班立桐，楊紅澎，黃亮，王玉，童應(yīng)凱

（天津農(nóng)學(xué)院，天津300384）

新疆和天津產(chǎn)香菇中氨基酸和多糖的對比分析

班立桐，楊紅澎*，黃亮，王玉，童應(yīng)凱

（天津農(nóng)學(xué)院，天津300384）

分析比較新疆和天津產(chǎn)香菇的氨基酸和多糖含量。結(jié)果表明：新疆產(chǎn)香菇子實體中氨基酸和多糖含量高于天津產(chǎn)香菇，兩種蘑菇子實體中氨基酸總含量分別為22.28%和17.4%。它們所含氨基酸含量的高低有所差別。兩種蘑菇子實體中多糖含量分別為9.61%和7.51%。新疆與天津產(chǎn)香菇相比較，天門冬氨酸（2.14%）、亮氨酸（1.44%）、賴氨酸（1.30%）、精氨酸（1.17%）含量明顯高于天津產(chǎn)香菇，天津產(chǎn)香菇中谷氨酸含量高于新疆產(chǎn)香菇，分別為5.52%和4.85%。

香菇；氨基酸；多糖；對比分析

香菇［Lentinus edodes（Berk）Sing］，又名香蕈、香椹、香信、合蕈、陳仁玉、臺蕈，是著名的食用兼藥用真菌，早在一千多年前就開始采集利用?！侗静菥V目》中有：香菇“甘、平、無毒”；《醫(yī)林纂要》記載：香菇“甘、寒”，“可托痘毒”；《日月本草》認為香菇“益氣、不饑、治風破血”；《本經(jīng)逢原》認為香菇為補償VD的要劑，預(yù)防佝僂病，并治貧血。香菇含有多種有效藥用成分，所含麥角甾醇（VD原，其含量比一般食物高）被人體吸收后，在光照下能轉(zhuǎn)變?yōu)閂D，可增強人體的抵抗力，并能促進兒童骨骼和牙齒的生長，預(yù)防佝僂?。?］。香菇所含的香菇素（Lentinacin，C9H11O4N5），具有降低血中膽固醇的作用，可預(yù)防因動脈硬化引起的冠心病、高血壓等中老年人常見病；香菇多糖（Lentinan）能刺激機體的免疫系統(tǒng)，使免疫功能得到恢復(fù)和提高，從而起到防癌、抗癌作用。香菇還含有一種誘導(dǎo)機體產(chǎn)生干擾素的雙鏈核糖核酸，可預(yù)防由病毒引起的多種疾?。?-2］。

本試驗對新疆和天津產(chǎn)香菇的氨基酸和多糖含量進行了分析測定，為香菇不同產(chǎn)地，尤其可對氣候差別非常大地區(qū)的種植及評價提供一定理論參考。

1材料與方法

1.1材料

新疆和天津產(chǎn)的香菇分別來自于天津市金三農(nóng)農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司凱潤食用菌園區(qū)和新疆和田地區(qū)策勒縣食用菌園區(qū)（兩產(chǎn)地香菇栽培菌棒配方均為：木屑64%、棉籽殼20%、麩皮13%、石膏1%、磷肥1%、含水量60%、pH自然）。

1.2主要儀器

AEZ00電子天平：瑞士METTLER公司；L-8800型全自動氨基酸分析儀：日立公司；真空干燥箱：上海博迅；TU-1901紫外分光光度計：北京普析；超聲波細胞粉碎機：寧波新芝生物科技。

1.3方法

1.3.1樣品處理

樣品去除子實體的帶泥部45℃烘干至重量沒有變化后，用植物粉碎機粉碎，過60目篩備用。

1.3.2多糖測定方法及條件

本研究采用苯酚-硫酸法檢測樣品子實體多糖。標準曲線的制作：

1）在電子天平上準確稱取葡萄糖0.1 g，用100 mL的容量瓶定容配成1.0 mg/mL的葡萄糖溶液，并分別稀釋成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/mL濃度梯度的葡萄糖作為基準物。

2）每種濃度的葡萄糖溶液取2 mL分別加入1 mL 5%苯酚和5 mL硫酸混勻，然后于25℃水中加熱20 min，流水冷卻后于紫外分光光度計489 nm處測光密度值。

3）以葡萄糖濃度為橫坐標，光密度值為縱坐標作標準曲線。

樣品的提?。?/p>

采用超聲波輔助熱水提取技術(shù)提取樣品子實體中的多糖。準確稱取樣品子實體粉末（60目）1 g放入50 mL的離心管中，按一定料液比向離心管中加入蒸餾水，在恒溫水浴鍋中加熱5 min，然后放入超聲波細胞粉碎機中超聲提取。為了在超聲波處理過程中維持料液的溫度，所以每隔5 min對料液進行一次加熱。本試驗采用提取時間35 min、功率150 W、溫度70℃、料液比1∶20（mg/mL）、二級提取，合并兩次上清液，用于多糖測定。

1.3.3氨基酸測試方法及條件

樣品用6 mol/L HCl于110℃水解24 h，提取蛋白水解氨基酸；用水溶液提取游離氨基酸。合并提取液，在氨基酸分析儀上測定氨基酸含量。

顯色劑：茚三酮。泵1壓力：6.90 kPa～7.90 kPa，流速：4.0 mL/min。泵2壓力：0.89 kPa～1.00 kPa，流速：3.5 mL/min。分離柱柱溫：57℃。反應(yīng)柱柱溫：134℃。

2結(jié)果

2.1葡萄糖標準曲線測定結(jié)果

將所測數(shù)據(jù)以吸光度對葡萄糖濃度求算線性回歸方程，得標準曲線回歸方程為y=13.095x（R2= 0.998 6）。試驗表明，葡萄糖在0 mg/mL～0.1 mg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。結(jié)果見圖1。

圖1　葡萄糖標準曲線Fig.1Result of standard curve

2.2子實體中多糖含量測定結(jié)果

經(jīng)檢測，在新疆與天津產(chǎn)香菇蘑菇子實體中多糖含量分別為9.61%和7.51%，見表1。

表1　新疆與天津產(chǎn)香菇子實體多糖含量測定結(jié)果Table 1Polysaccharides content of Lentinus edodes from Xinjiang and Tianjin

2.3子實體中氨基酸測定結(jié)果

經(jīng)檢測，在新疆與天津產(chǎn)香菇蘑菇子實體中分別含有17種氨基酸，總含量分別為22.28%和17.4%。新疆產(chǎn)香菇含量高于1%的氨基酸為谷氨酸、天門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、精氨酸。天津產(chǎn)香菇含量高于1%的氨基酸為谷氨酸、天門冬氨酸和丙氨酸。子實體氨基酸色譜圖見圖2、圖3，結(jié)果見表2、表3。

表2　新疆產(chǎn)香菇子實體氨基酸含量Table 2The content of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang

續(xù)表2新疆產(chǎn)香菇子實體氨基酸含量Continue table 2The content of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang

圖2　新疆產(chǎn)香菇子實體氨基酸色譜圖Fig.2The chromatogram of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang

表3　2013年天津產(chǎn)香菇子實體氨基酸含量Table 3The content of amino acids in Lentinus edodes from Tianjin

圖3　天津產(chǎn)香菇子實體氨基酸色譜圖Fig.3The chromatogram of amino acids in Lentinus edodes from Tianjin

3結(jié)論

上述結(jié)果表明，新疆產(chǎn)香菇子實體中氨基酸含量高于天津產(chǎn)香菇，但它們所含十七種氨基酸含量的高低有所差別。新疆產(chǎn)香菇與天津產(chǎn)香菇相比較，天門冬氨酸（2.14%）、亮氨酸（1.44%）、賴氨酸（1.30%）、精氨酸（1.17%）含量明顯高于天津產(chǎn)香菇，但天津產(chǎn)香菇中谷氨酸含量高于新疆產(chǎn)香菇，分別為5.52%和4.85%。

本研究所測結(jié)果表明，由于栽培環(huán)境的不同導(dǎo)致同一品種蘑菇的氨基酸含量和多糖含量發(fā)生明顯變化。國內(nèi)外已經(jīng)有很多對不同光照下和跨海拔條件下次生代謝產(chǎn)物變化的研究。有研究報道，不同光照強度下，半夏化學(xué)成分含量有顯著的差異，全光照處理有利于半夏生物堿、鳥苷和蛋白質(zhì)的積累［3］。在1 000 m以上西洋參總皂甙含量顯著回升，西洋參總糖、還原糖均隨海拔的增加而增加［4］。在大葉碎米薺研究中，有研究者發(fā)現(xiàn)大葉碎米薺光合速率隨著海拔升高而呈下降趨勢，隨著海拔升高，可溶性糖含量升高［5］。古世祿等［6］在研究海拔對谷子粗蛋白含量與氨基酸的影響中，得出較高海拔谷子粗蛋白和氨基酸含量較高，品質(zhì)較優(yōu)的結(jié)論。韓發(fā)等［7］在測定不同海拔矮嵩草粗蛋白含量中發(fā)現(xiàn)，青藏高原4個不同海拔地區(qū)的矮嵩草，其粗蛋白的含量在高海拔含量最高。

本研究中新疆產(chǎn)香菇是在新疆和田地區(qū)策勒縣栽培所得，策勒縣屬極端干旱型大陸荒漠氣候，氣候干燥、晝夜溫差大、日照長、降水量少、蒸發(fā)量大，年均氣溫11.9℃，年均降水33 mm，有得天獨厚的水土光熱資源，年平均風速1.9 m/s，平均海拔1 365 m。我們的研究結(jié)果說明次生代謝產(chǎn)物和粗蛋白的含量與生態(tài)條件有很大關(guān)系。不同海拔高度造成生境條件差異，在海拔高的地區(qū)，氣候涼爽，陽光充足，晝夜溫差大，適宜的溫度能促進氨基酸及多糖等物質(zhì)的合成［5］。當然還有很多因素（如營養(yǎng)的供給）與次生代謝產(chǎn)物生成有密切關(guān)系。這些因素也需進一步的研究。

［1］徐錦堂.中國藥用真菌學(xué)［M］.北京:北京醫(yī)科大學(xué)-中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1997:625-644

［2］董曉宇，寧安紅，曹婧，等.香菇及其藥理作用研究進展［J］.大連大學(xué)學(xué)報，2005，26（2）:263-268

［3］張躍進，孟祥海，楊東風，等.不同光照強度下半夏化學(xué)成分含量的比較研究［J］.武漢植物學(xué)研究，2009，27（5）:533-536

［4］朱仁斌，宛志滬，丁亞平.皖西山區(qū)西洋參有效成分含量與栽培地海拔高度的關(guān)系［J］.中草藥，2002，33（2）:163-166

［5］張宇.不同海拔高度對大葉碎米薺營養(yǎng)成分和生理特性影響的研究［D］.四川:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006

［6］古世祿，古曉紅，耿聚平.不同土壤與海拔高度對谷子（粟）蛋白質(zhì)氨基酸組成的影響［J］.生態(tài)農(nóng)業(yè)研究，2000，8（3）:32-35

［7］韓發(fā)，賁桂英，師生波.青藏高原不同海拔矮嵩草蛋白質(zhì)、脂肪和淀粉含量的變異［J］.植物生態(tài)學(xué)報，1997，21（2）:97-104

Comparison and Analysis of Amino Acid and Polysaccharides in Lentinus edodes from Xinjiang and Tianjin

BAN Li-tong，YANG Hong-peng*，HUANG Liang，WANG Yu，TONG Ying-kai
（Tianjin Agricultural University，Tianjin 300384，China）

The content of amino acid and polysaccharides in Lentinus edodes from Xinjiang and Tianjin was investigated and compared.The result indicated amino acid and polysaccharides in Lentinus edodes from Xinjiang was higher than that from Tianjin。The total content of amino acids in the two places were 22.28%and 17.4%.The total content of polysaccharides in the two places of mushroom fruiting bodies were 9.61%and 7.51%.The level kinds of amino acid in the two kinds of mushroom fruiting bodies were different.Compared with the content of amino acid in Lentinus edodes from Tianjin，the higher levels of amino acids in Lentinus edodes from Xinjiang was aspartic acid（2.14%），leucine（1.44%），lysine（1.30%）and argnine（1.17%）.But glutamic acid（5.52%）in Lentinus edodes from Tianjin was higher than that（4.85%）from Xinjiang.

Lentinus edodes；amino acid；polysaccharides；comparison and analysis

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.14.003

2014-02-27

天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項目（201101200）；天津市科技支撐計劃項目（13ZCZDNC 09700）；新疆自治區(qū)科技廳科技支疆項目：食用菌優(yōu)良品種在新疆干旱地區(qū)示范推廣（201291131）

班立桐（1972—），男（漢），教授，本科，主要從事食用菌栽培研究。

楊紅澎（1976—），男（漢），副教授，博士，主要從事植物及食用菌次生代謝產(chǎn)物的分離鑒定研究。