亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        Folin-Ciocaileu法測(cè)定鼠尾草多酚含量

        2015-10-24 10:09:29冷雪嬌章林鄧紹林王卓裴玉瓊許金國(guó)潘蘇華
        食品研究與開(kāi)發(fā) 2015年13期
        關(guān)鍵詞:方法

        冷雪嬌,章林,鄧紹林,*,王卓,裴玉瓊,許金國(guó),潘蘇華

        (1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,江蘇南京210046;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇南京210095)

        Folin-Ciocaileu法測(cè)定鼠尾草多酚含量

        冷雪嬌1,章林2,鄧紹林2,*,王卓1,裴玉瓊1,許金國(guó)1,潘蘇華1

        (1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,江蘇南京210046;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇南京210095)

        采用Folin-Ciocaileu法,以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)定鼠尾草多酚含量,用比色法測(cè)定其穩(wěn)定性、精密度、重現(xiàn)性和加樣回收率。標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為:y=0.1525x+0.018 1(R2=0.998)。本方法測(cè)得的鼠尾草中多酚含量為3.86%,5組樣品的平均回收率為101.3%。本方法測(cè)定鼠尾草多酚含量具有較高的穩(wěn)定性(RSD=1.63%)、重現(xiàn)性(RSD= 3.01%)和精密度(RSD=1.02%)。

        鼠尾草;多酚;Folin-Ciocaileu法

        鼠尾草(salvia officinalis L.)為唇形科、鼠尾草屬植物,其葉、莖和花均有很高的利用價(jià)值,被廣泛的用作醫(yī)藥、香料和食品行業(yè)的原料[1]。鼠尾草是著名的民間常用草藥,有活血化淤、通經(jīng)止痛、清心除煩、治月經(jīng)不調(diào)、心絞痛、肝脾腫大等作用[2],還可以作為香辛料來(lái)調(diào)味和保藏食物[3]。現(xiàn)代科學(xué)研究表明鼠尾草具有良好的抗氧化作用,主要表現(xiàn)在自由基清除活力、螯合過(guò)渡金屬離子活性和單線態(tài)氧清除能力[4],鼠尾草的抗氧化能力源于其所含有的抗氧化活性物質(zhì),如萜類(lèi)化合物、黃酮類(lèi)化合物和酚酸,其中酚類(lèi)化合物起主要作用[5],因此,有必要了解鼠尾草中的多酚含量及其測(cè)定方法。目前,F(xiàn)olin-Ciocaileu比色法廣泛的應(yīng)用于植物多酚的含量測(cè)定,此方法操作簡(jiǎn)便、精密度較高、重現(xiàn)性好,并且所需儀器設(shè)備價(jià)格低廉。本試驗(yàn)選擇Folin-Ciocaileu比色法測(cè)定鼠尾草中的多酚含量,研究此方法是否可應(yīng)用于鼠尾草的多酚含量測(cè)定。

        1 材料與方法

        1.1材料與試劑

        鼠尾草粉:山東濟(jì)南海樂(lè)西亞澤公司;沒(méi)食子酸(HPLC級(jí)純):阿拉丁公司;石油醚、乙醇、鎢酸鈉、鉬酸鈉、硫酸鋰、無(wú)水碳酸鈉、磷酸、溴等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

        1.2儀器與設(shè)備

        PS-10A超聲波:潔康牌數(shù)碼超聲波清洗機(jī);WFJ 2100可見(jiàn)分光光度計(jì):尤尼柯(上海)儀器有限公司;AUY120電子天平:日本SHIMADZU公司;ZKSY-600恒溫水浴鍋:南京科爾儀器設(shè)備有限公司;Milli-Q超純水系統(tǒng):Millipore公司。

        1.3方法

        1.3.1Folin-Ciocaileu試劑的配制[6]

        稱(chēng)取50 g鎢酸鈉和12.5 g鉬酸鈉置入1 L磨口圓底燒瓶中,用350 mL蒸餾水溶解,緩慢加入85%磷酸25 mL,濃鹽酸50 mL,充分混勻,放入數(shù)粒玻璃珠,連接回流冷凝裝置,文火回流10 h(回流不一定連續(xù))。用25 mL蒸餾水沖洗冷凝管上的附著物,拆開(kāi)冷凝管后加入75 g無(wú)水硫酸鋰和幾滴溴水(邊加邊振搖),開(kāi)口繼續(xù)加熱沸騰15 min,直至溴水完全揮發(fā),終點(diǎn)顏色為黃綠色。冷卻后定容至500 mL,過(guò)濾,儲(chǔ)存于棕色瓶中,放入冰箱保存?zhèn)溆?,使用時(shí)稀釋1倍。

        1.3.2沒(méi)食子酸標(biāo)液的配制

        精確稱(chēng)取0.035 4 g沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品,用燒杯溶解后,定容至250 mL,濃度為140 μg/mL,使用時(shí)濃度稀釋1倍。

        1.3.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立[7]

        精密吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL 70 μg/mL沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)稀釋液于10 mL量瓶?jī)?nèi),加1.0 mL Folin-Ciocaileu試劑,再加入10%碳酸鈉溶液3 mL(前后時(shí)間間隔不應(yīng)超過(guò)8 min),混勻,加水定容,再混勻。然后室溫下避光放置反應(yīng)2 h,在765 nm處測(cè)吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。鼠尾草樣品中的多酚含量以沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品計(jì)。

        1.3.4鼠尾草樣品溶液的制備[8]

        鼠尾草粉中按鼠尾草粉:石油醚為1∶10(g/mL)加入石油醚浸提12 h脫脂,室溫下干燥至恒重。準(zhǔn)確稱(chēng)取1.0 g鼠尾草粉末,加入60%乙醇20 mL,40℃,超聲提取30 min共3次,合并提取液,過(guò)濾,定容至100 mL,待測(cè)。

        1.3.5鼠尾草樣品中多酚含量的測(cè)定

        將鼠尾草樣品液稀釋10倍,用樣品空白作為對(duì)照。移液管精確量取稀釋液0.5 mL置于10 mL容量瓶中,加Folin-Ciocaileu試劑1.0 mL,再加入10%碳酸鈉溶液3 mL,混勻,加水定容,繼續(xù)搖勻,然后室溫下避光放置反應(yīng)2 h,在765 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度,代入回歸方程,得多酚濃度(μg/mL)。

        1.3.6鼠尾草多酚測(cè)定方法評(píng)價(jià)

        1.3.6.1穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

        取鼠尾草酚類(lèi)提取樣品液按上述處理及測(cè)定方法,分別在樣品液與顯色劑反應(yīng)0.5、1、2、3、4 h后測(cè)吸光度,以評(píng)價(jià)該比色分析方法在一定時(shí)間內(nèi)的穩(wěn)定性。

        1.3.6.2重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

        取鼠尾草樣品4份,依上述制備及分析方法,分別測(cè)定其多酚含量,并計(jì)算測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(Relative Standard Deviation,RSD),以評(píng)價(jià)該方法的重現(xiàn)性。

        1.3.6.3精密度實(shí)驗(yàn)

        用Folin-Ciocaileu法測(cè)定同一鼠尾草提取樣品液5次,計(jì)算測(cè)定結(jié)果的RSD,以評(píng)價(jià)該方法的精密度。

        1.3.6.4加樣回收率實(shí)驗(yàn)

        鼠尾草酚類(lèi)樣品液中加入不同量的沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液,分別測(cè)定其多酚含量,并計(jì)算回收率和RSD,以評(píng)價(jià)該方法的準(zhǔn)確度和可靠性。取0.4 mL稀釋10倍的鼠尾草樣品溶液于10 mL具塞刻度試管中,再加稀釋10倍的沒(méi)食子酸標(biāo)樣0、0.5、1、1.5、2 mL,加1 mL福林試劑,再加3 mL 10%碳酸鈉,定容至10 mL,搖勻,室溫放置2 h,測(cè)吸光度。

        2 結(jié)果與分析

        2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

        由圖1可知,沒(méi)食子酸在0 μg/mL~5 μg/mL濃度范圍內(nèi)與其吸光度值呈良好的線性關(guān)系,在此范圍內(nèi)線性回歸方程為Y=0.152 5X+0.018 1(R2=0.998)。

        圖1 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1Gallic acid standard curve

        2.2鼠尾草中多酚含量的測(cè)定

        精密稱(chēng)取1.0 g鼠尾草粉4份,按照1.3.4的方法制備供試品溶液,按照1.3.5的方法進(jìn)行操作,設(shè)空白管。為消除供試品溶液本身顏色的干擾,同時(shí)制備不加顯色劑的對(duì)照管,于765 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。結(jié)果見(jiàn)表。結(jié)果表明,本方法測(cè)得的鼠尾草中多酚含量平均為3.86%,RSD=3.71%。

        表1 鼠尾草中多酚含量Table 1Content of polyphenols in sage

        2.3Folin-Ciocaileu方法的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和精密度

        本試驗(yàn)驗(yàn)證了Folin-Ciocaileu比色法測(cè)定鼠尾草中酚類(lèi)含量的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和精密度,結(jié)果見(jiàn)表2。

        表2 Folin-Ciocaileu方法的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和精密度Table 2Stability,repeatability and precision of the Folin-Ciocaileu method

        由表2可見(jiàn),該方法在體系反應(yīng)完全后放置4 h內(nèi)測(cè)定的吸光度值變化較?。≧SD=1.63%),表明方法穩(wěn)定性較好;重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)測(cè)得5個(gè)不同鼠尾草樣品中多酚含量值較接近(RSD=3.01%),表明該方法重現(xiàn)性較好;精密度實(shí)驗(yàn),同一樣品5次測(cè)定的多酚含量值相差較?。≧SD=1.02%),表明該方法精密度較高,完全能滿(mǎn)足樣品分析的要求。

        2.4加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)

        按照1.3.6的方法進(jìn)行加樣回收率的測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表3。

        表3 鼠尾草多酚含量測(cè)定加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 3Recovery rate of polyphenols in sage

        由表3可見(jiàn),5次加樣回收實(shí)驗(yàn)的最低回收率為99.6%,最高回收率為103.5%,平均回收率為101.3%, RSD=1.61%。表明此法有很高的準(zhǔn)確性和可靠性。

        3 結(jié)論

        本試驗(yàn)以沒(méi)食子酸為對(duì)照品,采用Folin-Ciocaileu比色法測(cè)定鼠尾草多酚含量,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,多酚濃度在0 μg/mL~5 μg/mL范圍內(nèi)與吸光值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。本方法測(cè)得的鼠尾草中多酚含量平均為3.86%,RSD為3.71%。穩(wěn)定性試驗(yàn)RSD為1.63%,重現(xiàn)性試驗(yàn)RSD為3.01%,精密度試驗(yàn)RSD為1.02%,5組樣品的平均回收率為101.3%,RSD為1.61%。本方法操作簡(jiǎn)單、效率高、設(shè)備要求低、精密度高、穩(wěn)定性和重現(xiàn)性較好,可為鼠尾草多酚的檢測(cè)提供了技術(shù)參考。

        [1]Santos-Gomes P C,Seabra R M,Andrade P B,et al.Determination of phenolic antioxidant compounds produced by calli and cell suspensions of sage(Salvia officinalis L.)[J].Journal of Plant Physiology,2003,160(9):1025-1032

        [2]曲慧.甘西鼠尾草提取物抗氧化活性的初步研究[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2007,24(4):261-263

        [3]Durling N E,Catchpole O J,Grey J B,et al.Extraction of phenolics and essential oil from dried sage(Salvia officinalis)using ethanolwater mixtures[J].Food Chemistry,2007,101(4):1417-1424

        [4]Pizzale L,Bortolomeazzi R,Vichi S,et al.Antioxidant activity of sage(Salvia officinalis and S fruticosa)and oregano(Origanum onites and O indercedens)extracts related to their phenolic compound content[J].Journal of the Science of Food and Agriculture,2002,82(14):1645-1651

        [5]Lu Y,F(xiàn)oo L Y.Antioxidant activities of polyphenols from sage(Salvia officinalis)[J].Food Chemistry,2001,75:197-202

        [6]吳亮亮,石雪萍,張衛(wèi)明.Folin-Ciocalteu比色法測(cè)定花椒中多酚含量的研究[J].中國(guó)野生植物資源,2010(6):54-56

        [7]曹艷萍,代宏哲,曹煒,等.Folin-Ciocaileu比色法測(cè)定紅棗總酚[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(4):1299-1299

        [8]王曉陽(yáng),唐琳,趙壘,等.Folin-Ciocaileu比色法測(cè)定刺槐花中的多酚含量[J].食品與藥品,2010,12(9):332-335

        Determination of Polyphenols in Flowers of Salvia Officinalis L.by Folin-Ciocaileu Method

        LENG Xue-jiao1,ZHANG Lin2,DENG Shao-lin2,*,WANG Zhuo1,PEI Yu-qiong1,XU Jin-guo1,PAN Su-hua1
        (1.Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210046,Jiangsu,China;2.College of Food Science and Technology,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,Jiangsu,China)

        Gallic acid as reference,the Folin-Ciocalteu method was established to determine the content of polyphenols in sage.The stabilization,precision,repetition and recovery rate of this method were investigated. The regression equation was:Y=0.152 5X+0.018 1(R2=0.998).This method measured the polyphenols content in sage was 3.86%,the average recovery rate of five groups of samples was 101.3%.This method for determining the content of polyphenols in sage possesses high stability(RSD=1.63%),repeatability(RSD= 3.01%)and precision(RSD=1.02%).

        sage;polyphenols;folin-ciocaileu method

        10.3969/j.issn.1005-6521.2015.13.025

        2014-03-18

        南京中醫(yī)藥大學(xué)青年自然科學(xué)基金(13XZR29)

        冷雪嬌(1988—),女(漢),助理實(shí)驗(yàn)師,碩士,從事食品安全與工藝研究工作。

        鄧紹林(1986—),男,實(shí)習(xí)研究員,碩士,主要從事畜產(chǎn)品加工與質(zhì)量控制研究。

        猜你喜歡
        方法
        中醫(yī)特有的急救方法
        中老年保健(2021年9期)2021-08-24 03:52:04
        高中數(shù)學(xué)教學(xué)改革的方法
        化學(xué)反應(yīng)多變幻 “虛擬”方法幫大忙
        變快的方法
        兒童繪本(2020年5期)2020-04-07 17:46:30
        學(xué)習(xí)方法
        可能是方法不對(duì)
        用對(duì)方法才能瘦
        Coco薇(2016年2期)2016-03-22 02:42:52
        最有效的簡(jiǎn)單方法
        山東青年(2016年1期)2016-02-28 14:25:23
        四大方法 教你不再“坐以待病”!
        Coco薇(2015年1期)2015-08-13 02:47:34
        賺錢(qián)方法
        领导边摸边吃奶边做爽在线观看| 抖射在线免费观看视频网站| 粉色蜜桃视频完整版免费观看在线 | 中文AV怡红院| 日本视频一区二区三区三州| 日韩中文字幕版区一区二区三区| 五月综合激情婷婷六月色窝| 亚洲伊人久久大香线蕉影院| 一本久久伊人热热精品中文| 青青草在线免费视频播放| 日韩人妻无码精品久久免费一 | 欧美成人午夜免费影院手机在线看 | 秋霞国产av一区二区三区| 国语淫秽一区二区三区四区| 亚洲成a人无码| 99er视频| 国产一区二区三区porn | 久久成年片色大黄全免费网站| 国产一区二区黑丝美女| 国产91传媒一区二区三区| 亚洲熟女一区二区三区| 精品国产AⅤ无码一区二区| 亚洲一区二区一区二区免费视频| 精品天堂色吊丝一区二区| 国产影片中文字幕| 天堂最新在线官网av| 国产一级内射一片视频免费| 中国老熟妇506070| 亚洲精品国产美女久久久| 魔鬼身材极品女神在线| 精品一区三区视频在线观看| 国产精品毛片久久久久久久| 国产福利小视频在线观看| 久久精品国产黄片一区| 国产电影一区二区三区| 首页动漫亚洲欧美日韩| 男女视频网站免费精品播放| 激情内射人妻1区2区3区| 色爱区综合五月激情| 日本精品久久性大片日本| 伊人久久大香线蕉av五月|