林　霖，楊國(guó)棟，汪紀(jì)倉(cāng)

（1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南 洛陽(yáng)　471003；2.河南省高等學(xué)校環(huán)境與畜產(chǎn)品安全重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，河南 洛陽(yáng)　471003）

虎杖苷對(duì)鎘致小鼠睪丸氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用

林霖1，2，楊國(guó)棟1，汪紀(jì)倉(cāng)1，2

（1.河南科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，河南 洛陽(yáng)471003；2.河南省高等學(xué)校環(huán)境與畜產(chǎn)品安全重點(diǎn)學(xué)科開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，河南 洛陽(yáng)471003）

目的：探討虎杖苷對(duì)鎘致小鼠睪丸氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用。方法：40 只小鼠隨機(jī)分成5 組：正常對(duì)照組，鎘組，25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組，于實(shí)驗(yàn)第1天，鎘組及虎杖苷保護(hù)組小鼠一次性腹腔注射2 mg/kg氯化鎘（氯化鎘質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL），制造小鼠睪丸氧化應(yīng)激損傷，虎杖苷保護(hù)組小鼠同時(shí)經(jīng)口灌胃給予25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷，連續(xù)灌胃1 周后處死小鼠，統(tǒng)計(jì)小鼠睪丸臟器系數(shù)；蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色，觀察小鼠睪丸組織病理學(xué)變化；檢測(cè)虎杖苷對(duì)小鼠睪丸超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性，以及丙二醛（malonaldehyde，MDA）和8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG）含量的影響。結(jié)果：與正常對(duì)照組比較，鎘組小鼠睪丸臟器系數(shù)顯著降低，睪丸組織細(xì)胞變性、壞死，生精細(xì)胞明顯減少，而虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸組織細(xì)胞損傷均明顯減輕；與正常對(duì)照組比較，鎘組小鼠睪丸組織SOD及GSH-Px活性均極顯著降低，MDA及8-OHdG含量均極顯著升高（P＜0.01）。與鎘組比較，50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠的睪丸臟器系數(shù)顯著或極顯著升高（P＜0.05或P＜0.01），睪丸組織的SOD活性明顯升高，差異達(dá)到顯著或極顯著水平（P＜0.05或P＜0.01）；25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸組織的GSH-Px活性明顯升高，差異達(dá)到顯著或極顯著水平（P＜0.05或P＜0.01），而MDA及8-OHdG含量均明顯降低，差異同樣達(dá)到顯著或極顯著水平（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論：虎杖苷能減輕鎘致小鼠睪丸組織細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，抑制氧化應(yīng)激對(duì)睪丸細(xì)胞DNA的損傷。

虎杖苷；鎘；睪丸損傷；氧化應(yīng)激

虎杖苷是以植物中藥虎杖為主要來(lái)源的提取物，是植物體內(nèi)一種天然的二苯乙烯類多酚物質(zhì)。近年來(lái)，研究表明虎杖苷具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、抗疲勞等作用［1-3］，能夠治療出血性休克、腎上腺素導(dǎo)致的心、肺損傷，能拮抗順鉑、四氯化碳（CCl4）等毒物引起的肝、腎毒性損傷［4-8］。鎘是一種主要的環(huán)境污染物，能損傷組織和器官，并有潛在的致癌作用［9］，雄性睪丸對(duì)鎘引起的毒性敏感，鎘可導(dǎo)致睪丸組織損傷、生精障礙和不育［10-13］。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)一些植物提取物的活性成分如藍(lán)莓花青素、黃芪甲苷等對(duì)鎘的睪丸毒性均有一定的拮抗作用［14-15］，虎杖苷作為一種作用廣泛的植物活性成分，對(duì)重金屬鎘導(dǎo)致的睪丸損傷有無(wú)保護(hù)作用尚未見(jiàn)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)就虎杖苷對(duì)鎘致小鼠睪丸損傷的保護(hù)作用及其機(jī)理進(jìn)行探討，為虎杖苷防治重金屬鎘對(duì)人和動(dòng)物雄性生殖健康的影響提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

虎杖苷，經(jīng)高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）檢測(cè)純度為98.2%，購(gòu)于陜西慈緣生物技術(shù)有限公司。

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）試劑盒、丙二醛（malonaldehyde，MDA）試劑盒南京建成生物工程研究所；8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine，8-OHdG）酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒上海研生生物科技有限公司；其他試劑均為分析純。

1.2動(dòng)物

清潔級(jí)健康昆明雄性小鼠40 只，體質(zhì)量（30±2） g，購(gòu)于鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：SCXK（豫）2005-0001，小鼠飼養(yǎng)環(huán)境室溫控制在20～25 ℃、相對(duì)濕度55%～65%，小鼠的食物為鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的小鼠標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，自由飲用純凈水，實(shí)驗(yàn)期為7 d。

1.3方法

1.3.1動(dòng)物分組與處理

40 只雄性小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，隨機(jī)分為5 組，每組8 只：正常對(duì)照組，鎘組，25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組，于實(shí)驗(yàn)第1天，正常對(duì)照組小鼠腹腔注射滅菌生理鹽水0.01 mL/g（以體質(zhì)量計(jì)，下同），鎘組和虎杖苷保護(hù)組小鼠一次性腹腔注射氯化鎘溶液0.01 mL/g（200 mg氯化鎘溶解到1 L 0.9%生理鹽水中，氯化鎘質(zhì)量濃度為0.2 mg/mL）。同時(shí)，虎杖苷保護(hù)組小鼠分別灌胃25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷（灌胃劑型為混懸劑，虎杖苷質(zhì)量濃度分別為2.5、5、10 mg/mL，助懸劑為0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，小鼠一次灌胃容量為0.01 mL/g），正常對(duì)照組和鎘組小鼠灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，灌胃容量為0.01 mL/g。從實(shí)驗(yàn)第1天起，小鼠每天灌胃1 次，連續(xù)灌胃7 d，于末次灌胃24 h后，稱體質(zhì)量，脫頸椎處死小鼠。常規(guī)剖開(kāi)腹腔，取出兩側(cè)睪丸，精確稱量睪丸質(zhì)量，一側(cè)睪丸置入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的多聚甲醛溶液中固定，制作組織切片；切取另一側(cè)部分睪丸，精確稱質(zhì)量，用眼科剪剪碎，在冰浴的玻璃勻漿器中勻漿，檢測(cè)勻漿液中的SOD、GSH-Px活性以及MDA和8-OHdG含量。

1.3.2小鼠睪丸組織病理學(xué)檢測(cè)

常規(guī)制備小鼠睪丸石蠟組織切片，蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色，光鏡下觀察各組小鼠睪丸組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)。

1.3.3小鼠睪丸氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)

小鼠睪丸組織勻漿蛋白含量的測(cè)定采用考馬斯亮藍(lán)法；MDA含量測(cè)定采用硫代巴比妥法，8-OHdG含量測(cè)定參照8-OHdG ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)方法，SOD活性測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法，GSH-Px活性測(cè)定采用改良5，5'-二硫代雙（2-硝基苯甲酸）（5，5'-dithiobis-（2-nitrobenzoic acid），DTNB）直接顯色法，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)方法操作。

1.4數(shù)據(jù)處理

2　結(jié)果與分析

2.1小鼠睪丸形態(tài)及臟器系數(shù)變化

圖1　各組小鼠睪丸臟器系數(shù)變化Fig.1　Change in testis organ coefficient of mice in each group

與正常對(duì)照組比較，鎘組小鼠睪丸體積明顯縮小，色澤稍灰暗。如圖1所示，鎘組小鼠睪丸臟器系數(shù)極顯著降低（P＜0.01）；各劑量虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸的體積和臟器系數(shù)與鎘組比較均不同程度增加，50 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸臟器系數(shù)顯著升高（P＜0.05），100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸臟器系數(shù)極顯著升高（P＜0.01）。

2.2小鼠睪丸組織病理學(xué)觀察

圖2　光鏡下各組小鼠睪丸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)（HE，×400）Fig.2　Histological characteristics of testis sections stained with HE （× 400）

如圖2所示，正常對(duì)照組小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)清晰，生精細(xì)胞層數(shù)多、排列整齊，可見(jiàn)精子產(chǎn)生。鎘組小鼠睪丸曲細(xì)精管管壁變薄，上皮細(xì)胞排列紊亂、細(xì)胞層數(shù)明顯減少，管腔中無(wú)精子；存在少量變性、壞死的生精細(xì)胞：變性細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器腫脹，核體積略增大；壞死細(xì)胞的胞膜破裂，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡，細(xì)胞溶解。鎘組小鼠睪丸有較多生精細(xì)胞變性、壞死、脫落，偶見(jiàn)生精小管上皮細(xì)胞壞死、溶解；部分睪丸生精小管上皮細(xì)胞已全部壞死、溶解，管壁結(jié)構(gòu)分辨不清，間質(zhì)內(nèi)纖維大量增生?；⒄溶毡Ｗo(hù)組小鼠睪丸組織損傷明顯減輕，100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸形態(tài)及組織結(jié)構(gòu)基本接近正常對(duì)照組，生精細(xì)胞層數(shù)較多、排列基本整齊，并有精子生成。

2.3虎杖苷對(duì)小鼠睪丸組織抗氧化酶活性及氧化應(yīng)激產(chǎn)物的影響

表1　各組小鼠睪丸組織MDA、8-OHdG含量及SOD、GSH-Px活性Table 1 Contents of MDA and 8-OHdG and activities of SOD and GSH-Px in testis tissue from each group of mice

由表1可知，與正常對(duì)照組比較，鎘組小鼠睪丸組織SOD及GSH-Px活力極顯著降低（P＜0.01），MDA和8-OHdG含量極顯著升高（P＜0.01）；與鎘組比較，50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸組織SOD活力均明顯升高，差異達(dá)到顯著或極顯著水平（P＜0.05或P＜0.01），25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸組織GSH-Px活性明顯升高，差異達(dá)到顯著或極顯著水平（P＜0.05或P＜0.01）；與鎘組比較，25、50、100 mg/（kg·d）虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸組織MDA和8-OHdG含量均明顯降低，差異同樣達(dá)到顯著或極顯著水平（P＜0.05或P＜0.01）。

3　討論與結(jié)論

鎘廣泛應(yīng)用于現(xiàn)代工業(yè)、農(nóng)業(yè)，如電鍍、染料、涂料、電池、農(nóng)藥等領(lǐng)域，可通過(guò)消化、呼吸等途徑進(jìn)入人和動(dòng)物體內(nèi)，因其代謝緩慢、半衰期長(zhǎng)，易在體內(nèi)多種組織、器官中蓄積［16-17］，能對(duì)機(jī)體多種臟器造成危害，是一種國(guó)際公認(rèn)的主要環(huán)境污染物。鎘屬于過(guò)渡金屬元素，具有非?；顫姷耐鈱榆壍离娮?，易發(fā)生電子傳遞反應(yīng)而抑制線粒體呼吸鏈，并產(chǎn)生羥自由基（·OH）、超氧陰離子自由基（O2-·）、H2O2等［18］，可攻擊質(zhì)膜上不飽和脂肪酸的雙鍵，導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。鎘還可與微量元素相互作用，影響抗氧化酶系中的金屬輔基如Cu、Zn、Se等金屬依賴性酶的活性，降低其清除氧自由基的能力［19-20］。鎘不僅能導(dǎo)致組織細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，同時(shí)還可導(dǎo)致細(xì)胞DNA氧化損傷、DNA鏈斷裂、DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)損傷，染色體畸變［21］。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)小鼠采取一次性腹腔注射2 mg/kg氯化鎘，1 周后小鼠睪丸臟器系數(shù)明顯降低，睪丸組織發(fā)生變性與壞死等病理學(xué)改變，此病理結(jié)果與陳敏等［22］觀察到小鼠染鎘1、3 d后睪丸的形態(tài)呈出血、水腫特征，5 d后睪丸開(kāi)始縮小的報(bào)道一致，同時(shí)也表明本實(shí)驗(yàn)觀察到染鎘7 d后小鼠的睪丸體積縮小，是睪丸組織經(jīng)過(guò)了出血、水腫、壞死等一系列病理演變過(guò)程的結(jié)果，小鼠睪丸臟器系數(shù)越低，其損傷越嚴(yán)重，其變化與睪丸的組織病理變化相一致；與此對(duì)應(yīng)，小鼠睪丸組織中脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA的含量亦極顯著升高，表明脂質(zhì)過(guò)氧化可能是鎘誘導(dǎo)睪丸組織損傷的主要因素之一。

虎杖苷又稱白藜蘆醇苷，為植物虎杖體內(nèi)天然的二苯乙烯類多酚類物質(zhì)，具有順式與反式兩種構(gòu)象，自然界中主要以反式構(gòu)象存在。研究已表明，虎杖苷能拮抗出血性休克及CCl4造成的小鼠脂質(zhì)過(guò)氧化損傷［7-8］，對(duì)果糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷也有較強(qiáng)的抑制作用［3］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著虎杖苷劑量的增加，小鼠睪丸組織MDA含量也呈現(xiàn)逐步降低趨勢(shì)，與鎘組比較，25 mg/（kg·d）虎杖苷可以顯著降低睪丸組織MDA含量（P＜0.05），50、100 mg/（kg·d）虎杖苷可以極顯著降低睪丸組織MDA含量（P＜0.01）；睪丸組織中的SOD和GSH-Px活性隨虎杖苷劑量的增加呈增強(qiáng)趨勢(shì)，這表明虎杖苷能夠通過(guò)提升抗氧化酶活性、抑制鎘誘導(dǎo)的自由基對(duì)睪丸組織細(xì)胞的攻擊、減輕脂質(zhì)過(guò)氧化程度，從而使小鼠睪丸組織MDA含量降低。而睪丸MDA含量變化與睪丸的病理學(xué)損傷程度相一致，伴隨睪丸MDA含量逐漸降低，睪丸臟器系數(shù)逐漸接近正常對(duì)照組，小鼠睪丸組織病變逐漸減輕，表明虎杖苷與鎘誘導(dǎo)的睪丸氧化應(yīng)激損傷存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。

8-OHdG是活性氧簇致細(xì)胞DNA損傷的產(chǎn)物，活性氧自由基如O2-·、·OH等可攻擊DNA鳥(niǎo)嘌呤堿基第8位碳原子，生成8-OHdG，導(dǎo)致DNA空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，所以8-OHdG常作為氧化損傷及DNA突變的標(biāo)志物［23-24］。鎘可引起大鼠肝細(xì)胞DNA損傷及8-OHdG含量顯著升高［25］，本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鎘可導(dǎo)致小鼠睪丸組織8-OHdG含量極顯著升高，表明鎘具有DNA毒性。各劑量虎杖苷保護(hù)組小鼠睪丸組織8-OHdG含量顯著或極顯著降低，表明虎杖苷可以有效減輕鎘誘導(dǎo)的活性氧簇自由基對(duì)小鼠睪丸DNA的攻擊，進(jìn)而減少細(xì)胞發(fā)生基因突變的機(jī)率。

本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明虎杖苷能拮抗鎘引起的小鼠睪丸的毒性損傷，減輕睪丸的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷程度，并具有抑制鎘對(duì)小鼠睪丸組織細(xì)胞DNA氧化損傷的保護(hù)作用。

［1］GIAMPIETRO R A， de FILIPPIS D， CARTENI M， et al. Polydatin，a natural precursor of resveratrol， induces β-defensin production and reduces in.ammatory response［J］. In.ammation， 2013， 36（1）： 26-33.

［2］DING Xianqiong， TANG Keji， LU Pingjun， et al. Antifatigue effects of polydatin from Chinese herb polygonum cuspidatum in swimming mice［J］. African Journal of Microbiology Research， 2009， 3（7）： 358-361.

［3］CHEN Lüyi， ZHOU Lan， LIN Qinxiong， et al. Polydatin ameliorates renal injury by attenuating oxidative stress-related inflammatory responses in fructose-induced urate nephropathic mice［J］. Food and Chemical Toxicology， 2013， 52： 28-35.

［4］MIAO Qing， SHI Xiaopeng， YE Mingxiang， et al. Polydatin attenuates hypoxic pulmonary hypertension and reverses remodeling through protein kinase C mechanisms［J］. International Journal of Molecular Sciences， 2012， 13： 7776-7787.

［5］DONG Ming， DING Wenwen， LIAO Yansong， et al. Polydatin prevents hypertrophy in phenylephrine induced neonatal mouse cardiomyocytes and pressure-overload mouse models［J］. European Journal of Pharmacology， 2015， 746： 186-197.

［6］SINAN I， DAMLA A A， NEUWIRTH O， et al. Protective effect of polydatin， a natural precursor of resveratrol， against cisplatin-induced toxicity in rats［J］. Food and Chemical Toxicology， 2014， 72： 147-153.

［7］WANG Xingmin， SONG Rui， CHEN Yunyan， et al. Polydatin： a new mitochondria protector for acute severe hemorrhagic shock treatment［J］. Expert Opinion on Investigational Drugs， 2013， 22（2）：169-179.

［8］ZHANG Hong， Y. Chenghao， JIANG Yiping， et al. Protetive effects of polydatin from polygonum cuspidatum against carbon tetrachlorideinduced live injury in mice［J］. PLoS ONE， 2012， 7（9）. doi： 10.1371/ journal.pone.0046574.

［9］MISRA R R， SMITH G T， WAALKES M P. Evaluation of the direct genotoxic potential of cadmium in four different rodent cell lines［J］. Toxicology， 1998， 126： 103-114.

［10］ 江燕瓊， 王佳月， 唐思賢， 等. 鎘對(duì)鵪鶉睪丸組織的毒性研究［J］. 復(fù)旦學(xué)報(bào)： 自然科學(xué)版， 2007， 46（6）： 869-873.

［11］ 廖曉崗， 石之虎， 鄒聰， 等. 鎘對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞波形蛋白、E-鈣黏蛋白表達(dá)及血睪屏障的影響［J］. 重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011， 36（7）：814-817.

［12］ SIU E R， MRUK D D， PORTO C S， et al. Cadmium-induced testicular injury［J］. Toxicology and Applied Pharmacology， 2009，238（3）： 240-249.

［13］ 張明， 鄔靜， 袁慧， 等. 鎘誘導(dǎo)仔豬睪丸支持細(xì)胞氧化酶活性降低及DNA的損傷［J］. 中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)， 2010， 30（6）： 818-821.

［14］ 龔頻， 陳福欣， 虢紅梅， 等. 藍(lán)莓花青素對(duì)鎘致小鼠睪丸損傷的保護(hù)作用［J］. 中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志， 2014， 32（10）： 762-764.

［15］ 寧巍， 廖曉崗， 王毅， 等. 鎘對(duì)大鼠血睪屏障的損傷及黃芪甲苷的保護(hù)作用［J］. 解剖學(xué)報(bào)， 2014， 45（5）： 705-709.

［16］ 蔡秋， 龍梅立， 朱明， 等. 貴州牛組織鎘污染與飼養(yǎng)環(huán)境的相關(guān)性研究［J］. 食品科學(xué)， 2007， 28（7）： 434-437.

［17］ 任繼平， 李德發(fā)， 張麗英. 鎘毒性研究進(jìn)展［J］. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2003，15（1）： 1-6.

［18］ STOHS S J， BAGCHI D， HASSOUN E， et al. Oxidative mechanism in the toxicity of chromium and cadmium ions［J］. Journal of Environmental Pathology， Toxicology and Oncology， 2000， 19（3）：201-213.

［19］ 周雍， 金慧英， 馮偉華， 等. 急性鎘中毒大鼠睪丸氧化損傷機(jī)制的研究［J］. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2002， 23（1）： 64-66.

［20］ ARASH K， MASOUD A， OMID D. Cadmium-induced oxidative stress in the rat testes： protective effects of betaine［J］. International Journal of Peptide Research and Therapeutics， 2013， 19： 337-344.

［21］ 金龍金， 方周溪， 張嬋， 等. 鎘暴露小鼠生精細(xì)胞DNA損傷與Bcl-2和Bax表達(dá)率及超微結(jié)構(gòu)改變［J］. 中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志， 2005，23（4）： 271-273.

［22］ 陳敏， 謝吉民， 高曉欽， 等. 鎘對(duì)小鼠睪丸的毒作用［J］. 工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病， 2000， 26（5）： 275-277.

［23］ 樸恩誼， 徐立紅. 8-OHdG在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用與研究進(jìn)展［J］. 中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào)， 2012， 34（5）： 493-499.

［24］ PRABHULKAR S， LI Chengzhong. Assessment of oxidative DNA damage and repair at single cellular level via real-time monitoring of 8-OHdG biomarker［J］. Biosensors and Bioelectronics， 2010， 26（4）：1743-1749.

［25］ 潘洪志， 萬(wàn)麗葵， 李輝， 等. 番茄紅素對(duì)鎘中毒大鼠肝細(xì)胞DNA損傷的影響［J］. 營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)， 2006， 28（1）： 83-84.

Ameliorative Effect of Polydatin on Oxidative Stress Damage Induced by Cadmium in Testis of Mice

LIN Lin1，2， YANG Guodong1， WANG Jicang1，2
（1. College of Animal Science and Technology， Henan University of Science and Technology， Luoyang471003， China；2. Open Laboratory of Key Discipline for Environment and Animal Products Safety of Henan Institute of Higher Learning， Luoyang471003， China）

Objective： To study the protective effect of polydatin on oxidative stress damage induced by cadmium in the testis of mice. Methods： Forty male mice were randomly divided into five groups including negative control group， cadmium（Cd） group， and polydatin-protected groups （25， 50 and 100 mg/（kg·d） polydatin）. Oxidative stress damage was induced by 2 mg/kg cadmium chloride on the testis in mice from the Cd group and polydatin-protected groups on the 1st day of the experiment. On the same day， the mice treated with cadmium except those from the Cd group were subjected to intragastric administration of polydatin at doses of 25， 50 and 100 mg/（kg·d）. The experiment lasted one week. Testis organ coefficient，the activities of superoxide dismutase （SOD） and glutathione peroxidase （GSH-Px） and the contents of MDA and 8-hydroxy-2-deoxyguanosine （8-OHdG） were examined on testis in each group. Moreover testis tissue morphology was examined by HE. Results： Testis organ coefficient was decreased， and pathological observations of testis exhibited serious damage with degeneration， necrosis and decreased number of seminiferous cells in mice from the Cd group， while testis organ coefficient was enhanced. The damage was slighter in the testis of mice treated with polydatin. Compared with the control group， the activities of SOD and GSH-Px were decreased remarkably， and the contents of MDA and 8-OHdG were enhanced in the testis of mice from the Cd group （P ＜ 0.01）. However， compared with the Cd group， testis organ coefficient and the activity of SOD were enhanced significantly in the testis of mice treated with 50 and 100 mg/（kg·d） polydatin （P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01），and the activity of GSH-Px was enhanced significantly in the testis of mice treated with 25， 50 and 100 mg/（kg·d） polydatin（P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01）. Moreover， the levels of MDA and 8-OHdG were decreased significantly in the testis of mice treatedwith 25， 50 and 100 mg/（kg·d） polydatin （P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01）. Conclusion： Polydatin has ameliorative effect on testis lipid peroxidation， and can act as a protector to inhibit DNA damage induced by cadmium.

polydatin； cadmium； testis damage； oxidative stress

R144

A

1002-6630（2015）23-0275-04

10.7506/spkx1002-6630-201523050

2015-02-15

河南省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目（13B230989）；河南科技大學(xué)青年科學(xué)基金項(xiàng)目（2014QN062）

林霖（1972—），男，實(shí)驗(yàn)師，碩士，研究方向?yàn)榉肿佣纠韺W(xué)與中毒病防治。E-mail：linlin403@163.com