馮燕翀　孫文霞

[摘要] 目的 比較兩種病理學(xué)診斷方法診斷慢診斷性子宮內(nèi)膜炎的差異。 方法 獲取的標(biāo)本分別采用HE染色法與免疫組織化學(xué)染色聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138方法診斷慢性子宮內(nèi)膜炎，比較兩組診斷陽(yáng)性率。 結(jié)果 與HE染色組診斷陽(yáng)性率（3.57%）相比，免疫組織化學(xué)染色聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138組診斷陽(yáng)性率（26.19%）更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=36，P<0.05）。 結(jié)論 與傳統(tǒng)方法比較，采用免疫組織化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138方法對(duì)診斷慢性子宮內(nèi)膜炎更具靈敏性和特異性。

[關(guān)鍵詞] 慢性子宮內(nèi)膜炎；CD38；CD138；免疫組織化學(xué)方法

[中圖分類(lèi)號(hào)] R711.32 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2015）15-31-04

[Abstract] Objective To compare two pathological methods of diagnosing chronic endometritis. Methods Obtained samples adopted CD38 and CD138 combined with HE staining method or with immunohistochemistry respectively to diagnose chronic endometritis. Results Positive rate diagnosed by CD38 and CD138HE combined with immunohistochemistry was 26.19% which was higher than that diagnosed by HE staining method （3.57%）. The difference had statistical significance （x2=36， P<0.05）. Conclusion Immunohistochemistry combined with CD38 and CD138 to diagnose chronic endometritis is more of sensitivity and specificity.

[Key words] Chronic endometritis； CD38； CD138； Immunohistochemistry

子宮內(nèi)膜炎是婦科常見(jiàn)病，發(fā)病率逐年上升。子宮內(nèi)膜炎具有臨床表現(xiàn)無(wú)特異性、診斷較困難、病情易反復(fù)、為導(dǎo)致不孕和流產(chǎn)的重要原因等特點(diǎn)。因其診斷較困難，漏診和誤診在臨床工作中時(shí)有發(fā)生，嚴(yán)重時(shí)將導(dǎo)致不可估計(jì)的后果。因此找到切實(shí)有效的診斷方法是婦產(chǎn)科醫(yī)生的迫切愿望。

該病診斷的必備條件是在大量梭形的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞中辨認(rèn)出可能含有的漿細(xì)胞[1]，但此法對(duì)漿細(xì)胞的分辨仍較困難。國(guó)外有研究表明，CD38、CD138特異的表達(dá)在漿細(xì)胞胞膜或胞質(zhì)內(nèi)。為此本研究通過(guò)比較HE染色法與免疫組織化學(xué)染色聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138方法診斷子宮內(nèi)膜炎的差異性，以期找到更有效的診斷方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料

200例患者為2013年1月～2013年9月間因子宮異常出血、月經(jīng)失調(diào)、不孕癥、反復(fù)流產(chǎn)、陰道異常排液等情況在山西長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院附屬和平醫(yī)院婦科門(mén)診就診的患者，考慮可能患有慢性子宮內(nèi)膜炎而需行診斷性刮宮術(shù)明確診斷。研究方案經(jīng)長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院附屬和平醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)?；颊咭淹晟票匾妮o助檢查，并簽署知情同意書(shū)，清醒狀態(tài)下在門(mén)診行診斷性刮宮術(shù)。

1.2 標(biāo)本滿意標(biāo)準(zhǔn)及取材結(jié)果

組織病理學(xué)標(biāo)本滿意標(biāo)準(zhǔn)為：術(shù)者判定組織獲取量可做出組織病理學(xué)診斷。200例患者中168例取材滿意。168例患者年齡24～76歲，平均（43.3±4.2）歲，患者年齡及癥狀等差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組

將168名患者的子宮內(nèi)膜組織均分別制成三份標(biāo)本并分為兩組，一組為采用HE染色法組，另一組為采用免疫組織化學(xué)染色組分別兩份標(biāo)本檢測(cè)CD38、CD138。

1.4 診斷標(biāo)準(zhǔn)

（1）臨床表現(xiàn)下腹墜脹，子宮不規(guī)則出血，白帶多，檢查子宮稍大有觸痛，約20%無(wú)癥狀。（2）輔助檢查診斷性刮宮：先刮宮頸管，再進(jìn)宮腔刮取組織送病理檢查。內(nèi)膜中有大量漿細(xì)胞及淋巴細(xì)胞，即可明確診斷。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1 CD38、CD138采用免疫組化兩步法檢測(cè)步驟 洗載玻片備用、石蠟切片、脫蠟、抗原修復(fù)、加一抗、加二抗、加SABC試劑、加顯色劑（DAB顯色試劑）、蘇木精復(fù)染、脫水、封片、顯微鏡下觀察。

1.5.2 HE染色法步驟 將切片脫蠟、依次于蘇木素染液、稀鹽酸酒精、氨水、伊紅染液、75%酒精、90%乙醇、無(wú)水酒精、二甲苯中浸入并清洗，再使用中性樹(shù)膠封片，鏡下觀察。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

資料采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，采用配對(duì)四格表資料的x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

CD38、CD138表達(dá)陽(yáng)性鏡下顯示漿細(xì)胞的細(xì)胞膜出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒視為CD38表達(dá)陽(yáng)性。CD138以細(xì)胞膜/胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色為陽(yáng)性。圖1～2分別顯示CD38、CD138陽(yáng)性表達(dá)。兩者均陽(yáng)性方可診斷慢性子宮內(nèi)膜炎。

HE染色在鏡下以子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞中見(jiàn)到典型的漿細(xì)胞視為慢性子宮內(nèi)膜炎確診。見(jiàn)圖3。

2.2 兩種方法診斷慢性子宮內(nèi)膜炎陽(yáng)性率比較

168名患者的子宮內(nèi)膜細(xì)胞取材器組所獲標(biāo)本分兩份。免疫組織化學(xué)染色法聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138組診斷陽(yáng)性率（26.19%）與HE染色組診斷陽(yáng)性率（3.57%）比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=36，P<0.05），HE組診斷陽(yáng)性率低于CD38、CD138聯(lián)合組。可以認(rèn)為CD38、CD138聯(lián)合檢測(cè)診斷較HE染色方法更正確率更高。見(jiàn)表1。endprint

3 討論

子宮內(nèi)膜炎是婦科常見(jiàn)疾病，發(fā)病率國(guó)內(nèi)外報(bào)道不一，國(guó)內(nèi)鄭益紅等[2]報(bào)道的子宮內(nèi)膜活檢標(biāo)本中，慢性子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率占3%～11%，國(guó)外Ekanem等[3]對(duì)140例子宮內(nèi)膜活檢病例進(jìn)行分析，結(jié)果顯示慢性子宮內(nèi)膜炎占16.4%。

子宮內(nèi)膜炎分為急性子宮內(nèi)膜炎和慢性子宮內(nèi)膜炎兩種。急性子宮內(nèi)膜炎通常癥狀比較明顯，進(jìn)展較快，可蔓延至周?chē)M織和臟器，甚至可發(fā)展為敗血癥、感染性休克、中毒性休克綜合征等，危及生命。慢性子宮內(nèi)膜炎大多癥狀輕微，全身癥狀不明顯，但病程較長(zhǎng)，治療不徹底容易復(fù)發(fā)，影響女性生活質(zhì)量。無(wú)論是急性子宮內(nèi)膜炎，還是慢性子宮內(nèi)膜炎，如果治療不及時(shí)、不徹底，嚴(yán)重時(shí)影響子宮肌層，同時(shí)還可出現(xiàn)盆腔痛及反復(fù)發(fā)作。該病還可導(dǎo)致女性生殖疾病和影響產(chǎn)后子宮恢復(fù)。同時(shí)一旦形成慢性子宮內(nèi)膜炎對(duì)身體危害較大且治療較為困難。

慢性子宮內(nèi)膜炎還與女性生殖疾病密切相關(guān)。有研究表明，行體外授精-胚胎移植術(shù)反復(fù)胚胎著床后失敗、不明原因的不孕不育及不明原因反復(fù)流產(chǎn)等均與慢性子宮內(nèi)膜炎有關(guān)[4-7]。Sukhikh等[8]發(fā)現(xiàn)存在慢性子宮內(nèi)膜炎時(shí)內(nèi)膜發(fā)生的變化將會(huì)影響妊娠早期胚胎的發(fā)育。

慢性子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率較高，對(duì)女性生殖健康的影響較大、范圍較廣，因此，慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷及早期發(fā)現(xiàn)和早期治療對(duì)防治女性疾病進(jìn)展和提高女性生活質(zhì)量有著極其重要的意義，具有一定的臨床研究?jī)r(jià)值。

慢性子宮內(nèi)膜炎臨床表現(xiàn)為：不規(guī)則陰道出血或月經(jīng)不規(guī)則，有時(shí)有輕微下腹痛及白帶增多，不孕癥。其癥狀不具有特異性。該疾病常因?qū)m腔內(nèi)的分泌物通過(guò)子宮頸口流出體外，而癥狀不明顯。且本病約有20%無(wú)癥狀，易忽略診斷，多數(shù)是由婦科其他疾病如做診斷性刮子宮術(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn)的 。即使有癥狀的CE也可能會(huì)被忽略，因?yàn)槭茏訉m內(nèi)膜取樣滿意度和病理組織學(xué)檢測(cè)方法所限。

慢性子宮內(nèi)膜炎確定診斷的可靠方法落腳在診斷性刮宮術(shù)聯(lián)合組織內(nèi)膜病理檢查。趙健[9]在子宮內(nèi)膜細(xì)胞學(xué)診斷系統(tǒng)中指出：慢性子宮內(nèi)膜炎病理改變：在子宮內(nèi)膜細(xì)胞之間，有散在淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、細(xì)胞碎片等，子宮內(nèi)膜細(xì)胞少見(jiàn)。漿細(xì)胞并不是正常子宮內(nèi)膜的組成細(xì)胞，因而，漿細(xì)胞的出現(xiàn)是慢性子宮內(nèi)膜炎的重要診斷指標(biāo)[10]，但是，人們對(duì)識(shí)別子宮內(nèi)膜中的漿細(xì)胞還存有一定的難度[11]。而且，常規(guī)的組織染色技術(shù)很難檢測(cè)子宮內(nèi)膜間質(zhì)中的漿細(xì)胞[12]。

傳統(tǒng)HE法存在對(duì)漿細(xì)胞分辨困難的情況，如月經(jīng)后期、早期增生的內(nèi)膜、大量有絲分裂的基質(zhì)細(xì)胞、以及呈漿細(xì)胞樣的基質(zhì)細(xì)胞。研究表明辨認(rèn)漿細(xì)胞可通過(guò)切片的免疫染色法檢測(cè)CD38、CD138、免疫球蛋白、VS38。而在1997年，Anthony等[13]用VS38單克隆抗體檢測(cè)子宮內(nèi)膜的漿細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)VS38不僅使?jié){細(xì)胞著色，而且上皮和基質(zhì)細(xì)胞也呈顆粒狀著色，故而降低了VS38檢測(cè)漿細(xì)胞的特異性。

目前國(guó)內(nèi)外的研究表明，正常漿細(xì)胞的主要免疫表型為：CD38、CD138等[14]。有研究顯示漿細(xì)胞最特異的指標(biāo)是CD138[15-16]。CD138的免疫組化適合用于檢測(cè)石蠟包埋標(biāo)本中的子宮內(nèi)膜間質(zhì)漿細(xì)胞，并改善了慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷率[17-19]。Kitaya等[17-20]也證實(shí)了CD138對(duì)子宮內(nèi)膜炎中漿細(xì)胞的檢測(cè)率較其他方法高，而且準(zhǔn)確率也高，在慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷中發(fā)揮著必不可少的作用。Bhan[21]在實(shí)驗(yàn)中，對(duì)B細(xì)胞各個(gè)發(fā)育階段進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)漿細(xì)胞表面的CD38分子著色很強(qiáng)。1997年，Anthony等[13]使用CD38對(duì)慢性子宮內(nèi)膜炎的組織中漿細(xì)胞的檢測(cè)達(dá)100%。綜上所述，可見(jiàn)CD38、CD138均對(duì)漿細(xì)胞的檢測(cè)具有較高特異性。

但鑒于CD38、CD138均在人體內(nèi)表達(dá)、分布廣泛，而各自對(duì)子宮內(nèi)膜中漿細(xì)胞的檢測(cè)所具有的高敏感性、特異性無(wú)定論，且目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于CD38、CD138均為單項(xiàng)檢測(cè)的研究，故本實(shí)驗(yàn)將免疫組織化學(xué)染色法聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138，并與傳統(tǒng)HE染色法用于辨別漿細(xì)胞是否存在的病理結(jié)果比較，旨在提高兩者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)慢性子宮內(nèi)膜炎中診斷的特異性，并得出結(jié)論：采用免疫組織化學(xué)方法聯(lián)合檢測(cè)CD38、CD138較傳統(tǒng)HE染色法診斷慢性子宮內(nèi)膜炎價(jià)值更高。

本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象選擇范圍界定為因癥需行診斷性刮宮術(shù)并考慮病因?yàn)槁宰訉m內(nèi)膜炎，故范圍有限，其結(jié)論仍需要大宗臨床資料的研究論證。也為本實(shí)驗(yàn)的不足之處。

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（收稿日期：2015-06-01）endprint