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        鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片中總黃酮含量的測(cè)定

        2015-10-24 10:09:31陳漢哲裴棟魏鑒騰邸多隆劉曄瑋
        食品研究與開發(fā) 2015年13期
        關(guān)鍵詞:鎖陽(yáng)中總蘆丁

        陳漢哲,裴棟,魏鑒騰,邸多隆,劉曄瑋

        (1.蘭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)研究所,甘肅蘭州730000;2.中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所中科院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅蘭州730000)

        鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片中總黃酮含量的測(cè)定

        陳漢哲1,裴棟2,魏鑒騰2,邸多隆2,劉曄瑋1

        (1.蘭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)研究所,甘肅蘭州730000;2.中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所中科院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅蘭州730000)

        建立鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片中黃酮含量的測(cè)定方法。以蘆丁為對(duì)照品,用分光光度法測(cè)定鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片中總黃酮的含量。鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片中黃酮含量測(cè)定方法的線性方程:y=11.920x+0.007 2,相關(guān)系數(shù):r=0.999 4,線性范圍:4.02 μg/mL~64.32 μg/mL,精密度的相對(duì)偏差:1.04%,加標(biāo)回收率:93.70%~104.58%。

        鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片;總黃酮;分光光度法;含量測(cè)定

        鎖陽(yáng),又名“不老藥”、“金不換”和“沙漠人參”等,為鎖陽(yáng)科(Cynomoraceae)寄生植物鎖陽(yáng)(Cynomorium Songaricum Rupr.)的干燥肉質(zhì)莖,主要分布于內(nèi)蒙古、寧夏、新疆、甘肅、青海等地區(qū)。研究表明,鎖陽(yáng)在防癌、抗癌、免疫調(diào)節(jié)、延緩衰老、防治心血管疾病、治療白細(xì)胞減少等方面也具有重要醫(yī)療價(jià)值[1]。

        在西北,鎖陽(yáng)早已成為其文化的一部分,并形成了一些獨(dú)特的飲食,如,“酥茲根茶”、“燒殼子”、“鎖陽(yáng)餅”等[2]。鎖陽(yáng)肉質(zhì)莖富含淀粉,可釀酒,作飼料及代食品。鎖陽(yáng)系列產(chǎn)品的研究開發(fā)已取得突破性進(jìn)展,涉及到醫(yī)藥、食品等各個(gè)方面,如鎖陽(yáng)保健酒、鎖陽(yáng)啤酒、鎖陽(yáng)飲料、鎖陽(yáng)沖劑、鎖陽(yáng)膠囊、鎖陽(yáng)精、鎖陽(yáng)茶、鎖陽(yáng)飲片等[3]。

        鎖陽(yáng)含有黃酮類、有機(jī)酸、甾體類、三萜類、鞣質(zhì)、糖苷、氨基酸、無機(jī)離子等多種成分。鎖陽(yáng)中的黃酮類化合物主要為蕓香苷、表兒茶素、順式-5-脫氧戊糖酸-γ-內(nèi)酯、兒茶素、蘆丁、柑桔素、異槲皮苷等[4]。

        鎖陽(yáng)黃酮以鎖陽(yáng)的干燥肉質(zhì)莖為原料,經(jīng)乙醇提取、分離、干燥而成。鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片是以鎖陽(yáng)黃酮為主要原料,經(jīng)科學(xué)配方加工而成的營(yíng)養(yǎng)食品。本文建立了鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片中總黃酮含量測(cè)定方法,該方法鮮見文獻(xiàn)報(bào)道。

        1 儀器及材料

        1.1儀器

        BT224S型精密電子天平:德國(guó)賽多利斯集團(tuán);UV759紫外可見光分光光度計(jì):上海精科電子有限公司;KQ-250DE超聲波清洗器:上海書培實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。

        1.2試劑

        蘆丁對(duì)照品:成都曼思特生物科技有限公司;無水乙醇、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH均為分析純。

        1.3樣品

        鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片由阿拉善盟萬銘生物制品有限公司提供。

        2 方法與結(jié)果

        2.1對(duì)照品溶液的制備

        稱取蘆丁對(duì)照品約20 mg,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇適量超聲溶解,放至室溫后,用60%乙醇定容、搖勻,即得蘆丁對(duì)照品溶液。

        2.2供試品溶液的制備

        取鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片20片,研磨后過80目篩備用。稱取粉末約200 mg,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇適量超聲溶解,放至室溫后,用60%乙醇定容、搖勻,即得供試品溶液。

        2.3含量測(cè)定

        精密量取供試品(對(duì)照品)溶液2.0 mL于25 mL容量瓶中,用30%乙醇補(bǔ)足至6 mL,加入1.0 mL 5% NaNO2溶液,搖勻,放置6 min;加入1.0 mL 10%Al(NO3)3溶液,搖勻放置6 min;加入4%NaOH溶液10.0 mL,用30%乙醇定容,搖勻放置15 min,過濾。蘆丁對(duì)照品溶液為對(duì)照,相應(yīng)的試劑作空白對(duì)照,于510 nm下測(cè)定吸光度。

        黃酮含量按下式計(jì)算,式中A為樣品吸光度,C1為蘆丁對(duì)照品顯色濃度,(mg/mL),A1為蘆丁對(duì)照品吸光度,m1為樣品質(zhì)量,g。

        2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

        精密量取對(duì)照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0 mL,分別置25 mL容量瓶中,按2.3項(xiàng)下方法,自“用30%乙醇補(bǔ)足至6 mL”起,進(jìn)行測(cè)定。

        以質(zhì)量濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:y=11.920x+0.007 2,r=0.999 4,線性范圍:4.02μg/mL~64.32μg/mL,如下圖。

        圖1 蘆丁對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1The standard curve of Rutin reference substance

        2.5精密度試驗(yàn)

        精確量取4.5mL對(duì)照品溶液5份,分別置于25mL容量瓶中,按2.3項(xiàng)下方法,自“用30%乙醇補(bǔ)足至6 mL”起,進(jìn)行測(cè)定。

        相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.04%<5%。

        2.6穩(wěn)定性試驗(yàn)

        精密量取8.0 mL供試品溶液于100 mL容量瓶中,用30%乙醇補(bǔ)足至24 mL,加入4.0 mL 5%NaNO2溶液,搖勻放置6 min;加入4.0 mL 10%AlNO3溶液,搖勻放置6 min;最后加入40 mL 4%NaOH溶液,用30%乙醇定容,搖勻放置15 min,過濾。波長(zhǎng)設(shè)定為510nm并分別于5、10、15、20、25、30、60、90、120、150min時(shí)進(jìn)行測(cè)定。

        吸光度值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.70%<5%,表明在2.5 h內(nèi),體系基本穩(wěn)定。

        2.7重復(fù)性試驗(yàn)

        精密稱取樣品5份,分別置于50 mL容量瓶中,按2.2項(xiàng)下方法,自“加60%乙醇適量超聲溶解”起,配制供試品溶液。各量取2.0 mL供試品溶液,分別置25 mL容量瓶中,按2.3項(xiàng)下方法,自“用30%乙醇補(bǔ)足至6 mL”起進(jìn)行測(cè)定。

        相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.43%<5%。

        2.8加樣回收率試驗(yàn)

        分別精密稱取已知含量鎖陽(yáng)黃酮咀嚼片粉末15份,按低、中、高3個(gè)濃度水平分別加入蘆丁對(duì)照品,按2.2及2.3項(xiàng)下方法測(cè)定,每個(gè)濃度水平測(cè)定5個(gè)平行樣,結(jié)果下表。

        回收率在93.70%~104.58%之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<5%。

        3 結(jié)論

        本法樣品前處理方法簡(jiǎn)單,顯色體系穩(wěn)定性良好,其線性方程為y=11.920x+0.007 2,相關(guān)系數(shù)為r= 0.999 4,線性范圍在4.02 μg/mL~64.32 μg/mL之間,精密度的相對(duì)偏差為1.04%,加標(biāo)回收率為93.70%~104.58%,相關(guān)指標(biāo)均良好,達(dá)到理想的要求。故此法可用于鎖陽(yáng)咀嚼片黃酮含量測(cè)定。

        表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)Table 1Analytical results of spiked recovery tests

        [1]張立明,鄭傳莉,李思.紫外分光光度法測(cè)定鎖陽(yáng)中總黃酮含量[J].科協(xié)論壇·下半月,2009(12):73-74

        [2]鐘進(jìn)文.鄉(xiāng)土知識(shí)不可忘記-從幾件小事說起[J].西北民族研究,2009(1):177-182

        [3]張丙云,相炎紅,周青鈺.鎖陽(yáng)的研究現(xiàn)狀及開發(fā)[J].釀酒,2002,29(4):72-73

        [4]王曉梅,張倩熱娜·卡斯木,王新玲,等.鎖陽(yáng)全草化學(xué)成分的研究[J].中草藥,2011,42(3):458-460

        Determination of Flavonoids in Cynomorium Songaricum Flavonoids Tablets

        CHEN Han-zhe1,PEI Dong2,WEI Jian-teng2,DI Duo-long2,LIU Ye-wei1
        (1.Institute of nutrition and food hygiene in College of Public Hygiene of Lanzhou University,Lanzhou 730000,Gansu,China;2.Key Lab of Chemistry of Northwestern Plant Resources in Lanzhou Institute of Chemical Physics,Lanzhou 730000,Gansu,China)

        To establish the method for content determination of flavonoids in Cynomorium Songaricum flavonoids tablets.Lutoside as control article,the content of the flavoneoids in Cynomorium Songaricum flavonoids tablets was determined by spectrophotometry.The linear equation,related coefficient and range of linearity were y=11.920x+0.007 2,r=0.999 4,4.02 μg/mL-64.32 μg/mL,respectively.The precision(RSD%)was 1.04%.The recoveries obtained were from 93.70%to 104.58%.

        Cynomorium Songaricum;flavonoids;spectrophotometry;content determination

        10.3969/j.issn.1005-6521.2015.13.031

        2015-03-06

        陳漢哲(1992—),男(漢),在讀研究生,研究方向:營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)。

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