王勝德危芬蘭

（1. 江西省鷹潭市人民醫(yī)院鐵路分院腫瘤科 鷹潭 335000；2. 江西省鷹潭市人民醫(yī)院腫瘤科 鷹潭 335000）

HIF-1α表達(dá)對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者化療敏感性的影響*

王勝德1**危芬蘭2

（1. 江西省鷹潭市人民醫(yī)院鐵路分院腫瘤科 鷹潭 335000；2. 江西省鷹潭市人民醫(yī)院腫瘤科 鷹潭 335000）

目的：探討HIF-1a表達(dá)對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的化療敏感性。方法：選取我院收治的晚期NSCLC化療患者92例，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)HIF-1a的表達(dá)，分析HIF-1a表達(dá)與化療療效的關(guān)系。結(jié)果：HIF-1a主要表達(dá)于肺癌細(xì)胞胞核及胞質(zhì)，呈明顯的異質(zhì)性；HIF-1a不同表達(dá)患者間化療有效率和疾病控制率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：HIF-1a的表達(dá)狀態(tài)與化療近期療效無(wú)明顯相關(guān)性，尚不能確定為晚期NSCLC患者化療療效的預(yù)測(cè)因子。

缺氧誘導(dǎo)因子-1a 非小細(xì)胞肺癌 化療 敏感性

肺癌是全球累積危險(xiǎn)性最高的惡性腫瘤，其在所有的惡性腫瘤中預(yù)后最差，而其中超過(guò)80%的肺癌為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）[1]。惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)迅速、代謝快，腫瘤組織血流灌注相對(duì)減少，造成腫瘤內(nèi)局部組織有顯著的缺氧區(qū)域 ，且腫瘤細(xì)胞缺氧程度可在一定程度上反應(yīng)惡性程度及局部復(fù)發(fā)情況[2]。本研究通過(guò)檢測(cè)晚期NSCLC患者缺氧誘導(dǎo)因子-1a（hypoxia induction factor-1a，HIF-1a）表達(dá)水平，探討其與化療療效的相關(guān)性。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取我院2009年4月-2011年4月收治的非小細(xì)胞肺癌患者92例，按2003年第六版美國(guó)癌癥聯(lián)合委員會(huì)（American Joint Committee on Cancer，AJCC）對(duì)非小細(xì)胞肺癌的分期法[3]均為Ⅳ期，經(jīng)支氣管鏡取組織病理確診，入組前未行放療及化療。排除低氧性疾病，如慢性阻塞性肺病、肺心病、哮喘急性發(fā)作、呼吸衰竭等。其中男58例，女34例；年齡39~75歲，平均（55.8±6.2）歲；中鱗癌48例，腺癌38例，大細(xì)胞癌6例；肺內(nèi)轉(zhuǎn)移42例，肝臟轉(zhuǎn)移22例，腎上腺轉(zhuǎn)移12例，遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例，軟組織轉(zhuǎn)移4例。

1.2 方法

所有患者化療采用吉西他濱聯(lián)合順鉑的方案：吉西他濱1000 mg/m2，靜脈滴注30~60 min，第l、8、15天；順鉑100 mg/m2，靜脈滴注，30~60 min，每28 d重復(fù)。化療期間常規(guī)給予水化和止吐治療，并嚴(yán)密觀測(cè)患者血常規(guī)，若白細(xì)胞降低至（1.0~2.0）×109/L和（或）血小板降低至（50~75）×109/L時(shí)，則將吉西他濱劑量減少25%。根據(jù)患者情況順利給予6~8個(gè)療程后判定療效。

1.3 觀察指標(biāo)

采用免疫組化法檢測(cè)患者非小細(xì)胞肺癌組織中HIF-1a的表達(dá)情況，鼠抗人HIF-1a單克隆抗體和免疫組化檢測(cè)盒均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。以PBS代替一抗為陰性對(duì)照，已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn)[4]：綜合染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行評(píng)定：① 著色強(qiáng)度根據(jù)無(wú)著色、淺黃色、棕色、棕褐色分別為0~3分；② 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量：觀察10個(gè)高倍鏡視野（10×40倍）陽(yáng)性細(xì)胞所占比例，≤5%為0分，6%~25%為1 分，26%~50% 為2分，51%~75%為3分，≥76%為4分。表達(dá)強(qiáng)度為兩項(xiàng)計(jì)分乘積：陰性（－）：0~1分，弱陽(yáng)性（＋）：4~7分，陽(yáng)性（＋＋）：5~8分，強(qiáng)陽(yáng)性（＋＋＋）：＞8分。

1.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn)[5]

完全緩解（complete response，CR）：所有病灶完全消失；部分緩解（partial response，PR）：腫塊縮小≥50%；穩(wěn)定(stable disease，SD)：腫塊縮?。?0%或增大＜25%；進(jìn)展（pmgressive disease，PD）：一個(gè)或多個(gè)病灶增大≥25%或出現(xiàn)新的病變。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有顯著性意義。

2 結(jié)果

HIF-1a在NSCLC組織中主要表達(dá)于胞核，表現(xiàn)為程度不等的染色，呈黃色或棕黃色顆粒，胞質(zhì)中偶有表達(dá)。92例患者中HIF-1a陽(yáng)性54例，陽(yáng)性表達(dá)率為58.70%，其中化療有效率為40.74%，疾病控制率為77.78%；HIF-1a陰性38例，陽(yáng)性表達(dá)率為41.30%，其中化療有效率為42.11%，疾病控制率為73.68%。不同表達(dá)患者間化療有效率和疾病控制率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表1）。

表1 HIF-1a在NSCLC組織中的表達(dá)[例（%）]

3 討論

目前，晚期NSCLC患者的化療藥物與腫瘤細(xì)胞基因及細(xì)胞因子之間可發(fā)生相互作用，基因和各種細(xì)胞因子的表達(dá)情況與臨床治療療效密切相關(guān)。乏氧是腫瘤細(xì)胞的基本特征，其可影響腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂、增生、增殖、轉(zhuǎn)移以及對(duì)化療、放療的敏感性。其中造成對(duì)多種化療藥物耐藥的機(jī)制為大多數(shù)抗癌藥物主要作用于快速分裂相的細(xì)胞，而缺氧使腫瘤細(xì)胞停滯在G1期，對(duì)化療藥物不敏感[6]。此外缺氧增加細(xì)胞內(nèi)參與解毒和藥物代謝的酶類(lèi)表達(dá)，加快化療藥物的代謝排出，從而降低了治療效果。

HIF-1a是人體細(xì)胞內(nèi)的一類(lèi)介導(dǎo)缺氧適應(yīng)性反應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子，其結(jié)構(gòu)中的氧依賴(lài)性降解結(jié)構(gòu)域成為細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)微環(huán)境中氧變化的靈敏感受器。HIF-1a可與核內(nèi)的多種基因轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子上游的乏氧反應(yīng)元件結(jié)合，其在維持腫瘤細(xì)胞的新血管生成、能量代謝、促進(jìn)腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移中具有重要作用[7-8]。HIF-1a是瘤內(nèi)乏氧的內(nèi)源性標(biāo)記物，正常細(xì)胞中HIF-1a被泛素化蛋白水解酶降解而保持較低的穩(wěn)定濃度。當(dāng)細(xì)胞處于乏氧狀態(tài)時(shí)，HIF-1a泛素化降解過(guò)程減少導(dǎo)致其堆積在細(xì)胞漿，并進(jìn)入細(xì)胞核與核內(nèi)的多種基因轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子上游的乏氧反應(yīng)元件結(jié)合，表達(dá)迅速增強(qiáng)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的局部浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、細(xì)胞過(guò)度和永久性增殖、細(xì)胞增殖周期比率改變、腫瘤新生血管的生成等，并因氧氣與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏而使細(xì)胞抵抗凋亡[9-10]。相關(guān)研究證實(shí)，在NSCLC組織中，腫瘤迅速增殖引起的局部缺氧和抑癌基因突變均可能使腫瘤組織中的HIF-1a呈過(guò)度表達(dá)，而腫瘤組織內(nèi)的基質(zhì)細(xì)胞和鄰近的正常組織則未見(jiàn)HIF-1α的表達(dá)[11-12]。HIF-1a表達(dá)預(yù)示腫瘤化療抵抗，其誘導(dǎo)產(chǎn)物如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、碳酸纖酶、乳酸脫氫酶、等均直接與化療抵抗相關(guān)[13]。

本研究結(jié)果顯示，HIF-1a主要表達(dá)于肺癌細(xì)胞胞核及胞質(zhì)，呈明顯的異質(zhì)性。但HIF-1a不同表達(dá)患者間化療有效率和疾病控制率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此表明，HIF-1a的表達(dá)狀態(tài)與化療近期療效無(wú)明顯相關(guān)性，尚不能確定為晚期NSCLC患者化療療效的預(yù)測(cè)因子。考慮與研究樣本偏小有關(guān)，具體相關(guān)性尚有待于進(jìn)一步探討。

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Effect of HIF-1α expression on the chemotherapeutic sensitivity of patients with advanced non small cell lung cancer*

WANG Shengde1**, WEI Fenlan2
(1. Department of Oncology, Railway Branch, The People’s Hospital of Yingtan City, Jiangxi Province, Yingtan 335000, China;
2. Department of Oncology, The People’s Hospital of Yingtan City, Jiangxi Province, Yingtan 335000, China)

Objective: To investigate the effect of the expression of HIF-1a on the chemotherapeutic sensitivity of patients with advanced non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods: Ninety-two cases of patients with advanced NSCLC chemotherapy in our hospital were selected. The expression of HIF-1a was detected by immunohistochemistry and the relationship between the expression of HIF-1a and the efficacy of chemotherapy was analyzed. Results: HIF-1a was mainly expressed in the cytoplasm and nucleus of lung cancer cells, and its expression showed significant heterogeneity. There was no significant difference in the effective rate and the disease control rate between patients with different expression (P>0.05). Conclusion: The status of HIF-1a expression was not correlated with the short-term efficacy of chemotherapy, and is not a predictor for the efficacy of chemotherapy in patients with advanced NSCLC.

hypoxia inducible factor-1a; non small cell lung cancer; chemotherapy; sensitivity

醫(yī)藥論壇

R730.23; R734.2

B

1006-1533(2015)17-0041-02

2015年江西省衛(wèi)生計(jì)生委科技計(jì)劃（項(xiàng)目編號(hào)：20151555）

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王勝德，主治醫(yī)師。研究方向：非小細(xì)胞癌。E-mail：wsd20021290@163.com

2015-04-26）