朱 晴，羅惠莉,2，吳根義,2，李雋永，張文娟

（1. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院，湖南 長(zhǎng)沙410128；2. 湖南省環(huán)境保護(hù)畜禽養(yǎng)殖與農(nóng)業(yè)種植污染控制工程技術(shù)中心，湖南 長(zhǎng)沙410128）

嘧菌酯是一種高效、廣譜、新型殺菌劑，具有快速殺菌和持效期長(zhǎng)的雙重特性，同時(shí)該殺菌劑對(duì)人類(lèi)和環(huán)境的毒性相對(duì)較低，大鼠急性經(jīng)口LD50＞5 000 mg/kg。因此，被廣泛用于谷物、果蔬等作物的病害防治及其儲(chǔ)藏保鮮[1-3]。

嘧菌酯，中文名稱(chēng)（E）-{2-[6-（2-氰基苯氧基）嘧啶-4-基氧]苯基}-3-甲氧基丙烯酸甲酯，原藥為類(lèi)白色至黃色固體，微溶于己烷、正辛醇，溶于甲醇、甲苯、丙酮，易溶于乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷，20℃時(shí)溶解度為6 mg/L，相對(duì)密度為1.34 g/cm3，蒸汽壓1.1×10-7MPa，沸點(diǎn)為581.3℃，水溶液中光解半衰期為2 周，對(duì)水解穩(wěn)定[4-5]。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)嘧菌酯殘留檢測(cè)的方法主要有氣相色譜-氮磷檢測(cè)法、氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)法、液相色譜檢測(cè)法等。草莓、黃瓜等果蔬的嘧菌酯殘留檢測(cè)方法已有報(bào)道[6]，但柑橘中的嘧菌酯殘留檢測(cè)未見(jiàn)報(bào)道。因此，擬通過(guò)氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)法，對(duì)嘧菌酯懸浮劑在橘園土壤中的殘留進(jìn)行檢測(cè)，以明確其在柑橘園土壤中的消解動(dòng)態(tài)及安全施用濃度，為柑橘生產(chǎn)安全用藥提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試土樣 供試土樣分別采自湖南、貴州和浙江試驗(yàn)區(qū)，去掉植物殘?bào)w、石砂等，自然風(fēng)干后過(guò)20目篩，分別裝入潔凈的樣品袋中，貼好標(biāo)簽，備用。

1.1.2 主要儀器設(shè)備 Agilent-6890 型氣相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司生產(chǎn)）；RE-2000 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；SHZ-DⅢ循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；ZHWY-2102 恒溫振動(dòng)箱（上海自城分析儀器制造有限公司）；AM-9 型組織搗碎機(jī)；布氏漏斗；分液漏斗等實(shí)驗(yàn)室常用玻璃儀器。

1.1.3 主要試劑 準(zhǔn)確稱(chēng)取嘧菌酯標(biāo)樣（純度99.0%）0.050 4 g，用1%丙酮-正己烷混合溶劑定容至100 m L，配制成嘧菌酯濃度為500 mg/L 的母液，保存于5℃的冰箱中備用。丙酮、二氯甲烷、正己烷均為分析純。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 土樣中嘧菌酯的提取 準(zhǔn)確稱(chēng)取待測(cè)土樣10.0 g，置于250 m L 具塞三角瓶中，加入30 m L 的丙酮和二氯甲烷的混合試劑（丙酮︰二氯甲烷=1︰5），放入30℃的恒溫振蕩箱振蕩1 h 進(jìn)行提?。粶p壓抽濾后的濾渣再提取1 次；將兩次濾液合并，置于500 m L梨形分液漏斗中，加入10 m L 蒸餾水，進(jìn)行萃取，收集下層液；上層液另加入30 m L 二氯甲烷，再次萃取，收集兩次萃取的下層液；經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至近干，用1%丙酮-正己烷溶劑定容至10 m L，待進(jìn)氣相色譜儀測(cè)定。

1.2.2 氣相色譜儀檢測(cè)條件 色譜柱HP-5，30 m×0.25 m；ECD（電子捕獲）檢測(cè)器；色譜柱溫280℃；進(jìn)樣口溫度300℃；檢測(cè)器溫度300℃；載氣為氮?dú)猓兌取?9.99%；流速3 m L/m in；尾吹流量30 m L/m in；進(jìn)樣量1 μL；無(wú)分流進(jìn)樣。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 采用定量分析的外標(biāo)分析法，取已經(jīng)配制的濃度為500 mg/L 的嘧菌酯母液，用稀釋法配制濃度為0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 mg/L的嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣量1 μL，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.4 添加回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 用未施用過(guò)嘧菌酯農(nóng)藥的空白土壤樣品進(jìn)行3個(gè)濃度梯度的添加回收率試驗(yàn)，添加嘧菌酯后在土壤樣品中的濃度分別為0.01、0.10、1.00 mg/kg。

1.2.5 土壤樣品中嘧菌酯殘留動(dòng)態(tài)檢測(cè) 在貴州、湖南、浙江3 地研究了50%嘧菌酯懸浮劑在橘園土壤中殘留動(dòng)態(tài)規(guī)律。嘧菌酯懸浮劑施用濃度1 000 mg/kg（以有效成分計(jì)），按1.2.1 中的方法對(duì)采集的樣品進(jìn)行處理，處理過(guò)的樣品進(jìn)氣相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析。柑橘土壤中嘧菌酯的殘留含量R（mg/kg）=（V·C）/m，其 中：V 為 樣 品 體 積（m L），C 為 樣 品 檢 出 濃 度（μg/m L），m 為樣品重（g）。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性回歸方程及最小檢出量

從圖1 中可以看出，嘧菌酯在0.01～5.00 mg/L 范圍內(nèi)，峰面積與嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mg/L）呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為y=47 161x-3 793.5，其相關(guān)系數(shù)R2=0.997 6。

在1.2.2 的檢測(cè)條件下，嘧菌酯最小檢出量為1×10-11g，相對(duì)保留時(shí)間為4.86 m in。圖2 為1 mg/L 嘧菌酯標(biāo)樣的圖譜。

2.2 添加回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

圖1 嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 1 mg/L 嘧菌酯標(biāo)樣圖譜

從表1 可以看出，嘧菌酯在空白樣品中添加回收率為98.3%～105.4%，變異系數(shù)為5%～7.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.15%～7.15%，符合農(nóng)藥殘留分析方法的要求。

表1 嘧菌酯在土壤中的添加回收率

2.3 土壤樣品中嘧菌酯殘留的消解動(dòng)態(tài)

由表2 可知，施藥2 h 后嘧菌酯在貴州橘園土中殘留量為7.589 7 mg/kg，施藥后42 d 降解率為91.65%，消解方程為y=4.685 4e-0.0495x，半衰期T1/2=14.0 d；施藥2 h后嘧菌酯在湖南橘園土中殘留15.463 3 mg/kg，施藥后42 d 時(shí)，降解率為89.96%，消解方程為y=9.223 4e-0.0525x，半衰期T1/2=13.2 d；施藥2 h 后嘧菌酯在浙江橘園土中的殘留量為6.560 3 mg/kg，在施藥后42 d 時(shí)，降解率為95.1%，消解方程為y=2.988 5e-0.0593x，半衰期T1/2=11.6 d。圖3 為空白土樣和試驗(yàn)土樣的色譜圖。

3 結(jié)論

試驗(yàn)建立了氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)法測(cè)定嘧菌酯殘留的方法，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程為y=47161x-3 793.5，其相關(guān)系數(shù)R2=0.997 6；嘧菌酯的最小檢出量為1×10-11g，相對(duì)保留時(shí)間為4.86 m in；添加回收率為98.3%～105.4%，變異系數(shù)為5.0%～7.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.15%～7.15%，均能達(dá)到我國(guó)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求。對(duì)貴州、湖南、浙江3 地柑橘園土壤中嘧菌酯的消解動(dòng)態(tài)研究表明，湖南、浙江、貴州柑橘園土壤中嘧菌酯的消解半衰期分別為14.0、13.2、11.6 d。這表明在自然條件下，嘧菌酯在土壤中消解較快，不會(huì)造成土壤中累積性殘留污染。

表2 嘧菌酯在橘園土壤中動(dòng)態(tài)殘留結(jié)果 （mg/kg）

圖3 土壤樣品中嘧菌酯的氣相色譜圖

[1]吳 潤(rùn).嘧菌酯在水稻和土壤中的殘留分析方法研究[J].安徽化工，2013，39（4）：85-87.

[2]韓 波，姚安慶，吳慧明，等.嘧菌酯在柑橘和土壤中殘留動(dòng)態(tài)[J].農(nóng)藥，2009，48（12）：899-901.

[3]陳 濤，劉永波，崔 磊.嘧菌酯殘留量的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定研究[J].中國(guó)新技術(shù)新產(chǎn)品，2010，（10）：6.

[4]Angioni A，Schirra M，Garau M，et a1.Residues of Azoxystrobin，F(xiàn)enhexamid and Pyrimethanil in Strawberry following Field Treatments and the Effectof DomesticWashing[J].Food Additives&Contaminants，2004，2l（11）：1065-1070.

[5]ChristensenHB，GranbyK.Method Validation forStrobillurin Fungicides in Cereals and Fruit[J].Food Additives&Contaminants，2001，18（10）：866-874.

[6]楊振華，魏朝俊，賈臨芳，等.嘧菌酯在草莓與土壤中的殘留動(dòng)態(tài)研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2013，32（4）：697-700.