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        鎖陽黃酮咀嚼片中總黃酮含量的測定

        2015-10-24 10:09:31陳漢哲裴棟魏鑒騰邸多隆劉曄瑋
        食品研究與開發(fā) 2015年13期
        關(guān)鍵詞:鎖陽中總蘆丁

        陳漢哲,裴棟,魏鑒騰,邸多隆,劉曄瑋

        (1.蘭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)研究所,甘肅蘭州730000;2.中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所中科院西北特色植物資源化學(xué)重點實驗室,甘肅蘭州730000)

        鎖陽黃酮咀嚼片中總黃酮含量的測定

        陳漢哲1,裴棟2,魏鑒騰2,邸多隆2,劉曄瑋1

        (1.蘭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)研究所,甘肅蘭州730000;2.中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所中科院西北特色植物資源化學(xué)重點實驗室,甘肅蘭州730000)

        建立鎖陽黃酮咀嚼片中黃酮含量的測定方法。以蘆丁為對照品,用分光光度法測定鎖陽黃酮咀嚼片中總黃酮的含量。鎖陽黃酮咀嚼片中黃酮含量測定方法的線性方程:y=11.920x+0.007 2,相關(guān)系數(shù):r=0.999 4,線性范圍:4.02 μg/mL~64.32 μg/mL,精密度的相對偏差:1.04%,加標(biāo)回收率:93.70%~104.58%。

        鎖陽黃酮咀嚼片;總黃酮;分光光度法;含量測定

        鎖陽,又名“不老藥”、“金不換”和“沙漠人參”等,為鎖陽科(Cynomoraceae)寄生植物鎖陽(Cynomorium Songaricum Rupr.)的干燥肉質(zhì)莖,主要分布于內(nèi)蒙古、寧夏、新疆、甘肅、青海等地區(qū)。研究表明,鎖陽在防癌、抗癌、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老、防治心血管疾病、治療白細胞減少等方面也具有重要醫(yī)療價值[1]。

        在西北,鎖陽早已成為其文化的一部分,并形成了一些獨特的飲食,如,“酥茲根茶”、“燒殼子”、“鎖陽餅”等[2]。鎖陽肉質(zhì)莖富含淀粉,可釀酒,作飼料及代食品。鎖陽系列產(chǎn)品的研究開發(fā)已取得突破性進展,涉及到醫(yī)藥、食品等各個方面,如鎖陽保健酒、鎖陽啤酒、鎖陽飲料、鎖陽沖劑、鎖陽膠囊、鎖陽精、鎖陽茶、鎖陽飲片等[3]。

        鎖陽含有黃酮類、有機酸、甾體類、三萜類、鞣質(zhì)、糖苷、氨基酸、無機離子等多種成分。鎖陽中的黃酮類化合物主要為蕓香苷、表兒茶素、順式-5-脫氧戊糖酸-γ-內(nèi)酯、兒茶素、蘆丁、柑桔素、異槲皮苷等[4]。

        鎖陽黃酮以鎖陽的干燥肉質(zhì)莖為原料,經(jīng)乙醇提取、分離、干燥而成。鎖陽黃酮咀嚼片是以鎖陽黃酮為主要原料,經(jīng)科學(xué)配方加工而成的營養(yǎng)食品。本文建立了鎖陽黃酮咀嚼片中總黃酮含量測定方法,該方法鮮見文獻報道。

        1 儀器及材料

        1.1儀器

        BT224S型精密電子天平:德國賽多利斯集團;UV759紫外可見光分光光度計:上海精科電子有限公司;KQ-250DE超聲波清洗器:上海書培實驗設(shè)備有限公司。

        1.2試劑

        蘆丁對照品:成都曼思特生物科技有限公司;無水乙醇、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH均為分析純。

        1.3樣品

        鎖陽黃酮咀嚼片由阿拉善盟萬銘生物制品有限公司提供。

        2 方法與結(jié)果

        2.1對照品溶液的制備

        稱取蘆丁對照品約20 mg,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇適量超聲溶解,放至室溫后,用60%乙醇定容、搖勻,即得蘆丁對照品溶液。

        2.2供試品溶液的制備

        取鎖陽黃酮咀嚼片20片,研磨后過80目篩備用。稱取粉末約200 mg,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇適量超聲溶解,放至室溫后,用60%乙醇定容、搖勻,即得供試品溶液。

        2.3含量測定

        精密量取供試品(對照品)溶液2.0 mL于25 mL容量瓶中,用30%乙醇補足至6 mL,加入1.0 mL 5% NaNO2溶液,搖勻,放置6 min;加入1.0 mL 10%Al(NO3)3溶液,搖勻放置6 min;加入4%NaOH溶液10.0 mL,用30%乙醇定容,搖勻放置15 min,過濾。蘆丁對照品溶液為對照,相應(yīng)的試劑作空白對照,于510 nm下測定吸光度。

        黃酮含量按下式計算,式中A為樣品吸光度,C1為蘆丁對照品顯色濃度,(mg/mL),A1為蘆丁對照品吸光度,m1為樣品質(zhì)量,g。

        2.4標(biāo)準曲線的繪制

        精密量取對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0 mL,分別置25 mL容量瓶中,按2.3項下方法,自“用30%乙醇補足至6 mL”起,進行測定。

        以質(zhì)量濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準曲線,得回歸方程為:y=11.920x+0.007 2,r=0.999 4,線性范圍:4.02μg/mL~64.32μg/mL,如下圖。

        圖1 蘆丁對照品標(biāo)準曲線Fig.1The standard curve of Rutin reference substance

        2.5精密度試驗

        精確量取4.5mL對照品溶液5份,分別置于25mL容量瓶中,按2.3項下方法,自“用30%乙醇補足至6 mL”起,進行測定。

        相對標(biāo)準偏差為1.04%<5%。

        2.6穩(wěn)定性試驗

        精密量取8.0 mL供試品溶液于100 mL容量瓶中,用30%乙醇補足至24 mL,加入4.0 mL 5%NaNO2溶液,搖勻放置6 min;加入4.0 mL 10%AlNO3溶液,搖勻放置6 min;最后加入40 mL 4%NaOH溶液,用30%乙醇定容,搖勻放置15 min,過濾。波長設(shè)定為510nm并分別于5、10、15、20、25、30、60、90、120、150min時進行測定。

        吸光度值相對標(biāo)準偏差為2.70%<5%,表明在2.5 h內(nèi),體系基本穩(wěn)定。

        2.7重復(fù)性試驗

        精密稱取樣品5份,分別置于50 mL容量瓶中,按2.2項下方法,自“加60%乙醇適量超聲溶解”起,配制供試品溶液。各量取2.0 mL供試品溶液,分別置25 mL容量瓶中,按2.3項下方法,自“用30%乙醇補足至6 mL”起進行測定。

        相對標(biāo)準偏差為3.43%<5%。

        2.8加樣回收率試驗

        分別精密稱取已知含量鎖陽黃酮咀嚼片粉末15份,按低、中、高3個濃度水平分別加入蘆丁對照品,按2.2及2.3項下方法測定,每個濃度水平測定5個平行樣,結(jié)果下表。

        回收率在93.70%~104.58%之間,相對標(biāo)準偏差<5%。

        3 結(jié)論

        本法樣品前處理方法簡單,顯色體系穩(wěn)定性良好,其線性方程為y=11.920x+0.007 2,相關(guān)系數(shù)為r= 0.999 4,線性范圍在4.02 μg/mL~64.32 μg/mL之間,精密度的相對偏差為1.04%,加標(biāo)回收率為93.70%~104.58%,相關(guān)指標(biāo)均良好,達到理想的要求。故此法可用于鎖陽咀嚼片黃酮含量測定。

        表1 加樣回收率實驗Table 1Analytical results of spiked recovery tests

        [1]張立明,鄭傳莉,李思.紫外分光光度法測定鎖陽中總黃酮含量[J].科協(xié)論壇·下半月,2009(12):73-74

        [2]鐘進文.鄉(xiāng)土知識不可忘記-從幾件小事說起[J].西北民族研究,2009(1):177-182

        [3]張丙云,相炎紅,周青鈺.鎖陽的研究現(xiàn)狀及開發(fā)[J].釀酒,2002,29(4):72-73

        [4]王曉梅,張倩熱娜·卡斯木,王新玲,等.鎖陽全草化學(xué)成分的研究[J].中草藥,2011,42(3):458-460

        Determination of Flavonoids in Cynomorium Songaricum Flavonoids Tablets

        CHEN Han-zhe1,PEI Dong2,WEI Jian-teng2,DI Duo-long2,LIU Ye-wei1
        (1.Institute of nutrition and food hygiene in College of Public Hygiene of Lanzhou University,Lanzhou 730000,Gansu,China;2.Key Lab of Chemistry of Northwestern Plant Resources in Lanzhou Institute of Chemical Physics,Lanzhou 730000,Gansu,China)

        To establish the method for content determination of flavonoids in Cynomorium Songaricum flavonoids tablets.Lutoside as control article,the content of the flavoneoids in Cynomorium Songaricum flavonoids tablets was determined by spectrophotometry.The linear equation,related coefficient and range of linearity were y=11.920x+0.007 2,r=0.999 4,4.02 μg/mL-64.32 μg/mL,respectively.The precision(RSD%)was 1.04%.The recoveries obtained were from 93.70%to 104.58%.

        Cynomorium Songaricum;flavonoids;spectrophotometry;content determination

        10.3969/j.issn.1005-6521.2015.13.031

        2015-03-06

        陳漢哲(1992—),男(漢),在讀研究生,研究方向:營養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)。

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