李靜杰

摘要：為了減少乳腺炎對奶牛業(yè)的危害，提高乳制品質量，維護食品安全。本實驗采用美國加利福尼亞快速診斷法（CMT法）對哈爾濱市周邊6個規(guī)?；膛Ｄ翀龅?924頭泌乳牛進行隱性乳腺炎的流行病學調查，并進行主要致病菌的分離鑒定。結果表明，哈爾濱周邊地區(qū)奶牛隱形乳腺炎的發(fā)病率為48.59%，乳區(qū)發(fā)病率為44.29%；從隱形乳腺炎患牛的陽性乳區(qū)中分離出細菌76株其中葡萄球菌占46.05%，鏈球菌占36.84%，革蘭氏陰性桿菌占17.11%。從細菌分析來看，小部分為單獨致病，大多是2種或2種以上病菌混合感染。

關鍵詞：奶牛；隱形乳腺炎；流行病學；CMT法

奶牛乳腺炎是造成奶牛生產經濟損失的重要原因。雖然國內外學者都在積極地尋找一種有效的方法來控制奶牛乳腺炎，但都未獲得成功，尤其是隱形乳腺炎病因復雜，隱蔽性強，不易被發(fā)現(xiàn)。近年來，有專家對本地區(qū)奶牛乳腺炎進行了調查，結果顯示隱形乳腺炎發(fā)病率在47%～70%之間，國際上報到隱形乳腺炎發(fā)病率平均為50%左右。

1 材料與方法

選取哈爾濱市周邊地區(qū)的6個規(guī)?；膛Ｄ翀?，共存欄3056頭，對臨床檢查健康，且全部處于泌乳其的1924頭奶牛進行調查，以上6個牧場飼養(yǎng)管理與衛(wèi)生良好。

試劑有CMT檢驗試劑、分離用培養(yǎng)基、生化鑒定培養(yǎng)基及實驗室常用試劑等。

陰性乳房炎采用CMT法。用溫水將乳房擦洗干凈，繼而用0.2%“新潔爾滅”（主要成分為苯扎溴銨）擦洗乳房，再用75%酒精溶液消毒乳頭，然后帶上滅菌手套進行人工榨乳，棄去前2把乳，將4個乳區(qū)乳擠到相應的乳汁檢驗盤中，傾斜檢驗盤，盤中剩余2毫升左右的乳汁，加入2毫升試劑，立即水平搖動檢驗盤，使乳汁與試劑充分混合，10秒后觀察。

病原菌的分離及純化。將乳汁接種到瓊脂和血平板培養(yǎng)基上培養(yǎng)24小時后觀察，依據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等將菌落大致分類，然后配合小未經觀察細菌的形態(tài)、革蘭氏染色特點仔細進行分類，排除環(huán)境中常存在無致病性細菌，一般為革蘭氏染色呈陽性粗大桿菌。將挑選出來的細菌做進一步純培養(yǎng)，方法同上，注意鏈球菌需用血瓊脂進行培養(yǎng)。純培養(yǎng)后鏡檢無雜菌者保存于斜面培養(yǎng)基內，按生化鑒定方法進行生化鑒定。

生化鑒定。主要生化試驗有溶血、糖發(fā)酵、過氧化氫、三糖鐵、血漿凝固酶、CAMP、6.5%氯化鈉、檸檬酸鹽、吲哚、MR、V-P、硫化氫、尿素酶等實驗。

2 結果與分析

流行病學調查結果。利用CMT法對1924頭荷斯坦奶牛進行隱形乳腺炎快速診斷，發(fā)現(xiàn)共有935頭患有隱形乳腺炎，占總數(shù)的48.59%，在1842個有效乳區(qū)中，隱形乳腺炎的乳區(qū)有816個，陽性率44.29%，其中弱陽性乳區(qū)503個（61.65%），陽性乳區(qū)268個（32.84%），強陽性乳區(qū)45個（5.51%）。

細菌分離鑒定結果。在816個隱形乳腺炎的乳區(qū)中選取18個陽性反應（++）的乳區(qū)，共檢出76株細菌，通過初步的細菌分離并結合鏡下檢測發(fā)現(xiàn)，有葡萄球菌35株，占46.05%；鏈球菌28株，占36.84%；革蘭氏陰性桿菌13株，占17.11%，小部分為單獨致病，大多是2種或2種以上病菌混合感染。

從統(tǒng)計情況看，哈爾濱周邊地區(qū)引起奶牛隱形乳腺炎的主要致病菌以金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌兩種或兩種以上細菌混合感染為主，單獨感染為輔，多種細菌引起發(fā)病面積廣、危害性大。

3 討論

奶牛隱性乳腺炎是乳腺受到物理、化學、微生物等因素的刺激所產生的一種炎癥變化，誘因較多，其中，病原微生物的入侵是引起奶牛隱形乳腺炎的主要原因，臨床病例中，鏈球菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌最為常見。金黃色葡萄球菌感染具有普遍性，對隱性乳腺炎的危害最大，大腸桿菌的檢出率較高，乳房鏈球菌、腐生葡萄球菌，金黃色葡萄球菌和大腸桿菌等環(huán)境致病菌，主要通過牛體、糞便和泥土等傳播。環(huán)境致病菌主要存在于周圍環(huán)境中，不能完全消滅，奶牛的免疫力降低時，就能被感染致使隱性乳腺炎的發(fā)生。本實驗所分離出的環(huán)境致病菌所占的比例較大，經常保持牛舍內外和牛體的干燥清潔，就可降低環(huán)境致病菌的感染，減少隱性奶牛乳腺炎的發(fā)病率。無乳鏈球菌是傳染性致病菌，其傳播主要發(fā)生在擠奶過程中，如通過擦洗乳房用的毛巾、水、榨奶工、榨奶杯等傳播。