高紅，劉俊敏，王莉萍

（重慶科瑞制藥＜集團(tuán)＞有限公司，重慶400060）

注射用鹽酸頭孢吡肟與2種輸液配伍中5-羥甲基糠醛的穩(wěn)定性考察

高紅，劉俊敏，王莉萍

（重慶科瑞制藥＜集團(tuán)＞有限公司，重慶400060）

目的采用高效液相色譜（HPLC）法考察注射用鹽酸頭孢吡肟與2種常用輸液配伍中5-羥甲基糠醛（5-HMF）的穩(wěn)定性。方法建立測(cè)定注射用鹽酸頭孢吡肟在2種輸液的配伍穩(wěn)定性中的5-HMF的方法，分析混合液在8h中5-HMF的穩(wěn)定性。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動(dòng)相為甲醇-水（10∶90），流速為1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為284nm。結(jié)果5-HMF質(zhì)量濃度在0.5125～20.50μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系；與10%葡萄糖注射液配伍平均回收率為99.94%，RSD為1.23%；與5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍平均回收率為99.68%，RSD為1.51%。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可作為注射用鹽酸頭孢吡肟與2種常用輸液配伍中5-HMF的質(zhì)量控制方法。

高效液相色譜法；注射用鹽酸頭孢吡肟；配伍；穩(wěn)定性；5-羥甲基糠醛

注射用鹽酸頭孢吡肟為廣譜第4代頭孢菌素，對(duì)革蘭陽性菌和革蘭陰性菌均有較強(qiáng)的抗菌活性。葡萄糖等單糖化合物在高溫或酸性等條件下脫水產(chǎn)生5-羥甲基糠醛（5-HMF），易分解或發(fā)生聚合反應(yīng)，聚合物導(dǎo)致葡萄糖注射液變色，顏色深淺與5-HMF量成正比，可反映產(chǎn)品中葡萄糖的分解程度。5-HMF對(duì)人體橫紋肌和內(nèi)臟有損害［1-3］。筆者以5-HMF為指標(biāo)，參考文獻(xiàn)［4-8］，建立了測(cè)定注射用鹽酸頭孢吡肟在2種輸液中5-HMF含量的方法，并對(duì)配伍液中5-HMF的穩(wěn)定性進(jìn)行了考察［9］，為臨床用藥提供參考。

1 儀器與試藥

Agilent 1260型高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司）。注射用鹽酸頭孢吡肟（重慶科瑞制藥＜集團(tuán)＞有限公司，批號(hào)為20100702）；5-HMF對(duì)照品（美國(guó)Sigma-Aldrich公司，批號(hào)為BCBF6127V）；甲醇（色譜純，美國(guó)Tedia公司）；配伍溶液（太極集團(tuán)西南藥業(yè)股份有限公司）為10%葡萄糖注射液（批號(hào)為20110325）、5%葡萄糖氯化鈉注射液（批號(hào)為20120312）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液制備

稱取5-HMF約10mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取5mL，置100mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。取裝量差異項(xiàng)下的樣品內(nèi)容物，混合均勻，稱取約740 mg，精密稱定，置10 mL容量瓶中，加配伍溶液溶解并稀釋成每1 mL中約含頭孢吡肟40mg的溶液，作為供試品溶液。色譜圖見圖1。

2.2 色譜條件

色譜柱：Platisil ODS柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（10∶90）；檢測(cè)波長(zhǎng)：284 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10μL。取對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，其RSD≤2.0%。

圖1 高效液相色譜圖

2.3 方法學(xué)考察

檢測(cè)波長(zhǎng)選擇：精密稱取5-HMF適量，加入流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，在200～400 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。由其紫外吸收光譜可見，在284 nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰，與2010年版《中國(guó)藥典（二部）》中葡萄糖注射液中5-HMF的測(cè)定方法［1］的檢測(cè)波長(zhǎng)一致，故選擇284 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

定量限及檢測(cè)限確定：取5-HMF對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相稀釋成系列質(zhì)量濃度的溶液，依法測(cè)定。結(jié)果檢測(cè)限（S/N= 2）為0.10 ng，定量限（S/N=10）為0.53 ng。

線性關(guān)系考察：稱取5-HMF約10.25 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，再分別精密量取0.5，1.0，3.0，5.0，10.0，20.0 mL，置100mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋成質(zhì)量濃度為0.512 5，1.025，3.075，5.125，10.25，20.50μg/mL的對(duì)照品溶液，分別精密量取10μL，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖和峰面積，經(jīng)線性回歸，得回歸方程A=73.736C+0.2531，r=0.9999（n=6）。結(jié)果表明，5-HMF質(zhì)量濃度在0.5125～20.50μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn)：取同一5-HMF對(duì)照品溶液，依法重復(fù)進(jìn)樣6次。結(jié)果的RSD為0.18%（n=6），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：分別精密稱取同一批樣品6份，按2.1項(xiàng)下方法依法制備供試品溶液并測(cè)定。在2種配伍溶液中6次測(cè)定結(jié)果均一致，在10%葡萄糖注射液、5%葡萄糖氯化鈉注射液中5-HMF量的RSD分別為0.82%和1.53%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：取5-HMF對(duì)照品約10 mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，再分別精密量取0.8，1.0，1.2mL各3份，分別置9個(gè)20mL容量瓶中，于每個(gè)量瓶中加入注射用鹽酸頭孢吡肟樣品約1.5 g，加10%葡萄糖注射液或5%葡萄糖氯化鈉注射液溶解并稀釋至刻度，搖勻，按擬訂色譜條件測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算回收率。結(jié)果注射用鹽酸頭孢吡肟與10%葡萄糖注射液配伍時(shí)平均回收率為99.94%，RSD為1.23%（n=9）；與5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍時(shí)平均回收率為99.68%，RSD為1.51%（n=9）。

2.4 配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品適量，依法配制，各溶液均于室溫下放置，分別于0，15，30，45，60，120，240，360，480，510min時(shí)考察5-HMF峰面積及純度因子。結(jié)果表明，頭孢吡肟與10%葡萄糖注射液配伍，在8 h內(nèi)基本穩(wěn)定；頭孢吡肟與5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍，在2 h內(nèi)基本穩(wěn)定。見表1。

表1 頭孢吡肟配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果（n=10）

3 討論

由于頭孢吡肟在284 nm波長(zhǎng)處對(duì)紫外測(cè)定有干擾，故采用高效液相色譜（HPLC）法對(duì)5-HMF進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，該方法能有效分離5-HMF峰與其他色譜峰，方法簡(jiǎn)便，靈敏度高，準(zhǔn)確性好。

試驗(yàn)過程中比較了甲醇-水（15∶85）、甲醇-水（12∶88）、甲醇-水（10∶90）、甲醇-水（8∶92）的分離效果。結(jié)果表明，甲醇-水（10∶90）的分離效果好，峰純度高，分析時(shí)間相對(duì)較短，故優(yōu)選甲醇-水（10∶90）作為流動(dòng)相。

根據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀色譜工作站的色譜峰純度理論，計(jì)算供試品溶液中5-HMF色譜峰的純度因子，設(shè)置純度因子為999.0以上，色譜峰相對(duì)較純。測(cè)定結(jié)果顯示，頭孢吡肟與10%葡萄糖注射液配伍，在8 h內(nèi)被測(cè)成分5-HMF峰光譜均勻，基本穩(wěn)定；頭孢吡肟與5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍，在2 h內(nèi)被測(cè)成分5-HMF峰光譜均勻，基本穩(wěn)定。上述2種配伍溶液放置3 d后測(cè)定，其色譜峰均有明顯肩峰出現(xiàn)。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：928-929.

［2］吳毅，許妍，趙雯，等.參麥注射液中5-羥甲基糠醛的含量測(cè)定［J］.齊魯藥事，2012，31（1）：11-12.

［3］張莉，黃哲延.HPLC法測(cè)定復(fù)方氨基酸注射液（18AA-IV）中5-羥甲基糠醛的含量［J］.天津藥學(xué)，2012，24（6）：4-6.

［4］楊海燕，楊瑞瑞，李榮.大蜜丸中5-羥甲基糠醛的定量控制研究［J］.中國(guó)藥業(yè)，2012，21（19）：29-30.

［5］蘇雪清，黃燕萍.舒血寧注射液中5-羥甲基糠醛的含量測(cè)定［J］.天津藥學(xué)，2013，25（1）：7-9.

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［8］周堅(jiān).HPLC法測(cè)定小活絡(luò)丸（大蜜丸）中5-羥甲基糠醛的含量［J］.西北藥學(xué)雜志，2013，28（1）：34-35.

［9］金卉怡.某院葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛與溫度、時(shí)間的關(guān)系［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2012，10（31）：97-98.

Stability of Cefepime Hydrochloride Injection and 5-hydroxymethyfurfura in 2 Different Compatibility Infusions

Gao Hong，Liu Junmin，Wang Liping
（Chongqing Kerui Pharmaceutical Co.，Ltd.，Chongqing，China 400060）

Objective To investigate the stability of Cefepime Hydrochloride Injection and 5-hydroxymethyfurfura（5-HMF）in 2 commonly used infusion in clinic by HPLC.Methods The HPLC method for determination of Cefepime Dihydrochloride Injection and 2 injections in their mixed solutions were established，the stability of 5-hydroxymethyfurfura were assayed in the mixture during 8 h.By C18column chromatography，the mobile phase consisted of methanol and pure water（10∶90）.The flow rate was 1.0 mL/min and detection wavelength was 284 nm.Results The mass concentration of 5-hydroxymethyfurfura in the range of 0.512 5-20.50μg/mL showed good linear relation with the peak area.Cefepime Hydrochloride Injection was mixed in 10%Glucose Injection and 5%Glucose Sodium Chloride Injection，the average recovery was 99.94%（RSD=1.23%）and 99.68%（RSD=1.51%），respectively.Conclusion The method is simple，accurate，reproducible，and can be used for the quality control of 5-hydroxymethyfurfura in Cefepime Hydrochloride for Injection mixed with two kinds of infusions.

HPLC；Cefepime Hydrochloride Injection；compatibility；stability；5-hydroxymethyfurfura

R969.2；R978.1+1

A

1006-4931（2015）22-0033-02

高紅，女，大學(xué)本科，工程師，主要從事藥品檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究工作，（電話）023-62766815（電子信箱）ghong_gh@126.com。

2014-07-28；

2015-02-13）