張會(huì)麗，李陽(yáng)杰，李書(shū)平

（鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院，河南鄭州451150）

氨溴索亞微乳理化性質(zhì)研究

張會(huì)麗，李陽(yáng)杰，李書(shū)平

（鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院，河南鄭州451150）

目的探討氨溴索亞微乳的理化性質(zhì)。方法在氨溴索亞微乳處方和制備工藝的基礎(chǔ)上，對(duì)乳劑類(lèi)型、粒徑、pH、黏度等理化性質(zhì)進(jìn)行考察。結(jié)果制備的乳劑外觀為乳白色，3批樣品的粒徑分別為169.9，170.0，166.8 nm，平均pH為8.12，8.19，8.23，25℃時(shí)黏度為（1.9±0.1）mPa·s。結(jié)論氨溴索亞微乳注射劑的理化性質(zhì)穩(wěn)定，符合靜脈注射要求。

氨溴索；亞微乳；性質(zhì)

鹽酸氨溴索是鹽酸溴己新在人體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，有促進(jìn)黏痰排除及溶解分泌物的特性，促排痰作用比溴己新強(qiáng)，可預(yù)防新生兒呼吸窘迫綜合征（NRDS）的發(fā)生［2］，輔助治療小兒支氣管肺炎［1-3］。吸入鹽酸氨溴索、沙丁胺醇、N-乙酰半胱氨酸，可通過(guò)有效促進(jìn)結(jié)核病患者排痰來(lái)增加抗酸桿菌（AFB）涂片的陽(yáng)性診斷率［4］。國(guó)內(nèi)目前上市的鹽酸氨溴索口服制劑起效慢，緩釋膠囊對(duì)于不能口服給藥的患者無(wú)法使用，注射劑又需反復(fù)給藥。注射用亞微乳是主要以植物油為油相、以磷脂為乳化劑的O/W型乳劑，屬于熱力學(xué)不穩(wěn)定體系［5］。其作為脂溶性藥物的良好載體，不僅具有增加藥物穩(wěn)定性、減輕不良反應(yīng)、靶向釋藥作用、易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化等特點(diǎn)，還能提供適當(dāng)?shù)哪芰亢捅匦柚舅幔?］，在體內(nèi)迅速分布，能減緩機(jī)體對(duì)藥物的消除［7］，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床。筆者以鹽酸氨溴索為原料藥制備脂溶性氨溴索，再制備水包油的乳劑，作為研究平臺(tái)考察了脂溶性藥物制成O/W亞乳劑后的緩釋效果，并對(duì)其理化性質(zhì)及初步穩(wěn)定性進(jìn)行考察。

1　儀器與試藥

Mettler Toledo AT460型電子天平，Mettler Toledo AG245型電子天平（瑞士Mettler-Toledo儀器公司）；Professional Meter PP-50型電位與pH計(jì)（德國(guó)Sartorius公司）；NDJ-1型旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)（上海天平儀器廠）；BI-9000AT型光子相關(guān)光譜測(cè)定儀（美國(guó)Brookhaven公司）；DDS307型電導(dǎo)率儀（上海雷磁儀器廠）；LC-10AT型高效液相色譜儀（日本島津公司，Anastar工作站）；Diamonsil?C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm，重慶迪馬公司）。鹽酸氨溴索（北京太洋藥業(yè)有限公司）；二甲基黃染色劑（天津市染化四廠）；二甲酚橙染色劑（天津市化學(xué)試劑一廠）；正丁醇（天津興通精細(xì)化工有限公司）；注射用大豆油（浙江龍游聚興糧油醫(yī)藥化工有限公司）；其余試劑均為分析純或色譜純。

2　方法與結(jié)果

2.1亞微乳注射劑制備

氨溴索加入油相，70℃保溫；甘油、乳化劑加入水中，70℃保溫；水相和油相在70℃混合乳化，19 000 r/min均質(zhì)離心5min，將初乳在儀表壓力40，60，80 psi下通過(guò)微射流儀2次，在氮?dú)饬飨鹿喾庥?0mL安瓿，用恒溫水浴振蕩器進(jìn)行滅菌。

2.2氨溴索含量測(cè)定

2.2.1色譜條件

色譜柱：Diamonsil?C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)：248 nm；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；流動(dòng)相：甲醇；進(jìn)樣量：20μL。

2.2.2方法學(xué)考察

專(zhuān)屬性試驗(yàn)：取空白乳劑、供試品溶液和對(duì)照品溶液分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，考察其他成分是否干擾測(cè)定。由圖1可見(jiàn)，氨溴索和乳劑中其他成分分離較好，表明方法專(zhuān)屬性好。

圖1　高效液相色譜圖

線(xiàn)性關(guān)系考察：取氨溴索適量，精密稱(chēng)定，用流動(dòng)相溶解成質(zhì)量濃度為1 g/L的貯備液。精密量取貯備液，用流動(dòng)相稀釋成質(zhì)量濃度為5，10，20，30，50，80，100μg/mL，進(jìn)樣20μL測(cè)定。以氨溴索的峰面積（A）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得回歸方程A=56991C+249697，r=0.9996（n=7）。結(jié)果表明，氨溴索質(zhì)量濃度在5～100μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線(xiàn)性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：線(xiàn)性關(guān)系考察項(xiàng)下質(zhì)量濃度為30μg/mL的氨溴索溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果的RSD為0.41%（n=6），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：精密量取同一批樣品6份，每份1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇適量超聲破乳，定容；精密量取稀釋液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容；取上述樣品各20μL進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算氨溴索含量。結(jié)果平均含量為2.47 g/L，RSD為0.60%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取供試品，用流動(dòng)相配制成質(zhì)量濃度為10μg/mL的溶液，測(cè)定其8 h內(nèi)的穩(wěn)定性。結(jié)果的RSD為0.44%，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn)：分別稱(chēng)取約20，25，30mg氨溴索各3份，置10mL容量瓶中，加入適量空白乳劑，超聲處理。待溶解完全后，放冷至室溫，加空白乳劑定容至刻度，得加樣的乳液。依法制配供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　氨溴索加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）

2.2.3樣品含量測(cè)定

精密量取已滅菌自制乳劑（批號(hào)分別為20130515，20130516，20130517）各1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇適量超聲破乳，定容；精密量取稀釋液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容，得供試品溶液；另精密稱(chēng)取氨溴索2.5mg各3份，置10mL容量瓶中，加甲醇適量超聲破乳，定容；精密量取稀釋液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇適量溶解，定容，得對(duì)照品溶液。取上述溶液各20μL進(jìn)樣，按外標(biāo)法計(jì)算氨溴索含量。結(jié)果3批樣品的含量分別為2.55，2.48，2.46 g/L。

2.3理化性質(zhì)考察

乳劑類(lèi)型鑒別：染色法是利用油性染料二甲基黃和水性染料二甲酚橙在乳液中黃色或橙色擴(kuò)散快慢來(lái)判斷乳劑類(lèi)型，若黃色擴(kuò)散快于橙色則為W/O型乳劑，反之為O/W型。結(jié)果，乳劑橙色擴(kuò)散快于黃色，乳劑為O/W型。在乳劑中分別滴加2滴水和2滴大豆油，觀察水和大豆油的分散快慢情況。若大豆油擴(kuò)散快于水則為W/O型乳劑，反之為O/W型。結(jié)果乳劑水?dāng)U散快于大豆油，乳劑為O/W型。

pH：注射劑的pH要求與血液相近，一般為4～9，對(duì)于注射用乳劑，較適宜的pH為6～7；乳劑由于在貯存過(guò)程中，甘油酯和磷脂的水解會(huì)導(dǎo)致乳劑pH的降低，故弱堿性的pH較適宜［8］。在初乳通過(guò)微射流儀前用0.2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH，用Professional Meter PP-50酸度計(jì)測(cè)定，控制其pH約為8.5，滅菌后再次測(cè)定。取已滅菌自制乳劑（批號(hào)分別為20130515，20130516，20130517）各10 mL，用Professional Meter PP-50酸度計(jì)測(cè)定，3批樣品pH分別為8.12，8.19，8.23，符合要求。

流變學(xué)性質(zhì)：乳劑粒徑大小及分布、分散相的用量等均影響到乳劑的黏度，作為注射乳劑應(yīng)具有的良好的流動(dòng)性，因而研究乳劑制劑的流變學(xué)性質(zhì)對(duì)制劑的質(zhì)量、貯存和穩(wěn)定性等具有重要意義。采用NDJ-1型旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)，在25℃條件下，將待測(cè)乳劑置于直徑大于7 cm的燒杯中，將選定的轉(zhuǎn)子浸入溶液中，至液面標(biāo)志與液面相平，開(kāi)啟黏度計(jì)約60 s，待指針?lè)€(wěn)定后，測(cè)得黏度η。用旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)測(cè)定空白乳劑和載藥乳劑在25℃時(shí)的黏度。分散相的相體積分?jǐn)?shù)、分散介質(zhì)的黏度、乳化劑的性質(zhì)和用量、乳滴的大小和粒徑分布等對(duì)乳劑的黏度都會(huì)發(fā)生影響。用同一轉(zhuǎn)子，測(cè)定25℃不同轉(zhuǎn)速下乳劑的黏度，得到流變學(xué)曲線(xiàn)。見(jiàn)圖2?？梢?jiàn)，黏度不隨轉(zhuǎn)速的改變而變化，該乳劑為牛頓流體。結(jié)果3批樣品的黏度為（1.9±0.1）mPa·s。

圖2　不同轉(zhuǎn)速下的黏度曲線(xiàn)

粒徑：乳化劑的種類(lèi)及其用量是影響乳滴粒徑的重要因素［9］，乳劑的穩(wěn)定性與粒徑及其分布有相關(guān)性，粒徑越小、粒徑分布越窄，乳劑越穩(wěn)定［10］。取自制乳劑（批號(hào)分別為20130515，20130516，20130517）各2.5 mL，用雙蒸水稀釋至澄清透明，以BI-9000AT型光子相關(guān)光譜測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果3批樣品粒徑分別為169.9，170.0，166.8 nm。

3　討論

乳劑的類(lèi)型可用稀釋法進(jìn)行鑒別，O/W型乳劑可被水稀釋?zhuān)琖/O型乳劑可以被油稀釋。也可用染色法進(jìn)行鑒別，O/W型乳劑用水溶性染料染色，在顯微鏡下可觀察到外相被染色，用油溶性染料染色，在顯微鏡下可觀察到內(nèi)相被染色；W/O型乳劑則相反。用染色法、稀釋法分別對(duì)乳劑進(jìn)行鑒別，結(jié)果均為O/W型乳劑。

乳劑的穩(wěn)定性與粒徑及其分布有關(guān)，粒徑越小、粒徑分布越窄，乳劑越穩(wěn)定。由粒徑測(cè)定結(jié)果可見(jiàn)，所制備的乳劑為亞微乳，粒徑相對(duì)較集中，所制備的乳劑較穩(wěn)定。

含量測(cè)定時(shí)，根據(jù)藥物和磷脂的溶解性，選用甲醇，既能溶解氨溴索又能溶解大豆磷脂；乳劑用甲醇稀釋50倍時(shí)不澄清，稀釋100倍時(shí)，呈澄明溶液，故將乳劑用甲醇稀釋100倍后測(cè)定含量。

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Physicochem ical Properties of Am broxol Subm icron Em ulsion

Zhang Huili，Li Yangjie，Li Shuping
（Zhengzhou University of Industrial Technology，Zhengzhou，Henan，China 451150）

Objective To investigate the physicochemical properties of ambroxol submicron emulsion.M ethods On the basis of the formulation and the preparing technique of ambroxol submicron emulsion，the emulsion type，particle size，pH，viscosity were investigated. Results The submicron emulsion was milkiness，The particle sizes of the prepared ambroxol submicron emulsion in the 3 batches were 169.9，170.0，166.8 nm，respectively，while the average pH were 8.12，8.19，8.23，respectively，and the viscosity was（1.9±0.1）mPa·s at 25℃. Conclusion The physicochemical properties of ambroxol submicron emulsion is stable and can meet the standards of injection preparation.

ambroxol；submicron emulsion；property

R974+.1；TQ460.7+2

A

1006-4931（2015）24-0066-03

張會(huì)麗（1972-），女，河南新鄭人，碩士研究生，講師，主管藥師，研究方向?yàn)樗幬镄聞┬?，（電子信箱?5838202638@139.com。

2014-09-10；

2015-09-28）