許長青，郭吉吉，劉丹，姜瑩

（1.武警北京市總隊(duì)第二醫(yī)院，北京100035；2.武警北京市總隊(duì)醫(yī)院，北京100027）

過氧化氫銀離子消毒液滅菌作用研究

許長青1，郭吉吉1，劉丹1，姜瑩2

（1.武警北京市總隊(duì)第二醫(yī)院，北京100035；2.武警北京市總隊(duì)醫(yī)院，北京100027）

目的探討過氧化氫銀離子消毒液的滅菌作用。方法采用懸液定量殺菌試驗(yàn)及現(xiàn)場(chǎng)消毒試驗(yàn)方法對(duì)過氧化氫銀離子消毒液的殺菌效果及穩(wěn)定性進(jìn)行考察。結(jié)果含30 g/L過氧化氫和含259mg/L銀離子的消毒劑，對(duì)大腸桿菌和銅綠假單胞菌作用20min時(shí)殺菌對(duì)數(shù)值>5.00，對(duì)金黃色葡萄球菌作用30min時(shí)殺菌對(duì)數(shù)值>5.00；按15mL/m3用量向密閉室內(nèi)噴霧消毒30min，室內(nèi)空氣中自然菌的消亡率大于90%。進(jìn)行擦拭消毒10min，對(duì)染于桌面上的大腸桿菌降低對(duì)數(shù)值為4.27。結(jié)論過氧化氫銀離子消毒液對(duì)細(xì)菌有較強(qiáng)的殺滅作用，性能穩(wěn)定。

過氧化氫；銀離子；消毒劑；殺菌作用；懸液定量試驗(yàn)

過氧化氫屬過氧化物類，是一種低毒、易分解、無殘留的高效消毒劑，具有良好的滅菌效果［1］。過氧化氫銀離子消毒液是過氧化氫與銀離子組成的液體制劑，無色無味，其原液中過氧化氫含量為30 g/L，銀離子含量為259mg/L，原液pH為1.75［2］。目前，關(guān)于含過氧化氫的各種復(fù)方消毒劑滅菌作用的研究較多，但針對(duì)過氧化氫銀離子消毒液的滅菌作用研究較少。為了解其消毒性能，在實(shí)驗(yàn)室對(duì)其殺菌效果和穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　材料、儀器與方法

1.1材料與儀器

試驗(yàn)菌株金黃色葡萄球菌（ATCC6538）、大腸桿菌（8099）由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院消毒檢測(cè)中心提供；銅綠假單胞菌（ATCC15442）、白色葡萄球菌（8032）由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供。銀單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心，GBW 08610）；硝酸（北京化學(xué)試劑研究所，MOS級(jí)）。Z-2000型石墨爐原子吸收分光光度計(jì)及其銀空心陰極燈（日本日立公司）。

1.2菌懸液制備

取上述標(biāo)準(zhǔn)菌株18～24 h新鮮斜面培養(yǎng)物，用含1 000mg/L胰蛋白胨生理鹽水溶液（TPS）稀釋，配制成含菌量在1×108～5× 108cfu/m3的試驗(yàn)菌懸液，備用。

1.3中和劑鑒定試驗(yàn)

在（20±1）℃條件下進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)平行的6組，即第1組：消毒劑+菌片；第2組：（消毒劑+菌片）+中和劑組；第3組：（消毒劑+中和劑）+菌片；第4組：中和劑+菌片；第5組：正常菌對(duì)照；第6組：陰性對(duì)照。試驗(yàn)菌金黃色葡萄球菌，按懸液定量殺菌試驗(yàn)對(duì)過氧化氫銀離子消毒液原液進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果，第6組不長菌，第3，4，5組組間菌數(shù)相差不超過15%，第1組不長菌或菌數(shù)遠(yuǎn)少于第2組，表明所選中和劑及其濃度適宜。試驗(yàn)重復(fù)3次。

1.4懸液定量殺菌試驗(yàn)

將該消毒液用無菌硬水配制成試驗(yàn)濃度為1.25倍的稀釋液（陽性對(duì)照為TPS），置（20±1）℃水浴中5 min。在無菌試管內(nèi)加入0.5mL試驗(yàn)菌懸液與0.5mL有機(jī)干擾物（30 g/L牛血清白蛋白）混勻，置（20±1）℃水浴中5min。上述試管內(nèi)加入稀釋后的消毒液4.0mL，迅速混勻，作用至設(shè)定時(shí)間，取0.5mL菌藥混合液加入到含4.5mL中和劑的試管中，混勻，中和10min，振蕩脫洗，然后對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)，計(jì)算殺滅對(duì)數(shù)值。所有試驗(yàn)至少重復(fù)3次。

1.5現(xiàn)場(chǎng)消毒試驗(yàn)

空氣消毒試驗(yàn)：在20m3密閉房間內(nèi)，用FA-1型撞擊式采樣器于房間中央距地面1m處進(jìn)行消毒前采樣5min，所得樣品為陽性對(duì)照。然后保持室溫在25～30℃，相對(duì)濕度在60%～70%，用強(qiáng)力超低容量噴霧器按15mL/m3用量（含過氧化氫30 g/L）噴消毒液，關(guān)閉門窗。30min后，按上述方法進(jìn)行消毒后采樣。將采樣的培養(yǎng)基條置37℃培養(yǎng)48 h，對(duì)菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算自然菌消亡率。

器物表面現(xiàn)場(chǎng)消毒試驗(yàn)：選擇木質(zhì)油漆材料表面作為試驗(yàn)對(duì)象，確定染菌面積大小為5.0 cm×5.0 cm，取相鄰位置4塊。試驗(yàn)區(qū)用棉拭涂抹法進(jìn)行消毒前采樣，用含30 g/L的過氧化氫銀離子消毒液對(duì)試驗(yàn)區(qū)進(jìn)行擦拭消毒，對(duì)照區(qū)以TPS為對(duì)照，保持消毒區(qū)域濕潤，10min后進(jìn)行消毒后采樣。采樣后將采樣棉拭頭置含中和劑的試管內(nèi)。同法對(duì)未經(jīng)消毒處理的面積進(jìn)行采樣，作為陽性對(duì)照。然后，對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照組進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)，計(jì)算消毒后細(xì)菌減少對(duì)數(shù)值。重復(fù)30個(gè)樣本。

1.6穩(wěn)定性試驗(yàn)

將過氧化氫銀離子消毒液配制成30 g/L過氧化氫濃度后，置（54±1）℃恒溫箱中保存14，21 d，檢測(cè)貯存前后過氧化氫含量，計(jì)算其下降率。

2　結(jié)果

2.1中和劑鑒定結(jié)果

結(jié)果表明，以含10 g/L硫代硫酸鈉、5 g/L卵磷脂、30 g/L吐溫-80磷酸鹽緩沖液作為中和劑，可有效中和懸液殺菌試驗(yàn)中消毒劑的殘余作用，中和劑及其產(chǎn)物對(duì)試驗(yàn)菌和培養(yǎng)基無不良影響。

2.2懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，以含過氧化氫30 g/L的過氧化氫銀離子消毒液，作用20min時(shí)對(duì)大腸桿菌和銅綠假單胞菌的殺菌對(duì)數(shù)值均大于5.00，作用30min時(shí)對(duì)金黃色葡萄球菌的殺菌對(duì)數(shù)值大于5.00。見表1。

2.3現(xiàn)場(chǎng)消毒試驗(yàn)結(jié)果

現(xiàn)場(chǎng)空氣消毒試驗(yàn)結(jié)果：室溫25～30℃、相對(duì)濕度60%～70%下，向20m3密閉房間內(nèi)噴灑240mL含過氧化氫30 g/L的過氧化氫銀離子消毒液30min后，房間內(nèi)空氣中自然菌平均消亡率見表2。

表1　過氧化氫銀離子消毒液殺菌試驗(yàn)結(jié)果

表2　過氧化氫銀離子消毒液現(xiàn)場(chǎng)空氣消毒試驗(yàn)結(jié)果

器物消毒試驗(yàn)結(jié)果：用含量為30 g/L的過氧化氫銀離子消毒液對(duì)桌面進(jìn)行擦拭消毒，作用時(shí)間為10min，對(duì)大腸桿菌的殺菌對(duì)數(shù)值為4.27。

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

本研究結(jié)果顯示，過氧化氫含量為30 g/L的過氧化氫銀離子消毒液置（54±1）℃恒溫箱中保存14 d，過氧化氫平均下降率為3.68%，銀離子下降率為3.27%；保存21 d后，過氧化氫下降率為7.35%，銀離子下降率為6.50%。

3　討論

目前，醫(yī)院常用的化學(xué)滅菌劑為20 g/L的戊二醛，其殺菌能力較強(qiáng)，腐蝕性較小，但對(duì)人體有害［3］。過氧化氫殺菌能力強(qiáng)、無毒，且為光譜殺菌劑，對(duì)環(huán)境污染小，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療行業(yè)的消毒滅菌中。但單純的過氧化氫液穩(wěn)定性較差，遇空氣易產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，且腐蝕性較強(qiáng)，經(jīng)水稀釋后性質(zhì)更不穩(wěn)定［4］。研究顯示，運(yùn)用單純的過氧化氫殺滅細(xì)菌芽孢需要濃度為100 g/L的過氧化氫持續(xù)作用數(shù)小時(shí)才能完成［5］。故如何在安全范圍內(nèi)提高其消毒作用，減輕副作用，已成為研究的熱點(diǎn)。

銀離子對(duì)過氧化氫具有增效作用，且性質(zhì)穩(wěn)定，受有機(jī)物影響較小，無毒性殘留物［6］。關(guān)于含銀離子的過氧化氫消毒劑研究已有較多開展，均顯示其能顯著增強(qiáng)過氧化氫的消毒作用，且安全性高［7］。本研究選用的過氧化氫銀離子消毒液中過氧化氫含量為30 g/L，銀離子為259 mg/L。本研究中懸液定量殺菌試驗(yàn)證實(shí)，該消毒液作用20 min后即對(duì)大腸桿菌和銅綠假單胞菌有明顯殺菌作用，作用30 min后對(duì)金黃色葡萄球菌有明顯作用，提示該消毒液可在30 min起到明顯殺菌作用。此外，現(xiàn)場(chǎng)定性消毒試驗(yàn)均證實(shí)該消毒液可在30 min內(nèi)有效殺滅空氣中自然菌的作用，作用10 min內(nèi)即可有效殺滅器物表面的細(xì)菌，作用顯著，且消毒液放置14 d和28 d后消毒液性質(zhì)穩(wěn)定，殺菌效果未下降。

綜上所述，過氧化氫銀離子消毒液有顯著的滅菌作用，且無明顯毒副作用，具有良好的消毒性能。

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［2］De Giqlio O，CorettiC，Lovero G，etal.Pilot study on the antibacterial activity of hydrogen peroxide and silver ions in the hospital environment［J］. Ann Iq，2014，26（2）：181-185.

［3］Cadnum JL，Mana TS，Jencson A，etal.Effectiveness of a hydrogen peroxide spray for decontamination of soft surfaces in hospitals［J］.Am J Infect Control，2015，62（15）：767-770.

［4］邢于政.過氧化氫溶液穩(wěn)定劑選擇和提高澄明度的方法［J］.中國藥業(yè)，2008，17（6）：39.

［5］楊華明，易濱.現(xiàn)代醫(yī)院消毒學(xué)［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2002：86-87.

［7］孫巍，許欣，裴驍方，等.銀離子與過氧化氫協(xié)同殺菌作用的研究［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2006，33（2）：140-142.

Study on Sterilization of Hydrogen Peroxide Silver Ion Disinfection Solution

Xu Changqing1，Guo Zhe1，Liu Dan1，Jiang Ying2
（1.The Second Hospital of Beijing Armed Police Corps，Beijing，China 100035；2.Beijing Armed Police Corps Hospital，Beijing，China 100027）

Objective To understand the sterilization effect of hydrogen peroxide silver ion disinfection solution.M ethods Suspension quantitative germicidal test and field disinfection test method were used to observe the germicidal efficacy and stability of hydrogen peroxide silver ion disinfection solution.Results The disinfection solution containing 30 g/L hydrogen peroxide and 259 mg/L silver ion with a 20 min contact time could kill completely the spores of the Escherichia coli and pseudomonas aeruginosa by a logarithm of> 5.00，with a 30 min contact time could kill completely the staphylococcus aureus by a logarithm of>5.00.Spraying disinfection of closed room for 30 min using an aerosol sprayer and a dose of 15 mL/m3resulted in>90%eliminating rate of natural bacteria in indoor air.Wiping disinfection with the disinfectant containing hydrogen peroxide for 10 min reduced Escherichia coil table surface by 4.27. Conclusion Hydrogen peroxide silver ion disinfection solution has relatively strong killing effecton the bacteria，and its performances are stable.

hydrogen peroxide；silver ion；disinfectant；germicidal effect；suspension quantitative test

R969.4；R979.1

A

1006-4931（2015）24-0064-03

許長青，男，碩士研究生，主管藥師，研究方向?yàn)獒t(yī)院藥學(xué)，（電子信箱）xuchangqing1973@sohu.com；姜瑩，女，大學(xué)本科，研究方向?yàn)樵簝?nèi)感染，本文通訊作者，（電子信箱）wjyyyb@ 163.com。

2015-07-10）