沈赤,毛健,3,*,陳永泉,孟祥勇,3,艾斯卡爾·艾拉提,3
(1.江南大學(xué)食品學(xué)院,江蘇無錫214122;2.江南大學(xué)糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國家工程實驗室,江蘇無錫214122;3.國家黃酒工程技術(shù)研究中心,浙江紹興312000)
黃酒多糖對免疫缺陷小鼠血清免疫相關(guān)因子的影響
沈赤1,2,毛健1,2,3,*,陳永泉1,孟祥勇1,2,3,艾斯卡爾·艾拉提1,2,3
(1.江南大學(xué)食品學(xué)院,江蘇無錫214122;2.江南大學(xué)糧食發(fā)酵工藝與技術(shù)國家工程實驗室,江蘇無錫214122;3.國家黃酒工程技術(shù)研究中心,浙江紹興312000)
研究黃酒多糖對免疫缺陷小鼠血清免疫因子的影響。選擇健康昆明小鼠,適應(yīng)性喂養(yǎng)4d后,分成5組:空白組、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CY)模型組、CY+黃酒多糖(低、中、高劑量)組,每組10只。黃酒多糖按高、中、低3個劑量(50、100、200mg/(kg·d),均以體質(zhì)量計)給小鼠灌胃,1次/d,連續(xù)給藥14d,空白組和CY模型組給予生理鹽水。第19天除空白組,其余4組腹腔注射環(huán)磷酰胺,連續(xù)4d。處死小鼠,眼眶取血,測定血清中白細(xì)胞介素-6(interleukin6,IL-6)、干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、補(bǔ)體(C3、C4)水平。結(jié)果表明,與CY組相比,黃酒多糖能提高IL-6、IFN-γ、TNF-α、免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)和補(bǔ)體(C3、C4)水平,并且隨著低中高劑量效果依次增加。由此說明,黃酒多糖能提高免疫缺陷小鼠的免疫功能。
黃酒多糖;免疫缺陷小鼠;環(huán)磷酰胺;免疫活性
免疫反應(yīng)是由免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫分子組成的機(jī)體免疫系統(tǒng)識別“自身”與“異己”抗原[1-2]的過程,并由此帶來許多生理或病理性反應(yīng)。在正常情況下,免疫系統(tǒng)對自身抗原形成天然免疫耐受,對“非己”抗原產(chǎn)生排異作用,維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定起到免疫保護(hù)作用[3-4]。但是,免疫失調(diào)也會對機(jī)體產(chǎn)生有害反應(yīng),繼而引發(fā)超敏反應(yīng)、自身免疫性疾病等。
多糖類物質(zhì)具有的生物活性使其成為研究熱點(diǎn)。研究表明,多糖具有免疫調(diào)節(jié)[5]、抗腫瘤[6]、抗氧化[7]、抗輻射[8]、降血糖/血脂[9]等作用,其中多糖的免疫調(diào)節(jié)是多糖活性研究中的一個重點(diǎn)[4,10]。多糖的免疫調(diào)節(jié)作用是通過多種途徑激活免疫系統(tǒng),提高機(jī)體的特異性或非特異性免疫功能[11]。免疫細(xì)胞種類繁多,泛指所有參與免疫應(yīng)答的細(xì)胞及其前體,部分在免疫應(yīng)答中起協(xié)助、調(diào)節(jié)作用,部分直接發(fā)揮吞噬、殺傷等免疫作用,免疫細(xì)胞主要包括單核巨吞噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell,NK)細(xì)胞、粒細(xì)胞、紅細(xì)胞等[12-14]。靈芝多糖通過對巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的活性誘導(dǎo),從而增強(qiáng)NK的功能[15];乳酸菌胞外多糖除能夠使T淋巴細(xì)胞的免疫作用增強(qiáng)外,還有利于免疫系統(tǒng)對腫瘤的監(jiān)測作用[16];香菇多糖不僅可使NK和T淋巴細(xì)胞活力得到增強(qiáng),促進(jìn)白介素-2的產(chǎn)生,還可以使血單核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的免疫活力升高[4]。細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主有序死亡,在這個過程中免疫系統(tǒng)能夠加速衰老和損傷細(xì)胞的清除。對于腫瘤細(xì)胞,多糖不僅能直接抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,而且還能誘導(dǎo)并加速腫瘤細(xì)胞的凋亡。
有研究表明[17],黃酒能提高小鼠的脾臟指數(shù)、提高溶血素水平,促進(jìn)小鼠的體液免疫和非特異性免疫作用。但是目前鮮有黃酒多糖(polysaccharides from Chinese rice wine,CRWP)尤其黃酒多糖免疫作用的報道。為了探討黃酒多糖是否具有免疫調(diào)節(jié)作用,本實驗采用環(huán)磷酰胺免疫缺陷型小鼠作為模型,給予小鼠不同劑量的黃酒多糖,通過小鼠免疫指標(biāo)(如免疫器官指數(shù)、免疫細(xì)胞和免疫因子)來評價黃酒多糖的免疫活性。
1.1材料與試劑
黃酒多糖實驗室自制[18]。
環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CY)、刀豆蛋白(ConA)、白細(xì)胞介素-6(interleukin6,IL-6)、干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)ELISA試劑盒美國Sigma-Aldrich公司;免疫球蛋白試劑盒(IgA、IgG、IgM)、補(bǔ)體試劑盒(C3、C4)美國Ortho-Clinical Diagnostics公司。
1.2儀器與設(shè)備
XP2001S精密天平梅特勒-托利多(上海)儀器有限公司;79-3型恒溫磁力攪拌器上海司樂儀器廠;Thermo3111二氧化碳培養(yǎng)箱美國Thermo Fisher Scientific公司;SpectraMax M5酶標(biāo)儀美國Molecular Devices公司;SN-CJ-ZF型雙人雙面凈化工作臺蘇州凈化設(shè)備有限公司;UV2600紫外-可見分光光度計上海天美科學(xué)儀器有限公司;日立7100全自動生化分析儀日本日立公司;24、96孔培養(yǎng)板賽業(yè)生物科技有限公司;BXM-30R立式壓力蒸汽滅菌器、Centrufuge5415R型高速冷凍離心機(jī)德國Eppendorf公司。
1.3方法
1.3.1動物處理及分組
健康昆明種成年小鼠,雌雄各半,由蘇州大學(xué)實驗動物中心提供,生產(chǎn)許可證號:XCYK(蘇)2002-0008,使用許可證號:SYXK(蘇)2002-0037,體質(zhì)量(20.0±2.0)g,分組后每只老鼠掛牌編號。根據(jù)實驗檢測指標(biāo),分批飼養(yǎng)小鼠,并且在適應(yīng)性喂養(yǎng)4 d后隨機(jī)分為5 組,空白組、CY模型組、CY+低劑量黃酒多糖組、CY+中劑量黃酒多糖組、CY+高劑量黃酒多糖組,每組10 只。每周空腹稱質(zhì)量一次,黃酒多糖用水溶解后,按3 個不同多糖劑量(按體質(zhì)量計)50、100、200 mg/(kg·d)給小鼠灌胃,連續(xù)給藥14 d,空白組和CY模型組給予生理鹽水,自由采食。第19天除空白組其余4 組開始腹腔注射環(huán)磷酰胺100 mg/(kg·d),連續(xù)4 d。
1.3.2免疫缺陷小鼠免疫因子的測定
小鼠處理結(jié)束后,空腹稱質(zhì)量,眼眶取血,血樣于4 ℃靜置12 h,析出血清后,于4 ℃、3 000 r/min離心10 min,收集血清分裝于Eppendorf管中,于20 ℃保存。取保存的血清,按照試劑盒說明書測定免疫缺陷小鼠免疫因子。其中細(xì)胞因子IL-6、IFN-γ、TNF-α含量均以O(shè)D450nm值來表征。
1.4統(tǒng)計分析
2.1黃酒多糖對免疫缺陷小鼠血清細(xì)胞因子的影響
2.1.1黃酒多糖對免疫缺陷小鼠IL-6含量的影響
IL-6是一類分子質(zhì)量為21~28kD的多功能蛋白質(zhì),由184個氨基酸組成。作為一種多效性細(xì)胞因子,IL-6在多種細(xì)胞功能調(diào)節(jié)方面具有重要的作用,包括細(xì)胞分化、增殖、免疫防御、造血功能、神經(jīng)系統(tǒng)等[13,19]。IL-6與腫瘤細(xì)胞的生長、增殖密切相關(guān),通過對腫瘤細(xì)胞的黏附性、活動力、增殖以及特異性抗原的表達(dá),控制腫瘤的發(fā)展[5]。若IL-6水平降低,則會引起免疫系統(tǒng)中某個節(jié)點(diǎn)或者多個節(jié)點(diǎn)發(fā)生障礙,從而導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降[5]。因此,本實驗通過測定小鼠血清中IL-6的含量來評價黃酒多糖對免疫缺陷小鼠免疫功能的影響。
表1 黃酒多糖對免疫缺陷小鼠IL-6含量的影響Table 1 Effect of polysaccharides from Chinese rice wine on serum IL-6 of immunodeficient mice
如表1所示,與空白組相比,模型組小鼠血清中IL-6的含量較低,表明環(huán)磷酰胺的注射會使正常生長小鼠血清中IL-6的含量降低,引起小鼠免疫系統(tǒng)功能紊亂,造成機(jī)體免疫力下降。多糖+CY組小鼠血清中IL-6含量雖低于空白組小鼠,但仍明顯高于模型組小鼠。黃酒多糖劑量為50mg/(kg·d)時,免疫缺陷小鼠血清中IL-6含量(OD450nm=0.115±0.013)為模型小鼠血清IL-6含量(0.082±0.011)的1.40倍,是空白組小鼠血清IL-6含量(OD450nm=0.171±0.008)的67.25%;黃酒多糖劑量為200mg/(kg·d)時,免疫缺陷小鼠血清中IL-6含量(OD450nm=0.152±0.014)為模型小鼠血清中IL-6含量(0.082±0.011)的1.85倍和空白組小鼠血清IL-6含量(OD450nm=0.171±0.008)的88.89%。由此說明,黃酒多糖能夠抑制環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠血清中細(xì)胞因子IL-6含量的下降,明顯改善環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫缺陷小鼠的免疫功能,并且黃酒多糖劑量與免疫缺陷小鼠血清中細(xì)胞因子IL-6含量之間存在一種正相關(guān)的關(guān)系。
2.1.2黃酒多糖對免疫缺陷小鼠IFN-γ含量的影響
IFN-γ是一種多種功能活性蛋白質(zhì),由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生[5]。IFN-γ可通過激活單核吞噬細(xì)胞殺滅微生物及腫瘤細(xì)胞,激活中性粒細(xì)胞和NK細(xì)胞,強(qiáng)化NK細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷活性,促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能,抑制自分泌生長因子的形成和活性,抑制宿主向腫瘤細(xì)胞提供重要的營養(yǎng)因子或生長因子,從而造成腫瘤細(xì)胞的凋亡[20-21];此外,IFN-γ還能夠抑制腫瘤基因的表達(dá),抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成,阻礙腫瘤細(xì)胞的增殖[20]。一旦機(jī)體發(fā)生腫瘤,輔助性T細(xì)胞(helper T cell,Th1)功能降低,IFN-γ產(chǎn)生減少。因此,本實驗通過測定小鼠血清中IFN-γ的含量來評價黃酒多糖對免疫缺陷小鼠免疫功能的影響,結(jié)果如表2所示。
表2黃酒多糖對免疫缺陷小鼠IFN-IFN-γ含量的影響Table2Effect of polysaccharides from Chinese rice wine on serum IFN-IFN-γof immunodeficient micemice
由表2可知,與空白組相比,模型組小鼠血清中IFN-γ的含量較低,表明環(huán)磷酰胺的注射會使正常生長小鼠血清中IFN-γ的含量降低,引起小鼠免疫系統(tǒng)功能紊亂,造成機(jī)體免疫力下降。對于多糖+CY組小鼠而言,雖然其血清中IFN-γ含量低于空白組小鼠,但是仍明顯高于模型組小鼠血清中IFN-γ含量。這表明黃酒多糖能夠抑制環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠血清中細(xì)胞因子IFN-γ含量的下降,明能夠顯改善免疫缺陷小鼠的免疫功能。對于不同劑量黃酒多糖+CY組而言,當(dāng)劑量為50、100、200mg/(kg·d)時,其IFN-γ含量(OD450nm)分別為0.056±0.006、0.075±0.012、0.082±0.013。說明隨著黃酒多糖劑量的增加,免疫缺陷小鼠血清中IFN-γ的含量不斷增加,并且黃酒多糖劑量與免疫缺陷小鼠血清中細(xì)胞因子IFN-γ含量之間存在一種正相關(guān)關(guān)系。
2.1.3黃酒多糖對免疫缺陷小鼠TNF-α含量的影響
TNF-α是血清中一種能使腫瘤發(fā)生出血性壞死的物質(zhì),主要由巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞組成[13]。TNF-α在生物學(xué)上應(yīng)用廣泛,不僅可以對腫瘤細(xì)胞造成損傷、強(qiáng)化中性粒細(xì)胞的吞噬能力,還可以增加過氧化物陰離子產(chǎn)生,刺激細(xì)胞脫顆粒和分泌髓過氧化物酶、抗感染,并誘導(dǎo)肝細(xì)胞急性期蛋白的合成[22]。
表3黃酒多糖對免疫缺陷小鼠TNF-TNF-α含量的影響Table3Effect of polysaccharides from Chinese rice wine on serum Table3Effect of polysaccharides from Chinese rice wine on serum TNF-TNF-αof immunodeficient micemice
由表3可知,與空白組相比,模型組小鼠血清中TNF-α的含量較低,表明環(huán)磷酰胺的注射會使正常生長小鼠血清中TNF-α的含量降低,引起小鼠免疫系統(tǒng)功能紊亂,造成機(jī)體免疫力下降。對于黃酒多糖+CY組小鼠而言,雖然其血清中TNF-α含量低于空白組小鼠,但是仍明顯高于模型組小鼠血清中TNF-α含量。這表明黃酒多糖能夠抑制環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)小鼠血清中細(xì)胞因子TNF-α含量的下降,明能夠顯改善免疫缺陷小鼠的免疫功能。對于不同劑量黃酒多糖+CY組而言,當(dāng)劑量為50、100、200mg/(kg·d)時,其TNF-α含量(OD450nm)分別為0.296±0.021、0.337±0.015、0.389±0.015。說明隨著黃酒多糖劑量的增加,免疫缺陷小鼠血清中TNF-α的含量不斷增加,并且黃酒多糖劑量與免疫缺陷小鼠血清中細(xì)胞因子TNF-α含量之間存在一種正相關(guān)的關(guān)系。
2.2黃酒多糖對免疫缺陷小鼠免疫球蛋白的影響
免疫球蛋白是免疫系統(tǒng)的有機(jī)組成部分,在體液免疫中發(fā)揮著重要作用。IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白,具有多種免疫活性:抗菌、抗病毒、抗毒素等作用,還可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞核效應(yīng)細(xì)胞之間的鏈接,引起細(xì)胞毒作用而殺傷腫瘤細(xì)胞等靶細(xì)胞[23];而IgA是血清中含量僅次于IgG的免疫球蛋白,對機(jī)體局部黏膜免疫起到非常重要的作用,特別是對經(jīng)黏膜途徑感染的病原微生物具有抵抗作用[23-24];IgM也是血清中一種重要的免疫球蛋白,其分子質(zhì)量大于其他免疫球蛋白,具有較強(qiáng)的殺菌、中和毒素和抗病毒等免疫活性。
表4 黃酒多糖對免疫缺陷小鼠免疫球蛋白含量的影響Table4Effect of polysaccharides from Chinese rice wine on immune globulin contents in immunodeficient micemice
本實驗通過測定小鼠血清中免疫球蛋白的含量來評價黃酒多糖對免疫缺陷小鼠免疫功能的影響,結(jié)果如表4所示。與空白組相比較,模型組小鼠的免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)含量要明顯降低,并且差異顯著;對于3個多糖+CY組而言,其免疫球蛋白含量雖然均低于空白組小鼠血清中免疫球蛋白含量,但是高于CY模型組小鼠血清中免疫球蛋白含量;尤其是當(dāng)黃酒多糖劑量為200mg/(kg·d)時,小鼠血清中免疫球蛋白含量要明顯大于模型組小鼠血清免疫球蛋白含量。同時,還發(fā)現(xiàn)灌胃黃酒多糖的小鼠血清中免疫球蛋白變化與黃酒多糖之間存在劑量依賴關(guān)系,免疫球蛋白含量隨著灌胃劑量的增加而不斷增加。
2.3黃酒多糖對免疫缺陷小鼠補(bǔ)體的影響
補(bǔ)體是存在于血清和組織液中的一種免疫球蛋白,活化后具有酶的活性以及連鎖酶促反應(yīng)的功能,并且在活化過程中不斷形成具有酶活性的新復(fù)合物[25-26]。在激活過程中,補(bǔ)體被裂解為許多大小不等的片段,產(chǎn)生眾多不同的生物活性,協(xié)助抗體和吞噬細(xì)胞對病原菌產(chǎn)生致死作用從而強(qiáng)化細(xì)胞的免疫功能[26]。在補(bǔ)體系統(tǒng)中,C3是系統(tǒng)中含量最多也是最重要的一個組分,是兩條補(bǔ)體激活途徑的中心環(huán)節(jié),可通過免疫復(fù)合物、調(diào)節(jié)吞噬細(xì)胞的吞噬作用和免疫黏附作用等途徑清除病原菌。研究[25]表明,多糖能夠調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)補(bǔ)體含量,增強(qiáng)小鼠的免疫功能。黃酒多糖對免疫缺陷小鼠補(bǔ)體含量的影響見表5。
表5黃酒多糖對免疫缺陷小鼠補(bǔ)體含量的影響Table5Effect of polysaccharides from Chinese rice wine on complement contents in immunodeficient micemice
由表5可知,與空白組((25.46±1.23)mg/100mL))相比較,模型組小鼠的補(bǔ)體C3含量((19.32±2.25)mg/100mL))要明顯降低,并且差異顯著;對于3個CY+黃酒多糖劑量組而言,其小鼠補(bǔ)體C3含量相互之間存在明顯的差異,雖然低于空白組小鼠補(bǔ)體C3含量((25.46±1.23)mg/100mL)),但是高于模型組小鼠補(bǔ)體含量;尤其是當(dāng)黃酒多糖劑量為200mg/(kg·d)時,小鼠補(bǔ)體C3含量((23.15±1.06)mg/100mL))要明顯大于模型組小鼠補(bǔ)體C3含量。同時,還發(fā)現(xiàn)灌胃黃酒多糖的小鼠補(bǔ)體含量變化與黃酒多糖之間存在劑量依賴關(guān)系,補(bǔ)體C3含量隨著灌胃劑量的增加而不斷增加。模型組小鼠C4含量((3.25±0.89)mg/100mL))與空白組小鼠補(bǔ)體含量((6.13±0.27)mg/100mL))差異顯著,并且3個黃酒多糖劑量組小鼠補(bǔ)體C4含量均與模型組小鼠補(bǔ)體C4含量之間存在顯著差異。同時,還發(fā)現(xiàn)灌胃黃酒多糖的小鼠補(bǔ)體含量變化與黃酒多糖之間存在劑量依賴關(guān)系,補(bǔ)體C4含量隨著灌胃劑量的增加而不斷增加。
細(xì)胞因子(cytokine)是指主要由機(jī)體免疫細(xì)胞分泌的、具有免疫調(diào)節(jié)作用的蛋白質(zhì)和小分子多肽[19]。這些由免疫細(xì)胞合成和分泌的微量多肽類因子,在免疫應(yīng)答過程中,對于細(xì)胞間相互作用、細(xì)胞的生長和分化有重要調(diào)節(jié)作用。它們不僅具有維持機(jī)體生理平衡的功能,還能夠抵御病原菌的侵襲和抑制腫瘤細(xì)胞生長、誘導(dǎo)宿主對腫瘤細(xì)胞的反應(yīng)或者調(diào)控致癌基因的表達(dá)等[19,23]。細(xì)胞因子具有特定的靶細(xì)胞,通過靶細(xì)胞膜上的受體,將信息傳遞給細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng)答反應(yīng),提高機(jī)體的免疫能力,但異常情況下也會引起感冒、發(fā)燒等病理現(xiàn)象。細(xì)胞因子的產(chǎn)生和相互作用對機(jī)體抵御疾病和維持機(jī)體平衡方面具有重要的意義。由于基因工程和細(xì)胞工程研究的快速發(fā)展,越來越多的細(xì)胞因子被挖掘出來。目前,細(xì)胞因子已被發(fā)現(xiàn)有上百種,包括按照來源分為:淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子、單核細(xì)胞產(chǎn)生的單核因子、各種生長因子等,按照功能分為白細(xì)胞介素、干擾素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、紅細(xì)胞生成素等[23,27]。
綜上所述,注射環(huán)磷酰胺能顯著抑制免疫缺陷小鼠血清補(bǔ)體(C3、C4)的含量,黃酒多糖能通過提高免疫缺陷小鼠血清中補(bǔ)體含量來改善免疫缺陷小鼠的免疫功能,因此,增強(qiáng)補(bǔ)體水平是黃酒多糖增強(qiáng)機(jī)體免疫功能的途徑之一。
黃酒多糖能提高免疫缺陷小鼠血清中細(xì)胞因子:IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量,并且還能提高免疫缺陷小鼠血清中免疫球蛋白和補(bǔ)體含量,表明黃酒多糖能夠提高免疫缺陷小鼠的免疫功能,抵御環(huán)磷酰胺對免疫缺陷小鼠造成的免疫損傷。
[1]傅圣斌,錢建鴻,陳樂意,等.黃精多糖的提取及其對小鼠免疫活性的影響[J].中國食品學(xué)報,2013,13(1):68-72.
[2]姜琛璐,湯承,騫宇,等.黃芪多糖免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].食品科學(xué),2013,34(11):327-332.
[3]YU Zhanhai,YIN Lihua,YANG Qian,et al.Effect of Lentinus edodes polysaccharide on oxidative stress,immunity activity and oral ulceration of rats stimulated by phenol[J].Carbohydrate Polymers,2009,75(1):115-118.
[4]WONG K,LAI C K M,CHEUNG P C K.Immunomodulatory activities of mushroom sclerotial polysaccharides[J].Food Hydrocolloids,2011,25(2):150-158.
[5]YANG Lichan,LU Tingjang,HSIEH Changchi,et al.Characterization and immunomodulatory activity of polysaccharides derived from Dendrobium tosaense[J].Carbohydrate Polymers,2014,111:856-863.
[6]BAI Lu,ZHU Liyiing,YANG Baoshan,et al.Antitumor and immunomodulating activity of a polysaccharide from Sophora fl avescens Ait[J].International Journal of Biological Macromolecules,2012,51(5):705-709.
[7]SHAO Ping,CHEN Xiaoxiao,SUN Peilong.Chemical characterization,antioxidant and antitumor activity of sulfated polysaccharide from Sargassum horneri[J].Carbohydrate Polymers,2014,105:260-269.
[8]XING Xiaohui,CUI S W,NIE Shaoping,et al.A r e view of isolation process,structural characteristics,and bioactivities of water-soluble polysaccharides from Dendro bium plants[J].Bioactive Carbohydrates and Dietary Fibre,2013,1(2):131-147.
[9]MA Jiangwei,QIAO Zengyong,XIANG Xia.Optimisation of extraction procedure for black fungus polysaccharides and effect of the polysaccharides on blood lipid and myocardium antioxidant enzymes activities[J].Carbohydrate Polymers,2011,84(3):1061-1068.
[10]REN Zhe,HE Chenghua,F(xiàn)AN Yanhong.Immune-enhancing activity of polysaccharides from Cyrtomium macrophyllum[J].I n ternational Journal of Biological Macromolecules,2014,70:590-595.
[11]BAO Xiaoli,YEAN Huihui,WANG Chengzhong,et al.Antitumor and immunomodulatory activities of a polysaccharide from Artemisia argyi[J].Carbohydrate Polymers,2013,98(1):1236-1243.
[12]李思宇,袁亞光,欽佩,等.海濱錦葵塊根皂苷及多糖的分離、純化及對細(xì)胞增殖活性的影響[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2013,25(1):87-91.
[13]賈林,陸金健,周文雅,等.桔梗多糖對環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)[J].食品與機(jī)械,2012,28(3):112-114.
[14]ZHENG Wei,ZHAO Ting,F(xiàn)ENG Weiwei,et al.Purification,characterization and immunomodulating activity of a polysaccharide from flowers of Abelmoschus esculentus[J].Carbohydrate Polymers,2014,106:335-342.
[15]許丹妮,李健,馬玉芳,等.金線蓮多糖對免疫抑制小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖及免疫器官的影響[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2011,13(3):15-17.
[16]李景艷.乳酸菌胞外多糖的抗氧化活性及其結(jié)構(gòu)[D].無錫:江南大學(xué),2013:1-33.
[17]倪贊.中國黃酒保健功能的研究[D].杭州:浙江大學(xué),2006:5-11.
[18]彭金龍,毛健,黃桂東,等.黃酒多糖體外抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(20):94-97.
[19]王君巧,聶少平,余強(qiáng),等.黑靈芝多糖對免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)和抗氧化作用[J].食品科學(xué),2012,33(23):274-277.
[20]DING Xia,ZHU Fangshi,GAO Siguo.Purification,antitumour and immunomodulatory activity of water-extractable and alkali-extractable polysaccharides from Solanum nigrum L.[J].Food Chemistry,2012,131(2):677-684.
[21]QIN Tao,CHEN Jin,WANG Deyun,et al.Selenylation modification can enhance immune-enhancing activity of Chinese angelica polysaccharide[J].Carbohydrate Polymers,2013,95(1):183-187.[22]ZHANG Xiaorui,LI Yingjie,CHENG Junping,et al.Immune activities comparison of polysaccharide and polysaccharide-protein complex from Lycium barbarum L.[J].Interna tional Journal of Biological Macromolecules,2014,65:441-445.
[23]CHO C,HAN C,RHEE Y,et al.Immunostimulatory effects of polysaccharides isolated from makgeolli(traditional Korean rice wine)[J].Molecules,2014,19(4):5266-5277.
[24]SUN Yichun.Biological activities and potential health benefits of polysaccharides from Poria cocos and their derivatives[J].International Journal of Biological Macromolecules,2014,68:131-134.
[25]夏雪雁,彭仁琇,王智勇.當(dāng)歸多糖及其分離組分對小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)效應(yīng)[J].武漢大學(xué)學(xué)報:醫(yī)學(xué)版,2001,22(3):199-203.
[26]JONES H E,TAYLOR P R,MCGREAL E,et al.The contribution of naturally occurring IgM antibodies,IgM cross-reactivity and complement dependency in murine humoral responses to pneumococcal capsular polysaccharides[J].Vaccine,2009,27(42):5806-5815.
[27]ZHANG Bingzhao,INNGJERDINGEN K T,ZOU Yuanfeng,et al.Characterisation and immunomodulating activities of exopolysaccharides from submerged cultivation of Hypsizigus marmoreus[J].Food Chemistry,2014,163:120-128.
Effect of Polysaccharides from Chinese Rice Wine on Immunity-Related Cytokines in Immunodeficient Mice
SHEN Chi1,2,MAO Jian1,2,3,*,CHEN Yongquan1,MENG Xiangyong1,2,3,AISIKAER Ailati1,2,3
(1.School of Food Science and Technology,Jiangnan University,Wuxi214122,China;2.National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology,Jiangnan University,Wuxi214122,China;3.National Engineering Research Center of Chine se Rice Wine,Shaoxing312000,China)
The objective of the present work was to study the effects of polysaccharides from Chinese rice wine on immunityrelated cytokines i n immunodefi cient mice induced by cyclophosphamide (CY). After fi fty mice were fed adaptively for four days, they were divided into five groups: blank control, cyclophosphamide, cyclophosphamide + polysaccharides from Chinese rice wine (50, 100 and 200 mg/(kg·d)). The mice in CRWP + CY (50, 100 and 200 mg/(kg·d)) groups were administered with polysaccharides from Chinese rice wine by gavage once a day for 14 days, and the mice from the blank control group and CY grou p were fed with the same volu me of physical saline. Then, the mice in CY group and CRWP + CY group were injected intraperitoneally with CY (100 mg/(kg·d)) once a day for 4 days. On the 22thday, the mice we re executed and the blood was collected from the retro-orbital plexus and centrifuged for analysis. Interleukin 6, interferon-γ tumor necrosis factor-α, immunoglobulin A, immunoglobulin M, immunoglobulin G and complement C3, complement C4 in mouse serum were measured by ELISA. Compared with the controls, interleukin 6, interferon-γ, tumor necrosis factor-α, immunoglobulin A, immunoglobulin M, immunoglobulin G and complement C3, complement C4 in mouse serum were increased. The level of interferon-γ in CRWP + CY (200 mg/(kg·d)) g roup was signifi cantly higher than that in the blank control group. These results indicate that polysaccharides from Chinese rice wine can enhance immune function in immunodefi cient mice especially at higher dose.
polysaccharides from Chinese rice wine; immunodefi cient mice; cyclophosphamide; immunocompetence
TS262.4
A
1002-6630(2015)05-0158-05
10.7506/spkx1002-6630-201505030
2014-09-23
國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)項目(2013AA102203-06);國家自然科學(xué)基金面上項目(31271839)
沈赤(1964—),男,研究員,博士研究生,研究方向為食品生物技術(shù)。E-mail:1356339751@qq.com
毛健(1970—),男,教授,博士,研究方向為食品生物技術(shù)。E-mali:biaomao@263.net