朱曉琳，劉躍鈞，陸　敏，呂麗爽,*

（1.南京師范大學(xué)金陵女子學(xué)院，江蘇南京210097；2.浙江省麗水市林業(yè)科學(xué)研究所，浙江麗水323000）

馬蘭中酚類的分離純化及其抑制蛋白糖基化的研究

朱曉琳1，劉躍鈞2，陸敏1，呂麗爽1,*

（1.南京師范大學(xué)金陵女子學(xué)院，江蘇南京210097；2.浙江省麗水市林業(yè)科學(xué)研究所，浙江麗水323000）

采用大孔吸附樹(shù)脂對(duì)馬蘭粗提物進(jìn)行分離，得到4組含有多酚的洗脫組分（F1、F2、F3、F4）。用Sephadex LH-20色譜柱對(duì)F2進(jìn)一步純化，得到3,5-二咖啡?？鼘幩岷?,4,5-三咖啡?？鼘幩?。通過(guò)建立牛血清白蛋白-甲基乙二醛（bovine serum albumin-methylglyoxal，BSA-MGO）和牛血清白蛋白-乙二醛（bovine serum albuminglyoxal，BSA-GO）的蛋白質(zhì)糖基化反應(yīng)模型，分析各所得組分抑制蛋白質(zhì)糖基化的能力。結(jié)果表明：多酚含量依次為F2＞F1＞F3＞F4，馬蘭各組分對(duì)兩種模型引起的蛋白質(zhì)糖基化均具有良好的抑制效果。在BSA-GO的反應(yīng)模型中，抑制蛋白質(zhì)糖基化效果為3,5-二咖啡酰奎寧酸＞F2＞F3＞F1＞馬蘭粗提取物＞F4，BSA-MGO的反應(yīng)模型中，抑制蛋白質(zhì)糖基化效果為3,5-二咖啡酰奎寧酸＞F2＞馬蘭粗提取物＞F1＞F4＞F3，此結(jié)果與F2組分中分離得到的3,5-二咖啡?？鼘幩峋哂辛己玫囊种菩Ч恢?。結(jié)論：馬蘭中分離得到的多酚類物質(zhì)——3,5-二咖啡酰奎寧酸具有很強(qiáng)的抑制MGO/GO引發(fā)的蛋白糖基化功能。

馬蘭；多酚；3,5-二咖啡?？鼘幩幔坏鞍踪|(zhì)非酶糖基化

馬蘭（Kalimeris）屬菊科，為多年生草本植物，我國(guó)南方各省均有分布，在江浙一帶作為蔬菜食用，含多種維生素、礦物質(zhì)和氨基酸，營(yíng)養(yǎng)豐富[1]?！侗静菔斑z》中記載其具有清熱利濕、解毒消腫、涼血止血功效?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究證明其具有抗菌[2]、抗炎[3]、提高子宮活力及促血凝[4]、治療肝炎[5]、降血脂[6]作用，是集食用和藥用價(jià)值于一身、備受青睞的時(shí)令野菜。目前發(fā)現(xiàn)馬蘭中含有黃酮類[7]、三萜類[8]、甾體類化合物[9]。季鵬等[10]首次從馬蘭全草80%乙醇提取物中分離并鑒定了5 個(gè)酚類化合物：漢黃芩素、千層紙素A、4-羥基苯乙酮、7,4-二羥基異黃酮、芹菜素。

蛋白質(zhì)非酶糖基化又稱美拉德反應(yīng)，是由還原糖與氨基酸和蛋白質(zhì)的游離氨基通過(guò)非酶促反應(yīng)形成的結(jié)構(gòu)多樣的聚合物。1984年Brownlee等[11]將體內(nèi)類似于美拉德反應(yīng)途徑形成的一類穩(wěn)定的聚合物定義為晚期糖基化終產(chǎn)物（advance glycation end products，AGEs）?，F(xiàn)代研究表明蛋白質(zhì)非酶糖基化與糖尿病并發(fā)癥[12]、白內(nèi)障[13]、阿茨海默病[14]等慢性病密切相關(guān)。

活性二羰基化合物乙二醛（glyoxal，GO）和甲基乙二醛（methylglyoxal，MGO）為蛋白質(zhì)非酶糖基化中間體，極易與游離氨基酸和蛋白質(zhì)的游離氨基發(fā)生反應(yīng)，生成晚期糖基化終產(chǎn)物[15]。在糖基化反應(yīng)中，MGO和GO的活性是葡萄糖的20 000倍[16]。研究發(fā)現(xiàn)MGO可以引起體內(nèi)多種蛋白發(fā)生非酶糖基化反應(yīng)，如牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）[17]、膠原蛋白[18]等。另外，糖尿病患者血漿中GO和MGO的含量較高，MGO含量為16～27 μg/100 mL，而正常人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)量為3.0～7.0 μg/100 mL[19]。目前在多種食品中也發(fā)現(xiàn)MGO和GO的存在，如蜂蜜、面包、葡萄酒、啤酒和沙丁魚(yú)油[20-24]。因此對(duì)于抑制MGO與GO引起的蛋白質(zhì)非酶糖基化的研究具有重大意義。

眾多學(xué)者對(duì)各種抑制或改變糖基化進(jìn)程的物質(zhì)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)了一系列天然或者合成的化合物可抑制蛋白質(zhì)非酶糖基化，如大蒜提取物[25]、黃酮類化合物[26]、氨基胍[27]。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)[28]，馬蘭粗提物具有良好的抑制蛋白糖基化的效果，抑制率達(dá)到49%～71%，其抑制作用與馬蘭中的多酚含量存在一定的線性關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)旨在對(duì)馬蘭多酚提取物進(jìn)行分離純化，鑒定其主要組成，并分析馬蘭粗提物中抑制蛋白糖基化主要組分，為馬蘭抑制蛋白糖基化從而減少糖尿病并發(fā)癥發(fā)生提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

優(yōu)質(zhì)馬蘭（取可食部分，即葉子及地下嫩莖）浙江省麗水市林業(yè)科學(xué)研究院馬蘭種質(zhì)資源圃。

AB-8型大孔吸附樹(shù)脂南開(kāi)大學(xué)化工廠；Sephadex LH-20葡聚糖凝膠樹(shù)脂美國(guó)GE Healthcare公司；3,5-咖啡酰奎寧酸標(biāo)準(zhǔn)品成都普瑞法生物制劑公司；牛血清白蛋白、青霉素鏈霉素混合液生工生物工程（上海）股份有限公司；MGO、GO美國(guó)Sigma公司；其他均為分析純，購(gòu)自南京化學(xué)試劑有限公司。

1.2儀器與設(shè)備

AUY220分析天平日本島津公司；722型可見(jiàn)分光光度計(jì)上海精密科學(xué)儀器有限公司；RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上海亞榮生化儀器廠；KQ-300B超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵鄭州長(zhǎng)城儀器廠；LD5-10低速離心機(jī)北京醫(yī)用離心機(jī)廠；XW-80A微型旋渦混合儀、DBS-100電腦全自動(dòng)部分收集器、DHL-A恒流泵、HD-3型紫外檢測(cè)儀上海滬西分析儀器有限公司；GF254薄層層析硅膠板煙臺(tái)江友硅膠開(kāi)發(fā)有限公司；WFH-201B紫外投射反射儀上海精科實(shí)業(yè)有限公司；1290型高效液相色譜儀、9460型四極桿串聯(lián)質(zhì)譜美國(guó)安捷倫公司；AVANCE400型核磁共振波譜儀瑞士Bruker公司；GL-22M超高速離心機(jī)賽特湘儀離心機(jī)儀器有限公司；Infinite 200Pro TECAN奧地利Tecan有限公司；150E光照培養(yǎng)箱金壇市吉特實(shí)驗(yàn)儀器廠。

1.3方法

1.3.1馬蘭總多酚粗提物的制備

馬蘭→干燥→粉碎→80%乙醇溶液提?。弦罕?∶10（m/V）），60 ℃水浴60 min→磁力攪拌→離心（1 800×g，20 min）→殘?jiān)酝瑯拥姆椒ㄖ貜?fù)提取2 次→減壓濃縮→冷凍干燥→4 ℃冷藏備分析用

1.3.2大孔吸附樹(shù)脂對(duì)馬蘭粗提物的分離

將AB-8樹(shù)脂裝柱（Ф6 cm×60 cm），將馬蘭粗提物用超聲處理溶解進(jìn)行濕法上樣，先用水洗脫至洗脫液無(wú)色，再依次用20%、40%、60%、80%不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇洗脫，各洗脫5 個(gè)柱體積，洗脫速率為1 BV/h收集各組分流出液，用薄層色譜（thin layer chromatography，TLC），展開(kāi)體系為：V（乙酸乙酯）∶V（正丁醇）∶V（甲醇）∶V（水）=5∶3∶1∶1，檢測(cè)洗脫液，將Rf值相同的洗脫組分合并，減壓濃縮，冷凍干燥。分別得到F1（20%洗脫組分）、F2（40%洗脫組分）、F3（60%洗脫組分）、F4（80%洗脫組分）。

1.3.3Sephadex LH-20色譜柱純化F2組分

將洗脫組分用少量80%乙醇溶解，14 000×g離心5 min，取上清液過(guò)Sephadex LH-20柱，用80%乙醇等梯度洗脫。恒流泵控制流速為1 mL/min，部分收集器收集洗脫液，5 mL/管，用TLC跟蹤分析每管洗脫液，將Rf值相同的洗脫組分合并。得到新的洗脫物。將新洗脫物用40%～50%的乙醇過(guò)Sephadex LH-20柱，相同條件下過(guò)兩次，得到化合物Ⅰ。

經(jīng)AB-8大孔吸附樹(shù)脂純化后，各組分經(jīng)真空冷凍干燥至恒質(zhì)量。分別精密稱取一定質(zhì)量的樣品溶于80%乙醇中，采用Folin-Ciocalteus法測(cè)定，以沒(méi)食子酸為對(duì)照品[29]，測(cè)定總多酚含量，并按式（1）計(jì)算，并按公式（2）計(jì)算其得率。

式中：m1為樣品中總多酚質(zhì)量/mg；m2為樣品質(zhì)量/mg。

式中：m1為樣品中總多酚的質(zhì)量/mg；m3為純化前樣品中總多酚的質(zhì)量/mg。

1.3.4高效液相色譜-質(zhì)譜（high perfor mance liquid chromatography-mass spectrometry，HPLC-MS）分析條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse XDB-C18（4.6 mm× 250 mm，5 μm）色譜柱，DAD檢測(cè)器。流速：0.5 mL/min，柱溫：25 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm。流動(dòng)相A：乙腈，流動(dòng)相B：體積分?jǐn)?shù)0.05%甲酸水溶液。流動(dòng)相梯度：0 min（20% A），0～20 min（20%～30% A），20～40 min（30%～60% A）；進(jìn)樣量：3 μL。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子化（ESI）源，負(fù)離子模式檢測(cè)，噴霧電壓為10 kV，毛細(xì)管溫度為300 ℃，氮?dú)饬魉贋? L/min。

1.3.5馬蘭各活性組分抑制蛋白質(zhì)糖基化活性[28]

采用0.2 mol/L、pH 7.4的磷酸緩沖液配制質(zhì)量濃度為30 mg/mL BSA和濃度為20 mmol/L的GO/MGO，分別加入不同馬蘭組分F1、F2、F3、F4、3,5-二咖啡?？鼘幩峒榜R蘭粗提物，質(zhì)量濃度均為30 mg/mL。青霉素鏈霉素混合液體積分?jǐn)?shù)為0.5%。將所有試劑和材料加入反應(yīng)管后，密封管口，于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中反應(yīng)168 h。期間每24 h取樣500 μL，立即放入─80 ℃冰箱冷凍結(jié)束反應(yīng).，作為陽(yáng)性對(duì)照組。以0.2 mol/L、pH 7.4的磷酸緩沖液代替不同馬蘭組分做如上操作，作為陰性對(duì)照。稀釋10 倍后利用酶標(biāo)儀在Ex/Em340nm/465nm測(cè)定熒光值。讀465 nm熒光強(qiáng)度得出樣品管吸光度（A）值。應(yīng)用以下公式計(jì)算化含物對(duì)BSA糖基化反應(yīng)的抑制作用，用抑制率表示。

2　結(jié)果與分析

2.1分離所得組分結(jié)果

表1　乙醇洗脫組分總多酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)Table1Total polyphenol contents of elution fractions by aqueous ethanol

由表1可知，F(xiàn)2組分總多酚得率最高，達(dá)到48.97%，多酚組成種類相對(duì)較為單一。雖然F1總多酚含量略高于F2，故對(duì)F1進(jìn)行進(jìn)一步分析，發(fā)現(xiàn)其組成復(fù)雜，種類多，單一含量低，難以得到主要成分。本研究對(duì)F2做進(jìn)一步分析。

2.2F2純化產(chǎn)物分析

F2經(jīng)過(guò)Sephadex LH-20色譜柱的進(jìn)一步純化，得到Fr2。

2.2.1成分Ⅰ的結(jié)構(gòu)分析

Fr2的高效液相色譜圖如圖1A所示，圖中顯示有兩個(gè)主要峰，分別對(duì)應(yīng)成分Ⅰ和成分Ⅱ。經(jīng)Sephadex LH-20柱反復(fù)分離，得到成分Ⅰ，純度為96%。對(duì)成分Ⅰ進(jìn)行了HPLC-MS和核磁共振（nuclear magnetic resonance，NMR）分析。

成分Ⅰ的一、二級(jí)質(zhì)譜圖如圖1B和圖1C，出現(xiàn)m/z 515[M-H]-的準(zhǔn)分子離子峰，表明該化合物的相對(duì)分子質(zhì)量為516；另有m/z 353[M-H-162]-的碎片離子峰。在ESI-MS2圖中，出現(xiàn)m/z 191[M-H-162-162]-的碎片離子峰。推測(cè)該化合物中存在高度對(duì)稱結(jié)構(gòu)，分子式為C25H24O12，結(jié)合文獻(xiàn)[30-31]和該物質(zhì)的紫外吸收光譜（圖1D），初步推測(cè)成分Ⅰ是二咖啡酰奎寧酸。

圖1　Fr2的高效液相色譜圖（A）及成分Ⅰ的一級(jí)（B）、二級(jí)（C）C質(zhì)譜和紫外吸收光譜圖（D）DFig.1HPLC of Fr2（A）and ESI-MS（B），ESI-MS2（C），ultra-violent spectrum（D）of compoundⅠ

成分ⅠESI-MS m/z 515[M-H]-（分子式為C25H24O12）。1H-NMR（400 MHz，MeOD）：δ 2.26（2H，m），5.40（1H，m），4.00（1H，d，J=4.4Hz），5.45（1H，m），2.35（1H，brd），2.30（1H，m），7.08（2H，brs，H-2'和H-2''），6.80（2H，d，J=8.4 Hz，H-5'和H-5”），6.98（2H，brd，J=8.4 Hz，H-6'和H-2''），7.65（1H，d，J=16.0 Hz），6.39（1H，d，J=16.0 Hz），7.08（2H，brs，H-2'和H-2''），6.80（2H，d，J=8.4 Hz，H-5'和H-5''），6.98（2H，brd，J=8.4 Hz，H-6'和H-2''），7.57（1H，d，J=16.0 Hz），6.30（1H，d，J=16.0 Hz）。

13C-NMR（150 MHz，MeOD）：δ 73.3（C-1），36.2（C-2），70.7（C-3），69.2（C-4），71.7（C-5），34.6（C-6a），175.9（C-7），126.5（C-1'），113.9（C-2'），145.6（C-3′），148.2（C-4'），115.1（C-5'），121.6（C-6'），145.9（C-7'），114.2（C-8'），167.5（C-9'），126.4（C-1''），113.7（C-2''），145.6（C-3''），148.1（C-4”），115.1（C-5''），121.6（C-6''），145.4（C-7''），113.7（C-8''），166.9（C-9''）。

具體的1H-NMR和13C-NMR信息如下：

1H-NMR給出了兩組咖啡?；|(zhì)子的特征信號(hào)δ 7.08（2H，brs），6.98（2H，brd，J=8.4 Hz），6.80（2H，d，J=8.4 Hz）和兩組AB型的反式烯質(zhì)子信號(hào)δ 7.65（1H，d，J=16.0 Hz），7.57（1H，d，J= 16.0 Hz），6.39（1H，d，J=16.0 Hz），6.30（1H，d，J=16.0 Hz）。同時(shí)顯示了奎尼酸基團(tuán)的存在，包括4 個(gè)亞甲基質(zhì)子：δ 2.26（2H，m，H-2），2.35（1H，brd，H-6a），2.30（1H，m，H-6b）。此外也顯示了3 個(gè)連氧氫的存在：δ 4.00（1H，d，J=4.4 Hz，H-4），5.40（1H，m，H-3），5.45（1H，m，H-5）。

13C-NMR數(shù)據(jù)顯示了該化合物中存在2 個(gè)亞甲基碳（δ 34.6，36.2），3 個(gè)連氧次甲基碳（δ 69.2，70.7，71.1）、1個(gè)季碳（δ 73.3）和1 個(gè)羰基碳信號(hào)（δ 175.9）。

化合物Ⅰ的1H-NMR圖中顯示了H-3和H-5存在低場(chǎng)位移，同時(shí)13C-NMR圖中也顯示了C-3和C-5存在低場(chǎng)位移，證明了兩個(gè)咖啡?；B在奎尼酸的3號(hào)位和5號(hào)位上，以上NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[32-33]3,5-二咖啡?？鼘幩嵋恢?，確認(rèn)成分Ⅰ為3,5-二咖啡酰奎寧酸。

2.2.2成分Ⅱ的結(jié)構(gòu)分析

成分Ⅱ的液相色譜圖如圖1A，在成分Ⅱ旁邊存在兩個(gè)尖峰，說(shuō)明成分Ⅱ未達(dá)到完全分離，存在同分異構(gòu)體。一級(jí)質(zhì)譜和紫外吸收光譜圖見(jiàn)圖2A和圖2B。在ESI-MS圖中，出現(xiàn)m/z 677[M-H]-的準(zhǔn)分子離子峰，表明該化合物的分子質(zhì)量為678 g/mol；另有m/z 515[MH-162]-和m/z 161的碎片離子峰。據(jù)文獻(xiàn)[34-35]報(bào)道，3,4,5-三咖啡?？鼘幩岬囊患?jí)質(zhì)譜結(jié)構(gòu)為677[M-H]-的準(zhǔn)分子離子峰，二級(jí)質(zhì)譜結(jié)構(gòu)中有515[M-H-162]-和m/z 191的碎片離子峰。而該物質(zhì)的紫外吸收光譜與化合物Ⅰ相似，推測(cè)該物質(zhì)與化合物Ⅰ相似，為3,4,5-三咖啡酰奎寧酸。

圖2成分Ⅱ的二級(jí)質(zhì)譜圖（A）及紫外吸收光譜圖（B）BFig.2ESI-MS（A）and ultra-violent spectrum（B）of compoundⅡ

2.3馬蘭不同分離組分對(duì)BSA-GO的抑制

馬蘭不同組分（F1、F2、F3、F4、3,5-二咖啡?？鼘幩?、馬蘭粗提物）抑制GO引起的蛋白質(zhì)糖基化效果如圖3A、3B所示。馬蘭不同組分的抑制效果排序如下：F4＜馬蘭粗提物＜F1＜F3＜F2＜3,5-二咖啡?？鼘幩?。其中，F(xiàn)2 組分的抑制效果明顯高于馬蘭粗提物的抑制作用，說(shuō)明經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂的富集和純化，40%乙醇洗脫的組分中含有較多能夠抑制蛋白質(zhì)非酶糖基化的活性物質(zhì)；F2組分分離得到的3,5-二咖啡?？鼘幩峋哂蟹浅：玫囊种谱饔?，抑制率達(dá)到92%；F1與F3的抑制效率相似，略高于馬蘭粗提物的抑制作用，且與馬蘭粗提液的抑制作用存在顯著性差異，說(shuō)明F1與F3中含有能夠抑制蛋白質(zhì)非酶糖基化的活性物質(zhì)，但是活性物質(zhì)成分沒(méi)有F2組分多；而F4的抑制作用較弱，因此F4組分中含有的活性成分較少。

圖3馬蘭組分對(duì)BSA-GO模型中AGEs的抑制作用Fig.3The AGEs inhibitory effect of Kalineris in BSA-GO assay

2.4馬蘭不同分離組分對(duì)BSA-MGO的抑制

圖4馬蘭組分對(duì)BSA-MGO模型中AGEs的抑制作用Fig.4The AGEs inhibitory effect of Kalineris in BSA-MGO assay

馬蘭不同組分（F1、F2、F3、F4、3,5-二咖啡?？鼘幩幔┮种芃GO引起的蛋白質(zhì)糖基化效果如圖4A、4B所示。馬蘭不同組分的抑制效果排序如下：F3＜F4＜F1＜馬蘭粗提物＜F2＜3,5-二咖啡?？鼘幩?。其中，3,5-二咖啡?？鼘幩峤M分的抑制效果最佳，抑制率達(dá)到95%，與2.3節(jié)結(jié)果一致；F2組分的抑制效果較粗提取液好，F(xiàn)1組分的抑制作用略低于粗提液，而F3、F4組分的抑制效果遠(yuǎn)低于粗提物，說(shuō)明經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂的富集和純化，功能成分大部分被20%乙醇和40%乙醇洗脫下來(lái)，而60%乙醇和80%乙醇洗脫液中的功能成分含量很少。

3　結(jié)論

對(duì)馬蘭進(jìn)行分離純化，選取40%乙醇洗脫物經(jīng)過(guò)AB-8型大孔吸附樹(shù)脂和Sephadex LH-20多次純化后，得到兩個(gè)組分，其中一個(gè)經(jīng)質(zhì)譜（mass spectrometry，MS）、NMR等技術(shù)方法鑒定為3,5-二咖啡?？鼘幩?；另一個(gè)通過(guò)MS推斷為3,4,5-三咖啡?？鼘幩帷?/p>

研究大孔吸附樹(shù)脂純化所得組分和3,5-二咖啡?？鼘幩嵋种频鞍踪|(zhì)非酶糖基化效果時(shí)發(fā)現(xiàn)，40%乙醇洗脫組分F2較粗提物具有更好的抑制效果，抑制率達(dá)到70%以上，因此經(jīng)過(guò)大孔吸附樹(shù)脂的富集和純化，40%乙醇洗脫組分中含有較多抑制蛋白質(zhì)糖基化的成分。3,5-二咖啡?？鼘幩岬囊种菩Ч罴?，達(dá)到90%以上。對(duì)馬蘭抑制蛋白糖基化進(jìn)行研究，進(jìn)一步了解其藥用價(jià)值，可為抑制AGEs新藥研發(fā)提供新的思路，開(kāi)發(fā)出藥食同源、綠色、安全、副作用小的降血糖產(chǎn)品。

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Separation，Purification and Inhibitory Effect on Protein Glycosylation of Phenols in Kalimeris

ZHU Xiaolin1，LIU Yuejun2，LU Min1，L?Lishuang1，*
（1.Ginling College，Nanjing Normal University，Nanjing210097，China；2.Lishui Forestry Research Institute of Zhejiang Province，Lishui323000，China）

Macroporous resin was used to separate the crude extract of Kalimeris and four polyphenol-rich fractions （F1, F2, F3, and F4） were obtained. F2 was further purif ed by Sephadex LH-20 column chromatography and 3,5-dicaf eoylquinic acid and 3,4,5-tricaf eoylquinic acid were obtained. Using the protein glycosylation reaction models of bovine serum albumin-methylglyoxal （BSA-MGO） and bovine serum albumin-glyoxal （BSA-GO）, we analyzed the inhibitory activity of each component on protein glycosylation. The results showed that the content of polyphenols was in the order of F2 > F1 > F3 > F4, and all the four fractions had good inhibitory ef ects on protein glycosylation in both models. In BSA-GO reaction model, the inhibitory capacity against protein glycosylation was in the order of 3,5-dicaf eoylquinic acid > F2 > F3 > F1 > crude extract of Kalimeris > F4. In BSA-MGO reaction model, the inhibitory capacity against protein gly cosylation was in the order of 3,5-dicaf eoylquinic acid > F2 > crude extract of Kalimeris > F1 > F4 > F3. These results are consistent with the inhibitory ef ect of 3,5-dicaf eoylquinic acid separated from F2. The 3,5-dicaf eoylquinic acid as a phenolic compound from Kalimeris had a potent inhibitory ef ect on protein glycosylation induced by MGO or GO.

Kalimeris； polyphenols； 3,5-dicaf eoylquinic acid； protein non-enzymatic glycosylation

TS201.4

A

1002-6630（2015）05-0061-06

10.7506/spkx1002-6630-201505012

2014-05-19

浙江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（LY12C15001）；江蘇省基礎(chǔ)研究（自然科學(xué)）基金項(xiàng)目（BK2012850）；江蘇省普通高校自然科學(xué)研究資助項(xiàng)目（12KJB550005）

朱曉琳（1988—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)。E-mail：marynutralong@gmail.com

呂麗爽（1969—），女，副教授，博士，研究方向?yàn)槭称坊瘜W(xué)、功能性食品的分離及活性。E-mail：lishuanglv@126.com