王凌云 劉小芳 杜濤

摘要：目的：探討腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者唑來磷酸治療前后uNTx、sBAP的變化及臨床應用價值。方法：16例腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者，在唑來磷酸治療前后采用ELISA法測定uNTx、sBAP水平。結(jié)果：骨轉(zhuǎn)移組uNTx和sBAP明顯升高于，與無骨轉(zhuǎn)移組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。唑來磷酸治療1個月后，uNTx/Cr水平明顯降低。結(jié)論：骨代謝標記物uNTx、sBAP在骨轉(zhuǎn)移患者診斷及監(jiān)測唑來磷酸治療反應方面有一定的臨床價值。

關(guān)鍵詞：唑來磷酸；uNTx、sBAP；骨轉(zhuǎn)移瘤

基金項目：貴陽市科技計劃項目（筑科合同[2011103]4號）

骨轉(zhuǎn)移造成溶骨性或成骨性的骨破壞，骨的重塑過程顯著加快，引起骨代謝標志物水平的變化[1]。唑來磷酸作為第三代雙膦酸鹽復合物，是治療骨轉(zhuǎn)移腫瘤最常用的藥物。通過監(jiān)測反映破骨細胞活性的骨吸收標志物-尿I型膠原交聯(lián)氨基末端肽（uNTx）和反映成骨細胞活性的骨形成標志物-血清骨源性堿性磷酸酶（sBAP）在唑來磷酸治療前后的變化，探索骨代謝標志物作為評估唑來膦酸治療療效的臨床應用價值。

1 材料與方法

1.1 對象和分組：病理學和（或）細胞學證實的惡性腫瘤患者28例，33—82歲，診斷時中位年齡62.4歲；分組：1.骨轉(zhuǎn)移組16例，其中骨轉(zhuǎn)移組患者又分為唑來磷酸使用組和未使用組；2.無骨轉(zhuǎn)移組12例。兩組病例基線情況經(jīng)統(tǒng)計學檢驗無顯著差異。骨轉(zhuǎn)移組滿足：經(jīng)X線/CT/MRI證實為骨轉(zhuǎn)移。無骨轉(zhuǎn)移組：近1個月內(nèi)包括骨掃描在內(nèi)的影像學檢查未發(fā)現(xiàn)骨轉(zhuǎn)移病灶。

1.2 排除標準：①患有可影響骨代謝的疾病，如甲狀腺疾病、風濕性疾病等；②過去30天內(nèi)使用過雙膦酸鹽、降鈣素、雌激素等影響骨代謝藥物；③1月內(nèi)因骨痛而接受放射治療；④有口腔創(chuàng)傷、感染或近期計劃行口腔、頜骨手術(shù)患者。

1.3 骨代謝標記物檢測：采集患者空腹靜脈血2ml和中段尿5mL，離心后置于-70℃凍存待測。uNTx試劑盒購自美國Ostex international公司，sBAP試劑盒購自Quidel公司。應用酶聯(lián)免疫吸附法檢測uNTx和sBAP。全自動生化分析儀測定同一標本尿肌酐（Cr），uNTx檢測結(jié)果經(jīng)尿Cr校正（uNTx/Cr）。uNTx/Cr正常值[2]：成年人<65nmol/mmol；sBAP正常值：成年男性≤73IU/L，成年女性≤44IU/L。

1.4 藥物和治療方法：骨轉(zhuǎn)移組患者給予唑來膦酸4mg+生理鹽水100ml稀釋后，靜脈輸注15 min。每4周1次。同時每天口服補充鈣（500mg）和維生素D（400U）。

1.5 統(tǒng)計學處理：應用SPSS10.0軟件包，數(shù)據(jù)均以x±s表示，各組間的比較采用t 檢驗分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

表1 骨轉(zhuǎn)移組uNTx和sBAP與無骨轉(zhuǎn)移組的比較（ x±s）

注：與無骨轉(zhuǎn)移組比較，★ P < 0.05

從表1結(jié)果顯示：與無骨轉(zhuǎn)移組比較，骨轉(zhuǎn)移組uNTx/Cr和sBAP水平均明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義（二者uNTx/Cr比較t=2.2415， P=0.027；sBAP比較t=1.9864，P=0.039）。

表2 唑來磷酸治療前與治療后1月uNTx和sBAP水平比較（ x±s）

注：治療前后比較，★ P < 0.05 ▲P > 0.05

從表2結(jié)果顯示：與治療前相比，唑來膦酸輸注后1月，uNTx/Cr水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（t=2.4106， P=0.006）；sBAP水平較治療前稍降低，但差異無統(tǒng)計學意義（t=1.0375， P=0.133）

3 討論

惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移時產(chǎn)生骨破壞，伴隨這一過程中產(chǎn)生大量的蛋白質(zhì)或骨基質(zhì)降解產(chǎn)物即成為與骨代謝密切相關(guān)的生化標志物[3]。骨代謝標志物包括骨形成標志物和骨吸收標志物。uNTx是膠原纖維在骨質(zhì)吸收過程中降解產(chǎn)生，尿中穩(wěn)定的骨質(zhì)溶解最終產(chǎn)物，反映破骨細胞的功能和活性，是骨破壞特異性最高的骨代謝標志物[4]。血清骨源性堿性磷酸酶（sBAP）水平上升認為是骨形成速率加快，為特異性反映成骨細胞活性和骨形成的標志物。

本研究顯示uNTx和sBAP水平在骨轉(zhuǎn)移組明顯高于無骨轉(zhuǎn)移組，差異有統(tǒng)計學意義，表明一旦發(fā)生腫瘤骨轉(zhuǎn)移，不可能單一激活破骨細胞或成骨細胞，必定是影響整個網(wǎng)絡[5]，從而導致骨吸收標志物和骨形成標志物均會發(fā)生變化。uNTx和sBAP作為一種骨代謝的反映指標，在骨轉(zhuǎn)移瘤患者中水平增高，提示惡性腫瘤患者早期聯(lián)合檢查uNTx和sBAP水平，為骨轉(zhuǎn)移瘤及時診斷提供了一種簡便、價廉的手段，有一定的臨床價值。

雙膦酸鹽通過抑制破骨細胞介導的過量骨吸收，降低骨相關(guān)事件（SREs）。部分雙膦酸鹽有直接抗腫瘤作用，并可誘導腫瘤細胞凋亡 。本研究顯示，應用唑來磷酸后，uNTx水平較使用前明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義，然而sBAP水平變化不明顯。表明唑來磷酸主要通過調(diào)節(jié)破骨細胞活性產(chǎn)生作用，抑制骨重吸收，使骨標志物濃度降低，uNTx可作為評價唑來磷酸抗骨吸收療效方面的有臨床價值的生化標志物，早于影像學所發(fā)現(xiàn)的形態(tài)學改變。本研究由于病例數(shù)量和觀察時間的限制，未能得出uNTx和sBAP在預測骨轉(zhuǎn)移及監(jiān)測唑來磷酸療效的參考范圍。有待于擴大樣本量進一步研究。

參考文獻：

[1] Rodoman GD. Mechnaisms of bone metastasis[J]. N Engl J Med， 2004， 350（16）： 1655-1664.

[2] Chirgwin JM，Guise TA.Molecular mechanisms of tumor-bone interactions in osteolytic metastases[J].Crit Rev Eukaryot Gene Expr，2000，10（2）： 159-178.

[3] Ramankulov A，Lein M，Kristiansen G，et a1.Plasma osteopontin in comparison with bone markers as indicator of bone metastasis and survival outcome in patients with prostate cacer[J].Prostate，2007，67（3）：330—340.

[4] Clinea GA，Guise TA.Hypercalcaemia of malignancy and basic research on mechanisms responsible for osteolytic and osteoblastic metastasis to bone[J].Endoer Relat Cancer.2005，12（3）：549-583.

[5] Yin JJ， Pollock CB， Kelly K. Mechanisms of cancer meatsatsis to the bone[J]. Cell Res， 2005， 15（1）： 57-62.