用非水滴定法測定鹽酸金剛烷胺的含量[1]。試驗中發(fā)現(xiàn)該方法操作步驟繁瑣，樣品前處理取樣量大。本文運用HPLC-ELSD法測定感愈膠囊中鹽酸金剛烷胺及對乙酰氨基酚的含量，該方法操作簡便，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，本文所進(jìn)行的工作為今后開發(fā)感愈膠囊的質(zhì)量監(jiān)控奠定了基礎(chǔ)。