楊明華*　賀興江*　李永能　匡海鷗　劉鴻源　和紹禹*　李亞輝*

（1云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明650201；2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201；3云南農(nóng)業(yè)大學(xué)招生就業(yè)處，昆明650201；4云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201）

人工飼養(yǎng)中華蜜蜂幼蟲及其成蜂形態(tài)特征分析

楊明華1，2*賀興江2*李永能3匡海鷗4劉鴻源4和紹禹4*李亞輝4*

（1云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明650201；2云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201；3云南農(nóng)業(yè)大學(xué)招生就業(yè)處，昆明650201；4云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，昆明650201）

蜜蜂因所具有的獨(dú)特特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于眾多科學(xué)研究領(lǐng)域，蜜蜂基因組測(cè)序的完成更加速了其作為模式生物的進(jìn)程。實(shí)驗(yàn)室人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲技術(shù)體系的建立，是蜜蜂作為模式生物研究的基礎(chǔ)和保證。目前，有關(guān)蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)的研究多見于西方蜜蜂，東方蜜蜂生活環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)需求與西方蜜蜂有所不同，實(shí)驗(yàn)室人工飼養(yǎng)東方蜜蜂幼蟲的難度較大，不同實(shí)驗(yàn)室的研究結(jié)果存在著很大差異。對(duì)人工飼養(yǎng)幼蟲培育出的東方蜜蜂成蜂形態(tài)特征的分析目前尚未見報(bào)道。本研究的開展，不僅可以建立東方蜜蜂幼蟲的人工飼養(yǎng)技術(shù)體系，且對(duì)進(jìn)行東方蜜蜂幼蟲營(yíng)養(yǎng)需要、生長(zhǎng)發(fā)育、形態(tài)特征形成等方面的研究也具有重要意義。本文以中華蜜蜂（Apis cerana cerana）1～2日齡幼蟲為實(shí)驗(yàn)材料，在室內(nèi)人工氣候箱中用人工飼料進(jìn)行飼養(yǎng)，直至化蛹羽化，對(duì)羽化后的蜜蜂進(jìn)行體重及形態(tài)特征測(cè)定，并將其與自然羽化的蜜蜂進(jìn)行比較分析。結(jié)果顯示：在人工飼養(yǎng)條件下，中華蜜蜂幼蟲可以正常發(fā)育、羽化為成蜂，其存活率和羽化率分別是55.56%和40.63%；主成分分析、區(qū)辨分析、聚類分析表明，人工飼養(yǎng)與自然羽化的工蜂形態(tài)特征無(wú)顯著差異，但人工飼養(yǎng)的中蜂幼蟲羽化后的工蜂體重顯著低于自然羽化的工蜂。本文闡明了人工飼養(yǎng)中華蜜蜂幼蟲的基本條件，為東方蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)技術(shù)體系的建立奠定了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

中華蜜蜂；幼蟲；人工飼養(yǎng)；形態(tài)特征

蜜蜂是典型的真社會(huì)性昆蟲，具有明確而細(xì)致的勞動(dòng)分工，群內(nèi)有專職的哺育蜂飼喂幼蟲，進(jìn)行過人工操作的幼蟲往往會(huì)被蜜蜂遺棄［1］，從而造成人為干預(yù)下對(duì)蜜蜂幼蟲研究的困難。

人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)人工氣候箱中進(jìn)行，它可人為控制幼蟲食物成分，排除哺育蜂的影響。進(jìn)而許多研究都可得到直接明確的結(jié)果，該技術(shù)的成功應(yīng)用將為蜜蜂作為模式昆蟲研究奠定基礎(chǔ)［2，3］。

早在20世紀(jì)30年代，研究者就陸續(xù)開展了人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲試驗(yàn)。Rhein［4］用新鮮蜂王漿進(jìn)行幼蟲的室內(nèi)人工飼養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)羽化的成蜂只能發(fā)育為工蜂。后人重復(fù)了其試驗(yàn)并認(rèn)為可能有二個(gè)原因：其一是使幼蟲分化發(fā)育為蜂王的某些物質(zhì)是通過哺育蜂直接分泌給幼蟲而不是由幼蟲從蜂王漿中取食得到的；另一個(gè)原因是蜂王漿中含有這種促分化物質(zhì)但其在王漿儲(chǔ)存過程中極易失活。為探明這一問題，Weaver［5］采用每隔2 h收取新鮮蜂王漿飼喂蜜蜂幼蟲的方法，發(fā)現(xiàn)培育出的蜜蜂無(wú)論在外形、個(gè)體大小，還是卵巢管數(shù)等方面都類似蜂王；Jay［6］則在移蟲24、38、48和72 h后取漿來(lái)飼喂幼蟲，結(jié)果表明盡管羽化率很低，移蟲后48 h生產(chǎn)的蜂王漿培育出的成蜂都為蜂王。

在蜂群中，蜂王和工蜂都是由遺傳組成完全一樣的受精卵發(fā)育而來(lái)的雌性蜂，但由于它們所接受的食物不同，致使其發(fā)育成為外部形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)以及群體職能都有巨大差異的不同個(gè)體，蜂王在整個(gè)幼蟲期都被飼以蜂王漿，而工蜂幼蟲僅在3日齡前食用蜂王漿，3日齡以后它們的食物變成以蜂蜜、花粉為主要成分的工蜂漿［7，8］。1984年，Brouwers［9］的研究表明蜂王幼蟲食物中糖類的比例明顯高于工蜂幼蟲的，對(duì)此，他們的解釋為：糖類物質(zhì)可能通過刺激幼蟲取食而使其中腸更為伸展，進(jìn)而激發(fā)外圍中腸伸展受體將信號(hào)傳至大腦，刺激咽側(cè)體合成、釋放更多的保幼激素，高水平的保幼激素支持蜜蜂發(fā)育為蜂王。這些研究無(wú)疑為蜜蜂幼蟲人工飼料的研發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。1988年以后，研究人員不斷改進(jìn)幼蟲飼養(yǎng)技術(shù)，獲得較高的羽化率，成功建立了人工飼養(yǎng)西方蜜蜂幼蟲技術(shù)［10，15］。

目前，人工飼養(yǎng)西方蜜蜂幼蟲技術(shù)已趨成熟，但對(duì)我國(guó)特有的蜂種——中華蜜蜂（Apis cerana cerana）人工飼養(yǎng)幼蟲的研究較少，中華蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)技術(shù)仍未真正建立。據(jù)陳裕文［16］等的報(bào)道，中華蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)羽化率很低，僅為0～4.9%。王倩［17］等從中華蜜蜂幼蟲飼料配方、飼養(yǎng)模式等方面進(jìn)行研究，使化蛹率及羽化率分別提高至82.6%、72.9%，然而，人工飼養(yǎng)的蜜蜂幼蟲能否發(fā)育為形態(tài)正常的個(gè)體仍不可知，針對(duì)來(lái)自人工飼養(yǎng)幼蟲的中華蜜蜂成蜂所進(jìn)行形態(tài)特征分析也未見報(bào)道。因此，開展此類研究不僅有助于豐富人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲的內(nèi)容，建立穩(wěn)定可靠的東方蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)技術(shù)體系，而且對(duì)進(jìn)行中蜂幼蟲營(yíng)養(yǎng)需要、生長(zhǎng)發(fā)育、形態(tài)特征形成等方面的研究也具有重要的意義。

1　材料與方法

1.1材料

本實(shí)驗(yàn)所用東方蜜蜂樣本取自云南農(nóng)業(yè)大學(xué)東方蜜蜂研究所實(shí)驗(yàn)蜂場(chǎng)。

1.2方法

1.2.1蜜蜂幼蟲培育：通過隔王處理得到日齡一致（1.5～2.0日齡）的幼蟲，提出巢脾，用移蟲針將適齡幼蟲轉(zhuǎn)移到加有食物的培養(yǎng)板內(nèi)，每孔一只，將培養(yǎng)板放入人工氣候箱中培養(yǎng)，每天定時(shí)飼喂并觀察幼蟲發(fā)育情況。至幼蟲出現(xiàn)尿酸結(jié)晶排泄物時(shí)，將其轉(zhuǎn)移至化蛹板，每孔一只，化蛹板置于人工氣候箱中，此后不再移動(dòng)蟲體，觀察幼蟲在孔中完成排便吐絲、化蛹和羽化的過程。

1.2.2羽化蜜蜂的收集：取出羽化出房的蜜蜂并從蜂箱中采集同一天自然羽化的工蜂（15只），用電子天平稱重，記錄數(shù)據(jù)，然后將每一組蜜蜂分別放進(jìn)盛有75%乙醇溶液的試管中浸泡備用。

1.2.3形態(tài)測(cè)定：取人工培育及自然羽化的中華蜜蜂每組各15只，用于形態(tài)測(cè)定。形態(tài)測(cè)定特征參照1988年Ruttner［18］1988年提出的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。每只蜜蜂共測(cè)定28個(gè)特征（表1）。

形態(tài)測(cè)定樣本的制作參照譚墾［19］等報(bào)道的方法進(jìn)行。首先，用透明膠帶固定重疊在一起的兩片載玻片，將載玻片展開放于墊有白紙的操作臺(tái)上。然后挑選15只完好的蜜蜂個(gè)體放入蠟盤（其中盛有75%的酒精溶液，盡可能地讓酒精淹沒蜜蜂的第六腹板）。將15只蜜蜂的右前翅和右后翅剝下，依次放在展開的一片載玻片上，用另一塊載玻片壓平，然后用透明膠帶固定載玻片的另一側(cè)，蜜蜂前后翅的玻片即制作完畢。

表1　測(cè)定蜜蜂的28個(gè)形態(tài)特征

將15只蜜蜂右后足從軀干分離，依次粘附在透明膠帶上，之后用透明膠片固定做成右后足的膠片。

將蜜蜂的第二、三、四背板從其腹部剝離后，依次粘附在操作臺(tái)上的透明膠帶上，然后用透明膠片固定，做成第二、三、四背板的膠片。第三腹板和第六腹板剝下后用品紅染色，漂凈后按上述方法做成第三、六腹板的玻片（如圖1）

圖1　蜜蜂玻片和膠片

1.2.4形態(tài)特征測(cè)定：測(cè)量每個(gè)特征之前，用校正尺對(duì)形態(tài)測(cè)定儀上的刻度進(jìn)行校正，將做好的玻片和膠片在形態(tài)測(cè)定儀下攝取圖像并分類存儲(chǔ)（包括前翅、后足、第三、四背板、第三、六腹板），然后提取圖像利用形態(tài)測(cè)定儀中Bee2程序1.11版本對(duì)各個(gè)特征進(jìn)行測(cè)量，且在連續(xù)變倍體顯微鏡下直接數(shù)出后翅翅鉤數(shù)，完成表1中述及的28個(gè)形態(tài)特征測(cè)定。

1.3數(shù)據(jù)分析

將由Bee2軟件生成的不同樣點(diǎn)樣本的各種形態(tài)測(cè)量數(shù)據(jù)的平均值以EXCEL格式輸出，然后轉(zhuǎn)換成SPSS格式。用SPSS軟件17.0版本對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析、因素分析和聚類分析。

2　結(jié)果與分析

2.1幼蟲人工飼養(yǎng)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，三次實(shí)驗(yàn)的平均成活率和羽化率分別為55.56%和40.63%。見表2。

圖2中人工培育和自然羽化蜜蜂的平均體重分別為80.8±4.94和86.62±8.63。

采用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)：人工羽化工蜂的體重較自然羽化工蜂的體重小且差異顯著（P＜0.05）。

2.2形態(tài)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1主成分分析：將人工培養(yǎng)蜜蜂與自然羽化工蜂形態(tài)數(shù)據(jù)進(jìn)行主成分分析（PCA），提出了三個(gè)特征值高的因素。因素1包括了數(shù)據(jù)里40.427%的變異，這些變異特征有前脛節(jié)長(zhǎng)，翅脈角D7，第三背板長(zhǎng)、寬，翅長(zhǎng)，翅脈角L13，第六腹板寬、翅脈角，跗節(jié)寬，翅脈角J16，第三腹板長(zhǎng)，翅脈角A4，翅脈角b，翅脈角B4，翅脈角，翅溝數(shù)。因素2包括了數(shù)據(jù)里26.281%的變異，這些變異特征有：第三腹板蠟鏡間距、翅脈角a﹑第三腹板上的寬。因素3包括了數(shù)據(jù)里16.882%的變異，這些變異特征有翅脈角26，跗節(jié)長(zhǎng)，第三腹板蠟鏡長(zhǎng)，翅脈角Q18，翅脈角K19，翅脈角23，第六腹板長(zhǎng)、寬。以上3個(gè)因素包括了83.590%的數(shù)據(jù)變異。其中因素1和因素3主要與體型大小及相關(guān)（見表3）。

表2　幼蟲成活率和羽化率

圖2　人工培育與自然羽化工蜂體重比較（*表示P＜0.05）

2.2.2區(qū)辨分析：

進(jìn)行區(qū)辨分析結(jié)果表明：即使6組蜜蜂在圖中不是很聚集，但人工培育的蜜蜂與自然羽化的蜜蜂并未成為兩個(gè)不同的類群。

圖3　自然與人工羽化蜜蜂的因素1-因素2分析圖

從圖3可以得出自然羽化蜜蜂因素1和因素2要比人工羽化蜜蜂的要高。由于因素1、2主要與體型相關(guān)，說(shuō)明自然羽化工蜂的個(gè)體較其人工羽化蜜蜂的大。

2.2.3聚類分析：將人工羽化和自然羽化工蜂6組數(shù)據(jù)一起進(jìn)行聚類分析（見圖4），結(jié)果表明：Label Num雖在4～6左右變動(dòng)，但沒有明顯數(shù)據(jù)顯示有2個(gè)不同的蜜蜂種群，說(shuō)明自然羽化和人工羽化的蜜蜂其形態(tài)特征并無(wú)顯著差異。

圖4　聚類分析圖

3　討論

在本研究中，人工飼養(yǎng)中蜂幼蟲的羽化率為40.63%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于陳裕文［16］等所報(bào)道4.9%的羽化率（陳裕文，2002），但與王倩等報(bào)道的89.8%的研究結(jié)果相比則低了很多。本文的培育方法與王倩他們的基本相同，羽化率差別卻如此之大，原因尚需進(jìn)一步探討。這一切均說(shuō)明人工飼養(yǎng)中蜂幼蟲的基本條件仍未明確，飼養(yǎng)技術(shù)有待提高。在進(jìn)行本研究的過程中，我們同時(shí)進(jìn)行了意大利蜜蜂（簡(jiǎn)稱意蜂）幼蟲人工飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，成蜂羽化率可達(dá)75%以上（數(shù)據(jù)未在此提供），與國(guó)外的現(xiàn)有研究水平相當(dāng)［10，15］，與西方蜜蜂幼蟲人工飼養(yǎng)相比，中蜂幼蟲羽化率相對(duì)較低，究其原因，可能與飼糧中的意蜂蜂王漿有關(guān)，它表明意蜂蜂王漿不能較好地支持中蜂幼蟲的發(fā)育，并非是最適于中蜂幼蟲發(fā)育的食物來(lái)源，陳裕文［20］等的研究也證明了這一點(diǎn)。

我們的前期研究發(fā)現(xiàn)，來(lái)自不同蜂群的幼蟲人工培育時(shí)，其幼蟲羽化率相差很大，說(shuō)明移蟲所用蜂群的種質(zhì)特性可能與人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲的羽化率有著直接的關(guān)系；此外，由于蜜蜂幼蟲在人工飼養(yǎng)過程中其蟲體要被多次移動(dòng)，移動(dòng)對(duì)幼蟲造成的機(jī)械損傷會(huì)引起幼蟲死亡，實(shí)驗(yàn)中羽化率不高可能也與移植幼蟲的操作有關(guān)。

表3　人工羽化與自然羽化蜜蜂形態(tài)分析結(jié)果

本文選擇意蜂蜂王漿作為幼蟲食物的基本成分，主要是因?yàn)橹蟹涞姆渫鯘{產(chǎn)量很低，難以收集，而意蜂的蜂王漿產(chǎn)量高且容易得到，且意蜂蜂王漿飼養(yǎng)中蜂幼蟲的成活率、羽化率等都很低。鑒于影響幼蟲存活率的因素頗多，而中蜂蜂王漿很難獲得，為了增加幼蟲飼養(yǎng)體系的可控性，建立相對(duì)簡(jiǎn)單、易行的中蜂幼蟲飼養(yǎng)技術(shù)體系，進(jìn)一步探討意蜂蜂王漿對(duì)中蜂幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育的影響，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了利用意蜂蜂王漿飼養(yǎng)中蜂幼蟲的探索。

實(shí)驗(yàn)中，添加日糧后培養(yǎng)板34℃5分鐘的預(yù)溫，能讓幼蟲適應(yīng)培養(yǎng)盤內(nèi)的環(huán)境，防止較低溫度的BLD引起的幼蟲死亡對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。

本實(shí)驗(yàn)不區(qū)分蜜蜂幼蟲將來(lái)發(fā)育的級(jí)型而采用統(tǒng)一的日糧，幼蟲的存活率不很理想。部分幼蟲排便期和羽化期的稍有延遲可能與此有關(guān)。后續(xù)研究可以設(shè)計(jì)中蜂各個(gè)級(jí)型的幼蟲食物，針對(duì)中蜂幼蟲的營(yíng)養(yǎng)需要做更深入的探索。

本論文通過對(duì)人工飼養(yǎng)與自然羽化的中華蜜蜂工蜂28個(gè)形態(tài)特征的測(cè)定分析，發(fā)現(xiàn)人工培育和自然羽化的蜜蜂其形態(tài)特征無(wú)顯著差異，證明人工培育的蜜蜂可用于相關(guān)蜜蜂科學(xué)的研究。

致謝

本研究中蜜蜂形態(tài)測(cè)定得到云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院東方蜜蜂研究所譚墾教授和曲玉鳳的大力支持和幫助，特表謝忱。

［1］Tamar Katzav-Gozansky，Victoria Soroker，Josef Kamer et al.Ultrastructural and chemical characterization of egg surface of honeybee worker and queen-laid eggs［J］.Chemoecology，2003，13：129-134.

［2］劉光楠，曾志將.人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲技術(shù)的進(jìn)展［J］.蜜蜂雜志，2010，29（8）：32-34.

［3］鄭火青，胡福良.蜜蜂--新興的模式生物［J］.昆蟲學(xué)報(bào)，2009，52（2）：210-215.

［4］Rhein W.ber die Entstehung des weiblichen Dimorphismus im Bienenstaate［J］.Developmentgenes and Evolution，1933，129（4）：601-665.

［5］Weaver N，1955.Rearing of honeybee larvae on royal jelly in the laboratory.Science，121（3145）：509-510.

［6］Jay SC.Starvation studies of larval honey bees［J］.Canadian Journal of Zoology，1964，42（3）：455-462.

［7］王倩.室內(nèi)人工飼養(yǎng)中華蜜蜂技術(shù)及卵顯微注射ECFP基因的研究［D］.濟(jì)南：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.5-6

［8］Winston ML.The biology of the honey bee［M］.London：Harvard University Press.1991，28-41.

［9］Brouwers EVM.Glucose/fructose ratio in the food of honeybee larvae during cast differentiation［J］.Journal of Apicultural Research，1984，23：94-101.

［10］Vandenberg JD and Shimanuki H.Technique for rearing worker honeybees in the laboratory［J］.Journal of Apicultural Research，1987，26：90-97.

［11］Asencot M，Lensky Y.The effect of soluble sugars in stored royal jelly on the differentiation offemale honeybee（Apis mellifera.）larvae to queens［J］.Insect Biochem.1988，18（2）：127-133.

［12］Czoppelt C，Rembold H.Effect of parathion on honeybee larvae reared invitro［J］.Apiodologie，1988，61（5）：95-100.

［13］Peng CYS，Mussen E，F(xiàn)ong A，et al.Effect of chlortetraeycline of honeybee worker reared in vitro［J］.Invertebr Pathol，1992，60：127-133.

［14］AmdamgV，Hagena A，Omholta SW.A new method for rearinggenetically manipulatedHoneybee workers［J］.Anne Lene T.O. AASEa，INRA/DIB-AGIB/EDP Sciences，Apidologie，2005，36：293-299.

［15］Aupinel P，F(xiàn)ortini D，Dufour H，et al.Improvement of artficial feeding in a standard in vitro method for rearing Apis mellifera larvae［J］.Bulletin of Insectology，2005，58（2）：107-111

［16］陳裕文，王重雄，何鎧光.以人工飼育蜜蜂幼蟲法評(píng)估羥四環(huán)素的藥效［J］.臺(tái)灣昆蟲，2002，22：53-64.

［17］王倩，孫亮先，肖培新，等.室內(nèi)人工培育中華蜜蜂幼蟲技術(shù)研究［J］.山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，（11）：113-116.

［18］Ruttner，F(xiàn).Biogeography and Taxonomy of Honeybees［M］. Springer Verlag：Berlin，Heidelberg.New York，1988.282pp.

［19］譚墾，張炫，和紹禹，等.云南東方蜜蜂的形態(tài)特征數(shù)值分類研究［J］.中國(guó)養(yǎng)蜂，2003，54（3）：4-6.

［20］陳裕文，江敬皓，何鎧光.人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲的技術(shù)與應(yīng)用［A］.海峽兩岸蜜蜂生物學(xué)研討會(huì)［C］.臺(tái)北：2000.16-33.

In Vitro Larval Rearing and the Morphological Characteristic Analysis of Honeybees（Apis cerana cerana）

Yang Minghua1，2，He Xingjiang2，Li Yongneng3，Liu Hongyuan4，Kuan Haiou4，He Shaoyu4，Li Yahui4
（1 Yunnan Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China；2 College of Animal Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China；3 Admission and Employment Office，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China；4 College of Food Science and Technology，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China）

Owing to the unique characteristics，honey bees are widely used in various scientific fields.The accomplishment of honey beegenome sequence speeds up the process of honey bees becoming a model organism.Rearing honey bee larvae in the laboratory is a basis and aguarantee to make the honey bee become a model insect.Many studies on bee larval rearing in the laboratory have been carried out in Apis mellifera while similar study in Apis cerana is more difficult than that in Apis mellifera and the rearing results various significantly among different laboratories as different environment and nutrition exist in these two species.In addition，the analysis of morphological characteristics for adult honey bees reared in vitro has not been reported yet.Therefore，performing this kind of study will facilitate theestablishing in vitro larval rearing technique for Apis cerana，in addition，it has important significance in probing larval nutrition requirement，growth，development and morphogenesis of Apis cerana.In the present study，1 to 2-day-old larvae of Apis cerana cerana were removed from worker cells in a comb andgrafted to cell culture plates containing artificial diets，where they were maintained in the laboratory inside an incubator.When larvae emerged to adult bees，the workers，together with those reared in the hive（i.e.naturally developed worker bees）were weighed and characterized for morphological features.The results indicated：1.Under in vitro rearing conditions，the larvae of Apis cerana cerana could normally develop and emerge to adult bees，the larval survival and emergence rates were 55.56% and 40.63%，respectively.2.Relative analysis（i.e.Principal Component Analysis，Discriminant Analysis，Cluster Analysis）showed that there is no morphological difference between in vitro reared bees and the hive reared bees. However，the weight of newly-emerged worker reared in incubator was significantly lighter than that of in the hive.This thesis elucidates fundamental requirements for Apis cerana cerana larvae rearing in the laboratory，which lays a solid foundation for the establishing of in vitro larval rearing technique for Apis cerana.

Apis cerana cerana；larvae；in vitro rearing；morphological characteristics

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（蜜蜂）產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金資助（CARS-45-kxj14）

*為本研究貢獻(xiàn)等同，并列第一作者。

楊明華（1967-），女，云南人，實(shí)驗(yàn)師，碩士，從事動(dòng)物分子營(yíng)養(yǎng)與代謝調(diào)控方向研究，E-mail：yangmh85@hotmail.com；賀興江（1988-），男，云南人，在讀碩士，從事蜜蜂發(fā)育生物學(xué)研究。

和紹禹（1952-），男，教授，博士生導(dǎo)師，從事蜜蜂資源與授粉研究，E-mail：kmhsy@163.com；李亞輝（1967-），男，教授，博士，從事動(dòng)物生殖與發(fā)育生物學(xué)研究，E-mail：liyh85@aliyun.com。