盤捷等

摘要：目的： 分別通過超聲乳化法和超聲初乳化結(jié)合SPG微膜乳化法制備非載藥微泡超聲造影劑。方法： 分別通過超聲乳化法和超聲初乳化結(jié)合SPG微膜乳化法進(jìn)行非載藥微泡制備的研究。 結(jié)果： 兩種方法都能夠制備出粒徑適合的微泡超聲造影劑，但超聲初乳化結(jié)合SPG微膜乳化法制備的微泡粒徑均勻度上要優(yōu)于超聲乳化法制備的微泡。結(jié)論： 超聲乳法結(jié)合SPG微膜乳化法制備超聲微泡造影劑具有更好的均勻度，適合于載藥超聲造影劑的制備。

關(guān)鍵詞： 超聲微泡造影劑；外消旋聚乳酸；超聲乳化法；SPG微膜乳化技術(shù)

聚乳酸（PLA）以其所特有的良好的生物相容性和生物降解性而得到了廣泛的研究，尤其是在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，如醫(yī)用可吸收縫合線、骨科固定裝置以及組織工程支架和藥物釋放系統(tǒng)。由于結(jié)晶上的不同聚乳酸可分為右旋聚乳酸（PDLA），左旋聚乳酸（PLLA）和外消旋聚乳酸（PDLLA）。PDLLA降解和吸收速度較快，有利于藥物均勻分布在基質(zhì)中，因此非常適合于藥物釋放系統(tǒng)，主要作藥物控緩釋的載體和軟組織修復(fù)材料[1-3]。復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法是在藥物釋放系統(tǒng)應(yīng)用很廣的一種包囊技術(shù)，尤其適用于水溶性的化學(xué)類藥物以及蛋白類藥物，既避免了大量有機(jī)溶劑的毒性，也可以防止生物活性分子、蛋白類等藥物在包囊過程中變性而影響藥效，而且這種方法也適用于高分子聚合材料超聲微泡造影劑的制備[4-8]。20世紀(jì)80年代后期，Nakashima等人[9]首次利用SPG（Shirasu Porous Glass）成功制備了粒徑均一的煤油/水以及水/煤油的乳液滴。自此之后，膜乳化技術(shù)作為一種嶄新的乳化技術(shù)日益受到各國(guó)學(xué)者的關(guān)注并得到了很大的發(fā)展。本文的研究設(shè)法對(duì)W/O/W復(fù)乳溶劑蒸發(fā)法進(jìn)行了改進(jìn)，在復(fù)乳制備過程中引入了SPG膜乳化技術(shù)，以其代替機(jī)械攪拌、超聲、均質(zhì)等傳統(tǒng)乳化工藝用于復(fù)乳液的制備，以期得到粒徑均一的載藥超聲造影劑微囊。

1.實(shí)驗(yàn)方法

1.1超聲W/O/W復(fù)乳法制備PDLLA微泡造影劑條件研究

制備流程：超聲波作用下將內(nèi)水相用1ml醫(yī)用注射器勻速注入溶解有PDLLA和1.0%Span80的10ml外油相中形成W/O初乳液后，用10ml的醫(yī)用注射器勻速將W/O初乳液注入超聲波作用下的含有1.0%吐溫80乳化劑的外水相中形成W/O/W復(fù)乳液，將復(fù)乳液傾倒入1.0%PVA為穩(wěn)定劑的外水相中，40℃恒溫持續(xù)100rpm/min低速磁力攪拌過夜，使油相完全揮發(fā)，PDLLA固化成包膜，3000g離心10min，收集微泡沉淀，純凈水洗滌三次后，真空冷凍干燥。掃描電子顯微境下觀測(cè)微泡直徑及均勻度。

1.2超聲W/O/W復(fù)乳法結(jié)合SPG膜乳化器法制備PDLLA超聲微泡造影劑

制備流程：超聲波作用下將內(nèi)水相用1ml醫(yī)用注射器勻速注入溶解有PDLLA的10ml外油相中形成W/O初乳液后，將此初乳液傾入已清洗干凈的微膜乳化器壓力艙中，選擇孔徑為1.1m的SPG膜，以高壓高純氮?dú)馓峁毫ΓO(shè)置壓力參數(shù)分別為25kpa，50kpa，100kpa，打開循環(huán)泵使分散相1.0%PVA水溶液循環(huán)起來，打開通道閥，使初乳液勻速通過SPG膜進(jìn)入分散相中形成復(fù)乳液，復(fù)乳液經(jīng)40℃恒溫100rpm/min低速磁力攪拌過夜，使油相溶劑充分揮發(fā)，PDLLA固化成微膜。3000g離心10min收集微泡沉淀，真空冷凍干燥后，充入空氣，掃描電子顯微鏡檢測(cè)微泡粒徑及均勻度。

2.結(jié)果與分析

2.1復(fù)乳液制備超聲波功率？時(shí)間對(duì)微泡粒徑的影響

其他參數(shù)恒定的條件下，各復(fù)乳液超聲功率時(shí)間恒定為200W10S，微泡粒徑分布如圖1，可見復(fù)乳超聲功率時(shí)間與微泡粒徑大小緊密相關(guān)。

2.3超聲波初乳法結(jié)合微膜乳化法制備PDLLA微泡研究

根據(jù)超聲乳化法制備初乳液實(shí)驗(yàn)，選擇以80W？10S？10次的超聲方式制備10ml初乳液體系，再用高純氮?dú)鈱⒋顺跞橐簤哼^SPG微膜進(jìn)入分散液中獲得適當(dāng)粒徑的W/O/W復(fù)乳，揮發(fā)形成固化的微泡。制備的微泡粒徑大小主要與SPG膜的孔徑和氮?dú)鈮毫ο嚓P(guān)。在壓力較?。?5kpa）的條件下，初乳液不能順利的勻速通過SPG膜，雖然制備的微泡均勻度較好，但粒徑大小不甚理想，在壓力較大（100kpa）的條件下，制備的微泡均勻度較好，但粒徑偏大。在50kpa的壓力下制備的微泡，其粒徑大小及均勻度都較好。

3.討論與小結(jié)

通過超聲W/O/W復(fù)乳法制備超聲微泡造影劑的實(shí)驗(yàn)研究，本研究總結(jié)出超聲初乳法結(jié)合微膜乳化法制備PDLLA微泡方法制備的微泡粒徑均勻度上要高于超聲W/O/W復(fù)乳法制備的微泡。

由圖2可知，超聲初乳法結(jié)合微膜乳化法制備PDLLA超聲微泡造影劑粒徑分布較超聲W/O/W復(fù)乳法制備的超聲微泡造影劑均勻度高出很多。其中93.6%的微泡平均粒徑為4.124？m，6.4%的微泡平均粒徑為274nm，沒有微泡粒徑超過7m。

綜合超聲造影劑的兩個(gè)制備方法，本文研究認(rèn)為超聲乳法結(jié)合SPG微膜乳化法制備PDLLA超聲微泡造影劑具有更好的均勻度，適合于載藥超聲造影劑的制備。

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